1、簡(jiǎn)述色譜儀的工作原理。答：色譜法是一種物理分離技術(shù)，實(shí)質(zhì)上是利用混合物中各個(gè)組分在互不 相溶的兩相（固定相和流動(dòng)相）之間的分配的差異而使混合物得到分離的一種方 法，也可以稱為色層法，層析法。利用色譜分離技術(shù)再加上檢測(cè)技術(shù)，對(duì)混合物 進(jìn)行先分離后檢測(cè)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)多組分分復(fù)雜混合物進(jìn)行定性、定量分析的儀器 就是色譜儀。色譜儀主要有哪些特點(diǎn)？答：色譜儀的主要特點(diǎn)是可以對(duì)混合物進(jìn)行多組分分析或者全分析，儀器 結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、操作使用方便、應(yīng)用范圍廣、樣品用量少、高選擇性、高效能、高速 度且高靈敏度。常用的色譜儀器有哪兩大類，各自有何特點(diǎn)？答：目前常用的色譜儀有氣相色譜儀和高效液相色譜儀。氣相色譜儀有高 分辨

2、率、高速度、高靈敏度及選擇性好的優(yōu)點(diǎn)，但它只能用于被氣化的物質(zhì)的分 離檢測(cè)，而常壓下可氣化或可定量轉(zhuǎn)變?yōu)闅饣难苌锏奈镔|(zhì)，不能用該方法； 液相色譜的樣品無需經(jīng)氣化而直接導(dǎo)入色譜柱進(jìn)行分離、檢測(cè)，特別適用于氣化 時(shí)易分解的物質(zhì)的分離、分析。有70%的有機(jī)物可以用高效液相色譜法進(jìn)行分析。氣相色譜儀的主要組成部分有哪些，其工作過程如何？答：氣相色譜儀的主要組成部分有氣路系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè) 系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、數(shù)據(jù)處理、記錄系統(tǒng)及電源、電子線路等。其工作過程是： 氣源提供的載氣減壓后，經(jīng)凈化干燥器凈化再通過穩(wěn)壓和穩(wěn)流環(huán)節(jié)，保證得到流 動(dòng)平穩(wěn)、潔凈的載氣作流動(dòng)相，進(jìn)入色譜柱；當(dāng)氣化室、分離

3、柱、檢測(cè)器達(dá)到操 作的所需溫度，且載氣流量平穩(wěn)時(shí)，將樣品由進(jìn)樣器注入，則氣態(tài)樣品經(jīng)氣化室 氣化了的液態(tài)樣品被載氣（流動(dòng)相）帶入色譜柱（固定相），開始分離過程；由 于樣品中各組分對(duì)兩相的分配系數(shù)等方面的差異，在色譜柱中經(jīng)過反復(fù)多次吸附 -洗脫或溶解-析出的分配過程后，依次離開色譜柱，進(jìn)入檢測(cè)器；檢測(cè)器把流入 的組分定量地轉(zhuǎn)換成電信號(hào)，經(jīng)放大處理后，送往顯示與記錄系統(tǒng)，就可以得到 被測(cè)樣品各個(gè)組分的色譜圖。氣路系統(tǒng)和進(jìn)樣系統(tǒng)的目的和要求是什么？答：氣路系統(tǒng)的目的是向色譜柱提供質(zhì)地潔凈、流動(dòng)平穩(wěn)的流動(dòng)相。進(jìn)樣 系統(tǒng)的要求一方面是準(zhǔn)確定量，迅速注入。另一方面氣態(tài)或經(jīng)氣化的樣品能在載 氣中形成一個(gè)窄帶集

4、中地進(jìn)入色譜柱，否則測(cè)量結(jié)果將毫無意義。為了取樣的準(zhǔn) 確性，常選用專門的取樣閥取樣。注射器進(jìn)樣和多通進(jìn)樣閥進(jìn)樣的優(yōu)缺點(diǎn)各是什么？答:注射器進(jìn)樣的主要優(yōu)點(diǎn)是死體積小，分析結(jié)果的精度高，缺點(diǎn)是定量不 準(zhǔn)確，重復(fù)性差.與之 相反，多通進(jìn)樣閥進(jìn)樣的優(yōu)點(diǎn)定量準(zhǔn)確，重復(fù)性好,缺點(diǎn)是 死體積較大，分析結(jié)果的精度較差.氣相色譜儀為什么必須進(jìn)行穩(wěn)定的溫度控制？答:在氣相色譜儀的使用過程中，必須使用氣態(tài)樣品（如果是液態(tài)樣品需要 經(jīng)過氣化處理），這就 決定了在大多數(shù)情況下氣相色譜儀的溫度操作.而溫度控 制的穩(wěn)定與否直接與氣相色譜儀的正常工作及其測(cè)量結(jié)果的可靠性有著密切的 關(guān)系.首先，溫度對(duì)于固定相是十分重要的.操作

5、時(shí)一定要知道所用固定相溫度的 極限，把全部操作保持在臨界溫度以下10 C15。C進(jìn)行.這將有助于延長(zhǎng)柱 子的使用壽命和 避免檢測(cè)器與其他裝置受固定相流失所造成的污染.其次，在 氣相色譜儀中，溫度不僅對(duì)樣品在色 譜柱上的分離過程有很大影響,對(duì)許多檢測(cè) 器（如熱導(dǎo)，電子捕獲，示差折光等）的檢測(cè)結(jié)果也有很大 的影響.因此必須對(duì)色 譜柱箱，檢測(cè)器和氣化室等實(shí)行穩(wěn)定的溫度控制.對(duì)氣相色譜儀檢測(cè)器的主要要求有哪些？答:靈敏度（S）高，同類檢測(cè)器靈敏度越高,性能也就越好.最小檢測(cè)量 愈低愈好，以適應(yīng) 痕量分析的要求.線性范圍要寬.噪音要低，漂移要小. 注意檢測(cè)器的選擇性問題.響應(yīng)時(shí)間要快.氣相色譜儀常用的檢

6、測(cè)器有哪些？可以分別檢測(cè)什么樣的樣品？答:熱導(dǎo)檢測(cè)器，是基于被測(cè)樣品和載氣具有不同的導(dǎo)熱系數(shù)進(jìn)行檢測(cè)的， 基本上所有的樣品組分都能夠檢測(cè)；氫火焰離子化檢測(cè)器是樣品在電離室里面 參與燃燒，增加由于載氣的穩(wěn)定燃燒產(chǎn)生的基流 而進(jìn)行檢測(cè)的，主要用于含碳有 機(jī)物（可以燃燒的樣品）的檢測(cè)；電子捕獲檢測(cè)器是利用具有電負(fù)性的 組分捕獲 電子,減少載氣由于受放射性同位素照射電離而產(chǎn)生的基流,主要用于具有電 負(fù)性組分的檢測(cè).簡(jiǎn)述氣相色譜儀新柱子“老化”處理的步驟及目的。答:老化處理就是在比操作溫度高20 C的條件下，將色譜柱烘烤12h 以上.將有助于除去填料中的污染物和減輕對(duì)檢測(cè)器的污染.對(duì)高壓輸液泵的要求主要

7、有哪些？答:能產(chǎn)生較高的壓力推動(dòng)流動(dòng)相，且壓力要平穩(wěn)，脈動(dòng)小.能提供無 脈動(dòng)恒定流量.輸 送流動(dòng)相的流量能在較大范圍內(nèi)連續(xù)調(diào)節(jié).更換流動(dòng)相方 便.便于實(shí)現(xiàn)程序控制.12 .自動(dòng)化儀器為什么必須要有完善的檢測(cè)保護(hù)裝置？答：自動(dòng)化儀器由于采用了自動(dòng)控制裝置，其內(nèi)部工作過程都可以自動(dòng)完 成.但在工作過程中，如 果出現(xiàn)了故障而沒有完善的檢測(cè)保護(hù)裝置來進(jìn)行實(shí)時(shí)的 監(jiān)測(cè)，保護(hù)，那就會(huì)使儀器在異常的情況下繼續(xù) 工作,這樣不但得不到正確的分 析結(jié)果，而且還可能進(jìn)一步損壞儀器，因此自動(dòng)化儀器必須要有完善的檢測(cè)保護(hù) 裝置來保證其正常運(yùn)行.對(duì)于一些復(fù)雜樣品，如果還是采用常液洗脫的方法，樣品各組分分離效 果很差的時(shí)候

8、，可以用什么方法來改善分離？答:對(duì)于一些復(fù)雜樣品，如果還是采用常液洗脫的方法，樣品各組分的分配 比K的值對(duì)任意一種流 動(dòng)相都分布很寬時(shí)，分配比小的先出色譜柱，但往往分 離不好,甚至不能完全分離.而最后出來的若干 組分因分離時(shí)間太長(zhǎng)，峰形擴(kuò)散, 致使檢測(cè)器的靈敏度顯著降低，甚至無法檢出，因此不能得到好的分 離結(jié)果.為 解決這個(gè)問題，可采用梯度洗脫；程序升溫;程序變流速；組合柱等方法 來改善樣14品的分離.最常用的是梯度洗脫的方法.對(duì)高效液相色譜儀進(jìn)樣系統(tǒng)的要求主要是什么，如何實(shí)現(xiàn)？答:高效液相色譜儀的進(jìn)樣系統(tǒng)，要求能將樣品有效地注入到系統(tǒng)里去， 而不破壞在色譜柱和檢測(cè)器里所建立的流量平衡.由于考

9、慮到高效液相色譜儀 溶劑流動(dòng)的特點(diǎn)是壓力高，流速慢,樣品在移動(dòng)過 程中的擴(kuò)散作用更為明顯.因 此盡量降低進(jìn)樣器的死體積將有助于柱效率的提高.15 .在液固吸附色譜中，正確選擇流動(dòng)相應(yīng)依據(jù)哪些基本原則？答:穩(wěn)定性.主要是指柱效率或柱子的保留性質(zhì)要長(zhǎng)期不變.適應(yīng)所 采用的檢測(cè)器.能溶解待分離樣品.清洗方便.粘度要小一些.對(duì)于高效液相色譜儀的檢測(cè)器，除了須具備與氣相色譜儀相同的基本要 求外，還要特別注意哪兩點(diǎn)？為什么？答:對(duì)流動(dòng)相的適應(yīng):在氣相色譜儀中，流動(dòng)相比較簡(jiǎn)單，只是少數(shù)性質(zhì)差 異不大的氣體.但在高效液相色譜儀中，流動(dòng)相從有機(jī)化合物到水及其他電解質(zhì) 溶液都有，特別是加上梯度洗脫之后，流動(dòng) 相本

10、身就成為多元物質(zhì)，因此在設(shè)計(jì) 及選用檢測(cè)器時(shí)必須充分注意.峰擴(kuò)展的問題:在高效液相色譜儀中由于流動(dòng) 相的流速相對(duì)較慢，峰擴(kuò)展的問題顯得比氣相色譜 儀中更為突出.因此，對(duì)于死 體積及測(cè)量系統(tǒng)的時(shí)間常數(shù)的要求就更為嚴(yán)格.要求檢測(cè)器的空間及測(cè)量系統(tǒng) 的時(shí)間常數(shù)盡可能小.早期樣品池體積在50p l左右,現(xiàn)在一般都在10p l以 下.紫外及可見分光檢測(cè)器與一般的紫外-可見分光光度計(jì)的主要差異有哪 些？答:紫外及可見分光檢測(cè)器與一般的紫外-可見分光光度計(jì)的主要差異有: 樣品檢測(cè)池體積只有5 p l8p l,不致于影響峰形，并做成流動(dòng)式.檢測(cè)靈敏 度達(dá)0.05O.D.0.01O.D.的滿度值（一般光 度計(jì)僅為1.0O.D.0.5O.D.）.為 提高靈敏度,樣品池盡量做得細(xì)長(zhǎng).對(duì)分光后光的單色性,波長(zhǎng)精 度要求不高, 光譜寬度可在10nm