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文檔簡介

1、堅實(shí)的蠟塊。常規(guī)的石蠟包埋過程包括五個根本步驟,即固定,脫水,透亮,浸蠟和包埋,前一章中已述過固定。第一節(jié) 脫 水以使組織再次發(fā)生肯定的硬化,脫水劑必需是與水在任何比例下均能混合的液體。一常用的脫水劑 1酒精:是制片最常用的試劑,可與水在任何比例下相混合,酒精的脫水力量比較強(qiáng),又 脫水劑時,應(yīng)領(lǐng)先從濃度較低的酒精開頭,然后遞增其濃度,這樣可以避開組織過度收縮。 5070酒精開頭, 再經(jīng) 80,95以至無水酒精。但是有時為了某種特別要求,例如要做糖元的切片標(biāo)本或 過換一次無水酒精脫水即可。用 AAF 95酒精開頭脫水。用醇性固定劑如Carnoy則可置于高濃度無水酒精內(nèi),但應(yīng)屢次換液以除酸。一般狀

2、況下,組織經(jīng)過 70,80,90,95,以至無水酒精的脫水程序,即可到達(dá)脫 95100 留意,脫水時間應(yīng)比為鍍銀的同類組織要短。脫水的根本原則:從低濃度酒精開頭漸漸升到高濃度酒精,以保持組織中的水分完全脫凈。1cmX1cmX0.2cm 大小的組織, 酒精內(nèi)處理的最短時間分別削減到24 ,隨后的透亮,浸蠟都會受到影響,很簡潔造成在染色時脫片, 這樣的組織蠟塊,因其含有肯定的水分,一經(jīng)與空氣接觸即枯燥而凹陷。脫水不盡的組織是 不能切出很好的切片的。外檢標(biāo)本的制作,教學(xué)標(biāo)本的脫水時間比較長,其目的在于更充分脫水,并適當(dāng)加強(qiáng)了組織的硬度。酒精脫水劑使用不宜太久,應(yīng)適時更換液。當(dāng)酒精混濁,變黃或酒精滴于

3、水中消滅乳白色混濁時,說明酒精中溶解了過量的脂類,這種狀況一消滅,將會影響脫水,則應(yīng)準(zhǔn)時更換。各種濃度酒精的配制:切片室內(nèi)應(yīng)常備有70%,80%,85%等各種濃度的酒精95%酒精作為基液加水稀釋,不要用無水酒精去配制,因無水酒精的價格較高,極不經(jīng)濟(jì)。配制方法如下:先將高濃度酒精注入量杯,其量同將要稀釋酒精濃度數(shù)字相等。參加蒸餾水,致總量到達(dá)原酒精濃度的數(shù)字量。例如: (一)95%70%酒精時:(1)95%70 毫升;(2)加蒸餾水使到達(dá) 95 毫升; 70%的酒精。(二) 80%60%酒精時:(1)80%60 毫升;(2)80 毫升;稀釋后的酒精既為濃度為 60%的酒精.其余類推,其他的試劑的

4、稀釋也均可以參照此方法進(jìn)展配制。丙酮(Acetone):可用作固定液,也是一種比較好的脫水劑。脫水力量強(qiáng)、速度快,可配制不同濃度進(jìn)展脫水。但一般狀況下,多用在無水酒精的補(bǔ)充脫水。丙酮脫水時間比酒精強(qiáng),但簡潔使組織過度硬化,所以應(yīng)適當(dāng)把握脫水時間。正丁醇(-Buty alcohol):正丁醇脫水力量較酒精弱,可與水、酒精相混合,而且也能溶解石蠟,因此正丁醇不僅可以替代酒精使組織脫水,還可以代替二甲苯使組織透亮。尋常在稀釋時都與酒精依據(jù)肯定比例配制使用,或?qū)⒔M織脫水至 90%酒精后移入正丁醇, 正丁醇再脫水后可直接投入石蠟。用正丁醇脫水,組織比較少引起收縮和硬化等不良結(jié)果。二氧乙環(huán)(Dioxan)

5、:二氧乙環(huán)是一種有毒物質(zhì),易揮發(fā)(使用場所必需通風(fēng)),能同水、酒精、 二甲苯相混合并能溶解石蠟,是一種既可以脫水,也具有透亮效果的液體。脫水一般可以 70% 開頭,再經(jīng)過 90%至純二氧乙環(huán),然后浸入石蠟。二氧乙環(huán)脫水對組織無收縮和硬化等不良現(xiàn)象,對較硬的組織或易收縮的組織可使用二氧乙環(huán)。二.組織的搖震熱酒精會使組織過硬,并有爆裂危急,除急診外,最好不用此方法。其次節(jié) 透 明被媒劑所取代。透亮后就可以將組織浸入溶解的石蠟進(jìn)展浸蠟。透亮劑透亮劑很多,一般常用的有二甲苯,苯,甲苯,氯仿,香柏油等。 1二甲苯:是最為常用的一種透亮劑,它能與酒精,丙酮相混合,又是石蠟的溶劑。在透 明過程中,組織連續(xù)發(fā)

6、生硬化,由于二甲苯對組織的收縮性強(qiáng),作用快速,因此,組織在二 的作用稍緩,對組織收縮較少,不易變脆。但苯較二甲苯毒性大,揮發(fā)快,故應(yīng)留意安全使用。 2氯仿:也是一種很好的媒劑,它的作用緩和。組織在此液內(nèi)過夜也不至于過硬變脆,這 一點(diǎn)較苯,二甲苯和甲苯優(yōu)良。但氯仿比重較大,折光率較小,不能轉(zhuǎn)變組織的折光率,組織在氯仿中不易呈現(xiàn)二甲苯那樣的透亮現(xiàn)象 完全滲透和置換出酒精。 3香柏油:是爭辯處理細(xì)柔組織的最正確透亮劑,因它的硬化作用微小,組織在此液體內(nèi)較 如皮膚和致密纖維組織用香柏油透亮, 效果好,故常規(guī)石蠟切片一般不用。 透亮劑等量混合液半小時,再入透亮劑,并更換一次透亮劑,待組織完全透亮后進(jìn)展浸

7、蠟, 23 小時。脂肪組織由于其構(gòu)造不同透亮最快,但是這并不能說明組織中脫水劑已完全被透亮劑取代, 二甲苯 織盡可能為透亮劑所溶解,才有利于石蠟的侵入。透亮過久是否會導(dǎo)致組織過度硬化變脆 則不會導(dǎo)致過度硬化和變脆,個別含膠樣物質(zhì)過多的組織例外。第三節(jié) 浸 蠟組織經(jīng)媒劑的透亮作用之后 這一程序就叫浸蠟。依據(jù)所用石蠟的熔點(diǎn),浸蠟需要能夠保持于 5460.C 溫箱內(nèi)進(jìn)展。石蠟的質(zhì)量和熔度與切片質(zhì)量親熱相關(guān),因此對石蠟的選擇應(yīng)以留意。 覺滑而不膩,結(jié)晶及顆粒少。石蠟中如有水分會結(jié)晶而變?yōu)榘装呖捎眉訜釘嚢璧姆椒ǔ?。全部的蠟在使用前按常?guī)必需用標(biāo)準(zhǔn)濾紙在漏斗內(nèi)過濾到搪瓷杯里儲存于浸蠟箱中 中揮發(fā)。處置后

8、的石蠟置于恒溫箱中保持液體狀態(tài)備用。所用的石蠟有肯定的熔點(diǎn)和硬度, 熔點(diǎn)高,硬度大。一般要求在 5256之間,這既可以支持硬組織也可使切片成條。使用時的石蠟。石蠟的熔點(diǎn)越低,其質(zhì)地相應(yīng)的較為疏松。硬蠟熔點(diǎn) 60用于硬纖維組織。軟蠟用于合劑,常用蜂蠟,硬脂酸,松香等。54為了使低熔點(diǎn)的石蠟硬一些,可參加 1020的蜂蠟。它能增加蠟的熔點(diǎn)而不必使組織浸在高溫內(nèi),便于切片。也要依據(jù)組織的種類而異,一般常規(guī)用量不超過5為度。6471, 在浸蠟中參加少量的硬脂酸可增加石蠟的滲透性替二甲苯透亮。松香:為棕黃色半透亮的固體。質(zhì)硬而脆,遇熱熔解,呈膠體狀,同石蠟混合時,可增加石蠟的硬度,由于松香質(zhì)脆,混合后可

9、增加硬度但韌性缺乏。 織要比軟組織如肝腎等需要加倍時間。含血多的組織,肌肉和纖維束在蠟內(nèi)易過硬而發(fā)脆, 熔點(diǎn)較高的石蠟作為其次步,第三步。浸蠟時間14 小時,或更長,并使之過夜則較易切割,如此浸漬的組織切片在枯燥箱內(nèi)枯燥也不易卷曲和龜裂。第四節(jié) 包 埋劑凝固后,進(jìn)一步加強(qiáng)了組織的硬度和韌度而便于進(jìn)展切片。一石蠟包埋法連續(xù)切片,包埋后的組織可以長期保存。包埋的方法有自動包埋機(jī)包埋和手工包埋兩種。手工包埋的步驟如下:組織浸入石蠟后,包埋前將組織移入包埋用石蠟杯內(nèi)。從恒溫箱取出置于三角架上,其下點(diǎn)燃酒精燈,以保持石蠟的溶解狀態(tài)。預(yù)備好包埋框,將包埋用的鑷子在酒精燈上加溫防止鑷子粘蠟后,左手持蠟杯,右

10、手把加溫的鑷子放在蠟口直立狀倒蠟時讓石蠟沿鑷子注入包埋框內(nèi)??焖勹嚾〗M織塊放入包埋框石蠟內(nèi),切面朝下放正置入框底并輕輕壓平,以保證不再有氣泡。待石蠟外表凝固前將標(biāo)簽貼于其上,需留意勿使標(biāo)簽與標(biāo)本混淆,當(dāng)蠟塊冷至蠟面有一層透亮蠟?zāi)r,浸入冷水中快速使其冷卻,否則蠟內(nèi)常形成結(jié)晶。蠟塊完全硬固后除去銅框,以保證蠟徹底凝固,馬上修切,預(yù)備制成切片或貯存?zhèn)溆?。二石蠟包埋的留意事?關(guān)系,過硬的組織最好用硬度較高的石蠟包埋,反之,軟組織則應(yīng)以硬度較低的石蠟包埋。60。C 左右。包埋用石蠟加溫不行過高,以保持其不凝固為度,溫度過高簡潔將組織燙壞,使得組織變 硬,變脆,并發(fā)生卷曲,收縮變形而不利于切片,甚至影

11、響診斷。另外留意埋蠟的溫度和組 包埋的作用。包埋用石蠟應(yīng)把握用量,以組織全部包埋完畢,石蠟也恰好用完為宜。包埋應(yīng)留意組織病變面放在下面,并盡可能使組織放平,在不損傷組織的狀況下可用鑷子輕壓。囊壁和消化道等組織包埋時更應(yīng)留意組織方位,應(yīng)將組織塊直立拉平,不要卷曲。一樣組織如包埋于一個蠟塊時,除包平外,還要留意方向的全都,以利切片。多塊組織和碎組織包埋于一個蠟塊內(nèi)時,組織的排列肯定要密擠靠攏,以求成直線或方塊行,這樣有利于切片。石蠟包埋后,不宜冷凝過慢,特別是室溫較高時,石蠟?zāi)毯髴?yīng)馬上投入冷水中加速冷卻可增加石蠟密度,韌性和硬度。但冷凝過速也會由于內(nèi)外溫差過大造成蠟塊裂損。三石蠟包埋程序1.2

12、毫米厚度,固定于福爾馬林?jǐn)?shù)小時后再換以穎福爾馬林固定數(shù)小時。 過夜最好是在低濃度酒精中浸泡,透亮過程肯定適當(dāng)把握,不要時間過長。更換脫水酒精, 如從節(jié)約的角度考慮,可將各級酒精逐級下降使用,如無水酒精可降為 95酒精在連續(xù)使用成效,因此,最好是更換酒精。組織脫水,透亮徹底后,浸蠟過程在必要時候可以延長,例如,在石蠟中過夜,但溫箱肯定要恒溫,以免組織塊受高溫影響,造成組織過度硬化。四.快速石蠟包埋法快速切片診斷是在數(shù)格外中或半小時左右制成切片并作出診斷的一種手段打算手術(shù)的切除范圍和手術(shù)方式。快速切片的方法包括冰凍切片和快速石蠟切片。制作快速石蠟切片時,切取組織應(yīng)當(dāng)薄小,從固定、脫水到浸蠟的全過程都要加溫,一般是先將各種試劑在超聲波快速石蠟脫水儀中預(yù)熱,恒溫下操作,

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