1、 果蠅唾腺染色體 的制備與觀察11. 練習(xí)剖取果蠅三齡幼蟲唾液腺的方法。2. 掌握制作果蠅唾腺染色體標(biāo)本的技術(shù)。3. 觀察果蠅唾腺染色體的形態(tài)特征。一、實驗?zāi)康?3二、實驗原理1881年D. Kostoff用壓片法首先在D. melanogaster 果蠅幼蟲的唾液腺細胞核中發(fā)現(xiàn)了特別巨大的染色體唾液腺染色體（salivary gland chromosome）。但到后來，EHeitz和HBauer（1933）以及TSParnter（1933）才指出它在細胞學(xué)上的意義。事實上，雙翅目昆蟲（如搖蚊、果蠅等）的幼蟲期都具有很大的唾腺細胞，其中的染色體就是巨大的唾液腺染色體。這些巨大的唾液腺染色體具

2、有許多重要特征，為遺傳學(xué)研究的許多方面，如染色體結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成、基因差別表達等提供了獨特的研究材料。4果蠅唾腺染色體的特點：1.巨大染色體：這種染色體比普通染色體大得多，寬約5um，長約400um，相當(dāng)于普通染色體的100150倍，因而又稱為巨大染色體。52.多線染色體：果蠅的唾腺細胞停止在分裂間期（永久間期 ），染色體核蛋白纖維不斷復(fù)制，平行排列形成巨大而伸展的多線染色體唾腺染色體經(jīng)過多次復(fù)制而并不分開，每條染色體大約有10004000根染色體絲的拷貝，所以又稱多線染色體(polytene chromosome)。62.體聯(lián)會：類似于減數(shù)分裂中的同源染色體聯(lián)會。由于同源染色體緊密配對幾乎相互

3、融合，使果蠅的唾腺染色體只有二倍體染色體數(shù)目的單元數(shù)。73.橫紋結(jié)構(gòu)：染色體上有橫紋結(jié)構(gòu)，這些橫紋的數(shù)目和位置往往是恒定的，代表著果蠅等昆蟲的種的特征；可用于基因定位；4.Puff結(jié)構(gòu)：幼蟲的不同發(fā)育期，濃縮的染色質(zhì)纖維會成群解旋、松開，形成泡狀松散結(jié)構(gòu)，使相應(yīng)的基因得以表達，這種泡狀結(jié)構(gòu)稱Puff結(jié)構(gòu)，亦稱染色體的疏松。8 1. 材料： 普通果蠅的三齡幼蟲。 2. 器具： 雙筒體視解剖鏡、顯微鏡、鑷子、解剖針、載玻片、蓋玻片、培養(yǎng)皿、吸水紙等。 3. 藥品： 改良苯酚品紅溶液、生理鹽水、1mol/L鹽酸。三、實驗材料、器具和藥品9四、實驗步驟 1. 材料準(zhǔn)備： 將幼蟲放在含有一滴生理鹽水的潔

4、凈載玻片上。在解剖鏡下觀察：幼蟲頭部有黑色的口溝，尾端有一對黃色的后氣門。 雙手各持一枚解剖針，用左手解剖針壓住幼蟲中部，用右手解剖針自幼蟲口溝后切斷頭部，體內(nèi)各器宮便從切口處擠出，一對唾腺也隨之而出。 唾液腺體是一對半透明棒狀腺體。迅速剝離唾腺周圍的脂肪體，將唾腺保留在載片中央。101112 2. 解離：用吸水紙吸去生理鹽水，然后加1滴Imol/L HCl溶液于腺體上，作用12min。 3. 沖洗：用吸水紙吸去HCl ，滴加蒸餾水于腺體上進行沖洗（兩次）。 4. 染色：吸去蒸餾水，加1滴改良苯酚品紅溶液，染色30min以上。用鑷子加蓋玻片。 5. 觀察： 鏡檢。13五、注意事項1. 盡可能完整剖取唾腺，小心撥除脂肪；2.沖洗染色時防止腺體丟失；3.謹防腺體干固，及時滴加HCl或染液； 4.掌握好染色時間。 14