1、方法名稱水質(zhì)總大腸菌群和糞大腸菌群的測定 （紙片快速法）申請人項目負責人員制定原因驗證檢測方法符合實驗室要求、確保數(shù)據(jù)準確性與有效性方法適用范圍適用于地表水、地下水及廢水中的總大腸菌群和糞大腸菌群的快速測定。方法來源HJ 755-2015水質(zhì)總大腸菌群和糞大腸菌群的測定紙片快速法儀器、試劑和環(huán) 境的要求儀器和設(shè)備1.1高壓蒸汽火菌器1.2培養(yǎng)箱1.3冰箱1.4采樣瓶1.5試管1.6水質(zhì)總大腸菌群和糞大腸菌群測試紙片試劑：2.1硫代硫酸鈉2.2乙二胺四乙酸二鈉采樣和測試過程中，所用到的玻璃器皿需滅菌后方可使用。方法描述按MPN法，將 定量的水樣以無菌操作的方式接種到吸附有適量指示劑（漠 甲酚紫和

2、2,3,5-氯化二苯四氮唑即TTC）以及乳糖等營養(yǎng)成分的無菌濾紙 上，在特定的溫度（37C或44.5C ）培養(yǎng)24h，當細菌生長繁殖時，產(chǎn)酸使 pH值降低，漠甲酚紫指示劑由紫色變黃色，同時，產(chǎn)氣過程相當?shù)拿摎涿?在適宜的pH范圍內(nèi)，催化底物脫氫還原TTC形成紅色的不溶性二苯甲（TTF）。 即可在產(chǎn)酸后的黃色背景下顯示出紅色斑點（或紅暈）。通過上述指示劑的 顏色變化就可對是否產(chǎn)酸產(chǎn)氣作出判斷，從而確定是否有總大腸菌群或糞 大腸菌群存在，再通過查MPN表就可得出相應(yīng)總大腸菌群或糞大腸菌群的濃 度值。檢測結(jié)果的判斷結(jié)果判讀：（1）制片上出現(xiàn)紅斑或紅暈且周圍變黃，為陽性。（2）紙片全片變黃，無紅斑或紅

3、暈，為陽性。（3）紙片部分變黃，無紅斑或紅暈，為陰性。（4）紙片的紫色背景上出現(xiàn)紅斑或紅暈，而周圍不變黃，為陰性。（5）紙片無變化，為陰性。結(jié)果計算：根據(jù)不同接種量的陽性紙片數(shù)量，查MPN表得到MPN值，按公式換算并報告1L水樣中總大腸菌群或糞大腸菌群數(shù)：C=100*M/Q式中：C一水樣總大腸菌群或糞大腸菌群濃度（MPN/L）M查 MPN 表得到的 MPN 值（MPN/100ml）Q一實際水樣最大接種量（ml）100為10*10ml，其中，10將MPN值的單位MPN/100ml轉(zhuǎn)換為MPN/L，10ml 為MPN表中最大接種量。結(jié)果表示：測定結(jié)果保留一位有效數(shù)字，大于等于100時以科學計數(shù)法表

4、示，結(jié)果的單 位為MPN/L。平均值以幾何平均計算。附件說明表1運行說明經(jīng)驗證該方法符合我實驗室使用。審批意見技術(shù)經(jīng)理：日 期：總經(jīng)理：日期：表1甲錄日桃料性Pfd暴）鼠大可能散（IMPN）表（水樺摧神量為5忻10ml. 5份ImL 5 ffr 0.1 ml）凸住利蜀陽性出就MPNIOOml95%宣傳眼春接件盆陽性階數(shù)MPNdOOml1.0mlLmJ0. Iml下昵上歸10mlImCM ml下跟上用1002300SI1900120.57301350Q540.57302IS3310035303160047304200Q5930523010十0.5T310112250114131114434015

5、60.51531217546037313206600149314230151.1.215n020403l320443402161532117546022732加66(10239323240y41.1.3242702512325310M060.51533017546031Y33,1217630s2933240M311333280341333432035533536040834021763041934,124fi720421.1.34業(yè)043334332冉接種貴招性粉缺FN/IOamlgw*置倍以香橙而景陽性粉散MPN!IOQml州咒置與隍1 DjnlImlOJnil下限上笠10mlImlDJin

6、l.下限A0441?3443療04517345如050935025S7?051LI35129052I J5232053153533705417J54410551935545002o.s740013n J310140.51140175460260.S1540221763038119403258750410404300512405361040.511410：75461160.5154I12176312fi119412269網(wǎng)13104I3311412414361514415422060.51542022721&11942269登2210234223211912W12423S2415424442517425503011943027gSO31W2234333ii9332124323。13110331543345341743452351943559再接蘇鬲習性曲數(shù)MPN-100ml置信猊每接志盆田性份段MPXdOOml10J1ILmlOJni下限上限10mlUmLOJml-限上限40H2254403412於4:1j44J40141J042154