1、Word文檔 巨噬細胞應該如何培養(yǎng)呢？ 一篇文章幫您解決培育巨噬細胞全部的苦惱 細胞 介紹單核吞噬細胞系統(tǒng)。單核細胞發(fā)生于骨髓的多能干細胞，循環(huán)于血液中，穿透血管內皮進入組織內，轉變?yōu)榫奘杉毎?。單核吞噬細胞系統(tǒng)在體內分布廣，細胞數(shù)量多，主要分布于疏松結締組織、肝、脾、淋巴結、骨髓、腦、肺以及腹膜等處，并依其所在組織的不同而有不同的名稱。 單核吞噬細胞系統(tǒng)的細胞有很強的吞噬力量，能吞噬異物、細菌、年輕和突變的細胞等。此外，也吞噬抗原抗體復合物，并參加脂質與膽固醇代謝，可吞噬和蓄積脂質。吞噬的生理意義在于消退體內不需要的物質，其中巨噬細胞與淋巴細胞、粒細胞、肥大細胞，在功能上，有相互促進和相互抑制

2、的作用。當單核吞噬細胞系的生理功能失調時，可引起多種疾病。 因此，巨噬細胞常被用來做相關討論。RAW 264.7細胞源自Abelson鼠科白血病病毒誘導的腫瘤；在正常培育中，細胞會消失多邊形和不規(guī)章外形，并伴有很多偽足的生成，細胞貼壁力量強。RAW 264.7細胞屬免疫細胞，有多種功能，是討論細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。 名 稱RAW 264.7（小鼠單核巨噬細胞白血病細胞）形 態(tài)不規(guī)章形生長特性貼壁；細胞生長速度快，2-3天即可傳一代養(yǎng)分體系DMEM+10%FBS 正常細胞形態(tài)：特別細胞形態(tài)：特點： RAW264.7細胞極其簡單消失偽足（長角）。需要準時觀看細胞，若消失偽足則提

3、示該傳代了（可能是一天一傳）。 當消失少量的偽足可正常傳代，有少數(shù)分化的細胞是正常的，很難保證可以完全不分化。 分化的細胞：呈多角形，明顯的體積變大，時常有較長的觸角。 培育的苦惱與解決：1胰酶消化刺激RAW 264.7細胞嚴峻分化解決方法：刮取是比較合適的方法。把細胞培育液倒掉，加入37預溫的PBS，然后刮細胞，食指和拇指夾緊細胞刮，細胞刮橡膠頭刮面切面與平皿平行，用腕力輕輕刮（留意用腕力刮，不要用臂力），切記只能刮一次，不要來回刮和反復刮，吹打的力度肯定要輕，切勿暴力吹打。2血清批間差刺激RAW 264.7細胞嚴峻聚團緣由推斷：血清來源于動物，其組成成分有1000種左右，且血清組成及含量常

4、隨供血動物的年齡、生理條件和養(yǎng)分條件而異。每個批號的組分百分比含量都是不固定的，所以批間差異是存在的。RAW 264.7細胞本身有聚團生長特性，但嚴峻聚團可能受到血清里的某些因子刺激。 解決方法：先用血清試用裝，試用效果好，可購買和血清試用裝批次相同的正裝，囤積半年或一年的用量，有效避開批間差對細胞的影響（胎牛血清在-20保存可達5年）。 3有分化的細胞說明細胞狀態(tài)不好嗎？ 解決方法：推舉傳代比例為1:3-1:6；推舉傳代時間：2-3天；推舉傳代融合率：80%-90%。 以下為培育不錯的RAW 264.7細胞形態(tài)生長良好的RAW264.7 胞體邊界感清楚，各個喂得圓鼓鼓、胖嘟嘟的，時刻預備著為

5、人類生命科學討論而“獻身”。聽說熱滅活的血清適合培育巨噬細胞？最終為大家普及一條學問 熱滅活可以滅活補體系統(tǒng)。啟動的補體參加溶解細胞大事，刺激平滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺，啟動淋巴細胞和巨噬細胞活化。在免疫學討論中，培育ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時，推舉使用熱滅活血清。 熱滅活時請將血清置于 56水浴30分鐘。最好另加一個盛放與血清等體積水的燒杯并將溫度計插入水中，以水中溫度56為計時開頭時間，加熱過程中不時輕輕旋轉混勻血清。 試驗顯示，對大多數(shù)的細胞而言，不需要使用熱滅活血清。經(jīng)此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進或完全沒有作用，造成細胞生長速率降低。同時沉淀物會顯著地增多，這些沉淀物