1、實(shí)驗(yàn)八-九 水中細(xì)菌總數(shù)與大腸菌群數(shù)的測定及計(jì)數(shù)Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.骸輥色顏蘊(yùn)產(chǎn)垂韓如慰飾丑吻噪妊搖芯膘轅淤后頁睹沁摘蠢艙抨彰刀乏峙實(shí)驗(yàn)八-九水中細(xì)菌總數(shù)與大腸菌群數(shù)的測定1I9 目的要求 1、學(xué)習(xí)檢測水中細(xì)菌總數(shù)和大腸菌群數(shù)的方法 2、掌握用稀釋平板計(jì)數(shù)法測定水中細(xì)菌總數(shù)的方法 3、學(xué)習(xí)使用大腸菌群檢索表Evaluation only.Created with Aspose.Slides

2、 for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.顴惦柑桿冶搽嬸似懈研酪展喂釉鞭萊蘊(yùn)仟閨廖輿賣苗丹叔勵甘專打丙寢來實(shí)驗(yàn)八-九水中細(xì)菌總數(shù)與大腸菌群數(shù)的測定1I9實(shí)驗(yàn)原理我國飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：每ml水樣細(xì)菌總數(shù)37培養(yǎng)24h不得大于100個。水中細(xì)菌總數(shù)說明被有機(jī)物污染的程度，細(xì)菌數(shù)越多，有機(jī)物質(zhì)含量越大；采用平板菌落計(jì)數(shù)法測定水中細(xì)菌總數(shù)。采用牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基，能使大多數(shù)細(xì)菌生長。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Cli

3、ent Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.悟影鉀釘忻孺撥微答詠何姿瞇琢撾癰構(gòu)帝育艇潑答迅哀儲焰濰只悠遂入豢實(shí)驗(yàn)八-九水中細(xì)菌總數(shù)與大腸菌群數(shù)的測定1I9總大腸菌群指數(shù)高，表示水被糞便污染。采用多管發(fā)酵法：初發(fā)酵、平板分離和復(fù)發(fā)酵。我國飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：每升水中總大腸菌群37培養(yǎng)48h小于3個。發(fā)酵管內(nèi)裝有乳糖蛋白胨液體培養(yǎng)基,并倒置一杜氏發(fā)酵小管.乳糖能起選擇作用,因?yàn)楹芏嗉?xì)菌不能發(fā)酵乳糖,而大腸菌群能發(fā)酵乳糖而產(chǎn)酸產(chǎn)氣。為便于觀察細(xì)菌產(chǎn)酸情況，培養(yǎng)基內(nèi)加有溴甲酚紫作為PH指示劑,細(xì)菌產(chǎn)酸后,培養(yǎng)基即由原來的紫色變?yōu)辄S色。溴甲酚

4、紫還有抑制其他細(xì)菌如芽孢菌生長的作用。 產(chǎn)氣情況可通過倒置小管中的氣泡來觀察。Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.旅渺債淡錯腕井傻閩烘莎矛揀屯圾媽疇刻蔚蝶愉生鯨棗甕尖龐司用抹肋馴實(shí)驗(yàn)八-九水中細(xì)菌總數(shù)與大腸菌群數(shù)的測定1I9實(shí)驗(yàn)材料1. 牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基，乳糖蛋白胨發(fā)酵管（內(nèi)有倒置小管），3倍濃縮乳糖蛋白胨發(fā)酵管（內(nèi)有倒置小管），伊紅美藍(lán)瓊脂平板2. 革蘭氏染液，無菌水3. 滅菌吸管，滅菌試管等Ev

5、aluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.君險(xiǎn)尾鹿霞吟撓味政晚辱拐揣橋胎頻姨橋幻子唉苑書狹群肚眨瀑蔚騾千佩實(shí)驗(yàn)八-九水中細(xì)菌總數(shù)與大腸菌群數(shù)的測定1I9實(shí)驗(yàn)方法1. 稀釋水樣： 取3支無菌管，分別加入無菌水9ml。取1ml水樣加入第一支管中，振蕩，混勻，此為10-1。依次做1：10系列稀釋至10-2、10-3。 自不同稀釋度的試管中各取0.1ml水，分別加入牛肉膏蛋白胨瓊脂平板中，用無菌涂布棒在培養(yǎng)基表面將水涂布均

6、勻，室溫下靜置10min。每一稀釋度作2個平板將平板倒置，37，培養(yǎng)24h后，進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。 污水中細(xì)菌總數(shù)的檢測Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.娃撥彰照隘性妖涌憾鮮盈伙札騷曰柱某蘑替欄截筷浮伍輯撩嘩炎鏡耳萬舒實(shí)驗(yàn)八-九水中細(xì)菌總數(shù)與大腸菌群數(shù)的測定1I9實(shí)驗(yàn)方法4. 菌落計(jì)數(shù)： CFU/ml某稀釋度的菌落數(shù)：兩平板菌落數(shù)取平均值 選擇菌落數(shù)在30-300之間的稀釋度 Evaluation only.

7、Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.夫陛敏扔幸唇渦弱格烷屹繕絕尚撬奶蟄鍬撰皇鵬盆仔序裙腕掉幼綱輝躬置實(shí)驗(yàn)八-九水中細(xì)菌總數(shù)與大腸菌群數(shù)的測定1I9例次不同稀釋度的平均菌落數(shù)兩個稀釋度菌落之比菌落總數(shù)（CFU/ml）10-110-210-3僅有一個稀釋度在此范圍： 菌落數(shù)稀釋倍數(shù)1365164201.6104有兩個稀釋度在30-300之間 菌落數(shù)之比2，選較小值3890271602.22.7104所有稀釋度均300 取稀釋倍數(shù)最大者無法計(jì)

8、數(shù)16505135.1105所有稀釋度均30 取稀釋倍數(shù)最小者271152.7102沒有任何稀釋度在30-300之間 選最接近該范圍者無法計(jì)數(shù)305123.1104Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.拜粳怨元平果摻溜撮鑰梯漸巍的焰飛氈土多至杰堿慎爬端撂奮贍季決從侯實(shí)驗(yàn)八-九水中細(xì)菌總數(shù)與大腸菌群數(shù)的測定1I9細(xì)菌總數(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果稀釋度10-110-210-3平板121212菌落數(shù)平均菌落數(shù)計(jì)算方法細(xì)菌總數(shù)Ev

9、aluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.錯綁旦適姓磚窖里秒概煎咕拍別譏疙鞠田虞撫淆奢試彪砸量簡哪卿捐差店實(shí)驗(yàn)八-九水中細(xì)菌總數(shù)與大腸菌群數(shù)的測定1I9實(shí)驗(yàn)方法1. 稀釋水樣： 取 1ml水樣加入9ml無菌水，振蕩，混勻，此為10-1。同法稀釋至10-2。2. 初發(fā)酵：分別取1ml10-2、10-1的稀釋水樣和1ml原水樣，各注入裝有10ml普通濃度乳糖蛋白胨 發(fā)酵管中。另取10ml原水樣，注入裝有5ml 3倍濃縮

10、乳糖蛋白胨發(fā)酵管中?；靹?，37 培養(yǎng)24h，24h未產(chǎn)氣繼續(xù)培養(yǎng)至48h。 普通濃度發(fā)酵管中加入20%乳糖0.55ml，3倍濃縮發(fā)酵管中加入乳糖0.75ml 多管發(fā)酵法測定水中總大腸菌群Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.槳田現(xiàn)診鉗壤池庶焦貞弱瞇卓翰皇苞羊嘉汛卓秦童喊箕材離恿渡實(shí)宜艱女實(shí)驗(yàn)八-九水中細(xì)菌總數(shù)與大腸菌群數(shù)的測定1I9實(shí)驗(yàn)方法3.平板分離：（1）制備伊紅美藍(lán)平板： 45 ，無菌，傾注15ml（

11、2）選產(chǎn)酸產(chǎn)氣的發(fā)酵管，接種至伊紅美藍(lán)平板（分區(qū)劃線法）（3）培養(yǎng)： 37，24h 多管發(fā)酵法測定水中總大腸菌群Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.締玫槐淡賀罰讀侯補(bǔ)調(diào)暗蠶腆洶居幫操柏獅挑訃漚淡豢鄭捆邵戴渠鈉居箱實(shí)驗(yàn)八-九水中細(xì)菌總數(shù)與大腸菌群數(shù)的測定1I9實(shí)驗(yàn)方法分區(qū)劃線法第一區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第二區(qū)劃線滅菌接種環(huán)第三區(qū)劃線滅菌接種環(huán)Evaluation only.Created with Aspose.

12、Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.潑終嫁餌歐隋髓局認(rèn)煽蝶甘毛縱憑裴攆完朵熬胰吶耘割聲像運(yùn)勤兌炒釋婪實(shí)驗(yàn)八-九水中細(xì)菌總數(shù)與大腸菌群數(shù)的測定1I9實(shí)驗(yàn)方法 操作要點(diǎn) 1.劃下一個區(qū)前必須滅菌接種環(huán) 2.劃線時接種環(huán)同平板呈30-40角 3.每次劃線應(yīng)該壓到上一個區(qū)域的2-3條線 4.用接種環(huán)的“面”而不是“弧”在平板上滑動Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile

13、.Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.撻隔敝眶每落馬末穎臂泥夕宮容呻勢昂縮獨(dú)惜碰局醉堵剝轎嶺踏汞樹驟衡實(shí)驗(yàn)八-九水中細(xì)菌總數(shù)與大腸菌群數(shù)的測定1I9平板分離（4）菌落特征： 深紫黑色、有金屬光澤 紫黑色、無或略有金屬光澤 淡紫紅色、中心顏色深 （5）革蘭染色、鏡檢：選特征菌落Evaluation only.Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile .Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.甩癱帝栽奎操即猜止紹擄值戚盛鼠措蔬峪餌概酬刺太踏辰肘帝寡次上矚有實(shí)驗(yàn)八-九水中細(xì)菌總數(shù)與大腸菌群數(shù)的測定1I9實(shí)驗(yàn)方法4. 復(fù)發(fā)酵： （1）選取鑒定為無芽孢G-桿菌的菌落1-3個 （2）接種至7ml乳糖蛋白胨培養(yǎng)液(加入0.35ml乳糖液） （3）培養(yǎng)：37，24h （4）觀察指標(biāo)：產(chǎn)酸，產(chǎn)氣將結(jié)果查閱大腸菌群檢數(shù)表-6，即可獲得每升水樣中的總大腸