1、中國藥典2020版微生物檢驗控制發(fā)展與規(guī)劃胡昌勤中國食品藥品檢定研究院2019年4月25日，蘇州NIFDC1中國藥典微生物控制體系2 2020版中國藥典增修訂情況尚需進一步關注的工作4中藥微生物污染控制方案NIFDC如何控制藥品中的污染微生物中國藥典微生物控制體系中國藥典微生物控制主要內(nèi)容NIFDC藥品中污染菌的檢出與鑒定. 無菌與有菌（無菌檢查法）. 致病菌與非致病菌（微生物限度檢查法）藥品中污染菌的殺滅與控制. 滅菌法. 抑菌效力檢查法藥品中污染菌的質(zhì)控限度相關的指導原則歷版藥典所取得的進展NIFDC 2005版. 將按劑型制定限度修訂為按給藥途徑制定限度. 強調(diào)微生物檢驗的“方法驗證”.

2、 無菌檢查培養(yǎng)時間與國外接軌 2010版. 質(zhì)量標準體系基本與國外接軌. 強調(diào)對微生物檢驗過程的驗證及過程控制. 部分品種特別是抗生素品種的無菌檢查法由附錄走入各論歷版藥典所取得的進展（續(xù)）NIFDC 2015年版. 三部藥典實現(xiàn)了標準的統(tǒng)一. 形成了一個比較完備的藥品微生物檢驗標準體系，具有以下兩個顯著特征： 全面與國際標準接軌； 推動了藥品微生物控制由終產(chǎn)品檢驗向過程控制轉(zhuǎn)變。. 強化了對藥品微生物檢驗中試驗操作關鍵點的過程控制中國藥典2015年版框架體系NIFDC1、9203 藥品微生物實驗室質(zhì)量管理指導原則2、1101 無菌檢查法9206 無菌檢查用隔離系統(tǒng)驗證指導原則9205 藥品潔

3、凈實驗室微生物監(jiān)測和控制指導原則9204 微生物鑒定指導原則3、1105/6/7 計數(shù)法/控制菌/限度標準（微生物限度檢查）9201 藥品微生物檢驗替代方法指導原則9202 非無菌藥品微生物限度檢查指導原則9204 微生物鑒定指導原則9205 藥品潔凈實驗室微生物監(jiān)測和控制指導原則4、1121 抑菌效力檢查5、1421 滅菌法77歷版藥典所取得的進展（續(xù)）NIFDC 2020年版. 提出了對中藥飲片污染微生物的控制方案 飲片中的污染微生物具有高度的不確定性 結(jié)合用途，精準控制。. 完善了與工藝驗證相關的檢查法及指導原則 修訂滅菌法（已經(jīng)兩版沒有修訂） 增訂滅菌用生物指示劑指導原則 增訂生物指示

4、劑耐受性檢查法指導原則. 微生物檢驗新技術的引入中國藥典2020年版框架體系NIFDC1、9203 藥品微生物實驗室質(zhì)量管理指導原則2、1101 無菌檢查法9206 無菌檢查用隔離系統(tǒng)驗證指導原則9205 藥品潔凈實驗室微生物監(jiān)測和控制指導原則9204 微生物鑒定指導原則3、1 5/6/7 計數(shù)法/控制菌/限度標準（微生物限度檢查）9201 藥品微生物檢驗替代方法指導原則9202 非無菌藥品微生物限度檢查指導原則9204 微生定指導原則9205 藥品潔凈實驗室微生物監(jiān)測和控制指導原則4、1121 抑菌效力檢查法5、1421 滅菌法滅菌用生物指示劑指導原則生物指示劑耐受性檢查法指導原則6、技術方

5、法細菌DNA特征序列鑒定法（新增）DNA 測序技術指導原則（新增）標準核酸序列建立指導原則（新增）99NIFDC控制藥品污染，保證藥品安全2020版中國藥典增修訂情況一、修訂的背景NIFDC1.以中國藥典2020版編制大綱為指導2.以國際標準為參考3.以科研課題和研究數(shù)據(jù)為依托NIFDCNIFDCNIFDC微生物專委會的工作重點NIFDC化學藥品中藥先進技術的應用以注射劑再評價為契機，通過深入探討注射劑生產(chǎn)過程中無菌保障體系的評估與調(diào)查（OOS）策略，促使企業(yè)成為藥品過程過程中控制微生物污染的主體。以中藥飲片微生物限度標準的制定為突破口，探討基于風險控制理念，對不同用途的中藥，控制微生物污染的

6、策略與方法。以分子生物學技術為重點，研究其在藥品微生物檢測當中的應用，完善微生物質(zhì)量控制標準和體系，提升微生物鑒定和溯源分析水平。15近5年科研課題NIFDC中藥飲片： 中藥飲片污染微生物數(shù)據(jù)庫的建立 中藥飲片耐熱菌的研究及污染微生物數(shù)據(jù)庫平臺的建立 中藥飲片污染微生物限度標準研究生物指示劑 ：15項 菌生物指示劑研究 菌檢驗用隔離系統(tǒng)驗證指導原則新方法等： 水活度測定在非無菌產(chǎn)品中的應用研究（尚在進行） 氣霧劑和噴的微生物檢驗方法研究分子生物學技術應用： 分子生物學檢測技術藥典標準體系建設 核酸測序技術用于藥品 量控制規(guī)范法研究 標準核酸測序數(shù)據(jù)庫的 立 分子生物學技術用 藥品質(zhì)量控制標準核

7、酸序列數(shù)據(jù)庫的建立、分子生物學技術用于藥品質(zhì)量控制標準化技術指導原則的制定 分子生物學技術用于藥品控制菌檢研究 微生物致病菌鑒定與溯源用標準核酸序列的建立 微生物致病菌鑒定與溯源用標準核酸序列的建立（尚在進行） 微生物全基因組核酸測序技術用于藥品質(zhì)量控制指導原則的建立（尚在進行）近5年科研課題的應用NIFDC中藥飲片： 新增中藥飲片微生物限度檢查法; 修訂中藥飲片微生物限度標準生物指示劑等：12項 新增 物指示劑耐受性檢查法指導原則 新增滅菌用生物指示劑指導原則 修訂通則9206 無菌檢查用隔離系統(tǒng)驗證和應用指導原則氣霧劑： 修訂通則1105微生物計數(shù)法、1101無菌檢查法中供試品溶液制備分子

8、生物學技術應用： 建立標準核酸序列數(shù)據(jù)庫網(wǎng)站（/seq/home.php） 新增DNA 測序技術指導原則 新增標準核酸序列建立指導原則 新增細菌 DNA 特征序列鑒定法 修訂通則9204 微生物鑒定指導原則擬增修訂的與“注射劑控制” 相關的內(nèi)容NIFDC解決中國藥典2015年版微生物控制體系仍存在不協(xié)調(diào)、不適應和配套不足的問題：中國藥典2020年版應重點考慮完善與注射劑滅菌工藝驗證相關的檢查法及指導原則1. 1421滅菌法已經(jīng)兩版沒有修訂；2. 9204微生物 定指導原則需修訂完善3. 9205藥品潔凈實驗室微生物監(jiān)測和控制指導原則需修訂完善4. 9206無菌檢查用隔離器系統(tǒng)驗證指導原則需修訂

9、完善5. 增訂滅菌用生物指示劑指導原則6. 增訂生物指示劑耐受性檢查法指導原則7. 制藥用水、原輔料（包括中藥飲片）、中間體等的質(zhì)控標準及應用研究8. .擬增訂的與“先進技術應用” 相關的內(nèi)容NIFDC完善中國藥典2015年版微生物控制體系，提升微生物鑒定和溯源分析水平。中國藥典2020年版增訂的檢查法及指導原則1.細菌 DN 特征序列鑒定法 ；2.DNA 測序技術指導原則；3.標準核酸序列 立指導原則中國藥典2020年版增修訂內(nèi)容NIFDC1.滅菌法（重大修訂）2.無菌檢查用隔離系統(tǒng)驗證指導原則（重大修訂）3.中藥飲片微生物限度檢查法及標準（新增）4.生物指示劑滅菌用生物指示劑指導原則 （新

10、增）生物指示劑耐受性檢查指導原則 （新增）5.分子生物學技術應用重大變化細菌DNA特征序列鑒定法（新增）DNA 測序技術指導原則（新增） 準核酸序列建立指導原則（新增）1.1101 無菌檢查法一般性修訂2.1105 非無菌產(chǎn)品微生物檢查：微生物計數(shù)法3.1107 非無菌藥品微生物限度標準4.1121 抑菌 力檢查法5.9203 藥品微生物實驗室質(zhì)量管理指導原則6.9204 微生物鑒定指導原則7.9205 藥品潔凈實驗室微生物監(jiān)測和控制指導原則1.1106 非無菌產(chǎn)品微生物檢查：控制菌檢查法2.9201 藥品微生物檢驗替代方法驗證指導原則3.9202 非無菌產(chǎn)品微生物檢查指導原則未修訂總結(jié)NIF

11、DC最終目標：化學藥品全面與國際接軌，中藥標準符合藥材生產(chǎn)及應用的特點；服務于由終產(chǎn)品檢驗向微生物過程控制轉(zhuǎn)變的需要服務于企業(yè)是產(chǎn)品的第一責任人這一理念轉(zhuǎn)變的需要NIFDC檢查標準檢測方法結(jié)果判斷相互關聯(lián)，相互影響，不可分割。尚需進一步關注的工作NIFDC差異原因國內(nèi)生物制品無菌檢查在引用WHO導則6出現(xiàn)的對FTM兩種培養(yǎng)溫度的規(guī)定；歐美ICH1994年接受USP/EP方法1101 無菌檢查法中生物制品的特殊規(guī)定我國是抗生素及注射劑生產(chǎn)使用大國，大量的產(chǎn)品驗證報告表明檢驗條件下大腸更適合作為方法驗證菌株1101 無菌檢查 中以大腸為驗證菌株1101、110 等 CMCC菌株問題國際主要菌種保藏

12、機構的利益沖突，當前維護中國大量中小型制藥企業(yè)利益的必要性進一步強調(diào)培養(yǎng)觀察體系的參照（No Control No Test）提供履行按驗證/轉(zhuǎn)移過方法系統(tǒng)檢驗的直接證據(jù)1101、1106 陽性對照的 定1121 抑菌劑效力檢查法判斷規(guī)則與EP一 USP/EP亦未就此協(xié)調(diào)，隨著我國開展此項工作的經(jīng)驗積致，但實驗菌株規(guī)定有差異 累，還會進一步調(diào)整更合適的菌株標準的發(fā)展有一定的過程和規(guī)律，必須兼顧歷史和現(xiàn)實，必須符合一國的工業(yè)實際需求。非無菌藥品微生物限度檢查NIFDCICHChP2015評價總體上，ChP2015版微生物限度檢查法在（對照異，實菌限生檢驗方法、檢驗程序、實驗要求、標準表征方式等方

13、面與ICH方案基本一致，由于中藥的特殊性，ChP2015版在實施上存在較大挑戰(zhàn)，未來應在中藥標準方面研究完ICH方案的進一步協(xié)調(diào)一致問題（菌限制照培面存點，（菌限查要限度面差善，在與上更需深入研究討論。use不可接受微生物NIFDCNIFDC1107非無菌藥品微生物限度標準：標準列出的控制菌可能幵不能全面控制藥品中污染微生物的危害，因此，對于原料、輔料及某些特定的制劑，根據(jù)原輔料及其制劑的特性和用途、制劑的生產(chǎn)工藝等因素，可能還需檢查其他具有潛在危害的微生物。NIFDC什么是不可接受微生物（ObjectionableMicroorganisms）？通常是指藥品中的那些已知有明顯的致病性，存在足

14、夠的數(shù)量，通過產(chǎn)品的給藥途徑可能導致患者出現(xiàn)不可接受風險的污染微生物。USP42(2S)草案NIFDC 60 MICROBIOLOGICAL EXAMINATION OF NONSTERILEPRODUCTSTESTS FOR BURKHOLDERIA CEPACIA COMPLEX非無菌產(chǎn)品微生物檢查洋蔥伯克霍爾德菌復合體檢查法 60 Microbiological Examination of Nonsterile ProductsTests for Burkholderiacepacia Complex. Be se no standard method currently exists

15、 for the detectionof Burkholderia cepacia complex (BCC), a new chapter is being proposed. BCCspecies are gram-negative, rod-shaped bacteria that include opportunisticpathogens. Many BCC have thtential for overcoming antimicrobialpreservative systems and antiseptics, and grow in preserved aqueous ora

16、l liquidsand topical products. BCC may cause serious infections in individuals with cysticfibrosis and chronic granulomatous disea , mechanically ventilated patients,immunosuppressed people, and those with serious underlying disease. Thischapter proposal contains test procedures for the detection of

17、 BCC.NIFDC中藥微生物污染控制方案中藥污染微生物控制的起步NIFDC我國對非無菌藥物的微生物控制源于對中藥制品污染微生物控制的需要. 1972年我國出口日本的中藥由于微生物污染被日方大量退貨；. 中檢院組織相關藥檢所開展藥品衛(wèi)生檢驗方法及標準的研究. 1978年頒發(fā)了第一個“藥品衛(wèi)生標準”；1986年新版的“藥品衛(wèi)生標準”頒布。. 1995年版中國藥典首次收載了藥品微生物限度檢測法1986年版藥品衛(wèi)生標準NIFDC一、中藥： （一）口服藥品： 克戒毫升不得檢出大腸桿菌，含動物藥及臟器的藥品同時不得檢出沙門氏菌。不得檢出活螨。 固體制劑： （）不含生藥原粉的制劑，克含細菌數(shù)不得過個，霉菌

18、數(shù)不得過個。 （）含生藥原粉的制劑：片劑 克含細菌數(shù)不得過，個，霉菌數(shù)不得過個。 丸劑 克含細菌數(shù)不得過，個，霉菌數(shù)不得過個。 散劑 克含細菌數(shù)不得過，個，霉菌數(shù)不得過個。液體制劑：毫升含細菌數(shù)不得過個，霉菌和酵母菌數(shù)不得過個。藥品衛(wèi)生檢驗方法NIFDC 1980年，衛(wèi)生部正式發(fā)行了藥品衛(wèi)生檢驗方法； 1986年第二版藥品衛(wèi)生檢驗方法頒布；1991年5 月 日衛(wèi)生部于以衛(wèi)藥字( 9 1 ) 第15 號文頒布執(zhí)行藥品衛(wèi)生檢驗方法( 1990年版)。藥品衛(wèi)生標準的實施促進了藥品質(zhì)量的提高 NIFDC96.0%為配合2005版藥典的修訂，我們對當時國內(nèi)藥品的微生物污染情況進行過調(diào)查：100%90%8

19、0%70%60%5061.6%40%30%20%10%0%1999年與1986丸劑細菌數(shù)調(diào)查企業(yè)數(shù)品種數(shù)丸劑批數(shù)1986年1999年 1999年丸劑調(diào)查細菌數(shù)合格率（1999年 4571986年 2266113372181細菌數(shù)不得過310 個/g）由4135961.6%提高到96.0%中國藥品標準，2003,6（6）：NIFDC藥典會微生物丏業(yè)委員會成立（2005版中國藥典） 時對當時我國藥品衛(wèi)生狀況的訃識：1）我國藥品衛(wèi)生標準的不斷完善和貫徹執(zhí)行促進了我國藥品質(zhì)量的迅速提高；2）中成藥、民族藥、醫(yī)院制劑衛(wèi)生質(zhì)量仍令人擔憂；3）注射劑、滴眼劑、外用藥的無菌檢查及控制菌檢查不可松懈。直接危及

20、者生命的注射劑、甚至抗生素注射劑無菌檢查不合格仍時有發(fā)生。4）中國藥典微生物控制體系亟需與國際接軌。NIFDCNIFDC中醫(yī)藥在國家衛(wèi)生體系中的作用和地位越來越高習近平總書記：中醫(yī)藥學凝聚著深邃的哲學智慧和中華民族幾千年的健康養(yǎng)生理念及其實踐經(jīng)驗，是中國古代科學的瑰寶，也是打開中華文明寶庫的鑰匙。李克強總理：中醫(yī)藥是中華優(yōu)秀文化的瑰寶，為中華民族繁衍昌盛作出了巨大貢獻，也對世界文明產(chǎn)生了積極影響。對中藥飲片污染微生物的控制勢在必行中藥微生物控制風險分析NIFDC動植物礦物藥材飲片成藥 2015Chp 理化指標 生產(chǎn)控制 水源、土壤、環(huán)境 采收、加工、貯藏、運輸 大量微生物 性狀 鑒別 摻雜防偽

21、 微生物控制 0 微生物控制輻照滅菌（60Co-）輻照滅菌NIFDC能否利用輻照滅菌技術控制中藥材中的污染菌數(shù)量？NIFDC單一的依賴輻照不是控制中藥微生物污染的有效途徑！輻照劑量的選擇是一個復雜問題，劑量不夠，不能完全殺滅中藥材中的污染菌；大劑量的輻照可以使得中藥中活性成分發(fā)生化學反應，影響其有效性；大劑量輻照產(chǎn)生的殘留物可能影響藥物的安全性。NIFDC中藥材生產(chǎn)環(huán)境的非可控性，對傳統(tǒng)的微生物控制理念提出了挑戰(zhàn)。如何在中藥的發(fā)展過程中形成獨特的微生物限度標準？中藥飲片微生物控制NIFDC20132014飲片污染微生物數(shù)據(jù)庫的建立飲片微生物限度標準的研究2015飲片耐熱菌的研究和污染微生物數(shù)據(jù)

22、庫的擴建TAMC、TYMC、耐熱菌、耐膽鹽革蘭陰性菌污染微生物數(shù)量（有多少菌）控制菌檢查結(jié)果中藥飲片污染微生物數(shù)據(jù)庫污染微生物類別（有什么菌）劃線分離微生物鑒定結(jié)果中藥飲片污染微生物數(shù)據(jù)庫NIFDC品種數(shù)量（種）批次（批）分離菌株鑒定數(shù)（株含25種經(jīng)炮制品種）需氧菌總數(shù) 霉菌酵母菌總數(shù) 耐熱菌總數(shù) 需氧菌總數(shù)，耐熱菌數(shù) 霉菌及酵母菌總數(shù) 耐膽鹽格蘭陰性菌數(shù)JP 收載的植物藥微生物限度標準NIFDCTAMCTYMC分類藥典版本控制菌CFU/gCFU/g需煎煮的藥材JP16107107105104105103大腸埃希菌不得過（ ）102/g mL沙門菌不得檢出 /10g（

23、mL）不得過103/g（mL）不得檢出 /10g（mL）17大腸埃希菌沙門菌可直接服用的藥材JP16耐膽鹽的革蘭氏陰性菌 不得過 （ ）103/g mL大腸埃希菌沙門菌不得檢出/g（mL）不得檢出/10g（mL）JP17105104耐膽鹽的革蘭氏陰性菌 不得過104/g（mL）大腸埃希菌沙門菌不得檢出/g（mL）不得檢出/10g（mL）* JP17增加了5倍因子的控制，TAMC和TYMC計數(shù)的最大允許值，以5倍因子計算。USP收載的植物藥微生物限度標準NIFDCTAMCCFU/gTYMCCFU/g分類藥典版本控制菌干燥或 USP36 105103耐膽鹽革蘭氏陰性菌 不得過 （ ）103/g m

24、L粉末植物藥材沙門菌不得檢出/10g（mL）USP40 105103耐膽鹽革蘭氏陰性菌 不得過103/g（mL）沙門菌不得檢出/10g（mL）不得檢出/10g mL）大腸埃希菌待煎煮 USP36 105103104大腸埃希菌不得檢出 （ ）/10g mL的植物USP40 106耐膽鹽革蘭氏陰性菌 不得過102/g（mL）藥材沙門菌不得檢出/10g（mL）不得檢出/10g（mL）大腸埃希菌需氧菌總數(shù)（TAMC）NIFDCUSP EP/JP霉菌及酵母菌總數(shù)（TYMC）NIFDCUSPEP/JP中藥飲片污染微生物種類NIFDC鑒別污染微生物種類 對2286批飲片分離到的2513株微生物的鑒別：5門，

25、10綱，18目，26科，67屬 606株耐熱菌的鑒別：33屬，大部分為芽孢桿菌科，少數(shù)腸桿菌科、葡萄球菌科、鞘脂單胞菌科致病菌1199批樣品陽性溶血性鏈 白色念大腸 沙門115 10志賀銅綠 金葡球菌珠菌326700數(shù)量陽性率 9.6% 0.8% 0.3%.2% 0.6%00序號5門8綱-變形菌綱-變形菌綱11目根瘤菌目伯克霍爾德氏菌目巴斯德氏菌目14科根瘤菌科31屬土壤桿菌屬叢毛單胞菌屬分離813株菌NIFDC111叢毛單胞菌科巴斯德氏菌科23456789巴斯德菌屬Grimontella屬埃希菌屬變形桿菌屬腸桿菌屬21149119466117185泛菌屬克雷伯菌屬克羅諾桿菌屬克呂沃爾氏菌屬拉

26、烏爾菌屬萊克勒菌屬勒克氏菌屬檸檬酸桿菌屬歐文氏菌屬沙門菌屬10111213141516171819202122232425262728293031變形菌門86.8腸桿菌目74.8%腸桿菌科-變形菌綱186.4%15127127志賀氏菌屬假單胞菌屬金色單胞菌屬不動桿菌屬腸球菌屬37231996假單胞菌科假單胞菌目莫拉菌科腸球菌科鏈球菌科乳桿菌目厚壁菌門11.1%鏈球菌屬芽孢桿菌綱葡萄球菌科芽孢桿菌科球菌科葡萄球菌屬芽孢桿菌屬微球菌屬25505芽孢桿菌目放線菌門 放線菌綱放線菌目擬桿菌門 鞘氨醇桿菌綱鞘氨醇桿菌目鞘氨醇桿菌科鞘氨醇桿菌屬紅酵母屬絲孢酵母屬假絲酵母屬酵母菌屬1242芽生菌綱真菌門 1

27、.4%隱球酵母菌目酵母目隱球酵 菌科酵母科酵母綱3中藥飲片污染微生物種類NIFDC細菌16SrDNA可變區(qū)V3 5測序數(shù)量（條）樣品編號厚壁菌門 變形菌門101,911 99.20%135,805 96.00%118,893 97.00%122,944 99.90%108,127 96.50%155,582 44.90%0.80%3.70%2.90%0.10%3.40%55.00%85.60%13.10%1.10%2.80%BH1BH2BH3BH4BH5BH6BH7BH8BH9BH10 比對 eneBank 供試品1：3門6綱11目20科29屬 供試品2：5門7綱18目31科31屬98,073

28、14.30%110,492 8 .90%91,22988,38398.70%97.10%門/2綱/3目/6根瘤菌目科/8根瘤菌科屬/17根瘤菌屬種/47（122株）Rhizobium radiobacter-變形菌綱53批菊花分離鑒定的微生物群鞘脂單胞菌目鞘脂單胞菌科鞘脂單胞菌屬Sphingomonas paucimobilisNIFDCKosakoniaKosakonia cowaniihermanniivulneris埃希菌屬大腸埃希菌*赫氏埃希菌asburiae/cloacaecowaniiEnterobacter asburiaeEnterobacter soli（98.86）Ente

29、robacter xiangfangensishormaechei腸桿菌屬霍氏腸桿菌生癌腸桿菌陰溝腸桿菌*agglomeransananatis/agglomeransdispersaeu naPantoea theicola腸桿菌目腸桿菌科泛菌屬變形菌門變形菌綱變克雷伯氏菌克雷伯菌屬肺炎克雷伯菌肺炎亞種肺炎克雷伯氏菌Cronobacter sakazakii groupmalonaticus克羅諾桿菌屬勒克氏菌屬sakazakiisakazakii/malonaticussakazakii/turicensisadecarboxylata非脫羧勒克菌檸檬酸桿菌屬歐文氏菌屬志賀氏菌屬Citro

30、bacter freundiiErwinia tasmaniensissonnei變形假單胞菌假單 菌科莫拉菌科假單胞菌屬惡臭假單胞菌假單胞菌目乳桿菌目Ac netobacter baumanniibaumannii complex托爾豪特鏈球菌不動桿菌屬鏈球菌科鏈球菌屬類芽孢桿菌科類芽孢桿菌屬Paenibacillus odorifercereus groupcirculanslicheniformis厚壁菌門 芽孢桿菌綱芽桿菌目Paenibacillus alveisubtilis/vallismortis/amyloliquefaciens芽孢 菌科芽孢桿菌屬枯草芽孢桿菌芽孢桿菌屬門/3

31、綱/6目/9科/3屬/37株/1087-變形菌綱-變形菌綱紅螺菌目紅螺菌科產(chǎn)堿桿菌科固氮螺菌屬無色桿菌屬FranconibacterKosakonia2伯克霍爾德氏菌目13281Lelliottia耐膽鹽腸道微生物的分析Proteus1ProvidenciaRaoultella12SiccibacterSodalis61埃希菌屬692愛文氏菌屬布丘氏菌屬腸桿菌屬34211281腸桿菌科（89.3%）變形菌門腸桿菌目泛菌屬-變形菌綱假檸檬酸桿菌屬克雷伯菌屬克羅諾桿菌屬克呂沃氏菌屬拉烏爾菌屬勒克氏菌屬檸檬酸桿菌屬歐文氏菌屬沙門菌屬143603耐膽鹽革蘭氏陰性菌主要腸桿菌目組成，有也有少數(shù)的厚壁菌門

32、及放線菌門微生物檢出。（TSA和EE）43923202特布爾希氏菌屬志賀氏菌屬假單胞菌屬不動桿菌屬45假單胞菌科莫拉菌科8312假單目門/4綱/7目/11科/19屬/33菌株數(shù)根瘤菌目鞘脂單胞菌目奈瑟氏菌目根瘤菌科鞘脂單胞菌科奈瑟氏菌科根瘤菌屬84145341141-變形菌綱-變形菌綱鞘脂單胞菌屬奈瑟氏菌屬腸桿菌屬泛菌屬變形菌門腸桿菌目腸桿菌科克雷伯菌屬克羅諾桿菌屬檸檬酸桿菌屬假單胞菌屬不動桿菌屬糖多孢菌屬耐熱菌的分析：-變形菌綱假單胞菌科莫拉菌科假單胞菌目平板分離菌落鑒定結(jié)果與二代測序結(jié)果均證明，耐熱菌中存在少量耐膽鹽革蘭陰性菌，但占比不大 危害不高。假諾卡氏菌目假諾卡氏菌科Pseudart

33、hrobacter考克氏菌屬羅氏菌屬112放線菌門放線菌綱微球菌科微球菌目微球菌屬1細桿菌科丹毒絲菌科腸球菌科鏈球菌科乳桿菌科細桿菌屬6丹毒絲菌綱 丹毒絲菌目乳桿菌目丹毒絲菌屬腸球菌屬11鏈球菌屬2乳桿菌屬1Solibacillus1動性桿菌屬賴氨酸芽胞桿菌屬芽胞八疊球菌屬短芽胞桿菌屬類芽胞桿菌屬李斯特菌屬葡萄球菌屬Fictibacillus海洋芽胞桿菌屬土芽胞桿菌屬芽胞桿菌屬1動球菌科1厚壁菌門15（8 6%）芽胞桿菌綱芽胞桿菌目類芽胞桿菌科121李斯特氏菌科萄球菌科641芽胞桿菌科1519不同飲片中的致病菌NIFDC 藥典控制菌：大腸埃希菌、沙門菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌 其他風險菌

34、：陰溝腸桿菌、阪崎腸桿菌、肺炎克雷、蠟樣芽胞桿菌、溶血不動桿菌、鮑氏不動桿菌、犬巴斯德氏菌、多殺巴斯德氏菌等。名稱陰溝腸桿阪崎腸桿菌 肺炎克雷伯菌蠟樣芽胞桿菌品種數(shù)檢出批次261016161318667122直服類品種數(shù)直服類檢出批次52812164中藥飲片污染微生物的控制NIFDC對中藥飲片中污染微生物的鑒別提示，污中藥飲片中的污染菌具有高度的不確定性，僅控制特定致病菌存在極大地安全風險；而控制污染菌的總量，降低致病菌污染的風險，是理想的控制方案。NIFDC依據(jù)中藥飲片的使用風險控制其微生物限度分類TAMC*cfu/gTYMC*cfu/g耐熱菌數(shù)*控制菌cfu/g需煎煮的飲片07105104/耐膽鹽革蘭陰性菌不得過103/g（ml）沙門菌不得檢出/10g（ml）可直接服用的飲片1051