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1、實(shí)驗(yàn)二分離以尿素為氮源的微生物關(guān)鍵語句課前自上學(xué)習(xí),基艷才能樓高.尿素又稱月尿,是蛋白質(zhì)降解的產(chǎn)物。在人和其他哺乳動物如家畜的尿中都含有尿素,大量尿素的 存在會對環(huán)境造成污染。.以尿素為氮源的微生物的特點(diǎn)含有月尿酶,通過降解尿素作為其生長的氮源。其利用尿素的反應(yīng)式為:(Nhb) 26= 3 HO月尿酶,2NH3+ CQo3.分離以尿素為氮源的微生物(1)實(shí)驗(yàn)原理:在以尿素為唯一氮逸的選擇培養(yǎng)基上生存的微生物能以尿素為氮源。細(xì)菌合成的月尿酶能將尿素分解成NH,致使pH升高,使酚紅指示劑變紅。(2)培養(yǎng)基的對照:制備 LB全營養(yǎng)培養(yǎng)基和尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基,分別培養(yǎng)土壤中的微 生物,并對菌落觀察
2、并計(jì)數(shù)。(3)實(shí)驗(yàn)步驟:.分離以尿素為氮源的微生物所采用的分離方法是()A.涂布分離法B.劃線分離法C.稀釋分離法D.選擇分離法解析:選A微生物的分離方法多種多樣,本實(shí)驗(yàn)使用了涂布分離法。.用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目,其結(jié)果與實(shí)際值相比()A.比實(shí)際值高B.比實(shí)際值低C.和實(shí)際值一致D.比實(shí)際值可能高也可能低解析:選B培養(yǎng)基上的一個菌落也可能由相連的兩個或多個菌體繁殖而來,并且該方法測 得的是活菌的菌落數(shù)目,未包括死菌數(shù),因此統(tǒng)計(jì)的活菌數(shù)要少于菌體實(shí)際值。.下列有關(guān)敘述,錯誤的是 ()A.在尿素固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)含有月尿酶的微生物會導(dǎo)致培養(yǎng)基呈酸性B.地表土壤中含有一定量的月尿C.以
3、尿素為氮源的細(xì)菌含有月尿酶D.月尿是一種有機(jī)化合物,含有氮元素- _. 腺酶解析:選A 根據(jù)反應(yīng)式:(NH2) 2C= 0+ H2O2NH+CO,在尿素固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)含有月尿酶的微生物會產(chǎn)生 NH,從而導(dǎo)致培養(yǎng)基呈堿性。.用以尿素為唯一氮源加入酚紅指示劑的培養(yǎng)基,培養(yǎng)尿素分解菌后,指示劑將()A.變藍(lán)色B.變紅色C.變黑色D.變棕色解析:選B尿素分解菌合成的月尿酶將尿素分解成了氨,會使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng),pH升高,加入酚紅指示劑將變紅色。.在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中,生成物中除CO外還有()A. N2 B . N。C. NG D . NH解析:選D以尿素為氮源的微生物中含有月尿酶,它能降解尿素
4、并產(chǎn)生 NH,為其生長提供氮源,其反應(yīng)如下:(NH2)2C=G H20H 3 2NH3+ CO。酬患tasa或注課堂講陳設(shè)計(jì),舉一能通類即核心要點(diǎn) 一 |分離以尿素為氮源的微生物.篩選菌株的原理(i)原理:根據(jù)不同微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性不同而制備培養(yǎng)基。(2)方法:在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)。例如,加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌;加入高濃度 的食鹽可以得到金黃色葡萄球菌。改變培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分。例如,缺乏氮源時可以分離固氮微生物;石油作為唯一碳源時,可以分離出能消除石油污染的微生物;用含無機(jī)碳源的培養(yǎng)基分離自養(yǎng)型微生物。改變微生物的培養(yǎng)條件。例如,將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)
5、境中培養(yǎng)可以得到耐高溫的微生物;用普通培養(yǎng)基在無氧條件下分離厭氧型和兼性厭氧型微生物。特別提醒能在選擇培養(yǎng)基上生長的不一定是目的菌-2 -原則上選擇培養(yǎng)基只能允許特定種類的微生物生長,但實(shí)際上,微生物的培養(yǎng)是一個非常復(fù) 雜的問題,有些微生物可以利用其他微生物的代謝產(chǎn)物生長繁殖,因此能在選擇培養(yǎng)基上生長的 微生物不一定都是所需的微生物,還需進(jìn)一步的鑒定。2.統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法微生物生長量的測定有計(jì)數(shù)法、重量法、生理指標(biāo)法等方法,但是一般使用計(jì)數(shù)法,計(jì)數(shù)法 可分為直接計(jì)數(shù)法和間接計(jì)數(shù)法。二者的比較如下表所示:項(xiàng)目直接計(jì)數(shù)法間接計(jì)數(shù)法原理利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞 計(jì)數(shù)板,在顯微鐐r計(jì)算一定容 積的
6、樣品中微生物的數(shù)量當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時, 培養(yǎng)基表面生長的 一個菌落,來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù), 就能推測出樣品中 大約含有多少活菌主要用具顯微鏡、細(xì)菌計(jì)數(shù)板/口加小計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)菌體本身培養(yǎng)基上菌落數(shù)優(yōu)點(diǎn)計(jì)數(shù)方便、操作簡單計(jì)數(shù)的是活菌缺點(diǎn)死菌、活國都計(jì)算在內(nèi)操作較復(fù)雜,有一定誤差題組沖關(guān).下列有關(guān)尿素培養(yǎng)基的敘述,錯誤的是()A.根據(jù)物理性質(zhì)劃分,該培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基B.培養(yǎng)基中的唯一氮源為尿素,用以篩選以尿素為氮源的微生物C.培養(yǎng)基中的酚紅,用以鑒別以尿素為氮源的微生物D.培養(yǎng)基中加入 G6玻璃漏斗過濾的尿素后,要用 500 g/cm 2壓力(90 C以上)滅菌3
7、0 min解析:選D因?yàn)槟蛩丶訜釙纸?,所以?yīng)先將培養(yǎng)基經(jīng)500 g/cm2壓力滅菌30 min(為防止葡萄糖分解碳化),再添加經(jīng)過 G6玻璃漏斗過濾后的尿素。.下列關(guān)于微生物培養(yǎng)和利用的敘述,錯誤的是()A.利用涂布分離法既能分離微生物也能對微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)B.接種時連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步分散獲得單個菌落C.以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌D.選擇培養(yǎng)基作用的原理都是顯現(xiàn)某微生物的特征,以區(qū)別于其他微生物解析:選D涂布分離法能分離純化微生物也能對微生物進(jìn)行計(jì)數(shù);連續(xù)劃線是將聚集的菌 種逐步分散,以獲得單個菌落;尿素分解菌的分離和鑒別可以選用以尿素為唯一氮源,且含
8、酚紅 的培養(yǎng)基;選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某一化學(xué)物質(zhì)或改變某一理化性質(zhì),使某一微生物正常 生長,而其他微生物則被殺滅或生長受到抑制,從而選出所需要的微生物。土壤中有些微生物能利用尿素是因?yàn)?)A.其體內(nèi)含有月尿酶B.其體內(nèi)含有氨(NH3)酶C.它能將CO合成為有機(jī)物D.它們不需要氮源解析:選A能利用尿素的微生物就是因?yàn)轶w內(nèi)含有月尿酶,可降解尿素為其生長繁殖提供氮 源。核心要點(diǎn)二|分離以尿素為氮源的微生物實(shí)驗(yàn)分析1 .樣品稀釋的問題(1)稀釋原因:樣品的稀釋程度直接影響平板上生長的菌落數(shù)目。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時, 培養(yǎng)基表面生長的一個菌落,來源于樣品稀釋液中的一個活菌。因此,恰當(dāng)?shù)南♂尪仁浅?/p>
9、功地統(tǒng) 計(jì)菌落數(shù)目的關(guān)鍵。(2)稀釋標(biāo)準(zhǔn):選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng),保證獲得菌落數(shù)在30300之間,便于計(jì)數(shù)。2 .與涂布平板有關(guān)的問題(1)防止培養(yǎng)基外濺:在倒平板的過程中,不能將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,因?yàn)?空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。(2)涂布器的滅菌:玻璃刮刀用70%酉精消毒,取出時,多余酒精在燒杯中滴盡,沾有少量酒精的玻璃刮刀在酒精燈火焰上引燃。(3)設(shè)置對照:可排除實(shí)驗(yàn)中非測試因素對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。題組沖關(guān)(2012 浙江高考)幽門螺桿菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性潰瘍的主要致病因素。在 患者體內(nèi)采集樣本并制成菌液后,
10、進(jìn)行分離培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)基本步驟如下:配制培養(yǎng)基-滅菌、倒平板-X-培養(yǎng)-觀察請回答:(1)在配制培養(yǎng)基時,要加入尿素和酚紅指示劑,這是因?yàn)镠p含有,它能以尿素作為氮源;若有 Hp,則菌落周圍會出現(xiàn) 色環(huán)帶。(2)下列對尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方法是 滅菌。A.高壓蒸汽B.紫外燈照射C. 70%酉精浸泡D.過濾(3)步驟X表示。在無菌條件下操作時,先將菌液稀釋,然后將菌液 到 培養(yǎng)基平面上。菌液稀釋的目的是為了獲得 菌落。(4)在培養(yǎng)時,需將培養(yǎng)皿倒置并放在 中。若不倒置培養(yǎng),將導(dǎo)致(5)臨床上用14C呼氣實(shí)驗(yàn)檢測人體是否感染Hp,其基本原理是Hp能將14C標(biāo)記的14分解為NH和CQo解析:(1)幽門
11、螺桿菌中含有月尿酶,能將尿素分解成為 NH和CO,故尿素為氮源。NH為堿性,能使酚紅呈紅色,故菌落周圍會出現(xiàn)紅色環(huán)帶。(2)尿素在高溫下分解,故不能用高溫滅菌法,只能采取過濾的方法。(3)由細(xì)菌和真菌培養(yǎng)操作步驟可知,X為接種。接種時,應(yīng)將菌種均勻涂布在培養(yǎng)基上。為了獲得單菌落,接種前應(yīng)該稀釋菌液。(4)為了形成單菌落還應(yīng)該將培養(yǎng)皿倒置在恒溫箱中。(5)用14C標(biāo)記尿素,分解后標(biāo)記物全部在CO中。答案:(1)月尿酶 紅(2)D(3)接種 涂布 單(4)恒溫培養(yǎng)箱無法形成單菌落(5)尿素課后層級演練.缶步提升能力隨堂基礎(chǔ)鞏固.篩選、鑒別尿素分解菌的培養(yǎng)基氮源為()A.蛋白月東B.尿素C.酚紅D.
12、硝酸鹽解析:選B分離尿素分解菌的培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為唯一氮源。.要從多種細(xì)菌中分離某種細(xì)菌,培,養(yǎng)基要用()A.加入青霉素的培養(yǎng)基B.固體培養(yǎng)基C.液體培養(yǎng)基D.加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基解析:選B將聚集的菌種逐步稀釋分散到固體培養(yǎng)基的表面,經(jīng)過培養(yǎng),可以分離到由一 個細(xì)菌繁殖而來的肉眼可見的一定形態(tài)的菌落,即分離出某種細(xì)菌。.產(chǎn)生每個標(biāo)準(zhǔn)菌落的細(xì)菌的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是()A. 一個細(xì)菌,液體培養(yǎng)基B.許多細(xì)菌,液體培養(yǎng)基C. 一個細(xì)菌,固體培養(yǎng)基D.許多細(xì)菌,固體培養(yǎng)基解析:選C在微生物的培養(yǎng)中產(chǎn)生每個標(biāo)準(zhǔn)菌落的細(xì)菌的最初數(shù)目是一個細(xì)菌,使用的培 養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基。.平板冷凝后,要將平板倒置,其
13、原因是 ()A.接種時拿起來方便B.防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染C.正著放置容易破碎D.方便在皿底上標(biāo)記日期等內(nèi)容解析:選B平板倒置主要是防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。.用涂布分離法來統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌數(shù)時,通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)就能推測出樣品中的活菌數(shù)。原因是()A.平板上的一個菌落就是一個細(xì)菌B.菌落中的細(xì)菌數(shù)是固定的C.此時的一個菌落一般來源于樣品稀釋液中的一個活菌D.此方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)一定與活菌的實(shí)際數(shù)相同解析:選C當(dāng)稀釋倍數(shù)適宜時, 培養(yǎng)基上的一個菌落一般來源于樣品稀釋液中的一個活菌, 但也可能由兩個或兩個以上活菌生長而成,因此菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)低。.能產(chǎn)生月尿酶的
14、細(xì)菌菌落周圍出現(xiàn)著色環(huán)帶的原因是()A.外泌的月尿酶將尿素水解成氨,氨為堿性,使酚紅變?yōu)榧t色B.外泌的月尿酶呈堿性使酚紅變?yōu)榧t色C.外泌的月尿酶將酚紅分解成呈紅色的物質(zhì)D.酚紅與月尿酶反應(yīng)后生成了呈紅色的物質(zhì)解析:選A能產(chǎn)生月尿酶的細(xì)菌將月尿酶分泌到細(xì)菌外,隨后月尿酶將培養(yǎng)基中的尿素水解成氨,氨為堿性,遇酚紅變紅色。.分離以尿素為氮源的微生物的土樣最好取自()A.有大量植物生長的地方.臨水的地方C.有哺乳動物排泄物的地方D.干燥、空曠的地方解析:選C由于人和其他哺乳動物如家畜的尿中都含有尿素,因此含有哺乳動物排泄物的 土壤中就可能存在以尿素為氮源的微生物。課時跟檢測1.從土壤中分離以尿素為氮源
15、的細(xì)菌,實(shí)驗(yàn)過程如圖所示:(1)圖中物質(zhì) A為,若要統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中以尿素為氮源的細(xì)菌的活菌數(shù)目,宜采用 法接種到尿素培養(yǎng)基上,對照組配制的培養(yǎng)基為 培養(yǎng)基,若用同濃度的土壤稀釋液接種,實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)皿中菌落數(shù) (填“大于” “等于或“小于”)對照組。在能利用尿素的細(xì)菌菌落周圍,有紅色環(huán)帶出現(xiàn)的原因是(2)下列培養(yǎng)基中,能分離出分解尿素的細(xì)菌的是()A.葡萄糖、NaCl、&HPQ酚紅、瓊脂糖、水B.葡萄糖、NaCl、&HPQ酚紅、瓊脂糖、水、尿素C. NaCl、瓊脂糖、水、蛋白月東、酵母提取物、尿素D.葡萄糖、NaCl、K2HPQ酚紅、瓊脂糖、水、蛋白月東、酵母提取物(3)欲將分離得到的以尿素為
16、氮源的細(xì)菌進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),應(yīng)使用 培養(yǎng)基。答案:(1)無菌水 涂布分離 LB全營養(yǎng) 小于 能利用尿素的細(xì)菌產(chǎn)生的月尿酶,將培養(yǎng)基中的尿素分解,產(chǎn)生的氨使指示劑呈紅色(2)B (3)LB液體.苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì),自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生 的廢水中含有苯酚,為了降解廢水中的苯酚,研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的 細(xì)菌菌株,篩選的主要步驟如圖所示,為土壤樣品。請回答下列問題:(1)中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入 作為碳源,中不同濃度碳源的培養(yǎng)基(填“影響”或“不影響”)細(xì)菌的數(shù)量,如果要測定中活細(xì)菌數(shù)量,常采用法。(2)為對照,微生物在中不生長,在中生長
17、,與培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于;使用 法可以在上獲得單菌落。(3)實(shí)驗(yàn)過程中如何防止其他微生物的污染? 解析:根據(jù)微生物對營養(yǎng)的需求,在培養(yǎng)基中加入或不加某些物質(zhì)以達(dá)到促進(jìn)目的菌生長, 抑制或阻止其他雜菌生長的目的,然后再用涂布分離法、劃線分離法或其他方法篩選出單個目的 菌落,再接種培養(yǎng)即可獲得純目的菌。在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)中要注意單一變量原則和對照原則,操作中要 嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作。答案:(1)苯酚 影響 涂布分離 (2)的培養(yǎng)基沒有加入苯酚作為碳源,的培養(yǎng)基加入了苯酚作為碳源涂布分離法或劃線分離(3)培養(yǎng)基滅菌,接種環(huán)境滅菌,接種過程進(jìn)行無菌操作.圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)月尿酶細(xì)菌的過程,圖乙是月尿酶基因轉(zhuǎn)錄的
18、mRNAB分序列。請回答下列問題:-7 -(1)圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以 為唯一氮源;鑒別培養(yǎng)基還需添加 作指示劑, 產(chǎn)月尿酶細(xì)菌在該培養(yǎng)基上生長一段時間后,其菌落周圍的指示劑將變成 色。(2)在5個細(xì)菌培養(yǎng)基平板上, 均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液 0.1 mL培養(yǎng)一段時間 后,平板上長出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。該過程采取的接種方法是,每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為 X 10 8個;與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比, 此計(jì)數(shù)方法測得的細(xì)菌數(shù)較 。(3)現(xiàn)有一菌株的月尿酶由于基因突變而失活,突變后基因轉(zhuǎn)錄的mRNAE圖乙箭頭所示位置增加了 70個核甘酸,使圖乙序列中出現(xiàn)終止
19、密碼 (終止密碼有UAG UG用口 UAA)。突變基因轉(zhuǎn)錄的 mRNA3,終止密碼為 ,突變基因表達(dá)的蛋白含 個氨基酸。解析:(1)月尿酶能夠催化尿素水解釋放出氨和二氧化碳,因此選擇培養(yǎng)基中應(yīng)以尿素為唯一 氮源。挑取單菌落接種到加有酚紅指示劑的鑒別培養(yǎng)基中,培養(yǎng)一段時間后,菌落周圍的氨增加,pH升高,酚紅指示劑將變紅色。(2)該過程采取的接種方法為涂布分離法。利用涂布分離法對細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)時,應(yīng)選擇菌落數(shù)在 30300的平板,因此平板上長出的細(xì)菌菌落平均數(shù)為(156+178+ 191)+3= 175個。每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)為175+0.1 X 10 5= 1.75 X 10 8個。血細(xì)胞計(jì)數(shù)板
20、計(jì)數(shù)法會將死細(xì)胞計(jì)算在內(nèi),而稀釋涂布平板計(jì)數(shù)法只能計(jì)數(shù)活細(xì)胞(只有活細(xì)胞才能在平板上生長),故一般血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法所得結(jié)果要比涂布分離法所得結(jié)果大。(3)箭頭處插入70個核甘酸,箭頭后密碼子的解讀方式為*AG, UGA GAA-/比3種終止密碼可發(fā)現(xiàn),此處的終止密碼為UGA從起始密碼到終止密碼之前共有273+72個堿基,因此突變基因表達(dá)的蛋白含115個氨基酸。答案:(1)尿素 酚紅 紅(2)涂布分離法1.75 少 (3)UGA 115.生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多,某同學(xué)為探究土壤中微生物對尿素是否具有分解作用,設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn),并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌 (目的菌)。培養(yǎng)基成分如
21、表所示, 實(shí)驗(yàn)步驟如圖所示。請分析回答問題:KH2PO1.4 gNaHPO2.1 gMgSO- 7H2O0.2 g葡萄糖10 gwr1 g瓊脂糖15 g將上述物質(zhì)溶解后,用蒸儲水定容到1 000 mL(1)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選 ,因此這種培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。(2)目的菌生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的 ,實(shí)驗(yàn)過程中振蕩培養(yǎng)的主 要目的是。(3)轉(zhuǎn)到固體培養(yǎng)基上時,常采用 的方法接種,獲得單菌落后繼續(xù)篩選。(4)下列材料或用具:培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿,玻璃棒、試管、三角瓶和移液管,實(shí)驗(yàn)操作者的雙手。其中需要滅菌的是 ;需要消毒的是 。(填序號)(5)簡述土壤中可分解尿素的細(xì)菌的
22、鑒定方法及原理:,其原因是細(xì)菌產(chǎn)生的月尿酶催化尿素分解產(chǎn)生 所致。解析:(1)本實(shí)驗(yàn)中的LB培養(yǎng)基是要與尿素培養(yǎng)基作對比的,所以要用瓊脂糖替換瓊脂。(2)尿素培養(yǎng)基的滅菌要分開進(jìn)行,除尿素外的其他成分仍用高壓蒸汽滅菌,尿素溶液用G6玻璃砂漏斗過濾除菌,再將除菌的尿素加到已滅菌的其他成分中。G6玻璃砂漏斗由于孔徑小,細(xì)菌不能濾過,可用于過濾除菌,但需要在使用前進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。(3)由于在土壤中產(chǎn)月尿酶的細(xì)菌遠(yuǎn)少于普通細(xì)菌,所以在尿素培養(yǎng)基上的菌落數(shù)相對少得多,另外稀釋倍數(shù)高的土壤稀釋液中細(xì)菌 數(shù)量更少,在培養(yǎng)基上菌落數(shù)也更少。在尿素固體培養(yǎng)基上產(chǎn)月尿酶細(xì)菌菌落周圍出現(xiàn)紅色環(huán)帶, 這是因?yàn)樵履蛎复呋蛩胤纸猱a(chǎn)生氨,使培養(yǎng)基呈堿性,酚紅指示劑在堿性下呈紅色。答案:(1)瓊脂糖 (2)高壓蒸汽 孔徑小、細(xì)菌不
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