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文檔簡介
1、幾種常用的染色方法一、美蘭染色法在已染色、固定好的抹片上,滴加適量的(足夠覆蓋涂抹點(diǎn)即可)美蘭染色掖,經(jīng)12分鐘,水洗,干燥(可用吸水紙吸干,或自然干燥,但不能烤干),鏡檢。二、革蘭氏染色法1、在已干燥、固定好的抹片上,滴加草酸銨結(jié)晶紫染色掖,經(jīng)12分鐘,水洗。2、加革蘭氏碘溶液于抹片上媒染,作用13分鐘,水洗。3、加95酒%精于抹片上脫色,約30秒至1分鐘,水洗。4、加稀釋石炭酸復(fù)紅(或沙黃水溶液)復(fù)染1030秒,水洗。5、吸干或自然干燥,鏡檢。革蘭氏陽性菌呈藍(lán)紫色,革蘭氏陰性菌呈紅色。三、抗酸染色法1、萋尼氏抗酸染色法:首先在已干燥、固定好的抹片上,滴加較多量的石炭酸復(fù)紅染色液,在玻片下以
2、酒精燈火焰微微加熱至發(fā)生蒸氣為度(不要煮沸),維持微微發(fā)生蒸氣,經(jīng)35分鐘,水洗。然后用3%鹽酸酒精脫色,至標(biāo)本無色脫出為止,充分水洗。再用堿性美蘭染色液復(fù)染約1分鐘,水洗。最后吸干,鏡檢??顾嵝约?xì)菌呈紅色,非抗酸性細(xì)菌呈藍(lán)色。2、又法之一:滴加石炭酸復(fù)紅液于抹片(在已干燥固定過的)上染1分鐘,水洗;再用1%美藍(lán)酒精溶液復(fù)染20秒,水洗,干燥,鏡檢??顾峋t色。鏡檢前對光檢查染色片,標(biāo)本片務(wù)必全呈藍(lán)色,如標(biāo)本片呈現(xiàn)紅色或棕色,表示復(fù)染不足,應(yīng)在作復(fù)染510秒,再觀察,如仍未全呈藍(lán)色時(shí),仍可反復(fù)復(fù)染,至符合要求為止。四、瑞特氏染色法1、抹片自然干燥后,滴加瑞特氏染色液于其上,為了避免很快變干,染
3、色液可多加些,或者看情況補(bǔ)充滴加;經(jīng)13分鐘,再加約與染液等量的中性蒸餾水或緩沖液,輕輕晃動(dòng)玻片,使與染液混勻,經(jīng)5分鐘左右,直接用水沖洗(不可先將染液傾去),吸干或烘干,鏡檢。細(xì)菌染成藍(lán)色,組織、細(xì)胞等物呈其他顏色。2、另一染色法:抹片自然干燥后,按涂抹點(diǎn)大小,蓋上一塊略大的清潔濾紙片,在其上輕輕滴加染色液,至略浸過濾紙,并看情況補(bǔ)滴,維持不使變干;染色35分鐘,直接以水沖洗,吸干或烘干,鏡檢。此法的染色液經(jīng)濾紙濾過,可大大避免沉渣粘附抹片上而影響鏡檢觀察。五、姬母薩氏染色法1、于5毫升新煮過的中性蒸餾水中滴加510滴姬母薩氏染色液原液,即稀釋成為常用的姬母薩氏染色液。2、抹片經(jīng)甲醇固定并干燥后,在其上滴加足量染色液或?qū)⒛ㄆ胧⒂腥旧旱娜旧字?,染?0分鐘,或者染色數(shù)小時(shí)至24小時(shí),取出水洗,吸干或烘干,鏡檢。細(xì)菌呈藍(lán)青色,組織、細(xì)胞等呈其他顏色,視野常呈紅色。注:在進(jìn)行各種染色時(shí)都應(yīng)注意,當(dāng)抹片滴上染
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