1、同濟(jì)大學(xué)附屬同濟(jì)醫(yī)院檢驗科血液組項目操作指導(dǎo)書TJYYJYKMY/XMZ132第2版標(biāo)題: -丁酸萘酚酯酶染色第1章 第32節(jié)第 PAGE 3 頁 共 NUMPAGES 3 頁 目的：保證-丁酸萘酚酯酶染色 適用范圍：-丁酸萘酚酯酶染色檢測 項目名稱：-丁酸萘酚酯酶染色 檢測方法：化學(xué)染色法 原理：血細(xì)胞內(nèi)的-丁酸萘酚酯酶將基質(zhì)液中的-丁酸萘酚水解，產(chǎn)生丁酸萘酚， 與堅牢紫醬GBC偶聯(lián)形成灰褐色沉淀，定位與胞漿內(nèi)。 試劑：6.1 品牌： 丙酮 上海試劑三廠 37%甲醛 上海試劑三廠磷酸氫二鈉 上海新華化工廠 磷酸二氫鉀 上海試劑二廠丁酸萘酚 SIGMANN-二甲基甲酰胺溶液 上海華工試劑廠鹽酸

2、 上海試劑三廠付品紅 上海試劑二廠亞硝酸鈉 上海振興試劑廠6.2 貨號： 丙酮 13-20102365II 37%甲醛 13-20102569II磷酸氫二鈉 磷酸二氫鉀 13-001-0802-113II丁酸萘酚 218-440NN-二甲基甲酰胺溶液 鹽酸 13-001-0806-003II付品紅 亞硝酸鈉 13-0010801220II6.3 丙酮 500ml 37%甲醛 500ml磷酸氫二鈉 500g 磷酸二氫鉀 500g氯化醋酸AS-D萘酚 1gNN-二甲基甲酰胺溶液 500ml 鹽酸 500ml付品紅 25g亞硝酸鈉 25g6.4 內(nèi)含物：6.4.1 固定液： 丙酮 45ml 37%甲

3、醛 25ml6.4.2 六偶氮付品紅溶液 甲液：40g/L鹽酸付品紅溶液付品紅 4g2N鹽酸 100ml冷時過濾，置棕色瓶內(nèi)避光保存乙液：40g/L亞硝酸鈉溶液 亞硝酸鈉 4g 蒸餾水 100ml 配制后置4保存應(yīng)用液：甲液1份、乙液1份混合，褪至無色即可使用6.4.3 0.067mol/L磷酸鹽緩沖液（PH6.3）6.4.4 基質(zhì)液：6.4.4.1吸取10l丁酸萘酚溶液于小試管內(nèi)，加入0.5ml乙二醇單甲醚混勻6.4.4.2加入9.4ml緩沖液（PH6.3），再加入0.1ml六偶氮付品紅應(yīng)用液 儀器：顯微鏡 操作步驟；8.1 新鮮涂片冷固定液固定30秒8.2 水洗待干8.3 進(jìn)入基質(zhì)液，在37水溫箱內(nèi)孵育1小時8.4 流水沖洗干凈8.5 用蘇木素復(fù)染1-2分鐘 線性范圍：無10. 參考范圍：用油鏡觀察，胞漿內(nèi)出現(xiàn)灰褐色為陽性反應(yīng)。11 臨床意義：單核系細(xì)胞為陽性反應(yīng)。12. 病人準(zhǔn)備標(biāo)本要求：采取病人骨髓液涂片13 注意事項：13.1 標(biāo)本新鮮13.2 染色時間要充分。13.3 沖洗要