1、時(shí)間分辨熒光免疫分析法（Time-resolved fluoroimmunoassay）是在熒光分析的基礎(chǔ)上發(fā)展起 來(lái)的一種特殊的熒光分析。它利用具有長(zhǎng)效熒光的稀土金屬（Eu、Tb、Sm、Dy）作標(biāo)記物， 充分利用激發(fā)光與發(fā)射光之間的降移與發(fā)射光較長(zhǎng)的半壽期，在激發(fā)光后延時(shí)測(cè)量發(fā)射光的 強(qiáng)度。從而所測(cè)的熒光不受激發(fā)光和被檢物中的非特異熒光干擾，提高了檢測(cè)的特異性與靈 敏度。在激發(fā)光后延時(shí)400微秒，測(cè)量400微秒，間歇200微秒后進(jìn)入下一個(gè)測(cè)量周期， 每一個(gè)周期為1000微秒。對(duì)每一個(gè)樣品實(shí)施1秒鐘的測(cè)量，意味著完成了 1000個(gè)周期的 測(cè)量，測(cè)量精確度極高。（一）Auto DELFIA自動(dòng)時(shí)

2、間分辨熒光免疫分析儀開(kāi)/關(guān)程序1開(kāi)機(jī)1.1依次打開(kāi)樣品處理器電源，微孔板處理器電源，打印機(jī)電源。1.2打開(kāi)計(jì)算機(jī)顯示器。1.3啟動(dòng)計(jì)算機(jī)。1.4運(yùn)行系統(tǒng)軟件：Auto DELFIA與Multicalc系統(tǒng)軟件在Windows啟動(dòng)后自動(dòng)運(yùn)行。Auto DELFIA workstation軟件用于控制Auto DELFIA的運(yùn)行，MultiCalc的主要功能是與主機(jī)通訊， 對(duì)測(cè)試結(jié)果進(jìn)行評(píng)估和對(duì)質(zhì)控及其他數(shù)據(jù)處理（可通過(guò)雙擊屏幕上圖標(biāo)不運(yùn)行）。在MultiCalc Auto DELFIA環(huán)境下，只有鍵盤(pán)有效，鼠標(biāo)無(wú)效。2開(kāi)機(jī)后準(zhǔn)備1.1清洗液準(zhǔn)備1.1.1微孔板處理器洗液（250ml濃縮液+ 60

3、0ml去離子水混合），每做一塊板至少1升用量， 洗液在密閉條件可保存2周時(shí)間。1.1.2準(zhǔn)備樣品處理器洗液（50ml濃縮液+ 5000ml去離子水混合），每做一塊板至少需要 800ml洗液，洗液在密閉條件下可保存1周時(shí)間。1.2 樣品處理器準(zhǔn)備1.2.1在Wash bottle （清洗液瓶）、Rinse bottle （沖洗液瓶）分別注入足夠用量的清洗液和去離 子水，倒空廢液瓶。擰緊各瓶蓋，確保廢液瓶管路向下。1.2.2如樣品需要稀釋，放入稀釋杯和稀釋液。系統(tǒng)安裝時(shí)已調(diào)好有71ml和190ml兩種規(guī) 格的稀釋杯，若使用71ml的稀釋杯，從最右端開(kāi)始放置，如有預(yù)處理樣品，則不能使用190ml 的

4、稀釋杯。不能使用多個(gè)稀釋杯。1.3 微孔板處理器準(zhǔn)備。1.4 點(diǎn)擊 Load 菜單下的 Load System Liquids 選項(xiàng) Option-Show Tempareture 顯示溫度和壓力。 當(dāng)管路內(nèi)有壓力時(shí)，不要打開(kāi)瓶蓋。1.5點(diǎn)擊Maintenance f Plate Processor f Washer test，檢查洗板機(jī)功能，系統(tǒng)自動(dòng)提示 檢查步驟。1.6在試劑艙內(nèi)插入足量干凈、不彎曲的吸嘴。1.7裝載足量干凈的稀釋杯，每一稀釋杯分為兩半，可做兩次稀釋，總共有24個(gè)稀釋位。1.8檢查檢測(cè)帽（白色）是否放入試劑艙最左邊第一個(gè)帽架位置，并且其他位置沒(méi)有黑色防 蒸發(fā)帽。1.9確認(rèn)傳

5、送器下方的廢物盤(pán)已倒空。1.10檢查兩瓶增強(qiáng)液是否足夠（一瓶可做8塊板），通常先換右邊的瓶子，但如左邊瓶?jī)?nèi)溶 液少于以，則兩瓶均須更換。增強(qiáng)液瓶?jī)?nèi)有壓力，必須擰緊蓋子。必要時(shí)使用Maintenance 菜單下的Enhancement solution flush命令灌注管路。1.11校準(zhǔn)品：每瓶hAFP和8 hCG校準(zhǔn)品瓶中精確加1.1ml去離子水，輕輕混勻，30min后 去除泡沫使用。需再次使用的校準(zhǔn)品保存于-20C。1.12 Eu/Sm標(biāo)記物溶液：在使用前1h，根據(jù)每條板條（12孔）需30p l標(biāo)記物和30ml緩液 配制標(biāo)記物溶液。3關(guān)機(jī)3.1關(guān)閉微孔板處理器電源。3.2用探針支架支撐探針

6、架防止損壞，關(guān)閉樣品處理器電源。3.3退出Auto DELFIA系統(tǒng)軟件，退出MultiCalc軟件。退出Windows。3.4關(guān)閉電腦電源。（二）Auto DELFIA自動(dòng)時(shí)間分辨熒光免疫分析儀 分析參數(shù)設(shè)置程序1檢驗(yàn)項(xiàng)目設(shè)置1.1在操作主界面點(diǎn)擊Settings菜單f 選擇Assay Protocols （檢驗(yàn)項(xiàng)目）。1.2根據(jù)需要選擇校準(zhǔn)曲線、樣品復(fù)管數(shù)、批號(hào)和質(zhì)控。使用新批號(hào)試劑時(shí)，則更新批號(hào)。 如果選擇了參考曲線，批號(hào)改變后系統(tǒng)自動(dòng)提示需做一條新的曲線。1.3若欲將結(jié)果存到LIS系統(tǒng)中，確認(rèn)在MultiCalc中Protocol的Stored Files里選擇Results， 并選擇

7、Resulte格式。1.4如果要做雙標(biāo)，須先做溢出糾正因子校正（詳見(jiàn)維護(hù)保養(yǎng)部分）。1.5如果做新生兒篩查，在Settings菜單系統(tǒng)子菜單下選擇新生兒篩查。編輯檢驗(yàn)項(xiàng)目、校準(zhǔn)和質(zhì)控。在主界面鼠標(biāo)點(diǎn)擊 Settings 菜單，選擇 Assay protocols f 如 Screening f AFP-BHCG f Edit。進(jìn)入Assay protocol editor對(duì)話框。輸入相應(yīng)的批號(hào)，根據(jù)試劑說(shuō)明書(shū)上標(biāo)注輸入正確的 校準(zhǔn)品濃度值。（三）Auto DELFIA自動(dòng)時(shí)間分辨熒光免疫分析儀 校準(zhǔn)程序。1.1選擇校準(zhǔn)模式：有7種不同的選擇，在屏幕左邊從上到下依次是每一測(cè)試塊均做標(biāo)準(zhǔn) 曲線；第

8、一塊測(cè)試板做標(biāo)準(zhǔn)曲線，其余的做兩點(diǎn)校正；第一塊測(cè)試板做標(biāo)準(zhǔn)曲線，其余 不做校正和校準(zhǔn)；每一測(cè)試板均做兩點(diǎn)校正；第一塊測(cè)試板做兩點(diǎn)校正，其余不做校正 和校準(zhǔn)；不做校正和校準(zhǔn)，使用上一次標(biāo)準(zhǔn)曲線；不做校正和校準(zhǔn)，使用MultiCalc中 設(shè)定的參考曲線。1.2如果還有其他需要，可更改校準(zhǔn)品數(shù)目。例如要求第一塊板做標(biāo)準(zhǔn)曲線，其余的做3點(diǎn) 校正，則選擇第二項(xiàng)，然后在“Next Plates”下選擇相應(yīng)的3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)即可。1.3如果做雙標(biāo)（Dual Label Assay ），例如AFP0 hcg，則無(wú)法更改校準(zhǔn)品的數(shù)目，只能修 改濃度值。雙標(biāo)有A-Protocol和B-Protocol兩種協(xié)議，要更改B-

9、protocol的濃度值，點(diǎn)擊屏 幕右下角的B-protocol鍵。彈出新對(duì)話框，可修改校準(zhǔn)品和質(zhì)控濃度值，然后按OK保存 退出。返回到Assay Protocol Editor對(duì)話框。1.4復(fù)管數(shù)：在屏幕右下方點(diǎn)擊Replicates，輸入校準(zhǔn)品、質(zhì)控品及待檢標(biāo)本的復(fù)管數(shù)，按OK保存，返回Assay Protocol Editor對(duì)話框。1.5在Assay Protocol Editor對(duì)話框輸入校準(zhǔn)品批號(hào)，輸入正確的校準(zhǔn)品濃度值。1.6進(jìn)入Map Of Standards對(duì)話框，拉出校準(zhǔn)品抽屜，按屏幕提示順序依次放入校準(zhǔn)品，放 好后合上校準(zhǔn)品抽屜，按OK。使用后，校準(zhǔn)品立即放置于4C冰箱內(nèi)

10、保存。校準(zhǔn)品打開(kāi)后最多使用二次。在標(biāo)準(zhǔn)抽屜內(nèi)一 次最多可放8個(gè)項(xiàng)目的校準(zhǔn)品。1.6運(yùn)行（四）Auto DELFIA自動(dòng)時(shí)間分辨熒光免疫分析儀 室內(nèi)質(zhì)控程序1.1點(diǎn)擊屏幕右邊Controls進(jìn)入Controls界面，輸入質(zhì)控的允許范圍（目標(biāo)值土 2S）、質(zhì)控 代碼、質(zhì)控批號(hào)，必要時(shí)在Dil中輸入質(zhì)控稀釋倍數(shù)。1.2在屏幕左邊Controls欄選擇質(zhì)控做在第一塊板或下一塊板或最后一塊板。在屏幕下部的 測(cè)試板圖上已顯示有校準(zhǔn)品。在屏幕右邊Control Operation欄中選擇所用的質(zhì)控水平（Low、 Medium、High、Control 45）,然后移動(dòng)光標(biāo)到板上所要放置的位置。1.3必要時(shí)選

11、中Move Controk Delete control對(duì)質(zhì)控進(jìn)行移動(dòng)和刪除操作。1.4然后按OK鍵完成編輯，按Close鍵保存。1.5運(yùn)行、一人一三、運(yùn)仃1工作前準(zhǔn)備（二）創(chuàng)建工作表在以上準(zhǔn)備工作完成后，有兩種方法檢測(cè)。即點(diǎn)擊AutoMate （自動(dòng)操作）鍵，系統(tǒng)會(huì)按預(yù) 定的程序執(zhí)行。或選擇Load Worklist或Create list 一步一步運(yùn)行。在Auto DELFIA軟件中創(chuàng) 建工作表，還可在已存在的工作表中添加樣品：用鼠標(biāo)點(diǎn)擊空位置，然后輸入所須的項(xiàng)目即 可。（如果試管已經(jīng)放入樣品處理器中，則不能添加項(xiàng)目）。2. 1編輯試管架圖在主屏點(diǎn)擊Create list圖出現(xiàn)Analyt

12、es & samples和Sample Racks兩個(gè)對(duì)話框。進(jìn)入Sample Racks （樣品架圖），點(diǎn)擊想添加樣品的位置，會(huì)出現(xiàn)一紅方框。注意要確 保選擇的位置與試管架上樣品的實(shí)際位置對(duì)應(yīng)。通過(guò)對(duì)話框下方的按鍵可實(shí)現(xiàn)以下功能：點(diǎn)擊Plate Map看微孔板圖。選擇一試管，然后點(diǎn)擊Del Tube刪除該管檢測(cè)。 Print打印樣品信息。在屏幕試管架圖最后一排編號(hào)為73的單獨(dú)試管架，是質(zhì)控架，如已在檢驗(yàn)項(xiàng)目中設(shè)置了 質(zhì)控品，則自動(dòng)顯示在質(zhì)控架上。2. 2移動(dòng)試管架在想插入試管架的編號(hào)區(qū)輸入希望的試管架編號(hào)，則該位置上插入了你輸入編號(hào)的試管 架，其余試管架相應(yīng)后移。如不使用1號(hào)試管架，則必須移

13、動(dòng)試管架或?qū)⒃嚬苤苯泳幹频竭m當(dāng)?shù)脑嚬芗苌稀?. 3移動(dòng)質(zhì)控架如要把質(zhì)控放到其他試管架，在當(dāng)前質(zhì)控架73編號(hào)區(qū)輸入想放質(zhì)控的編號(hào)。如把73號(hào)改成 40號(hào)，則40架號(hào)成為質(zhì)控架而原質(zhì)控架73號(hào)變成普通的樣品架73。3. 2. 4移動(dòng)試管用鼠標(biāo)點(diǎn)住想移動(dòng)的試管，將其拖到需要放的位置，然后釋放鼠標(biāo)。在試管架圖左下角顯示出鼠標(biāo)位置、試管數(shù)和稀釋液位置（從右到左排列）。完成試管架安 排后，點(diǎn)擊Close，關(guān)閉Sample Racks對(duì)話框。3. 2. 5項(xiàng)目和樣品在Analytes & samples對(duì)話框中，在Analytes欄中選擇檢驗(yàn)?zāi)康脑谄聊挥疫叺南吕藛沃羞x擇測(cè)試項(xiàng)目。Screening的下拉菜

14、單中只顯示已校準(zhǔn)的測(cè)試 項(xiàng)目。選擇合適的試劑盒（1板或4板）及程序（不同溫育時(shí)間）。選擇合適的運(yùn)行序號(hào)，按OK。進(jìn)入Sample對(duì)話框。l在設(shè)置菜單中選擇了新生兒篩查后，才能按需要間歇振蕩篩查項(xiàng)目。l如果在系統(tǒng)設(shè)定中選擇了下一管，則需要預(yù)處理的實(shí)驗(yàn)將不顯示。在Sample對(duì)話框的Code區(qū)輸入相應(yīng)的樣本ID號(hào)，連續(xù)樣本以2個(gè)點(diǎn)（.）連接起始ID 號(hào)與未尾ID號(hào)，即xx.xxx。點(diǎn)擊Accept或按ENTER鍵。在樣本類型欄中選擇合適的試管，否則吸樣探針會(huì)吸錯(cuò)位。確認(rèn)前可在項(xiàng)目列表中雙擊項(xiàng)目名稱以刪除測(cè)試；如果已按Accept鍵，可在微孔板圖中 刪除管。已經(jīng)確認(rèn)后也能增加測(cè)試樣本。包括使用微管稀

15、釋樣品添加測(cè)試項(xiàng)目，但系統(tǒng)設(shè)定中選 擇下一管或下一架，則不能添加。注意不能更改已確認(rèn)樣品的稀釋狀態(tài)。確認(rèn)后，樣品架圖上選中的試管位顏色發(fā)生改變，綠色為樣品、淺蘭色為用來(lái)稀釋樣本 的空管或經(jīng)稀釋的質(zhì)控或經(jīng)預(yù)處理的標(biāo)準(zhǔn)、紅色為質(zhì)控。必要時(shí)，在Sample對(duì)話框的Factor欄中輸入稀釋倍數(shù)（5-100），按Accept鍵。在試管 架上會(huì)顯示出稀釋管的位置。所有稀釋管標(biāo)本設(shè)定好后，按Accept鍵。注：定義稀釋管時(shí)試管類型仍然為樣品管，按確定鍵后，會(huì)自動(dòng)變?yōu)橄♂尮?。如果樣品處?器類型為1297-014，必須在稀釋管槽內(nèi)從右到左依次放入稀釋微管。在稀釋杯內(nèi)加入適當(dāng) 稀釋液。預(yù)稀釋倍數(shù)：在此Pre-d

16、ilution中輸入樣品加樣前的預(yù)稀釋倍數(shù)，以便MultiCalc能計(jì)算 出正確的結(jié)果。原始標(biāo)本：選擇Use primary，則系統(tǒng)會(huì)吸取等量的稀釋樣品和原樣品。否則只吸取稀 釋樣品。該功能只是對(duì)選中的項(xiàng)目有效。復(fù)管數(shù)：如希望樣品復(fù)管數(shù)不同與檢驗(yàn)項(xiàng)目中設(shè)定的復(fù)管數(shù)，在# Repl欄中輸入需要 的復(fù)管數(shù)。該功能只是對(duì)選中的項(xiàng)目有效。增加管：Add tubes顯示除樣品外的其他和該待測(cè)樣品有關(guān)的試管數(shù)，如稀釋管、微管 等。條形碼：選中Barcode，則以條形碼來(lái)識(shí)別試管。2. 6微孔板圖：點(diǎn)擊樣品架圖下方Plate Map按鍵，顯示測(cè)試項(xiàng)目的微孔板圖。圖中黃色為校準(zhǔn)品，紅 色為質(zhì)控，綠色為樣品，淺

17、蘭色為稀釋液，紫色為稀釋質(zhì)控，深蘭色為手動(dòng)樣品，灰色為空 管。在微孔板圖左下方顯示實(shí)驗(yàn)板總數(shù)、當(dāng)前第幾塊板和在浮育器中的位置、試劑盒的總數(shù) 及位置。按Prev和Next，顯示前一板和下一塊板狀態(tài)。按Delete test、Delete Plate和Delete Well分別可刪除當(dāng)前測(cè)試項(xiàng)目、刪除當(dāng)前測(cè)試 中的最后一塊微孔板、刪除選定的微孔，同時(shí)與之相應(yīng)的試管也被刪除按Pack Plates，整理刪除后的微孔板。按Rack map鍵，系統(tǒng)提示裝載微孔板，然后直接進(jìn)行測(cè)量。3. 2. 7結(jié)束創(chuàng)建工作表工作表創(chuàng)建完成后，按儀器上的Load按扭裝載樣品，然后鼠標(biāo)點(diǎn)擊屏幕上的Close，結(jié) 束創(chuàng)建工作

18、表，此時(shí)系統(tǒng)會(huì)顯示出校準(zhǔn)品圖，裝載校準(zhǔn)品。（五）Auto DELFIA自動(dòng)時(shí)間分辨熒光免疫分析儀試劑/材料裝載程序1樣品管/架裝載1.1鎖定加樣臂：在裝載試管架之前，按Lock鍵鎖定加樣臂，裝載完畢后按Lock釋放加樣 臂。1.2將有紅色數(shù)字標(biāo)記的質(zhì)控試管架和樣品架依次放到裝載位置，質(zhì)控架在最前面，從樣本 運(yùn)送器最右邊的起始端開(kāi)始裝載試管架，將試管架有條形碼端向外。關(guān)上進(jìn)樣倉(cāng)蓋子，按 Load 鍵。1.3待質(zhì)控架檢測(cè)完成后自動(dòng)退出，放于樣本處理器中央的特定位置，關(guān)上蓋后按Load鍵， 儀器自動(dòng)裝載樣品架。1.4如在系統(tǒng)設(shè)置中選擇了稀釋微管，根據(jù)系統(tǒng)提示所需的稀釋微管量，從右向左裝載稀釋 微管。

19、1.5裝載完畢，按Close鍵如果樣品量非常少，可以手動(dòng)加樣（在Analytes & samples的Tube type列表中Man. Pipetted 或在Worklist的comment區(qū)域中輸入M。待儀器對(duì)其他孔完成吸樣后，系統(tǒng)提示手工加 樣到呈深蘭色的空孔，操作者拿出板加樣，要求每孔加樣時(shí)間不超過(guò)2分10秒，在屏幕上 顯示倒計(jì)時(shí)，完成手工加樣后，按IN/OUT按鈕，或按OK以確認(rèn)已手工吸樣。否則，到時(shí) 間后板被自動(dòng)運(yùn)送到下一步操作區(qū)，并報(bào)警為未手工加樣）。9.點(diǎn)擊主屏上的Schedule按鈕，在屏幕上顯示檢測(cè)項(xiàng)目的最佳順序和時(shí)間進(jìn)程。不同的顏 色代表不同的功能。黃色表示測(cè)試板的加樣時(shí)間

20、、深蘭色表示孵育時(shí)間、淺蘭色表示稀釋時(shí) 間或預(yù)處理時(shí)間、紅色表示清洗、加液等時(shí)間。在Priority欄下，對(duì)不同的項(xiàng)目設(shè)置不同的 優(yōu)先級(jí)，從而再制時(shí)間表。2 微孔板裝載鼠標(biāo)點(diǎn)擊Load plate圖標(biāo)，樣品處理器加樣臂自動(dòng)移到左邊以方便操作。這時(shí)屏幕出現(xiàn) 裝板信息。在每行前面的紅箭頭表示正在裝載的微孔板。由于系統(tǒng)的洗板機(jī)每次清洗兩條板孔，如測(cè)試板條為奇數(shù)，則用清潔的空板補(bǔ)足成偶數(shù) 板條。 檢查每個(gè)板孔是否潮濕，可用干凈軟紙擦干。否則會(huì)造成板條感應(yīng)出錯(cuò)，和測(cè)量熒光時(shí) 計(jì)數(shù)錯(cuò)誤。待微孔板支架到位后，依列表順序?qū)⒌谝粔K微孔板放到支架內(nèi)，微孔板的條形碼向右（A 板條在右邊），然后按IN/OUT鍵，系統(tǒng)

21、自動(dòng)將微孔板送進(jìn)溫育器內(nèi)。如有第二塊板，系統(tǒng) 讀取完板的批號(hào)后，微孔板支架返回裝載位置繼續(xù)裝載，直到所有微孔板裝載完畢。如板上條碼讀不出，則顯示錯(cuò)誤信號(hào)。如板放錯(cuò)位，點(diǎn)擊Retry后取出板，以正確方法 重新放入支架中，如果是條碼的問(wèn)題，則點(diǎn)擊Ignore并輸入板的批號(hào)，不必輸板的系列號(hào)。在裝載板時(shí)，系統(tǒng)檢查每一次板的支架在孵育器中的位置，如有問(wèn)題，則該板就不能被 裝入，并需要重新運(yùn)行系統(tǒng)，啟動(dòng)程序會(huì)把支架重新帶入孵育器中。3試劑裝載點(diǎn)擊Load reagents圖標(biāo)，顯示需要裝載的試劑及相應(yīng)的信息，每行前面的紅箭頭表示 正在被條碼機(jī)讀取的試劑盒。根據(jù)提示檢查相應(yīng)的信息。在試劑杯（cassett

22、es）右邊帖上條形碼，條形碼上的批號(hào)要與試劑盒上的一致。在條形碼上 還標(biāo)有微孔板的編號(hào)，用來(lái)定義相應(yīng)的微孔板。根據(jù)屏幕列表所示，在試劑架上從左到右依次放置已開(kāi)蓋的所需試劑，在示蹤劑和抗體 瓶上放黑色的防揮發(fā)帽。示蹤劑的位置標(biāo)記在試劑杯的底部。試劑杯有四種類型，適用于不 同的試劑。放好所有試劑后，按OK鍵，條形碼開(kāi)始讀取試劑條碼，完成后提示裝載微孔板。（二）Auto DELFIA自動(dòng)時(shí)間分辨熒光免疫分析儀 開(kāi)始運(yùn)行點(diǎn)擊Start run圖標(biāo)，開(kāi)始自動(dòng)運(yùn)行，顯示試劑架各試劑和消耗品的情況。按照?qǐng)D中的位置檢查試劑位置、吸嘴、稀釋杯及板條量是否正確，點(diǎn)擊OK。屏幕上顯示微孔板處理器和樣品處理器的液體量

23、。檢查是否達(dá)到屏幕所示的最低限度液 體量。注：殘留量：樣品處理器：清洗瓶為-2.5L ；去離子水瓶為-1.5L稀釋液瓶為-6mL。微孔板處理器：清洗液瓶和去離子水瓶均為-1.5L；左邊增強(qiáng)液瓶不少于13瓶。檢查完畢后按OK，系統(tǒng)開(kāi)始自檢準(zhǔn)備運(yùn)行。確認(rèn)吸嘴、稀釋杯、防蒸發(fā)帽是否已經(jīng) 放好，各瓶液量足夠、廢液瓶有足夠的空間等。自檢無(wú)誤后，屏幕顯示出測(cè)量時(shí)間表并開(kāi)始 運(yùn)行。運(yùn)行進(jìn)程屏幕出現(xiàn)測(cè)量進(jìn)程圖，實(shí)時(shí)顯示當(dāng)前運(yùn)行的狀態(tài)及時(shí)間。如果運(yùn)行過(guò)程中由于某種原因進(jìn)程 被終止，會(huì)在進(jìn)程圖上顯示一紅叉，可在歷史記錄中查閱有關(guān)信息。注意：出現(xiàn)問(wèn)題后，下 次運(yùn)行之前請(qǐng)重新啟動(dòng)系統(tǒng)。（七）運(yùn)行結(jié)束運(yùn)行結(jié)束后，測(cè)出的

24、計(jì)數(shù)值被保存在計(jì)數(shù)文件中，計(jì)數(shù)值由MultiCalc計(jì)算后打印出。確保 MultiCalc處在計(jì)數(shù)狀態(tài)以保證結(jié)果會(huì)自動(dòng)輸出。（八）卸載 運(yùn)行結(jié)束后鼠標(biāo)點(diǎn)擊Unload圖標(biāo)，選擇卸載樣品/卸載微孔板，點(diǎn)擊OK鍵，按提示卸載 完成后鼠標(biāo)點(diǎn)擊取消鍵。（九）查看加樣圖加樣圖是一 8X12的矩陣圖，對(duì)應(yīng)微孔板的每一孔。在每一孔內(nèi)有如下信息：序列號(hào)、探針 號(hào)、試管或校準(zhǔn)品、計(jì)數(shù)值和錯(cuò)誤信息。其中：探針號(hào)：第幾根探針進(jìn)行加樣。試管或校準(zhǔn)品：所加樣品為血清或校準(zhǔn)品。其中R代表試管，S代表校準(zhǔn)品，D代表稀釋微 管，P代表位置。例如：R2P3代表試管架2的第3個(gè)試管。計(jì)數(shù)值：實(shí)際測(cè)量出的計(jì)數(shù)值。錯(cuò)誤信息：L-液體

25、量過(guò)少（蘭色代表稀釋液過(guò)少，綠色代表預(yù)處理故障）；E-空試管或校準(zhǔn)品 瓶；C-加樣探針堵塞；F-液體表面有氣泡；W-交叉污染警告。鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊每一孔，可看每一孔的詳細(xì)信息。四、結(jié)果測(cè)試結(jié)果保存到C:wiacalcoauxAfp-bhcg.a文件中，將該文件拷貝到f:中。（二）Auto DELFIA自動(dòng)時(shí)間分辨熒光免疫分析儀 維護(hù)保養(yǎng)程序（一）該軟件提供了維護(hù)計(jì)劃表。每次維護(hù)都會(huì)被記入數(shù)據(jù)庫(kù)存檔。在主屏點(diǎn)擊 Maintenance圖標(biāo)的History，輸入用戶名OK進(jìn)入Maintenance History窗口，顯示當(dāng)前儀器保養(yǎng)情況和下次保養(yǎng)時(shí)間。在 Maintenance History 窗口

26、，點(diǎn)擊 Settings 鍵 出現(xiàn) Maintenance Settings 窗口，激活需 做保養(yǎng)檢查盒，在Reporting框中可選擇off或overdues或All OK2.在Maintenance History窗口點(diǎn)擊Register鍵，選擇所需的保養(yǎng)方式OK接受。（二）每日保養(yǎng)5. 2.1 Washer test洗板機(jī)功能測(cè)試點(diǎn)擊 Maintenance /Plate processor 進(jìn)入 Plate washer 界面 OK把一塊96孔空的微孔板平穩(wěn)地放于微孔板的支架上，按IN/POUT按鈕。板被送入儀器內(nèi)，系統(tǒng)檢查板條數(shù)并灌滿洗液后返回到載板位。用仔細(xì)檢查每個(gè)孔是否均注滿，再

27、放入載板位，按IN/OUT按鈕。板進(jìn)入儀器后孔內(nèi)液體被吸干，然后板被送出。檢查各孔是否完全被吸干?？芍貜?fù)操作，檢測(cè)完成后按Close鍵。如有孔沒(méi)有被加滿或吸干液體，可使用洗板機(jī)清洗保養(yǎng)程序。5. 2. 2 Waste tray清理廢物盤(pán)倒空廢物盤(pán)內(nèi)的吸頭，用自來(lái)水沖洗，晾干。2. 3 Sampl e processor tubing 樣本處理器管道檢查樣本處理器管路系統(tǒng)在灌水過(guò)程中是否有氣泡。如僅有小氣泡則沒(méi)問(wèn)題；如果是大 氣泡，可用Maintenance /Sample processor /Rinse命令沖洗系統(tǒng)將氣泡排出；如有大量氣泡 不能被排除，先檢查蠕動(dòng)泵內(nèi)管路連接和四個(gè)閥門(mén)是否有故

28、障。在注射器中偶有小氣泡不成問(wèn)題，但如存在大的氣泡，而且經(jīng)輕輕拍打注射器或擰緊接 口、拉直管路也不能排除的，則要考慮更換注射器。5. 2. 4 Rinse 沖洗（Rinse）進(jìn)入Maintenance /Sample processor/Rinse OK。用去離子水沖洗樣本探針并浸泡針管。通常在運(yùn)行樣本測(cè)定后儀器會(huì)自動(dòng)沖洗。2. 5 Temperature溫度點(diǎn)擊Options /Show temperature，以檢查溫度調(diào)節(jié)功能。通常在下列條件下，溫度在252C 范圍內(nèi)：室溫15-30C；板處理器合上蓋子；在啟動(dòng)后至少二h保持溫度穩(wěn)定，如果不在這 一范圍聯(lián)系工程師。（三）每周保養(yǎng)5. 3.

29、 1 Instrument cleaning儀器清洗進(jìn)入Maintenance/instrument cleaning，顯示消毒或清洗項(xiàng)目及所需的時(shí)間，根據(jù)需要可選 擇進(jìn)行。選擇對(duì)樣本或板處理器清洗、消毒后，拿掉其他樣本支架，按Yes。接著對(duì)話框要求倒 空廢液瓶，把裝有50ml 0.2 %的次氯酸鈉溶液（2000PPM Cl ）或70%-80%乙醇溶液的瓶子 放入試劑盒子最左邊位置，并在試劑架的起始位置放兩個(gè)吸頭，放一空的微孔板，按OK鍵 或IN/OUT按鈕，板進(jìn)入儀器內(nèi)開(kāi)始消毒。完成后板回到裝載位，取出。如用于新生兒疾病篩查中FT3或FT4的檢測(cè)，則必須對(duì)移動(dòng)盤(pán)進(jìn)行消毒，這只能與洗板 機(jī)消毒

30、同時(shí)進(jìn)行。使用高效含氯溶液對(duì)板處理器消毒前先倒空廢液內(nèi)液體再消毒，因?yàn)樵鰪?qiáng)液會(huì)降低廢液 的PH值而釋放氯氣。裝載板，點(diǎn)擊OK或按板邊上的IN/OUT按鈕， 當(dāng)清洗探針時(shí)，把盛有1： 20倍稀釋的DELFIA Wash液的8支試管放于試管架上，用內(nèi) 徑9-14mm的圓底試管，按OK，輸入試管架號(hào)（系統(tǒng)提供），按OK。當(dāng)消毒探針時(shí)，系統(tǒng)提示放置一個(gè)含70%-80%乙醇消毒液的8管洗液和4管水的架子， 每管液體量至少35ml。高氯溶液、丙酮、變質(zhì)酒精會(huì)毀壞探針。如果選擇了探針清洗和 消毒兩項(xiàng)，系統(tǒng)會(huì)完成清洗后進(jìn)行消毒，最后會(huì)用水清洗。 倒空廢液瓶并移去微孔板后按Yes鍵，把工作記錄入檔。最后用“Un

31、load sample racks” 命令取出支架。5. 3. 2 Enhancement Solution outlet 增強(qiáng)液出口檢查增強(qiáng)液出口處是否曾有液體濺出，如有用棉簽拭干凈。5. 3. 3 Sample processor bottles 樣本處理器瓶啟用“Load menu”菜單下” Load system liqids”命令，要求倒空廢液瓶?jī)?nèi)液體，對(duì)洗液瓶和 清洗瓶做排空和再灌滿，然后按OK。（四）每二周保養(yǎng)5. 4. 1 Sample processor樣本處理器1、關(guān)閉樣品處理器電源同時(shí)用手托住探針固定器，然后輕輕放低探針，擱置于放有干凈紙 的水平臺(tái)上，以防探針突然掉下而損

32、壞。2、用蘸有7080%乙醇的軟質(zhì)布擦洗樣品處理器上的齒輪。3、probe Wash wells探針清洗池：用移液管排空液體后，用小刷子清除異物，同時(shí)灌入70 80%乙醇約10min后，用清洗程序用水沖干凈。5. 4. 2 Plate processor 板處理器關(guān)閉所有應(yīng)用程序、板處理器電源和計(jì)算機(jī)電源。然后打開(kāi)系統(tǒng)電源，先打開(kāi)樣品處理器， 再板處理器，最后啟動(dòng)計(jì)算機(jī)。5. 4.3 Bottles 瓶子 選擇“ Loading”菜單下“ Load system liquids Bottles”命令，按提示倒空洗液瓶和清洗瓶?jī)?nèi) 剩余液體后，各自加滿液體；倒空廢液瓶?jī)?nèi)液體后按OK。（五）每月保養(yǎng)

33、5. 5. 1 Bottles 瓶子1、倒空樣品處理器和板處理器的洗液瓶并沖洗干凈。2、倒空廢液瓶，必要時(shí)可用大約1升的0.1-0.5%的高氯溶液消毒，蓋上蓋子，搖晃后放置30min, 然后用水沖洗。3、必要時(shí)用濕布清除傳感器或蓋子上的污垢。5. 5. 2 Sample processor tubing 樣品處理管路1、用DELFIA洗液（1： 20）沖洗樣品處理管路系統(tǒng)后用去離子水沖洗。2、 將管路取出后放入盛有7080%乙醇（不帶丙酮）消毒液的瓶子，并使用“ Rinse 命 令再?zèng)_洗。3、將管路放回各自加滿液體的洗液瓶和清洗瓶，用“ Rinse”命令沖洗五遍使去離子水充 滿管路。5. 5.

34、 3 Cleaning the covers, racks, and mirrors 擦洗蓋子、支架和鏡子1、用7080%乙醇擦洗板處理器上的塑料蓋和樣品處理器上的蓋子。先用自來(lái)水再用去離 子水沖洗水平托盤(pán)的蓋子；2、同法沖洗試劑架（沖洗后立即擦干，不能浸泡）、樣品架；3、如試劑分配器上套吸頭的部分有紅色沉淀物，則用濕的紙擦掉；4、蘸有7080%乙醇的濕軟布擦洗試劑架傳動(dòng)桿；5、用“Unload plates”命令將板固定器取出，清洗板固定器上的鏡子。5. 5. 4 Washer cleaning 洗板機(jī)清洗1、啟動(dòng)“Maintenance”菜單下 “Plate processor” 欄中的“

35、Washer cleaning”命令，可拆下 洗板機(jī)多頭吸嘴進(jìn)行清洗。（建議由經(jīng)過(guò)培訓(xùn)或公司專業(yè)人員操作）2、待多頭吸嘴移動(dòng)到方便操作的位置，關(guān)閉板處理器電源以確保安全，如果操作不方便可 移去增強(qiáng)液，但注意一定不要碰到增強(qiáng)液管路，以免污染。3、將多頭吸嘴往上抬高后往左移動(dòng)，小心地卸下多頭吸嘴，避免分配針和吸液針損壞。注 意不要在托架上太使勁。4、先在傳送帶上鋪上紙巾以免水滴進(jìn)儀器，然后小心地將管路從吸嘴上取下來(lái)，不要不正當(dāng)?shù)乩煨≈睆焦茏印?、移去吸嘴上方的橡皮蓋子，清洗整個(gè)腔室，使用維護(hù)盒內(nèi)提供的相應(yīng)直徑的通針清潔吸 液針和分配針。6、分配腔室上的四個(gè)硅膠塞子按以下方法拆下，注意不要損壞四個(gè)

36、孔，以免破壞密封性。（1）用小別針移去一邊的兩個(gè)帽子。（2）在臺(tái)上鋪一塊布，用維護(hù)盒內(nèi)提供的清潔刷將腔室里剩余的帽子推出，直到刷子的頭 能看見(jiàn)。（3）用布拭凈刷子上的異物后抽回刷子。同法清潔其他腔室。（4）用合適的通針再次清洗分配針，用清潔刷再次清洗腔室。清潔刷不能它用，以免污染。（5）分配腔室與吸液腔室均應(yīng)用去離子水灌滿后搖動(dòng)清洗。在裝回前先晾干或用干凈紙擦 干，小心別將紙片留在針上。（6）將橡皮封塞裝回原來(lái)合適的位置。（7）在裝新硅膠塞子時(shí)必須確保腔內(nèi)通道干燥及所有內(nèi)置帽子都在合適位置。最上面的帽 子位置稍低于腔室外壁。（8）檢查所有的針是直的，而且定位正確。（9）重新連接管路，將多頭吸嘴

37、放回支架上，檢查是否能自由上下移動(dòng)。（10）安裝完成后，按OK鍵，確認(rèn)多頭吸嘴已裝好，管路已連接后按OK。（11）系統(tǒng)提示打開(kāi)板處理器電源，并重新啟動(dòng)工作站，運(yùn)行洗板機(jī)測(cè)試以保證安裝到位。（六）每季保養(yǎng)6. 1 Pipetting precision check 移液管準(zhǔn)確性檢查1、將400-600P l （依測(cè)試的體積而定）1nmol/L銪溶液分別移入48支9 mm試管中。2、從“Create List”菜單下 “analytes selection” 中選“Use made” 項(xiàng)。3、選 sample 25、50 或 100 分別為 25、50 和 100p l。4、系統(tǒng)提供一個(gè)運(yùn)行號(hào)，如

38、有多個(gè)試驗(yàn)則另外編號(hào)。在樣品號(hào)框中輸入1.48號(hào)碼。5、將50ml的增強(qiáng)液放入試劑杯中，將此試劑杯及兩個(gè)吸嘴放在試劑架最左邊的位置。如不 止一個(gè)測(cè)試則再放一套于試劑架。6、 按OK鍵，屏幕上顯示因沒(méi)有試劑條形碼而出錯(cuò)，按“Ignore”，在對(duì)話框中輸入試劑盒 批號(hào)號(hào)碼為111111和板批號(hào)號(hào)碼為1，按OK。7、顯示Plate loading對(duì)話框，放入一塊清潔板后，按OK，屏幕上顯示因沒(méi)有板條形碼而 報(bào)警，按“Ignore”，輸入板批號(hào)號(hào)碼1和板系列號(hào)為零，按OK鍵。8、Multicalc中的“Probe”程序用來(lái)統(tǒng)計(jì)對(duì)整塊板的每根探針的平均值與變異系數(shù)?？傋?異系數(shù)必須小于3%，而探針的變異

39、系數(shù)應(yīng)小于2%，如CV%超標(biāo)，則應(yīng)檢查是否有偏離孔的 輸出，如有必須重新做以上檢查。9、檢查完畢，運(yùn)行“ Instrument cleaning ”進(jìn)行清洗。10、選擇“Disinfect sample processor probers” 對(duì)探針消毒。11、在1-8號(hào)管中加增強(qiáng)液，9-12管中加水。最后在相同條件下再運(yùn)行一次。5. 6. 2 Accuracy test 準(zhǔn)確性檢查1、啟動(dòng)“Maintenance”菜單下 “Sample processor” 欄中的“Accuracy test” ，按 OK 鍵， 選擇要測(cè)試的體積（20、25、50、100、150p l）后按OK鍵。2、在試劑

40、盒中選擇四個(gè)空的標(biāo)準(zhǔn)液瓶子稱重，把重量輸入對(duì)話框中，按OK鍵。3、將加有1.1ml達(dá)到室溫25C的DELFIA Dilution H的9mm試管放入試管架1-4號(hào)位，把已 稱量過(guò)的4個(gè)空瓶子放進(jìn)特定支架后放入板處理器的裝載位。按OK鍵。4、輸入裝試管的試管架號(hào)，按OK后儀器自動(dòng)將試管架移動(dòng)到吸液位，分別吸取試管中的 稀釋液到校準(zhǔn)品瓶。5、完成移液后，拿走4個(gè)校準(zhǔn)品瓶子，按OK鍵。立即再稱重4個(gè)校準(zhǔn)品瓶并輸入對(duì)話框 中，按OK鍵。如果在允許范圍內(nèi)（準(zhǔn)確度應(yīng)為3%）屏幕顯示每根探針的實(shí)際吸液量并告 知結(jié)果是否在接受范圍內(nèi)。接著可選擇做另一體積的測(cè)試。5. 6. 3 Carry-over check

41、 if the probers 探針的殘留檢查方法一：通過(guò)檢查hCG和TSH Ultra實(shí)驗(yàn)或其它分析來(lái)做。規(guī)定用于hCG和TSH Ultra實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析僅用到兩條微孔板。使用Muliticalc的“Carry” 程序，不必用標(biāo)準(zhǔn)，數(shù)據(jù)是從CPS上得到。如想要到更多的板條，必須手動(dòng)統(tǒng)計(jì)分析。方法二：在“Settings”菜單下“Analyte”欄中設(shè)定與“ Carry”程序的聯(lián)系。在“Create list” 里，選取“Use made”，再選擇“TSHu Carry”或“HCG Carry”，輸入ID號(hào)與使用的試劑 批號(hào)號(hào)碼，輸入1.12樣品號(hào)。準(zhǔn)備8管空白標(biāo)本與4管高濃度標(biāo)本，做hCG

42、需用300p l （9mm試管），如做TSH Ultra需 500U l，先放4管空白管，然后4管高濃度管，再另4管空白管。運(yùn)行檢查。要求HCG或TSHu殘留體積應(yīng)小于0.005%, LH殘留體積應(yīng)小于0.01%,如果 高這一界限必須更換探針。見(jiàn) Probe change”。（七）特別維護(hù)當(dāng)出現(xiàn)以下情況時(shí)，必須按相應(yīng)的步驟維護(hù)。5. 7. 1 Probe crash 探針碰落做準(zhǔn)確性和殘留試驗(yàn)。如結(jié)果不可接受，更換探針。5. 7. 2 Spillage 液體溢出如設(shè)備內(nèi)有液體溢出，用干凈的布擦干。5. 7. 3 Serum spillage 血清潑濺如血清潑濺在樣品處理器上，用蘸有清潔劑的布擦

43、洗傳送帶后用水沖洗，再用70-80%的乙 醇擦洗。5. 7. 4 Enhancement Solution flush 增強(qiáng)液沖洗1、如果DELFIA有一兩天沒(méi)有工作，啟動(dòng)“Maintenance”菜單下“Plate processor”欄中 的“Enhancement Solution flush”命令，沖洗增強(qiáng)液管路以排除可能存在的氣泡；2、如停用超過(guò)一周，必須更換增強(qiáng)液。先換上去離子水并用相同的命令沖洗整個(gè)管路。使 用前重新?lián)Q上新的增強(qiáng)液，再用相同命令沖洗換新整個(gè)管路。5. 7. 5 Sample processor probes 樣品處理器探針樣品處理器探針是不能干燥的，當(dāng)關(guān)閉系統(tǒng)時(shí)，

44、應(yīng)用手托住探針并移到灌滿去離子水的稀釋 槽內(nèi)，用探針托架支撐住探針，在儀器運(yùn)行前必須拿掉此托架。（八）其它5. 8. 1 Aspirate 吸取在“Run Menu”菜單下運(yùn)行。放一塊板在微孔板支架上，按IN/OUT按鈕，完成對(duì)板吸取過(guò) 程后按“close”結(jié)束。5. 8. 2 Counter signal level test 計(jì)數(shù)信號(hào)水平測(cè)試1、啟動(dòng)“Maintenance”菜單下 “Plate processor” 欄中“Counter signal level test ” 命令 對(duì)計(jì)數(shù)信號(hào)水平進(jìn)行測(cè)試，在屏幕上選定板的類型和標(biāo)記物。2、按系統(tǒng)的提示，在試劑架1號(hào)位放入裝有1nmol/L銪或1nmol/L釤溶液的瓶子，在試劑 架的最左邊放1個(gè)吸嘴，然后選一塊干凈的板并放入裝載位。3、吸樣器移取200 Ml溶液加入各孔，儀器測(cè)量板及背景，結(jié)果將從工作站傳送到Multicalc， 打出報(bào)告。結(jié)果應(yīng)該在1nmol/L20%范圍內(nèi)。5. 8. 3