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1、還原糖檢測考前須知(一)、A液與還原糖反響是定量關(guān)系,它的多少直接影響測定結(jié)果 的多少,從而影響檢測數(shù)據(jù),所以A液必須精確吸取,保證每次取樣 量一致。影響A液吸取誤差的因素:1、A液在吸管中刻度液面的位置要保持一致。2、吸管外壁殘留的A液多少會造成A液取樣量的誤差,所以要 習慣性的對吸管外壁的A液進行相同處理,保證每次外壁殘留A液相 對一致,從而減少A液取樣量的誤差。3、A液放入三角瓶的速度保持一致(不可吹),放完后要觀察 其殘留在吸管中有多少,要保證每次殘留一致。4、A液的不是很明顯的沉淀(或濃度變化)也會對測定造成波 動,取A液的器具切記不要與堿性物質(zhì)接觸(同時也要注意防止帶入 堿性物質(zhì)于
2、A液中),以防止A液產(chǎn)生沉淀,盛A液的容器時間長了, 內(nèi)壁上也會殘留固體(硫酸銅),這些固體顆粒也會造成檢測誤差。5、容器內(nèi)剩余少量A液時,其幾個小時的蒸發(fā)量也會造成濃度 的變化,所以檢測時還應經(jīng)常驗證一下空白,特別是數(shù)據(jù)異常時。、滴定速度要保持均衡一致,速度每12秒一滴為好(速度 不要受滴定時間的長短而改變)、空白滴定和樣品滴定一定要保證預加標準糖液量與最終數(shù)值 差0.50.7mL (最好0.5mL)比方空白測定是22mL,再滴空白時標準糖液預加入到2L5mL。如果這個空白又滴成了 22. 3mL,那么下次空白滴定就預加到21.8mL,樣品檢測也依此類推。、電爐的溫度對檢測結(jié)果也有影響,所以
3、要保證電爐充分預熱, 同時三角瓶在電爐上的放置位置要保持一致。、測定時液體沸騰后的開始滴定的時間也要保持一致,一般等 液體充分沸騰后開始滴定。、滴定終點的判斷也要保持一致。一般等液面半邊變透明為滴 定終點。、糖液稀釋及取樣也要注意精確,注意吸管正確使用方法。、折光糖度精心檢測,依此數(shù)據(jù)輔導還原糖的檢測。、注意輸液膠管漏液、變形,滴定管尖端氣泡等對檢測數(shù)值的 影響。、三角瓶使用后清洗干凈。樣品檢測注意加水體積,加水量為滴定數(shù)與空白數(shù)之差,使樣品 檢測總體積與空白滴定總體積大致相等。還原糖測定規(guī)那么一、方法原理:斐林氏A、B液混合時,生成天蘭色氫氧化銅沉淀并立即與酒石 酸鉀鈉起反響,生成深蘭色氧化
4、銅和酒石酸鉀鈉的絡合物酒石酸鉀 鈉銅,酒石酸鉀鈉銅被還原糖還原,生成紅色的氧化亞銅沉淀,而氧 化亞銅與亞鐵氫化鉀反響生成無色的絡合物,到達終點時,稍微過量 的還原糖將蘭色的亞甲基藍還原為無色。二、儀器及試劑:儀器:容量瓶100mL;滴定管25mL;三角瓶250mL;吸管2mL、1mL;量筒50mL;定量吸管5mL; 300W電爐;滴定裝置。試劑:斐林氏A液:稱取35g硫酸銅、0. 08g亞甲基藍,加水溶解定容至1000mL。斐林氏B液:稱取126g氫氧化鈉、117g酒石酸鉀鈉、10g亞鐵氯化鉀,分別 溶解后混合定容至lOOOmLo0. 1%標準葡萄糖溶液:精確稱取1.0000g葡萄糖(105七
5、干燥2小時),加1mL鹽酸溶解 定容至lOOOmLo三、分析步驟:空白滴定:1、以定量吸管吸取斐林氏A、B液各5mL于250mL三角瓶中(斐 林氏A液須精確吸取,A、B液要現(xiàn)混現(xiàn)用);2、預先加入約20mL0.l%標準葡萄糖溶液,混合后于電爐上加 熱至沸騰(溶液應在2分鐘內(nèi)沸騰);3、再以23秒/滴速度滴定至蘭色消失為終點(滴定速度需保 持一致)。4、同一空白做兩次(兩次之差0.1mL之內(nèi)),取平均值(后一次滴定預加入標準葡萄糖溶液量比前一次滴定數(shù)少0. 5-0. 7mL) o樣品滴定:1、以定量吸管精確吸取5mL糖液于容量瓶中,加水稀釋至100mL;2、吸取稀釋樣2mL(高濃度糖取1mL)于250mL三角瓶中;3、同空白滴定步驟(滴定時需預先加入一定體積的水,加水量與耗用標準糖液量的 總和應與空白滴定耗用標準糖液體積相同)。四、計算:(vo-v) X0.1%糖度=X100(5/100) XVIV0:空白滴定耗用標準葡萄糖溶液體積(mL)V:樣品
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