1、藥物分析第五章 體內(nèi)藥物分析藥物分析05體內(nèi)藥物分析第五章 體內(nèi)藥物分析體內(nèi)藥物分析定義體內(nèi)藥物分析是指體內(nèi)樣品（生物體液、器官或組織）中藥物及其代謝或內(nèi)源性生物活性物質(zhì)的定量分析。藥物分析05體內(nèi)藥物分析第五章 體內(nèi)藥物分析分析意義與體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)研究和臨床治療藥物監(jiān)測(cè)密切相關(guān)，直接關(guān)系到藥物的體內(nèi)作用機(jī)制探討與質(zhì)量評(píng)價(jià)和藥物臨床使用的安全、有效與合理。藥物分析05體內(nèi)藥物分析第五章 體內(nèi)藥物分析分析樣品種類血液尿液唾液頭發(fā)臟器組織其它特殊樣品?藥物分析05體內(nèi)藥物分析第五章 體內(nèi)藥物分析分析目標(biāo)藥物在體內(nèi)的某些代謝產(chǎn)物常具有一定的生理活性,它們?cè)隗w內(nèi)的變化規(guī)律對(duì)母體藥物的藥理學(xué)與毒理學(xué)評(píng)價(jià)

2、特別重要.機(jī)體內(nèi)源性生物活性物質(zhì)往往參與機(jī)體重要的生理過程,其變化規(guī)律的異常改變也與某些疾病的發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)母藥藥物特有代謝產(chǎn)物體內(nèi)內(nèi)源性生物活性物質(zhì)藥物分析05體內(nèi)藥物分析第五章 體內(nèi)藥物分析分析對(duì)象人動(dòng)物鼠兔犬大鼠小鼠雄雌Just a joke等等猴猩猩都是一些志愿者也有一些不知情的人須動(dòng)物管理與使用委員會(huì)同意藥物分析05體內(nèi)藥物分析分析對(duì)象藥物分析05體內(nèi)藥物分析第五章 體內(nèi)藥物分析藥物在體內(nèi)的形態(tài)游離型代謝產(chǎn)物游離型原藥結(jié)合型原藥結(jié)合型代謝產(chǎn)物情形極為復(fù)雜綴合物分子間力結(jié)合化學(xué)共價(jià)結(jié)合稱為兩類藥物分析05體內(nèi)藥物分析四、體內(nèi)藥物分析的特點(diǎn)體內(nèi)樣品性質(zhì)及分析特點(diǎn)采樣量少藥物濃度低干擾物

3、質(zhì)多數(shù)毫升,至數(shù)十微升,一般在特定條件下采集,且不易重新獲取生物活性物質(zhì)的濃度在納克級(jí)到微克級(jí)水平,甚至皮克級(jí)水平蛋白質(zhì),脂肪,尿素,鉀,鈉,代謝產(chǎn)物,內(nèi)源性物質(zhì).樣品需要分離富集,或者衍生化處理才能分析樣品分析方法需要高靈敏度與專屬性分析工作量,數(shù)據(jù)處理和結(jié)果闡明較為復(fù)雜藥物分析05體內(nèi)藥物分析五、體內(nèi)藥物分析方法體內(nèi)樣品分析方法色譜及其聯(lián)用方法免疫學(xué)方法生物學(xué)微生物學(xué)方法HPLC, GC, HPLC-MS, HPLC-MS/MS, GC-MS, GC-MS/MS放射（RIA）熒光（FIA）酶（EIA）適合小分子及代謝物，蛋白質(zhì)大分子藥物等生物大分子藥物分析抗生素分析藥物分析05體內(nèi)藥物分析

4、第一節(jié) 常用體內(nèi)樣品的制備與貯藏常用樣品的種類(一)血樣:藥物在體內(nèi)主要依靠血液運(yùn)輸,血藥濃度可作為藥物在作用部位濃度的指標(biāo). 血漿 (plasma) 血清 (serum) 全血(二)唾液:很少采用(三)尿液:用于藥物劑量回收、尿清除率、生物利用度，藥物代謝物及其代謝途徑、類型、速率等的研究；臨床上用于判斷患者是否違反醫(yī)囑用藥。藥物分析05體內(nèi)藥物分析其它：頭發(fā)、肝器組織、乳汁、精液、腦脊液、淚液、膽汁、胃液、胰液、淋巴液、糞便。常用樣品的種類藥物分析05體內(nèi)藥物分析采集和制備1、血樣：一般從肘靜脈采血，也可從毛細(xì)管采血。每次采血1-5ml，動(dòng)物采血時(shí)一般不超過動(dòng)物總血量的十分之一。2、血漿：

5、靜脈離心5-10分鐘，使與血細(xì)胞分離；3、血清：靜脈血放置30-60分鐘。1000g離心5-10分鐘。4、全血：加抗凝劑，不離心，血漿和血細(xì)胞分布均勻。采集方法藥物分析05體內(nèi)藥物分析2尿樣 目的：藥物劑量回收，藥物清除，藥物代謝和生物利用度 特點(diǎn)：濃度高，易于收集，體內(nèi)代謝研究，應(yīng)水解分 離 采集方法：隨時(shí)尿、晨尿、白天尿、夜間尿等，定時(shí)采集。 貯藏:健康人排出的尿液顏色淡黃至黃褐色,pH在4.88.0之間。3唾液 唾液中藥濃與血濃相關(guān)性密切 收集方法 瀨口15min鐘后采集，離心 收集采集方法藥物分析05體內(nèi)藥物分析組織采集：先取各種組織，應(yīng)用勻漿器均勻化制成水性基質(zhì)勻漿液，再以適當(dāng)方法萃

6、取。組織樣品要經(jīng)過蛋白沉淀：甲醇、乙腈、高氯酸、三氯乙酸沉淀。酸、堿水解：將組織水解掉酶水解：應(yīng)用酶將組織水解掉其它：頭發(fā)等組織樣品藥物在組織中的分布提供重要的體內(nèi)動(dòng)力學(xué)過程藥物分析05體內(nèi)藥物分析體內(nèi)樣品貯存與處理冷藏與冷凍去活性-20到-80,低溫終止酶的活性其它方式去除酶的活性，防止樣品進(jìn)一步代謝分解樣本量大，分析時(shí)間長(zhǎng)，要保證藥物不變質(zhì)，須貯存與處理藥物分析05體內(nèi)藥物分析1血樣（血漿、血清）及時(shí)分離冷藏， -70加入穩(wěn)定 劑NaF2尿樣 尿中水、無機(jī)鹽、尿素等細(xì)菌的生長(zhǎng)， 4保存 加入防腐劑 a1%甲苯 b飽和氯仿 cpH改變3唾液：同血樣冷凍與冷藏藥物分析05體內(nèi)藥物分析去活性去活

7、性：為防止酶進(jìn)一步分解體內(nèi)待測(cè)組分，采樣后必須終止酶的活性。常用方法有“液氮快速冷凍法、微波照射法、勻漿及溶淀，加酶活性阻斷劑、抗氧化劑、樣品煮沸等。藥物分析05體內(nèi)藥物分析第二節(jié)、體內(nèi)樣品的前處理體內(nèi)樣品的前處理是體內(nèi)藥物分析中極為重要的環(huán)節(jié),也是分析中最困難、最繁復(fù)的工作。請(qǐng)先看如下處理步驟與方法藥物分析05體內(nèi)藥物分析第二節(jié) 體內(nèi)樣品分析的前處理全血/血漿，組織(1)蛋白沉淀(2)調(diào)節(jié)pH選擇性溶劑提取RIA殘?jiān)瘜W(xué)衍生化(提取烴基化)堿回提酸回提HPLCUV、FLD、ECDTLC分光光度法UV、FLDGCFIDECDN/P-FIDGC-MS處理步驟與方法藥物分析05體內(nèi)藥物分析預(yù)處理的

8、目的使待測(cè)藥物游離滿足測(cè)定方法要求改善分析環(huán)境藥物進(jìn)入體內(nèi)后有多種存在形式，進(jìn)行預(yù)處理使之游離出來，便于測(cè)定藥物或代謝藥物的總濃度體內(nèi)樣品介質(zhì)組成復(fù)雜，干擾很多，而待測(cè)藥物組分濃度很低，進(jìn)行預(yù)處理可以分離濃集樣品。防止儀器的污染、劣化，提高測(cè)定的靈敏度和選擇性。不同的儀器及分析方法對(duì)樣品有不同的要求，須處理。藥物分析05體內(nèi)藥物分析常用體內(nèi)樣品預(yù)處理方法去除蛋白質(zhì)方法分離與富集方法微透析技術(shù)綴合物水解化學(xué)衍生化萃取如何進(jìn)行？藥物分析05體內(nèi)藥物分析蛋白質(zhì)的去除加入與水混融的有機(jī)溶劑(乙腈、甲醇、丙酮、四氫呋喃)加入中性鹽(飽和硫酸銨、硫酸鈉、枸櫞酸鹽)加入強(qiáng)酸(三氯醋酸、高氯酸、偏磷酸)加入金

9、屬沉淀劑(CuSO4-Na2WO4、ZnSO4-NaOH)綴合物的水解酸水解(鹽酸)酶水解(葡糖酸苷酶、硫酸酯酶、枯草菌溶素)有機(jī)破壞 (硝酸-高氯酸消化)分離、純化與濃集液-液萃取法 (Liquid-Liquid Extraction,LLE)液-固萃取法 (Liquid-Solid Extraction,LSE)P181P185溶解劑法 (硝酸-高氯酸消化)常用體內(nèi)樣品預(yù)處理方法藥物分析05體內(nèi)藥物分析去除蛋白質(zhì)方法加入與水混融（親水性）的有機(jī)溶劑（乙腈、甲醇、丙酮、四氫呋喃）。溶液的介電常數(shù)下降，蛋白質(zhì)分子間靜電力增加而聚集；親水性溶劑使蛋白質(zhì)水化膜脫落而析出沉降，并使與蛋白質(zhì)以氫鍵及其

10、它分子間作用力結(jié)合的藥物析釋放出來。溶劑沉淀法混比1：23，冷凍離心藥物分析05體內(nèi)藥物分析去除蛋白質(zhì)方法混比1：2，冷凍離心加入中性鹽(飽和硫酸銨、硫酸鈉、枸櫞酸鹽)，使溶液的離子強(qiáng)度發(fā)生變化，部分蛋白質(zhì)的電性被中和，蛋白質(zhì)的分子間排斥力減弱而凝聚；同時(shí)中性鹽使蛋白質(zhì)水化膜脫落而析出沉降。中性鹽析法藥物分析05體內(nèi)藥物分析去除蛋白質(zhì)方法混比1：0.6，冷凍離心加入強(qiáng)酸(10%三氯醋酸、6%高氯酸等)，影響蛋白質(zhì)等電點(diǎn)及開成不溶性鹽而沉降。強(qiáng)酸沉降法藥物分析05體內(nèi)藥物分析去除蛋白質(zhì)方法熱變性蛋白質(zhì)離心煮雞蛋？熱凝固法藥物分析05體內(nèi)藥物分析（1）優(yōu)點(diǎn)：與雜質(zhì)分離 簡(jiǎn)便 濃集提取率高（2）提取

11、率：在有機(jī)相與水相中的溶解度的比值分配系數(shù)，一般少量多次，對(duì)生物樣品一般一次萃取， 70%重現(xiàn)性分離與濃集液液萃取LLE利用藥物在有機(jī)溶劑中的溶解度大于在水中的溶解度而提取藥物分析05體內(nèi)藥物分析（3）影響提取率的因素 pH 堿性藥物在堿性pH 酸性 酸性pH 提取溶劑 相似相溶原理 沸點(diǎn)低，不影響檢測(cè),性質(zhì)穩(wěn)定，不起化學(xué)反應(yīng)(化學(xué)惰性） 離子強(qiáng)度 加入中性鹽 增加離子強(qiáng)度，與水結(jié)合強(qiáng)，便于有機(jī)溶劑提取 分離與濃集藥物分析05體內(nèi)藥物分析對(duì)于離子性特強(qiáng)，水溶性極大的藥物，可采用離子對(duì)提取原理應(yīng)用陰離子：COOH+ SO3H- 反離子 四丁基銨陽離子：NH2+ 反離子烷基或芳基磺酸鹽提取溶劑用量

12、:一般在試管中進(jìn)行 有機(jī)相與水相比1:1到5:1分離與濃集藥物分析05體內(nèi)藥物分析分離與濃集固相萃取SPE是目前使用相當(dāng)廣泛的一種萃取方法，惜乎價(jià)格較貴將不同填料作為固定相裝入小柱，藥物溶液通過小柱時(shí)，藥物被吸附、分配、離子交換，或其它親和力作用，使藥物及內(nèi)源性物質(zhì)同時(shí)被保留在固定相上，再選用適當(dāng)溶劑洗脫藥物的方法這方面，美國(guó)是老大藥物分析05體內(nèi)藥物分析用有機(jī)溶劑(甲醇)沖洗洗凈用水沖洗活化上樣用水或緩沖液沖洗，洗去內(nèi)源性物質(zhì)有機(jī)溶劑洗脫藥物收集洗脫液固相萃取步驟藥物分析05體內(nèi)藥物分析方法好價(jià)格貴藥物分析05體內(nèi)藥物分析固相選擇 樣品1ml 1ml規(guī)格固相 125ml 3ml規(guī)格固相固相處

13、理 反相C18 固定相的610倍體積甲醇洗柱，使溶劑化 610倍水緩沖服液沖洗達(dá)分離狀態(tài)上樣分離 用適當(dāng)?shù)娜跞軇┫礈?洗去雜質(zhì)，通N2干燥固相洗脫待測(cè)物 改變pH或極性 固相萃取具體步驟藥物分析05體內(nèi)藥物分析（1）流速 流速快，按觸不充分，樣品流失 回收率低 柱處理 510mlmin-1 洗脫 0.21mlmin-1（300mg 25mlmin-1（300mg）（2）裝樣 過載 突破性試驗(yàn) 已知濃度樣品液 小體積上柱洗脫回收百分率 加大體積洗脫回收百分率 繪圖 當(dāng)回收率下降時(shí)為過載 固相萃取具體步驟藥物分析05體內(nèi)藥物分析超濾分離法是以多孔半透膜（超濾膜）作為分離介質(zhì)的一種膜分離技術(shù)，選用不

14、同的孔徑的不對(duì)稱膜，即可按照分子量大小進(jìn)行分離適合TDM血樣分析Therapeutic drug monitoring藥物分析05體內(nèi)藥物分析綴合物的水解酶水解法酸水解法溶劑解法book藥物分析05體內(nèi)藥物分析化學(xué)衍生法why?某些藥物或者代謝產(chǎn)物極性大，揮發(fā)性低，或者對(duì)檢測(cè)器不夠靈敏，難以滿足常規(guī)HPLC及GC檢測(cè)的需要，因此進(jìn)行衍生How for GC?硅烷化?；榛粚?duì)稱化藥物分析05體內(nèi)藥物分析化學(xué)衍生法why?某些藥物或者代謝產(chǎn)物極性大，揮發(fā)性低，或者對(duì)檢測(cè)器不夠靈敏，難以滿足常規(guī)HPLC及GC檢測(cè)的需要，因此進(jìn)行衍生How for LC?UVFL非對(duì)映衍生化?藥物分析05體內(nèi)藥物

15、分析化學(xué)衍生法非對(duì)映衍生化?對(duì)映體：一個(gè)化合物的兩個(gè)光學(xué)異構(gòu)體，其分子在整體上互為不能重疊的鏡像。 分子量、分子式完全相同。應(yīng)用普通色譜方法難以分離。通過衍生可以使之非對(duì)映化。根據(jù)構(gòu)象等理化性質(zhì)差異進(jìn)行分離。藥物分析05體內(nèi)藥物分析分析方法的建立方法的選擇Chromatography？immunoassay ？biology？藥物分析05體內(nèi)藥物分析分析方法的建立方法建立的程序條件篩選？條件優(yōu)化？實(shí)際樣品測(cè)試？藥物分析05體內(nèi)藥物分析分析方法的建立方法的驗(yàn)證特異性標(biāo)準(zhǔn)曲線與定量范圍定量下限準(zhǔn)確度與精密度穩(wěn)定性回收率分析過程的質(zhì)量控制未知樣品濃度超出范圍的處理相關(guān)物質(zhì)測(cè)定其它方法驗(yàn)證藥物分析05

16、體內(nèi)藥物分析第四節(jié) 體內(nèi)樣品分析方法與方法驗(yàn)證(一)、特異性 所測(cè)的物質(zhì)是原型藥物或特定的活性代謝物，內(nèi)源性物質(zhì)和響應(yīng)的其他代謝物及其他藥物不影響樣品的測(cè)定。空白血漿空白血漿標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)受試血漿藥物分析05體內(nèi)藥物分析第四節(jié) 體內(nèi)樣品分析方法與方法驗(yàn)證(二)、標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性范圍6.412.819.225.6 3232.41.81.20.60茶堿(g/ml)Y=9.56610-2X+6.15310-3 r=0.9995至少6個(gè)濃度點(diǎn)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍必須覆蓋全部待測(cè)濃度，不得外推最低濃度點(diǎn)偏差在20%其余濃度點(diǎn)的偏差在 15%。藥物分析05體內(nèi)藥物分析(三)精密度與準(zhǔn)確度(四)定量下限(五)穩(wěn)定性

17、(六)提取回收率(七)質(zhì)控樣品(八)質(zhì)量控制(九)測(cè)定結(jié)果第四節(jié) 體內(nèi)樣品分析方法與方法驗(yàn)證看書了解藥物分析05體內(nèi)藥物分析色譜條件優(yōu)化試劑與溶劑實(shí)驗(yàn)經(jīng)化學(xué)衍生化處理時(shí)要進(jìn)行此步試驗(yàn)取待測(cè)藥物的非生物介質(zhì)溶液（通常為水溶液），按擬定的分析方法進(jìn)行衍生化反應(yīng)，萃取，分離等樣品預(yù)處理后，進(jìn)樣分析以考察反應(yīng)試劑對(duì)測(cè)定的干擾，通過條件優(yōu)化，使空白試劑色譜峰不干擾藥物的測(cè)定藥物分析05體內(nèi)藥物分析相關(guān)術(shù)語生物介質(zhì)來源于生物的介質(zhì)，如全血，血漿，血清，尿，糞，各種組織等取空白生物介質(zhì)按照擬定的體內(nèi)樣品預(yù)處理與分析方法進(jìn)行操作。生物介質(zhì)實(shí)驗(yàn)色譜條件優(yōu)化藥物分析05體內(nèi)藥物分析相關(guān)術(shù)語取空白生物介質(zhì)按照擬定的

18、體內(nèi)樣品預(yù)處理與分析方法進(jìn)行操作。生物介質(zhì)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模河糜诳疾焐锝橘|(zhì)中的內(nèi)源性物質(zhì)對(duì)測(cè)定的的干擾情況。要求：在待測(cè)藥物，特定的活性代謝產(chǎn)物，內(nèi)標(biāo)物質(zhì)等的信號(hào)窗口不應(yīng)出現(xiàn)內(nèi)源性物質(zhì)信號(hào)色譜條件優(yōu)化藥物分析05體內(nèi)藥物分析色譜條件優(yōu)化標(biāo)準(zhǔn)物品？在空白生物介質(zhì)中加入已知量的待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制成的樣品主要用于建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算質(zhì)控樣品和未知樣品的濃度藥物分析05體內(nèi)藥物分析色譜條件優(yōu)化質(zhì)控樣品試驗(yàn)取空白生物介質(zhì)，按實(shí)際體內(nèi)樣品中藥物的預(yù)期濃度范圍，加入待測(cè)藥物的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制成標(biāo)準(zhǔn)樣品和質(zhì)控樣品，照生物介質(zhì)試驗(yàn)項(xiàng)下的方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，建立分析方法的定量范圍與標(biāo)準(zhǔn)曲線并進(jìn)行方法學(xué)考察標(biāo)準(zhǔn)物品？質(zhì)控樣品？藥物分析0

19、5體內(nèi)藥物分析色譜條件優(yōu)化即QC樣品，系指在空白生物介質(zhì)中加入已知量待測(cè)藥物標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制成的樣品質(zhì)控樣品？主要用于監(jiān)測(cè)生物分析方法的效能和評(píng)價(jià)每一分析批結(jié)果的完整性和正確性藥物分析05體內(nèi)藥物分析色譜條件優(yōu)化標(biāo)準(zhǔn)物品？質(zhì)控樣品？相同點(diǎn)制備方法完全一樣藥物分析05體內(nèi)藥物分析色譜條件優(yōu)化標(biāo)準(zhǔn)物品？質(zhì)控樣品？不同點(diǎn)應(yīng)用目的不一樣藥物分析05體內(nèi)藥物分析色譜條件優(yōu)化標(biāo)準(zhǔn)物品？質(zhì)控樣品？具體操作做標(biāo)準(zhǔn)曲線，及相關(guān)指標(biāo)考察在分析樣品時(shí)，每分析多少個(gè)樣品進(jìn)行一次質(zhì)控樣品分析，看分析方法的可靠性：控制分析質(zhì)量藥物分析05體內(nèi)藥物分析色譜條件優(yōu)化具體操作實(shí)際樣品測(cè)試就是實(shí)際樣品測(cè)試，類似于供試品測(cè)試；考察方法是

20、否適合于實(shí)際樣品的測(cè)試藥物分析05體內(nèi)藥物分析色譜條件優(yōu)化介質(zhì)效應(yīng)樣品存在除待測(cè)物質(zhì)以外的所有其它干擾物質(zhì)對(duì)響應(yīng)造成的直接或者間接影響質(zhì)控樣品池所有的質(zhì)控樣品，同未知樣品在相同條件下保存測(cè)試藥物分析05體內(nèi)藥物分析色譜條件優(yōu)化未知樣品研究樣品，作為分析對(duì)象的體內(nèi)樣品制備樣品待測(cè)樣品經(jīng)過各步驟（如提取、純化、濃縮等）處理制成的、直接用于儀器分析的試樣藥物分析05體內(nèi)藥物分析色譜條件優(yōu)化分析批包括未知樣品、適當(dāng)數(shù)量的標(biāo)準(zhǔn)樣品和QC樣品的完整系列藥物分析05體內(nèi)藥物分析液相色譜技術(shù)簡(jiǎn)介講述原因同學(xué)們對(duì)液相色譜的相關(guān)理論認(rèn)知不深，感覺抽象，給本課程學(xué)習(xí)帶來嚴(yán)重影響在本書中有大量的含量測(cè)定及雜質(zhì)限量方法

21、會(huì)用到液相色譜方法希望給同學(xué)們今后從事藥物分析工作，讀研、讀博從事藥學(xué)研究提供一定的幫助藥物分析05體內(nèi)藥物分析液相色譜技術(shù)簡(jiǎn)介液相色譜定義藥物分析05體內(nèi)藥物分析液相色譜技術(shù)簡(jiǎn)介氣、液相色譜區(qū)別藥物分析05體內(nèi)藥物分析液相色譜技術(shù)簡(jiǎn)介液相色譜的結(jié)構(gòu)與原理藥物分析05體內(nèi)藥物分析液相色譜技術(shù)簡(jiǎn)介液相色譜的結(jié)構(gòu)高壓輸液系統(tǒng)分離系統(tǒng)檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)藥物分析05體內(nèi)藥物分析液相色譜技術(shù)簡(jiǎn)介液相色譜的分離系統(tǒng)藥物分析05體內(nèi)藥物分析液相色譜技術(shù)簡(jiǎn)介液相色譜的基本概念固定相：固定相是色譜的一個(gè)基質(zhì)。它可以是固體物質(zhì)（如吸附劑，凝膠，離子交換劑等），也可以是液體物質(zhì)（如固定在硅膠或纖維素上的溶液），這些基質(zhì)能與待分離的化合物進(jìn)行可逆的吸附，溶解，交換等作用。流動(dòng)相：在色譜過程中，推動(dòng)固定相上待分離的物質(zhì)朝著一個(gè)方向移動(dòng)的液體、氣體等，都稱為流動(dòng)相。柱色譜中一般稱為洗脫劑，薄層色譜時(shí)稱為展層劑。 藥物分析05體內(nèi)藥物分析分配系數(shù) 可由Langmuir方程得出 Kd-分配系數(shù) q、c-溶質(zhì)在固相和液相中的濃度藥物分析05體內(nèi)藥物分析保留時(shí)間（