1、關(guān)于臨床微生物實驗室基本操作流程第1頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一藥敏試驗標(biāo)本前處理報告標(biāo)本篩選第2頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一 實驗室質(zhì)量控制環(huán)節(jié) 標(biāo)本采集、運(yùn)送標(biāo)本合格判定培養(yǎng)基、試劑儀器設(shè)備 危急值報告分析前分析中分析后室間質(zhì)評第3頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一微生物結(jié)果的影響因素針對性的檢驗申請病人準(zhǔn)備 標(biāo)本的采取 標(biāo)本的運(yùn)輸 標(biāo)本檢驗危急值報告標(biāo)本的保存和處理結(jié)果審核和批準(zhǔn)4-15%18.5-47%分析前分析中分析后第4頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一微生物標(biāo)本采集過程中臨床醫(yī)師和護(hù)士第5頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一血培養(yǎng)Blood Culture 第6頁，講稿共146張

2、，創(chuàng)作于星期一采集時間 根據(jù)研究表明細(xì)菌通常在寒戰(zhàn)和發(fā)燒前1小時入血 考慮到可操作性，血培養(yǎng)標(biāo)本應(yīng)同時采集或在盡量短的間隔期內(nèi)采集。 間隔式采血法僅適用于確診持續(xù)性菌血癥 如：細(xì)菌性心內(nèi)膜炎或其他脈管內(nèi)感染 如導(dǎo)管相關(guān)性感染第7頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一 雖然血培養(yǎng)陽性率與體溫變化看上去相關(guān)性不大，但臨床仍應(yīng)遵從“（下一次）用藥前”或“停藥24小時后”采血！第8頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一推薦的血培養(yǎng)組合的數(shù)量第9頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一血培養(yǎng)次數(shù) 懷疑菌血癥的成人患者：采集2-3套血培養(yǎng)標(biāo)本（不同部位） 。 嬰幼兒患者：采集2次血培養(yǎng)標(biāo)本（不同部位） 除特殊情況外，在采取血

3、培養(yǎng)后的2-5天內(nèi)，無需重復(fù)采取血培養(yǎng)。 可疑為持續(xù)性菌血癥：如心內(nèi)膜炎、導(dǎo)管相關(guān)血流感染，間隔(1-24h)幾次取血監(jiān)測、捕捉、指導(dǎo)治療。第10頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一采血量成年患者：推薦的采血量為每套不少于10ml，每瓶 不少于5ml； 嬰幼兒患者：推薦的采血量，每瓶不少于2ml。 備注：如果實驗室收到采血量不足的標(biāo)本仍需進(jìn)行培養(yǎng)，則需在報告單上注明：“送檢血液標(biāo)本量未達(dá)到要求，會影響結(jié)果的靈敏度”。第11頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一血培養(yǎng)的采集從靜脈取血；不宜從靜脈導(dǎo)管或靜脈留置口取血；如必須從留置導(dǎo)管內(nèi)采血，應(yīng)同時從外周靜脈采集另外一個血培養(yǎng)標(biāo)本，以幫助陽性結(jié)果判讀。不主張

4、換針頭入瓶有血的培養(yǎng)瓶不可放入冰箱 和凍箱保存。第12頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一血培養(yǎng)的運(yùn)送 采集后血培養(yǎng)瓶應(yīng)立即送往實驗室（2小時內(nèi)） 接種前后的血培養(yǎng)瓶不得冷藏或冷凍。 任何延誤送入自動連續(xù)監(jiān)測血培養(yǎng)儀的行為將會延誤或阻止細(xì)菌生長的檢測； 血培養(yǎng)瓶保留在室溫不得超過數(shù)小時；第13頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一血培養(yǎng)污染Blood Culture Contamination第14頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一血培養(yǎng)存在的主要問題如果皮膚定植的細(xì)菌沒有被殺死，這些細(xì)菌將通過針頭被吸入血培養(yǎng)瓶并在瓶中生長這些細(xì)菌(主要為凝固酶陰性葡萄球菌) 引起導(dǎo)管相關(guān)性敗血癥 (住院患者血培養(yǎng)第一位

5、)醫(yī)生不能將真的凝固酶葡萄球菌感染和皮膚定植菌“污染”相區(qū)分，因此他們很可能會用萬古霉素治療患者。第15頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一污染細(xì)菌 血培養(yǎng)污染定義為在幾次血培養(yǎng)中單個血培養(yǎng)下列細(xì)菌陽性:凝固酶陰性葡萄球菌棒狀桿菌 微球菌丙酸桿菌 芽孢桿菌第16頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一呼吸道標(biāo)本Respiratory Cultures第17頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一上呼吸道標(biāo)本 Upper Respiratory Tract Specimens第18頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一第19頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一咽拭子運(yùn)送培養(yǎng)基可以運(yùn)送需氧、厭氧、苛養(yǎng)菌 4或RT 24或48小

6、時第20頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一尼龍植絨拭子傳統(tǒng)的人造纖維拭子第21頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一鼻拭子深部鼻拭子一般與咽拭子的信息等值。相對于診斷深部感染，鼻拭子更適用于偵測健康攜帶者。深部鼻拭子可用于診斷化膿鏈球菌和白喉棒狀桿菌感染，或金黃色葡萄球菌與化膿性鏈球菌暴發(fā)感染時調(diào)查用。第22頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一鼻竇炎標(biāo)本 采集膿液或竇吸出液/鹽水清洗液進(jìn)行革蘭氏染色和需氧、厭氧平板培養(yǎng)。第23頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一下呼吸道標(biāo)本 Lower Respiratory Tract Specimens 第24頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一下呼吸道標(biāo)本Lower Res

7、piratory Tract Specimen自然咳痰誘導(dǎo)痰 氣管內(nèi)吸取物支氣管肺泡灌洗液保護(hù)性毛刷支氣管灌洗液 肺部組織第25頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一下呼吸道標(biāo)本收集 所有病人的下呼吸道標(biāo)本應(yīng)在采集后立即送至微生物室，并于1小時內(nèi)接種 室溫下放置1h會降低肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌的分離率而定植于上呼吸道的非致病菌則會過度生長。 下呼吸道標(biāo)本勿放冰箱或運(yùn)輸時勿置于冰塊中第26頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一痰液標(biāo)本 采集時間：用抗生素前 采集方法： 自然咳痰：必須用清水漱口3次，應(yīng)包括咽喉部，立即用力咳出痰，于滅菌容器或輸送培養(yǎng)基中。 支氣管鏡或支氣管毛刷:由醫(yī)生采集，建議直接種入輸送

8、培養(yǎng)基。 運(yùn)送要求 于2小時內(nèi)送達(dá)檢驗室 如無法馬上送出，標(biāo)本置于4保存第27頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一標(biāo)本質(zhì)量帶血痰唾液or誘導(dǎo)痰 (?)膿痰粘液樣痰第28頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一用革蘭氏染色來評估 呼吸道標(biāo)本是否合格第29頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一痰標(biāo)本10鱗狀上皮細(xì)胞/每低倍視野=拒收第30頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一有PMN的痰標(biāo)本，中性粒細(xì)胞多，且鱗狀上皮細(xì)胞特別少=接受，進(jìn)行培養(yǎng)粘液絲第31頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌胞內(nèi)細(xì)菌 提示感染第32頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一柱狀纖毛上皮細(xì)胞肺泡巨噬細(xì)胞第33頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一滑石顆

9、粒第34頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一淀粉樣小體見于遷延長時間的呼吸道疾病第35頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一彈性纖維第36頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一庫什曼螺旋體第37頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一呈鏈排列的革蘭陽性球菌和革蘭陰性球桿菌。缺乏鱗狀上皮細(xì)胞提示混合厭氧菌感染第38頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一你看見多少種形態(tài)？幾種細(xì)菌的混合形態(tài)，缺乏鱗狀上皮細(xì)胞=混合厭氧菌感染。如果是呼吸道標(biāo)本可能是吸入性肺炎。報告臨床醫(yī)生“提示吸入性肺炎”第39頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一呼吸道標(biāo)本中未被染色的，有折射的桿菌=抗酸桿菌第40頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一呈鏈排列的革蘭陽性球

10、菌？或革蘭陽性分枝桿菌？肺中的結(jié)節(jié)吸出物，不規(guī)則“球菌”，分叉，無短鏈，鏈的末端的呈尖狀，都證明是分枝狀的革蘭陽性桿菌，可能是放線菌或諾卡菌（通常來自腦或肺組織的標(biāo)本）第41頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一肺炎-可接受的不合格標(biāo)本評述很少的鱗狀上皮細(xì)胞10個/低倍視野可以在玻片上看到許多鱗狀上皮細(xì)胞，說明在采集時受到了上呼吸道分泌物的污染或口水的污染。很多的中性粒細(xì)胞很少有或沒有中性粒細(xì)胞免疫抑制的病人也會出現(xiàn)中性粒細(xì)胞減少中性粒細(xì)胞和上皮細(xì)胞都很少的標(biāo)本需要培養(yǎng)很多中性粒細(xì)胞混合有形態(tài)多樣的細(xì)菌（革蘭氏陰性桿菌，紡錘形，革蘭氏陽性球菌）吸入性肺炎標(biāo)本革蘭氏染色的典型形式，培養(yǎng)只會培養(yǎng)出正常菌

11、群，所以革蘭氏染色是用于診斷的方法。許多或中等量的中性粒細(xì)胞，以一種形態(tài)的細(xì)菌為主酵母菌樣，酵母菌是一種很少引起肺炎的細(xì)菌，常由口腔污染成雙革蘭氏陽性球菌，短鏈=肺炎鏈球菌革蘭氏陽性菌成群排列=金黃色葡萄球菌革蘭氏陰性球桿菌（?。?流感嗜血桿菌革蘭氏陰性桿菌大且肥厚=肺炎克雷伯菌或其他腸道菌革蘭氏陰性雙球菌=卡他莫拉菌許多不著色的有折射的桿狀細(xì)菌可能是肺結(jié)核，抗酸桿菌不能被革蘭氏染色所染色。呼吸道標(biāo)本的涂片評估模式第42頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一配合診斷肺部感染的其它標(biāo)本血液標(biāo)本：體溫38的CAP病人，應(yīng)在抗生素使用前無菌手續(xù)取靜脈血。全自動血培養(yǎng)儀：10ml血/瓶胸腔積液：合并有胸水時

12、，應(yīng)及時無菌抽取胸水置全自動血培養(yǎng)儀中細(xì)菌培養(yǎng)。第43頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一腦脊液CEREBROSPINAL FLUID第44頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一第45頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一嚴(yán)格無菌操作soap第46頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一腦脊液 CEREBROSPINAL FLUID無菌操作，腰椎穿刺采樣最少1 mL，最好5 mL打入3個小管中，以第二根小管送檢培養(yǎng) 分枝桿菌培養(yǎng)標(biāo)本需要2 mL以上，置于4保存即時送檢絕對不能冷藏！第47頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一如何看待CSF的培養(yǎng)結(jié)果？（1）如果同期送檢的血培養(yǎng)大于3天報警，通常不是很緊急（2）假如仍不確定，

13、電話聯(lián)系微生物室值日主管，了解革蘭氏染色涂片的相關(guān)情況。（3）必須綜合生化和血液學(xué)結(jié)果（4）如果CSF常規(guī)檢查報告中沒有中性粒細(xì)胞或腦脊液的其他指標(biāo)正常，對報告的致病菌應(yīng)保持懷疑，可能送檢污染。第48頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一尿培養(yǎng)標(biāo)本 Urine Culture 第49頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一尿道感染每年850萬例尿路感染, 90%為女性1/2.5個婦女在一生中會得UTI下行性感染：血流腎臟膀胱（金黃色葡萄球菌，酵母菌，結(jié)核分枝桿菌）上行性感染：尿道膀胱腎盂 血流第50頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一用于尿液培養(yǎng)的標(biāo)本 腎活檢或腎抽吸物（外科） 恥骨上膀胱抽吸物（孕婦，嬰兒，全

14、膀胱） 微導(dǎo)管尿（內(nèi)部導(dǎo)管和外部導(dǎo)管）-老年人 中段尿，清潔留取急診成年人 留置導(dǎo)尿管中采集的標(biāo)本（經(jīng)常被三種以上細(xì)菌污染）第51頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一尿液標(biāo)本 采集中段尿時要先用肥皂清洗女性的外陰和男性的外生殖器包括包皮內(nèi)，然后用清水沖洗 長期留置導(dǎo)尿管的患者應(yīng)在更換新管時留取尿標(biāo)本。 做厭氧培養(yǎng)時應(yīng)恥骨上膀胱穿刺采集尿。第52頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一尿液運(yùn)輸方法如不能及時送檢，需冷藏。4小時延遲送檢，須廢棄標(biāo)本。 第53頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一評價尿培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)病人標(biāo)本特征有意義菌落形成單位/ml（非皮膚污染）無癥狀者清潔留取100,000有癥狀者，不固定的清潔留取

15、10,000 1-2種機(jī)會致病菌。若多于2種則認(rèn)為尿液被污染有癥狀，性活躍女性清潔留取100個純菌落腸桿菌科菌男性清潔留取1000個，機(jī)會致病菌任何人內(nèi)置導(dǎo)尿管100,000任意數(shù)量機(jī)會致病菌任何人通過直接導(dǎo)管獲得100任意數(shù)量機(jī)會致病菌任何人外科手術(shù)從腎臟獲得任意數(shù)量（肉湯增菌，厭氧菌）任何人經(jīng)皮穿刺膀胱吸取任意數(shù)量（肉湯增菌，厭氧菌）任何人任意標(biāo)本任何數(shù)量金黃色葡萄球菌不同人有爭議任何數(shù)量的酵母菌第54頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一出現(xiàn)如下情況時，怎樣判斷？尿常規(guī)結(jié)果尿培養(yǎng)結(jié)果可能原因WBC PRO 計數(shù) +PRO +計數(shù) +PRO +計數(shù) 105培養(yǎng)出一種致病菌預(yù)示患者泌尿系統(tǒng)感染。按

16、藥敏結(jié)果選擇性用藥。WBC +PRO +計數(shù) 105培養(yǎng)出大于兩種致病菌患者泌尿系統(tǒng)可能感染，但標(biāo)本可能被污染，應(yīng)重復(fù)送檢。WBC 105培養(yǎng)出大于兩種致病菌標(biāo)本污染第55頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一生殖道標(biāo)本 Lower Genital Tract Specimens 第56頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一女性生殖道標(biāo)本送檢第57頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一宮頸或?qū)m頸內(nèi)部：淋病奈瑟菌，沙眼衣原體，人乳頭瘤病毒陰道高位拭子：酵母菌，陰道毛滴蟲，細(xì)菌性陰道感染肛門或直腸拭子：淋病奈瑟菌，B群鏈球菌（+陰道拭子）女性下生殖道標(biāo)本采集第58頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一正常陰道內(nèi)微生物-以

17、培養(yǎng)為基礎(chǔ)乳酸桿菌葡萄球菌普雷沃菌屬消化鏈球菌鏈球菌產(chǎn)色素菌腸桿菌脲原體95%66%52%42%38%25%25%80%支原體14%第59頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一傳統(tǒng)方法檢測的與細(xì)菌性陰道病相關(guān)的致病菌二路普雷沃爾菌 P. disiens ；人體普雷沃菌 、利氏擬桿菌 動彎桿菌屬 四消化鏈球菌、厭氧消化鏈球菌；草綠色鏈球菌陰道加德納菌人型支原體第60頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一早發(fā)B群鏈球菌病 1%的新生兒因母親定植（10-30%的孕婦）發(fā)展為EOD 50%病死率 25%的美國女性在L&D期間得到IV預(yù)防 長期病癥包括：在30%以上的新生兒中產(chǎn)生嚴(yán)重精神運(yùn)動發(fā)展障礙Adriaans

18、e et al. Neonatal early onset group B streptococcal infection: a nine-year retrospective study in a tertiary care hospital. J Perinat Med. 1996;24:531538第61頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一男性生殖道標(biāo)本送檢第62頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一男性的生殖道致病菌與女性絕大部分一致；尿道炎通常由淋病奈瑟氏菌或非淋病奈瑟氏菌引起；可能并發(fā)于生殖器潰瘍；第63頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一淋病奈瑟氏菌感染 擠壓尿道或直接獲取尿道口分泌物； 直接

19、涂片 如果培養(yǎng)，須直接接種溫暖的篩選性平板，保溫并即刻送微生物室培養(yǎng)。第64頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一任何不能及時送檢的生殖道標(biāo)本，都應(yīng)采用運(yùn)送培養(yǎng)基采樣保存。禁止冷藏第65頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一傷口、皮膚、組織Wound、Skin、Tissue第66頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一標(biāo)本采樣和送檢 臨床常常送檢膿液和滲出液的拭子給實驗室做檢查。風(fēng)險 標(biāo)本不足量 拭子干燥 拭子吸附細(xì)菌，難于釋放到平板培養(yǎng) 盡可能抽吸或?qū)⑹米由钊雮冢o貼傷口前沿取樣深部傷口和特殊原因造成的傷口，如動物咬傷，應(yīng)考慮厭氧培養(yǎng)； 第67頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一 標(biāo)本采集 對開放性病灶的采集：

20、如眼結(jié)膜膿性分泌物、扁桃體、外耳道、手術(shù)后切口、導(dǎo)管治療感染、瘺管內(nèi)膿液、生殖道分泌物等均屬于開放性病灶。應(yīng)先用滅菌生理鹽水沖洗表面污染菌，去除舊的分泌物，用滅菌拭子采集病灶深部的分泌物，也可取感染部位下的組織送檢。 第68頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一 標(biāo)本采集 閉鎖性膿腫 如淋巴膿腫、肺膿腫、肝膿腫、腹腔膿腫、盆腔膿腫等，對封閉的膿腫常采用穿刺或引流的的方法采樣，應(yīng)在用藥前采集，注意膿液的氣味、性狀、顏色注意厭氧菌存在的可能。不能及時送檢應(yīng)用輸送培養(yǎng)基。第69頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一發(fā)現(xiàn)評述出現(xiàn)鱗狀上皮細(xì)胞提示標(biāo)本采集技術(shù)不過關(guān)；培養(yǎng)出來的可能是皮膚正常菌群大量的中性粒細(xì)胞如果查

21、見細(xì)胞內(nèi)的細(xì)菌，則更有意義。大量的中性粒細(xì)胞染色多樣染色陽性和陰性，小的細(xì)菌混合有厭氧或兼性厭氧菌感染出現(xiàn)少量破碎的中性粒細(xì)胞和比較大的面包車樣的染色不定的桿菌可能是梭菌引起的組織壞死，緊急外科手術(shù)，產(chǎn)氣莢膜梭菌引起的氣性壞疽很少有中性粒細(xì)胞，但是有其他體細(xì)胞患者不能產(chǎn)生足夠的免疫反應(yīng)或微生物不能趨化中性粒細(xì)胞（如球菌）。仍然高度懷疑細(xì)菌病因。細(xì)胞內(nèi)微生物細(xì)菌感染成塊的小的灰白的染色不規(guī)則的陽性成鏈的球菌如果分離自膿腫，提示咽峽炎鏈球菌（米勒鏈球菌）感染。很細(xì)小的革蘭氏陰性桿菌特別是從淋巴結(jié)或組織中分離的，可能是生物恐怖試劑（布魯氏桿菌，耶爾森，弗朗西斯）要在風(fēng)廚中操作。平板用膠條密封在生物安

22、全柜中操作，不可以嗅標(biāo)本。組織和抽吸物涂片檢查第70頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一糞便標(biāo)本 采集時間 腹瀉患者應(yīng)在用藥前、急性期采集； 沙門菌感染、腸熱癥應(yīng)在2周內(nèi)采； 厭氧菌出現(xiàn)癥狀即采集。 采集方法 自然排便采集標(biāo)本時，取有膿血、粘液、組織碎片部分的糞便1-3g。液體糞便擇取絮狀物，1-3ml，直接裝入無菌、帶蓋、廣口的培養(yǎng)杯中送檢，送檢的標(biāo)本中不能加入防腐劑。 不易獲得糞便患者及幼兒：用直腸拭子采集后置保存液或輸送培養(yǎng)基中送檢。第71頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一糞便標(biāo)本 注意事項： 要用無菌容器 在用藥前采集標(biāo)本。 應(yīng)床邊接種或置輸送培養(yǎng)基送檢。 厭氧細(xì)菌（難辨梭菌）培養(yǎng)的標(biāo)本應(yīng)盡

23、量減少與空氣接觸。第72頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一 拒收標(biāo)本指標(biāo) 除非不能再采集的標(biāo)本，否則不予檢測；如果培養(yǎng)或檢測，要對結(jié)果進(jìn)行說明。 書寫錯誤 容器問題 干燥拭子 厭養(yǎng)菌容器無菌無防腐劑足夠大安全嚴(yán)密不易碎運(yùn)送培養(yǎng)基無生長因子或保持特定菌的培養(yǎng)基避免用木質(zhì)的棉拭子對細(xì)菌有毒害第73頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一微生物標(biāo)本的運(yùn)送及貯存條件標(biāo)本 運(yùn)送 貯存溫度 血 血培養(yǎng)瓶 室溫或37 膿 、腦脊液 、胸水、心包液 、腹水、關(guān)節(jié)滑液 、鼻竇分泌物 短時間內(nèi)運(yùn)送: 標(biāo)本在帶帽的注射器內(nèi)保證厭氧條件長時間運(yùn)送：使用運(yùn)送培基 室溫不用培養(yǎng)避免冷藏 支氣管肺泡灌液、痰，其它分泌物 、便 立刻送

24、檢（2-3小時） 冷藏 眼、耳、嘴、咽 、鼻、尿道、生殖道 、直腸、傷口拭子 用運(yùn)送培養(yǎng)基(運(yùn)送時間4小時) 室溫不培養(yǎng)第74頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本質(zhì)量評估指標(biāo) 利用細(xì)胞學(xué)檢視 咳痰，氣管插管抽痰 污染率 血液，體液，尿液培養(yǎng) 標(biāo)本體積及數(shù)量 腦脊髓液，血培養(yǎng)第75頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一各類標(biāo)本質(zhì)量評估指標(biāo) 尿液培養(yǎng)結(jié)果污染率20% 2種菌株，且100,000 cfu/mL 血培養(yǎng)污染率3% 棒狀桿菌、微球菌、非炭疽芽孢桿菌屬、 瘡皰丙酸桿菌及凝固酶陰性葡萄球菌 24小時內(nèi)只送單套血培養(yǎng)5%第76頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一分析前質(zhì)量保證的措施 詳細(xì)制定并向

25、臨床發(fā)放標(biāo)本采集手冊； 每年對臨床醫(yī)護(hù)人員、運(yùn)送中心人員、新進(jìn)人員進(jìn)行“標(biāo)本采集、運(yùn)送”培訓(xùn)，至少一次； 加強(qiáng)工作人員的培訓(xùn)，嚴(yán)格遵守SOP文件，認(rèn)真做好分析前質(zhì)量保證的各種記錄。 每月對不合格標(biāo)本陽性率、血培養(yǎng)污染率等進(jìn)行統(tǒng)計分析，反饋給相關(guān)部門，加強(qiáng)標(biāo)本的質(zhì)量，提高微生物檢驗水平。第77頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一標(biāo)本處理血培養(yǎng) 腦脊液培養(yǎng)糞便培養(yǎng)生殖道標(biāo)本培養(yǎng)痰標(biāo)本咽部標(biāo)本培養(yǎng)尿培養(yǎng)真菌培養(yǎng)抽吸物和組織標(biāo)本的培養(yǎng)（需氧、厭氧培養(yǎng)）第78頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一全自動接種儀第79頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一 消耗品倉開蓋后可進(jìn)行耗材的更換（接種涂布器和吸頭）標(biāo)本倉開蓋后可進(jìn)

26、行標(biāo)本的取放打印機(jī)倉門開蓋后可以進(jìn)行條碼卷的更換 廢物收集箱 內(nèi)置垃圾箱 觸摸屏進(jìn)入儀器控制軟件PREVI Isola 儀器概況第80頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一 運(yùn)行前檢查查看儀器狀態(tài)是否為“Ready” 確保所有耗材足夠（ Tips, Applicators, Labels and Plates) Waste Bins 垃圾箱不是滿的 確保選擇了適當(dāng)?shù)钠桨蹇茉O(shè)置且輸入卡架中裝入了對應(yīng)的平板。確保輸出平板架為空的第81頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一0裝載Applicators第82頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一裝載 Tips0OK第83頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一安裝Label

27、sMore information see Instruction in the User Manual 21第84頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一 選擇適當(dāng)?shù)钠桨蹇苣Ｊ?第85頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一 裝載標(biāo)本開始運(yùn)行第86頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一臨床標(biāo)本常見病原微生物第87頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一第88頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一臨床標(biāo)本常見病原微生物血液及骨髓標(biāo)本常見病原菌 疾病常見病原菌皮膚軟組織感染金葡、溶血性鏈球菌燒傷銅綠、金葡、A群、腸桿菌科、不動、真菌留置導(dǎo)尿、尿路手術(shù)后腸球、大腸、銅綠創(chuàng)傷后炭疽、產(chǎn)氣莢膜梭菌急性心內(nèi)膜炎金葡、腸球、腦膜炎亞急性心

28、內(nèi)膜炎草鏈、腸球、流感化膿性骨髓炎金葡、溶血性鏈球菌、肺鏈、銅綠長期使用抗生素脆弱擬桿菌、L型細(xì)菌血液病、艾滋病、免疫低下真菌、結(jié)核厭氧菌血癥脆弱擬桿菌特殊病原體傷寒、副傷寒、鉤端螺旋體、布魯氏菌、鼠疫耶爾森婦產(chǎn)科手術(shù)后脆弱擬桿菌、B群鏈球菌、腸球菌、大腸靜脈置管、人工裝置腸桿菌科、葡萄球菌、銅綠、酵母菌第89頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一第90頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一臨床標(biāo)本常見病原微生物穿刺液標(biāo)本常見病原菌 1.腦脊液： 2.膽汁：多為腸道菌且多為厭氧需氧菌混合感染疾病常見病原菌成人腦膜炎肺鏈、腦膜炎、新隱兒童腦膜炎腦膜炎、大腸、流感、溶血性鏈球菌、結(jié)核 免疫缺陷、嗜酒、60歲流

29、感、腦膜炎、腸桿菌、銅綠、李斯特、新隱腦外傷金葡、銅綠、腸桿菌、肺鏈、化膿鏈繼發(fā)鼻竇炎或伴發(fā)紺的先心病腦膿腫草鏈第91頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一第92頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一臨床標(biāo)本常見病原微生物糞便標(biāo)本常見病原菌 1.原發(fā)性腸道感染：革蘭氏陰性桿菌（沙門、志賀、弧菌、小腸結(jié)腸耶爾森、致病性大腸等）、彎曲菌、結(jié)核、金葡、炭疽、蠟樣芽胞桿菌、梭菌屬、輪狀病毒、原蟲。 2.繼發(fā)性腸道感染：多因廣泛應(yīng)用廣譜抗生素、血液科、腫瘤科患者、激素類藥物的不規(guī)范應(yīng)用、侵入性操作：艱難梭菌、金葡、念珠菌、銅綠 、變形、弗勞地、致病性大腸、非結(jié)核分枝桿菌、偶見輪狀病毒、隱球菌等。 第93頁，講稿共1

30、46張，創(chuàng)作于星期一第94頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一臨床標(biāo)本常見病原微生物泌尿生殖道標(biāo)本常見病原菌 1.尿液：大腸、金葡、腐葡、表葡、A群、腸球、淋球、厭氧鏈球菌、腸桿菌科細(xì)菌、陰道加德納、念珠菌、結(jié)核分枝桿菌、沙眼衣原體、解脲脲原體、生殖道支原體等。 2.生殖道：淋球、念珠菌、陰道加德納、杜克雷、B群、梅毒螺旋體、沙眼衣原體、解脲脲原體、人型支原體、生殖道支原體、擬桿菌、厭氧鏈球菌等。 第95頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一第96頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一有意義的細(xì)菌濃度(CFU/ml)標(biāo)本有意義的濃度（CFU/ml）自然咳痰 107誘導(dǎo)痰 不確定氣管內(nèi)吸取物 106支氣管肺泡灌

31、洗液 104保護(hù)性毛刷 103支氣管灌洗液 不做培養(yǎng)第97頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一臨床標(biāo)本常見病原微生物痰及下呼吸道標(biāo)本常見病原菌 1.社區(qū)獲得性肺炎：流感、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、單純皰疹病毒、肺炎支原體、衣原體、嗜肺軍團(tuán)菌、多殺巴斯特菌等。典型：肺鏈、流感嗜血、卡他、化膿性鏈球菌等。 2.醫(yī)院獲得性肺炎：肺克、銅綠、鮑曼、嗜麥芽、大腸、陰溝、粘質(zhì)沙雷、MRS、耐青霉素肺鏈、腸球、弗勞地、變形、念珠菌、曲霉菌、毛霉菌、非結(jié)核、諾卡、厭氧菌、放線菌等。 定植or感染第98頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一第99頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一第100頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一臨

32、床標(biāo)本常見病原微生物泌尿生殖道標(biāo)本常見病原菌 1.尿液：大腸、金葡、腐葡、表葡、A群、腸球、淋球、厭氧鏈球菌、腸桿菌科細(xì)菌、陰道加德納、念珠菌、結(jié)核分枝桿菌、沙眼衣原體、解脲脲原體、生殖道支原體等。 2.生殖道：淋球、念珠菌、陰道加德納、杜克雷、B群、梅毒螺旋體、沙眼衣原體、解脲脲原體、人型支原體、生殖道支原體、擬桿菌、厭氧鏈球菌等。 第101頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一第102頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一第103頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一抽吸物和組織標(biāo)本的厭氧培養(yǎng)主要致病菌: 金黃色葡萄球菌、化膿鏈球菌、其他-溶血鏈球菌、銅綠假單胞菌、其他革蘭陰性桿菌、 梭狀芽孢桿菌、 梭菌屬

33、、擬桿菌屬、其他厭氧菌非致病菌: 凝固酶陰性葡萄球菌、少量棒狀革蘭陽性桿菌用酒精消毒皮膚后或者在手術(shù)時采集標(biāo)本將抽吸物或組織置于厭氧轉(zhuǎn)運(yùn)小玻璃瓶中拭子不能用于厭氧培養(yǎng)將體液置于血培養(yǎng)瓶和ACD管中#1#2#3在CO2孵箱中將BAP & Mac 孵育48小時在厭氧環(huán)境中孵育5天（不要暴露于空氣中48小時）#4重要厭氧菌進(jìn)行鑒定&藥敏試驗需氧培養(yǎng)時當(dāng)3或更多的腸道細(xì)菌生長，報告“混合細(xì)菌生長”，并且描述性的列舉假單胞菌、金黃色葡萄球菌、變形桿菌、腸道革蘭陰性桿菌 Ellen Jo Baron 2009; Use with proper attribution#5.如果為組織，在無菌的小盤上將其搗碎

34、，然后在含硫肉湯中將其研磨成勻漿將研磨后的組織接種于BAP, Mac, Bru, BBE, CM肉湯, & LKV (可選擇) 革蘭染色&將重要結(jié)果報告給醫(yī)生#6接種平皿、革蘭染色和厭氧菌專門的藥敏試驗卡那霉素 萬古霉素 粘菌素Bru agar anaerobic布氏瓊脂-厭氧菌巧克力瓊脂-置于CO2孵箱細(xì)胞離心機(jī)離心體液第104頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一藥敏試驗紙片擴(kuò)散法藥敏試驗 特殊藥敏試驗 MRSA 克林霉素耐藥的葡萄球菌 VISA或VRSA 青霉素耐藥的葡萄球菌 超廣譜-內(nèi)酰胺酶 超廣譜-內(nèi)酰胺酶檢測的第二種方法 第105頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一第106頁，講稿共146張，創(chuàng)作于星期一紙片擴(kuò)散法-測量抑菌圈（1）使用透射光觀察 ： Staphylococcus spp. 葡萄球菌屬 linezolid利奈唑烷 oxacillin苯唑西林 vancomycin萬古霉素 任何生長均有意義Enteroc