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文檔簡介
1、菊花的組織培育 植物的組織培育又叫離體培育,指植物的組織、器官或細胞等外植體課本34頁旁欄在離體條件下,經(jīng)過無菌操作,在人工控制條件下一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素、溫度等其他外界條件進展培育以獲得再生的完好植株或消費具有經(jīng)濟價值的其他產(chǎn)品的技術(shù)。 根底知識一、植物組織培育1、概念概念:緣由:全能性大小:2、植物組織培育原理:植物細胞的全能性細胞的全能性是指已分化的細胞具有發(fā)育成完好個體的潛能。生物體的每一個細胞都具有該物種生長、發(fā)育、遺傳變異的全套遺傳物質(zhì)受精卵生殖細胞體細胞植物細胞動物細胞分裂才干強分裂才干弱什么叫分化?其本質(zhì)是什么來著?什么叫脫去分化、再分化?愈傷組織的細胞有什么特點?如何控制細胞
2、的脫分化與去分化? 閱讀32-33頁第一段處理以下問題二、植物組織培育的根本過程二、植物組織培育的根本過程概念:本質(zhì):特點:細胞分化個體發(fā)育中,由一個或一種細胞增殖產(chǎn)生的后代,在形狀、構(gòu)造或功能上發(fā)生穩(wěn)定性差別的過程?;虻倪x擇性表達普遍性耐久性穩(wěn)定性不可逆性菠蘿的愈傷組織人參的愈傷組織三、影響植物組織培育的要素:1、植物資料外植體的選取1不同植物的組織培育難易程度不同 什么樣的植物容易進展組織培育?2同一種植物的不同組織培育難度不同 什么樣的組織容易進展組織培育?容易進展無性生殖的植物,如煙草、胡蘿卜幼齡、保管時間短的組織菊花的組織培育普通選用何種資料?未開花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝2、營養(yǎng)
3、成分培育基1植物組織培育常用的培育基? MS培育基大量元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co有機物:甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等 2MS培育基的主要成分?培育基中的各種成分的作用是什么?大量元素和微量元素提供植物細胞需求的各種無機鹽;蔗糖提供碳源的同時維持細胞浸透壓;甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是滿足離體植物細胞的特殊營養(yǎng)物質(zhì)需求課本33頁旁欄思索:微生物培育基以有機營養(yǎng)為主,MS培育基那么需提供大量無機營養(yǎng)3、植物激素1關(guān)鍵激素是什么?2兩種激素的不同運用順序出現(xiàn)不同結(jié)果3兩種激素的不同用量出現(xiàn)不同結(jié)果常用的植物激素:生長素、細胞分
4、裂素和赤霉素生長素類:2,4二氯苯氧乙酸2,4D、吲哚乙酸IAA、萘乙酸NAA、吲哚丁酸IBA細胞分裂素類:激動素KT、6芐基嘌呤 6BA、玉米素ZT赤霉素類:赤霉酸GA3生長素和細胞分裂素作用植物中生長素和細胞分裂素是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。在生長素存在的情況下,細胞分裂素的作用呈現(xiàn)加強的趨勢使用順序?qū)嶒灲Y(jié)果先使用生長素,后使用細胞分裂素有利于細胞分裂,但不利分化先使用細胞分裂素后使用生長素細胞既分裂也分化同時使用分化頻率提高生長素細胞分裂素:有利于根的分化生長素細胞分裂素:有利于芽的分化,抑制根的分化生長素細胞分裂素:促進愈傷組織生長生長素和細胞分裂素同時運用,用量的比例
5、對植物細胞發(fā)育方向的影響4、pH、溫度、光照等 菊花組織培育的PH?溫度?光照?5、無菌環(huán)境菊花的組織培育再分化資料性質(zhì)、營養(yǎng)物質(zhì)、調(diào)理物質(zhì)、環(huán)境條件根本原理:細胞的全能性根本過程:脫分化愈傷組織影響要素:制備MS固體培育基外植體消毒 接種 培 養(yǎng)栽 培四、實驗操作 移 栽流水沖洗無菌紙吸干70%酒精無菌水沖洗無菌紙吸干0.1%氯化汞無菌水沖洗至少三次之上流水是為消毒嗎?能消毒的是什么?無菌水沖洗是為了干啥?哪6步?1、配制各種母液大量元素、微量元素各濃縮多少倍?用量較小的有機物呢?2、配制培育基菊花組培能否添加植物激素?3、滅菌哪種滅菌方法?留意接種時的各種無菌操作。將菊花莖段插入培育基時特
6、別應(yīng)留意什么?最好在哪兒培育?溫度?光照?定期消毒?直接移栽到土壤中嗎?接種本卷須知每接種一塊外植體前,鑷子需放入體積分數(shù)為75的酒精溶液中消毒一次,然后在酒精燈火焰上燒一遍,冷卻后再接種外植體在培育基中要分布均勻,放置外植體數(shù)量根據(jù)錐形瓶的大小確定,普通胡蘿卜34塊,菊的莖或葉68塊,也不要太少,以充分利用培育基中的營養(yǎng)成分和光照條件插入時應(yīng)留意方向,不要倒插。莖段、莖尖基部插入培育基利于吸收水分和營養(yǎng)培育1、愈傷組織的培育從接種外植體到出現(xiàn)愈傷組織需經(jīng)過2周時間。2周之內(nèi)可以看到外植體上逐漸長出乳白色或黃白色的瘤狀愈傷組織。初次培育愈傷組織時,恒溫箱的門應(yīng)該封鎖不用見光,由于在無光條件下愈
7、傷組織長的更快。2周后,培育基成分接近耗盡,必需改換培育基,進展繼代培育繼代培育所用的培育基與培育愈傷組織的一樣,在嚴厲的無菌條件下,將愈傷組織連同原來的外植體一同移到新培育基上。愈傷組織的繼代培育一代為20d。假設(shè)延伸時間,培育基中營養(yǎng)物質(zhì)減少,外植領(lǐng)會分泌有毒物質(zhì),呵斥本身中毒。假設(shè)愈傷組織長到直徑為11.5cm時,就可以進展試管苗培育,否那么還需進展第二代繼代培育2、愈傷組織的繼代培育在愈傷組織繼代培育期間,將恒溫箱的門翻開,讓愈傷組織見光,愈傷組織見光后顏色可以轉(zhuǎn)為綠色3、試管苗的培育當愈傷組織長到一定大小后,可以改換培育基,進展試管苗的見光培育移栽移栽生根的菊花試管苗之前,應(yīng)先翻開培
8、育瓶的封口膜,讓試管苗在培育間生長幾日1、翻開封口膜2、清洗轉(zhuǎn)移用流水清洗根部的培育基,將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境下生活一段時間珍珠巖:固體基質(zhì)型,含水量高、蓄水性強、透性好,適宜栽培3、移栽幼苗長壯后,移栽到土壤中六栽培幼苗移栽后,每天察看并記錄幼苗的生長情況,適時澆水、施肥,直至開花1、培育基的滅菌高壓蒸汽滅菌2、外植體的消毒酒精、氯化汞3、接種的無菌操作酒精、酒精燈灼燒4、無菌箱中的培育;5、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時間在整個操作過程中,是如何來實現(xiàn)無菌環(huán)境的?35頁旁欄思索:至少做一組以上的反復。對照實驗用一個不接種的空白培育基與接種的培育基一同培育,用以闡明培育基制造
9、合格,沒有被雜菌污染。結(jié)果分析與評價一對接種操作中污染情況的分析二能否完成了對植物組織的脫分化和再分化三能否進展了統(tǒng)計、對照與記錄四生根苗的移栽能否合格1、培育無病毒植株2、 培育紫草愈傷組織,提取紫草素治療燙傷和割傷的藥物以及染料和化裝品的原料4、基因工程中亦需用到植物組織培育的方法植物組織培育的運用: 3、誘導離體的植物組織構(gòu)成具有生根發(fā)芽才干的胚狀構(gòu)造,包裹上人造種皮,制成人工種子,可以處理有些作物種類繁衍才干差,結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問題人工種子課題延伸略練習1.答:植物組織培育所利用的植物資料體積小、抗性差,對培育條件的要求較高。用于植物組織培育的培育基同樣適宜于某些微生物的生長,如一
10、些細菌、真菌等的生長。而培育物一旦遭到微生物的污染,就會導致實驗前功盡棄,因此要進展嚴厲的無菌操作。2.答:外植體的生理形狀是勝利進展組織培育的重要條件之一。生長旺盛的嫩枝生理情況好,容易誘導脫分化和再分化。菊花的組織培育再分化資料性質(zhì)、營養(yǎng)物質(zhì)、調(diào)理物質(zhì)、環(huán)境條件外植體的消毒接種根本原理:細胞的全能性根本過程:脫分化愈傷組織影響要素:操作流程:配制MS固體培育基培育移栽栽培1.以下關(guān)于愈傷組織的說法中不正確的選項是( )A.愈傷組織的細胞可以進展細胞分裂B.用葉培育構(gòu)成的愈傷組織細胞可以進展光協(xié)作用C.培育愈傷組織的培育基中應(yīng)含有有機養(yǎng)料 D.人們可以從愈傷組織中提取所需物質(zhì)B2.植物組織培
11、育過程中的脫分化是指 A.植物體的分生組織經(jīng)過細胞分裂產(chǎn)生新細胞B.未成熟的種子經(jīng)過處置培育出幼苗的過程C.植物的器官、組織或細胞,經(jīng)過離體培育產(chǎn)生愈傷組織的過程D.取植物的枝芽培育成一株新植物的過程C3 胡蘿卜的韌皮部細胞經(jīng)過組織培育,能發(fā)育成新的植株。以下有關(guān)的表達中,不正確的選項是 A闡明高度分化的植物細胞具有全能性 B植物細胞的全能性得以表達要分開母體C新植株的構(gòu)成是細胞分裂和分化的結(jié)果 D高度分化的動物細胞也具有全能D4 甘薯種植多年后易積累病毒而導致種類退化。目前消費上采用莖尖分生組織離體培育的方法快速繁衍脫毒的種苗,以保證該種類的質(zhì)量和產(chǎn)量程度。這種經(jīng)過分生組織離體培育獲得種苗的過程不涉及細胞的 A.有絲分裂B.分化 C.減
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