1、維藥雪蓮前列栓的質量標準研究【摘要】目的建立雪蓮前列栓的質量標準。方法采用薄層色譜(TL)鑒別處方中的雪蓮，用高效液相色譜(HPL)法測定雪蓮前列栓中綠原酸的含量。使用atersRp18(1504.6，5);檢測波長：327n;流動相：乙腈-0.4%磷酸溶液(1090);流速：1.0lin-1;柱溫：35。結果在TL圖譜中可檢出雪蓮的特征斑點，HPL法在綠原酸26.68293.48g(r=0.9998，n=6)范圍內，有良好的線性關系，平均加樣回收率為97.86%(n=9)，RSD為1.89%。結論所采用的方法準確、可靠,可行性及重復性良好，能有效控制該制劑的質量?！娟P鍵詞】雪蓮前列栓;綠原酸

2、;高效液相色譜;薄層色譜維藥雪蓮前列栓是雪蓮、紅花、沒藥等多味維吾爾藥材組成，具有消炎、消腫、通淋，用于慢性前列腺炎及前列腺增生等疾玻為了更好地控制其質量,保證臨床療效,本實驗采用薄層色譜(TL)法對其進展了定性鑒別研究,建立了制劑雪蓮的薄層定性鑒別方法,并采用高效液相色譜(HPL)法測定了制劑中綠原酸的含量,為本品質量標準的制訂提供了根據。1儀器與試藥aters600型高效液相色譜儀(美國aters公司)，包括aters2487紫外檢測器;ETTLERAE200型電子天平，SartriusBP211D型電子天平，KT-1000超聲波清洗器。乙腈為色譜級，其它試劑均為分析純;硅膠G(青島海洋化

3、工消費);綠原酸對照品(批號0753-200111)，蘆丁對照品(批號0753-200111)，雪蓮對照藥材(121205-0101)(中國藥品生物制品檢定所提供);雪蓮前列栓中試樣品由新疆奇康哈博維藥消費，批號為040402，040405，040410。2方法與結果2.1雪蓮的薄層色譜鑒別取供試品3粒，斷碎，稱取約2.2g，置索氏提取器中，加氯仿適量，回流脫脂5h以上，棄去氯仿溶液，濾渣連同濾紙揮盡氯仿;參加甲醇適量，回流提取至近無色，水浴蒸至近干，加70%甲醇2l溶解，作為供試品溶液。另取雪蓮對照藥材1g，加甲醇20l，超聲提取30in，水浴濃縮至1l，作為對照藥材溶液;取蘆盯綠原酸對照品

4、，甲醇溶解，分別制成每毫升含4g的溶液，作為對照品溶液。取不含雪蓮的陰性樣品3g,按供試品溶液制備方法制成陰性樣品溶液。照薄層色譜法?中國藥典?2022年版，部(附錄VIB)試驗，汲取供試品溶液10l，對照藥材、對照品溶液5l，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10612)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以1%亞硝酸鈉的1%的甲醇溶液，加熱至斑點明晰。供試品色譜中，在與對照藥材、對照品色譜相應的位置上顯一樣顏色的斑點。陰性無干擾。結果見圖1。1.陰性對照24.供試品(批號：040402，040405，040410)5.雪蓮對照藥材6.蘆丁

5、對照品7.綠原酸對照品圖1雪蓮前列栓的TL鑒別2.2含量測定2.2.1色譜條件色譜柱為atersRp18(1504.6，5)，加保護柱;檢測波長：327n;流動相：乙腈-0.4%磷酸溶液(1090);流速：1.0lin-1;柱溫：35。理論塔板數按綠原酸峰計算應不低于1000。流速為1.0lin-1時，在此條件下，綠原酸保存時間、別離度、理論板數等色譜參數均符合要求。2.2.2對照品溶液的制備精細稱取綠原酸對照品7.6g，置10l量瓶中，加70%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，得對照品儲藏液(0.76gl-1);精細量取對照品儲藏液1l置50l量瓶中，加70%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得(每毫升含綠

6、原酸15.2g)。轉貼于論文聯盟.ll.2.2.3供試品溶液的制備取供試品10粒，碎斷，取約2.2g，精細稱定，置索氏提取器中，加氯仿適量,回流脫脂5h以上，棄去氯仿溶液，濾渣連同濾紙揮盡氯仿;參加甲醇適量，回流提取至近無色，水浴蒸至近干，加70%甲醇定容至50l量瓶中，搖勻，用微孔濾膜(0.45)濾過，即得。2.2.4陰性對照溶液的制備按處方制備不含雪蓮藥材的供試品，依供試品溶液制備方法制成陰性供試品溶液。2.2.5線性關系考察精細量取對照品儲藏液1l置50l量瓶中，加70%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得(每毫升含綠原酸15.2g)。制得標準品溶液，取2，6，10，14，18，22l進樣。以綠原

7、酸進樣量為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，得線性回歸方程為：Y=2646.3X-1722.9，r=0.9998，結果說明在26.68293.48g范圍內，綠原酸進樣量與峰面積之間有良好的線性關系。2.2.6精細度實驗精細吸勸2.2.2項下的對照品溶液各連續(xù)進樣5次，每次10l，測得綠原酸峰面積的RSD為0.87%，說明儀器精細度良好。同一批供試品(040402)制成供試品溶液，連續(xù)進樣6次，10l/次,測得綠原酸峰面積的RSD=0.67%，說明樣品精細度良好。A-對照品B-樣品-陰性樣品a-綠原酸圖2高效液相色譜圖2.2.7穩(wěn)定性實驗取同一供試品(批號：040402)按“2.2.3項下方

8、法制備供試液，分別于0，2，4，6，8，12h進樣10l，測定綠原酸的峰面積，結果綠原酸峰面積的RSD為0.86%，結果供試品溶液12h內穩(wěn)定。2.2.8重復性實驗同一批樣品(040402)分別制成5個供試品溶液，連續(xù)進樣6次，10l/次，進樣測得綠原酸峰面積并計算含量，RSD為0.40%(n=6)。說明本方法重復性良好。2.2.9回收率實驗精細稱取供試品(040402)約1.1g，共9份，精細稱定，分別置索氏提取器中，分別參加綠原酸對照品溶液(1.002gl-1)267.5，335.7，401.3l，加氯仿180l，回流5h以上，棄去氯仿溶液;濾渣連同濾紙揮盡氯仿，參加甲醇適量，回流提取至近

9、無色，水浴蒸至近干，加甲醇定容至50l量瓶中，搖勻，進樣10l，測定，平均回收率為97.86%(n=9),RSD為1.89%。結果見表1。2.2.10樣品含量測定取小試7批和中試3批樣品(2.2g/粒)，每批重復測定兩次，按“2.2.3項下方法制備供試液，分別進樣10l，測定，以峰面積計算綠原酸含量。結果見表2。表1綠原酸加樣回收率實驗結果表210批樣品含量測定結果3討論本實驗采用薄層層析法分別對其主要成分雪蓮進展了鑒定,并采用高效液相色譜法制定了綠原酸的含量測定方法,到達了有效控制該制劑品種質量的目的。實驗中方法具有靈敏準確、重現性好的特點,適宜于該制劑質量控制。根據上述實驗結果，考慮到藥材

10、的來源，以及制劑消費、儲藏等方面的因素，暫定本品每粒含雪蓮以綠原酸(16H189)計，不得少于500g。由于購自中國藥品生物制品檢定所的綠原酸對照品(含量測定用)純度達不到規(guī)定的要求，故采用歸一化法對綠原酸對照品含量進展測定。精細汲取綠原酸對照品溶液10l，注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖30in，采用歸一化法計算綠原酸對照品(供含量測定用)含量，結果綠原酸對照品含量分別為87.78%，87.73%，平均含量為87.8%。本文對雪蓮前列栓按?中國藥典?2022年版部附錄I項下規(guī)定的方法，對廠家提供的3批(040402，040405，040410)供試品進展了檢查，結果符合檢查要求。為了優(yōu)化供試品中綠原酸提取方法，選擇了甲醇超聲，冷藏處理法;石油醚超聲處理，甲醇回流法;置索氏提取器氯仿回流脫脂法等。結果法說明脫脂效果差，不能用于高效液相儀的測定，以免污染檢測池及液相柱。法說明綠原酸回收率達不到要求。法說明脫脂完全，提取完全，綠原酸回收率到達要求。故采用以法為供試品提取方法16?！緟⒖嘉墨I】1中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準(中藥材)，第1冊S.中華人民共和國衛(wèi)生部，1992：10.2關家彥，王瑋文.天山雪蓮浸提液制備工藝的考察J.沈陽醫(yī)科大學學報，1995，64(12)：209.3李君山，蔡少青.雪蓮花類藥材的化學和藥理研究進展J.中國藥學雜志，19