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1、急 性 腎 功 能 不 全(Acute Renal insufficiency, ARI)各種病因引起雙側(cè)腎臟在短期內(nèi)泌尿功能急劇降低,導(dǎo)致機(jī)體內(nèi)環(huán)境出現(xiàn)嚴(yán)重紊亂的病理生理過程。實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10/6/20221急 性 腎 功 能 不 全各種病了解實(shí)驗(yàn)性腎功能不全動(dòng)物模型復(fù)制方法觀察升汞中毒家兔的一般狀態(tài),尿的變化、血漿尿素氮水平以及腎臟大體形態(tài)改變根據(jù)實(shí)驗(yàn)指標(biāo),分析討論急性腎功能不全的病理生理變化實(shí) 驗(yàn) 目 的實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10/6/20222實(shí) 驗(yàn) 目 的實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10/2/20222實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及模型復(fù)制的原理原 理 腎毒物HgCl2 引起家兔腎小管變性、壞死,導(dǎo)致嚴(yán)重的腎臟功能不全。實(shí)驗(yàn)性腎
2、衰竭10/6/20223實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及模型復(fù)制的原理原 理實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10/2/2觀 察 指 標(biāo) 臨床變化對(duì)象手術(shù)操作指 標(biāo)GFR下降、尿量下降 尿液膀胱插管尿量尿成分改變蛋白尿、血尿和管型氮質(zhì)血癥血液頸動(dòng)脈插管血漿尿素氮水平腎臟形態(tài)改變腎臟兔尸體解剖腎臟色澤、體積、皮質(zhì)條紋等與對(duì)照家兔做比較:實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10/6/20224觀 察 指 標(biāo)臨床變化對(duì)象手術(shù)操作指 實(shí) 驗(yàn) 步 驟1. 復(fù)制模型(已完成)實(shí)驗(yàn)組 HgCl2 肌肉注射1.2ml/Kg 24h 對(duì)照組 NaCl 肌肉注射1.2ml/Kg 24h 實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10/6/20225實(shí) 驗(yàn) 步 驟1. 復(fù)制模型(已完成)實(shí)驗(yàn)組 HgCl(1)
3、稱重麻醉: 腹腔注射20%烏拉坦,5ml/kg2. 手術(shù)及操作劍突恥骨聯(lián)合部位:左下腹近腹中線1cm方法:與腹壁呈45進(jìn)針,進(jìn)入腹腔有落空感,回抽無血、腸內(nèi)容物,緩慢推注效果判斷:肌肉松弛,自然臥倒,眼瞼反射遲鈍,鉗夾皮膚無反應(yīng)等實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10/6/20226(1) 稱重麻醉: 腹腔注射20%烏拉坦,5ml/kg2. (2)固定備皮:固定:備皮: 頸部正中:甲狀軟骨- 胸骨上緣 下腹正中:恥骨聯(lián)合上15cm實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10/6/20227(2)固定備皮:固定:備皮:實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10/2/20227(3)膀胱插管收集尿液下腹部切口,分離組織,暴露膀胱注射器抽膀胱內(nèi)尿3ml(備用)荷包縫合(膀胱
4、無血管區(qū))膀胱插管C實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10/6/20228(3)膀胱插管收集尿液C實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10/2/20228左頸總動(dòng)脈迷走神經(jīng)頸內(nèi)靜脈胸骨舌骨肌胸鎖乳突?。?)左頸總動(dòng)脈插管分離抗凝 耳緣靜脈 肝素(1ml/kg)插管實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10/6/20229左頸總動(dòng)脈迷走神經(jīng)頸內(nèi)靜脈胸骨舌骨肌胸鎖乳突?。?)左頸總動(dòng)左頸總動(dòng)脈插管3.遠(yuǎn)心端,45剪口,約為管徑的1/24.朝心臟方向插管 23cm并固定頸總動(dòng)脈1.結(jié)扎遠(yuǎn)心端12.夾閉近心端2近心端心臟遠(yuǎn)心端頭部實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10/6/202210左頸總動(dòng)脈插管3.遠(yuǎn)心端,45剪口,約為管徑的1/24.朝(5)尿液鏡檢,計(jì)錄管型數(shù)和細(xì)胞數(shù)(10個(gè)視野)管型
5、(低倍鏡)細(xì)胞(高倍鏡)實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10/6/202211(5)尿液鏡檢,計(jì)錄管型數(shù)和細(xì)胞數(shù)(10個(gè)視野)管型細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(6)尿蛋白定性檢查取尿液3ml于試管中酒精燈上加熱至沸騰若混濁,加入5%醋酸3-5滴再煮沸尿變清,尿內(nèi)有尿酸鹽 混濁加重,尿中有蛋白 實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10/6/202212(6)尿蛋白定性檢查取尿液3ml于試管中實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10/2程度等級(jí)蛋白含量(g%)清晰0.5(6)尿蛋白定性檢查實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10/6/202213程度等級(jí)蛋白含量(g%)清晰0.01輕度白色渾濁0.(7)血漿尿素氮測(cè)定 原理:血液中尿素在強(qiáng)酸條件下與二乙酰-肟和氨硫脲(DAM-TSC)共煮沸,生成紅色復(fù)合物,
6、顏色深淺與尿素氮含量成正比例關(guān)系,用分光光度計(jì)測(cè)定OD值,可計(jì)算出尿素氮含量。實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10/6/202214(7)血漿尿素氮測(cè)定 原理:血液中尿素在強(qiáng)酸條件下與二乙酰方法 每組自頸總動(dòng)脈取血10ml到離心管,離心,3000rpm 10min,吸出上層血漿置于干凈試管中備用; 按下表加入試劑:試劑(ml)空白管標(biāo)準(zhǔn)管測(cè)定管(ABCD)血漿 - -0.02水0.50.10.5尿素氮標(biāo)準(zhǔn)液-0.4-DAM-TSC0.50.50.5酸混合液4.04.04.0實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10/6/202215方法試劑(ml)空白管標(biāo)準(zhǔn)管測(cè)定管(ABCD)血漿 - -0 各管加好混勻后置沸水鍋中煮沸10min,流水中
7、冷卻3min后測(cè)OD值(520nm波長(zhǎng)),先以空白管調(diào)零,再讀取測(cè)定管值; 計(jì)算:測(cè)定管光密度(Du)標(biāo)準(zhǔn)管光密度(Ds)0.0021000.02=DuDs10血漿尿素氮(mg%)=實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10/6/202216 各管加好混勻后置沸水鍋中煮沸10min,流水中冷卻3mi(8)形態(tài)學(xué)觀察將家兔處死(耳緣靜脈注入空氣510ml),取出腎臟;觀察并比較兩組家兔腎臟的大體形態(tài),如體積大小,表面色澤,皮質(zhì)條紋及色澤等。實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10/6/202217(8)形態(tài)學(xué)觀察將家兔處死(耳緣靜脈注入空氣510ml)實(shí) 驗(yàn) 流 程 概 括1. 復(fù)制模型(已完成)(1) 稱重麻醉: 腹腔注射20%烏拉坦,5ml/kg2. 手術(shù)操作及檢測(cè)指標(biāo)(2) 固定備皮:(3) 膀胱插管收集尿液(4) 左頸總動(dòng)脈插管(5) 尿液鏡檢,計(jì)錄管型數(shù)和細(xì)胞數(shù)( 10個(gè)視野)(6) 尿蛋白定性檢查(7) 血漿尿素氮測(cè)定實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10/6/202218實(shí) 驗(yàn) 流 程 概 括1. 復(fù)制模型(已完成)(1) 稱重麻實(shí)驗(yàn)報(bào)告的書寫實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)步驟(簡(jiǎn)明扼要)實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目 中毒家兔 對(duì)照家兔 尿液檢查 尿液鏡檢 尿蛋白檢查尿量血漿尿素氮測(cè)定 腎臟大體形態(tài) 分析討論實(shí)驗(yàn)性腎衰竭10
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