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1、葡萄糖淀粉酶淀粉酶葡萄糖淀粉酶GA催化域連接域結(jié)合域基本結(jié)構(gòu)三個功能區(qū)O-Glycosylated Linker基本結(jié)構(gòu)黑曲霉糖化酶GA GA 催化域CDO-糖基化域淀粉結(jié)合域SBD限制性水解不含淀粉結(jié)合域SBD,少數(shù)甚至不含O-糖基化域催化域CD結(jié)構(gòu)含13股-螺旋,折疊成桶狀(/)6結(jié)構(gòu),桶的核心為一個口袋狀,催化中心位于其中催化機(jī)制酸堿催化連接域結(jié)構(gòu)起連接CD和SBD的作用,一般被O-糖基化修飾不同真菌來源的糖化酶該區(qū)域的氨基酸序列可變性較大在生物活性條件下,甘露糖比半乳糖更容易以O(shè)-方式連接到連接域的Ser和Thr殘基上連接域結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系GAGpI:增加了一段重復(fù)的O-糖基化連接域2
2、個重組蛋白酶GA470-493:缺少O-糖基化連接域中Ala470-Thr493氨基酸序列結(jié)果:GAGpI的熱穩(wěn)定性及PH穩(wěn)定性都有所提高,這主要是由于它含有額外的O-糖基化連接域,增加了糖基化位點(diǎn),因此碳水化合物的含量也增加淀粉結(jié)合域結(jié)構(gòu)具有八條折疊股,形成兩個主要的片層:第一個包括五個反平行的鏈,第二個包括一個平行和一對反平行的鏈淀粉結(jié)合域功能使得不溶性底物與溶液中的酶相互作用使底物結(jié)合到催化區(qū)域的活性位點(diǎn)上破壞淀粉顆粒的表面,提高淀粉水解率水解過程先為吸附,然后形成一種復(fù)合體,破壞維系淀粉分子螺旋結(jié)構(gòu)的氫鍵,然后不斷水解淀粉的糖苷鍵,水解使得淀粉顆粒的表面形成一系列的空穴,最后達(dá)到破壞淀粉結(jié)構(gòu)的效果。水解速率實(shí)際應(yīng)用中存在的問題及擬解決途徑水解-1,6糖苷鍵的性能差熱穩(wěn)定性不夠PH穩(wěn)定性低1.定點(diǎn)突變某些氨基酸酶穩(wěn)
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