1、法醫(yī)物證學(xué)中南大學(xué)根底醫(yī)學(xué)院法醫(yī)系Forensic GeneticsForensic Medicine Department of Basic Medical College of Central South University一、法醫(yī)物證學(xué)的定義 法醫(yī)物證學(xué)：以法醫(yī)物證為研究對(duì)象，以提供科學(xué)證據(jù)為目的，研究用生命科學(xué)技術(shù)解決案件中與人體有關(guān)的生物檢材鑒定的一門學(xué)科。 . Definition Forensic Genetics: A subject that with life science and technology to solve the case of human biolog

2、ical samples which related to the identification. It takes forensic evidence as research object and provide scientific proofs as research purpose. 證據(jù)：是指能證明案件真實(shí)情況的一切事實(shí)。刑事訴訟法規(guī)定的證據(jù)有：物證；書證；證人證言；鑒定結(jié)論；勘驗(yàn)；檢查筆錄；視聽資料；被害人陳述；犯罪嫌疑人、被告人供述和辯白 。 物證：能夠以本身所具有的物質(zhì)特征證明案件的真實(shí)情況的物品和物質(zhì)痕跡。分為物品、文書、音像、化學(xué)物、生物物證 Evidence: All f

3、acts that can prove the true circumstances. Such as: material vidence, documentary evidence, witness testimony, appraisal conclusion, audio-visual material,etc. Material vidence: All goods and material traces that can prove true circumstances of the case. It is divided into articles and documents, a

4、udio-visual, chemical, biological evidence. 法醫(yī)物證是研究與人有關(guān)的生物源性物質(zhì)證據(jù)。 具有種屬與個(gè)體特征，在案件偵審過(guò)程中可成為個(gè)人識(shí)別的重要證據(jù)。 并非所有的生物源性檢材都能起到證據(jù)作用，只有經(jīng)過(guò)專門檢驗(yàn)后證明其與案件有關(guān)并能對(duì)案件的真實(shí)情況起到證明作用的，方能作為證據(jù)。法醫(yī)生物檢材 Forensic material evidence 1) is a biogenic material evidence that related to the study of human beings; 2) have the characteristics

5、of species and individual; 3) is considered an important evidence of personal identification in the process of investigation and trial of cases. Forensic biological material is a biogenic material evidence which through a special inspection to prove their connection with the case as well as have the

6、 proof role in the true circumstances of the case. 二、法醫(yī)物證內(nèi)容 (1)與人體有關(guān)的各種體液、分泌物、排泄物及其斑痕，如血液、精液、陰道分泌液、唾液、乳汁、尿液、糞便、羊水等及其所形成的斑痕； (2)各種人體組織； (3)毛發(fā)、骨骼、牙齒及指甲等。. Forensic Biological Materials1. Various human body fluids, secretions, excretions and scars. Such as blood, semen, vaginal secretions, saliva;2. Va

7、rious body tissues；3. Hair, bones, teeth, nails, etc. 三、法醫(yī)物證檢驗(yàn)解決問(wèn)題 1偵破刑事案件的向?qū)?2查明案件事實(shí)的依據(jù)：解決個(gè)人識(shí)別問(wèn)題，否認(rèn)嫌疑對(duì)象，劃定嫌疑范圍或認(rèn)定罪犯犯罪現(xiàn)場(chǎng)重現(xiàn) 3審查其它證據(jù)的手段 4戰(zhàn)爭(zhēng)和災(zāi)難性事故中個(gè)人識(shí)別 5親緣關(guān)系確定包括親子鑒定 . Effections1. Detection of criminal cases;2. Ascertain the facts of the case：personal identification，exclude suspects, etc.;3. Review ot

8、her evidences;4. Personal identification in war and catastrophic accidents;5. Genetic relationship identification.四、法醫(yī)物證檢材的采取、包裝和送檢 檢材的特點(diǎn)：容易變性、變質(zhì)、降解、腐敗的特點(diǎn)。檢材本身的不確定性給鑒定工作帶來(lái)相當(dāng)大的困難。 所以，正確的取材、保存、及時(shí)送檢極為重要 檢材的采取、包裝與送檢必須遵循一定的規(guī)那么，以保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。. Sample Extraction, Packaging and Examination1. Discovery and

9、 extraction(1) Discovery: blood stain, seminal stain, Saliva spot, hair, skin, organ tissue fragments, etc.一檢材的發(fā)現(xiàn)和提取1.檢材的發(fā)現(xiàn)： 現(xiàn)場(chǎng)勘驗(yàn)中，全面仔細(xì)搜尋檢材，第一時(shí)間原位拍照、或拍攝錄像資料，結(jié)合測(cè)量、繪圖詳細(xì)記錄現(xiàn)場(chǎng)原始狀態(tài)。包括發(fā)現(xiàn)地點(diǎn)、顏色、大小、形狀、量的多少，特別是微量物證1血痕：褐色斑跡。地面、墻角衣服、被褥、兇器、頭發(fā)、指甲縫、木板縫、鞋底、下水道等自殺案例2精斑：受害人的陰道拭子、衣褲、被褥、手帕、衛(wèi)生巾及腹壁、大腿、陰毛等 3唾液斑：現(xiàn)場(chǎng)煙頭、口香糖、瓜子

10、殼、吸管、飲料容器、咬痕、牙簽、牙刷、信封口、郵票反面4毛發(fā)：現(xiàn)場(chǎng)地面、被褥、兇器、肇事車輛輪胎5皮膚、其它臟器組織碎塊：被害人及涉案人員指甲縫里有對(duì)方的皮膚組織；兇器、肇事車輛2.檢材的提取物證檢材收集和采取原那么 1在現(xiàn)場(chǎng)勘查或偵查過(guò)程中，必須全面、細(xì)致地尋找一切可疑的物證。 2詳細(xì)記錄檢材的名稱、數(shù)量、形狀、大小和發(fā)現(xiàn)地點(diǎn)，進(jìn)行繪圖，照相和記錄之后，根據(jù)檢材的具體情況，用適當(dāng)?shù)姆椒ú扇『桶b(2) General principles of Collection and Extraction 1) Comprehensive and detailed search for all sus

11、picious material evidence;2) Record in detail: name, quantity, shape, size and discovery site; 3采取檢材時(shí)，應(yīng)盡量保持其原狀不受損壞。對(duì)附有可疑斑跡的物品，能整件采取的(如衣物、床單、紙張、刀斧、棍棒、磚頭、石塊等)應(yīng)整件提取。提取的檢材應(yīng)分別包裝，注明取材的部位和方法、日期。 4提取現(xiàn)場(chǎng)的檢材時(shí)，應(yīng)同時(shí)提取受害人的血液、唾液或毛發(fā)等。強(qiáng)奸案精斑檢驗(yàn)時(shí)，必須提取受害人的血液與唾液同時(shí)檢查。 3) Try to keep in its original state without damage;4)

12、Extract the victims blood, saliva or hair, etc.; 5提取尸體血液時(shí)，最好采取末梢血，不采取心血，因?yàn)槭w腐敗時(shí)由于死后循環(huán)，細(xì)菌可迅速侵入心臟，使心血污染 6采取檢材時(shí)，切勿用手直接觸摸，一般用鑷子或戴上手套采取，以免手上的汗液污染檢材，并防止不同檢材之間的交叉污染7采取檢材寧多毋少，以供重復(fù)試驗(yàn)用5) Peripheral blood first;6) Use tweezers or gloves;7) Comply with the relevant provisions;8) Rather more not less. 二檢材的包裝與保存

13、檢材的包裝與保存對(duì)于保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性具有重要意義 不同的檢材應(yīng)用不同方式包裝2. General principles of Packaging and Preservation(1) Avoid confusion and cross contamination;(2) Reduce the impact of external factors;(3) According to the type of samples to Process and storage. 檢材的包裝與保存原那么 不同的檢材應(yīng)分別包裝，編號(hào)記錄，防止混淆和交叉污染。新鮮的血液、唾液、精液等可盛于潔凈的玻璃或塑料容

14、器中。潮濕的血痕、唾液斑、精斑及陰道內(nèi)容物，應(yīng)在陰涼處晾干后，用干凈紙袋或塑料袋分別包裝，低溫保存 盡可能保證檢材中的血型物質(zhì)、蛋白質(zhì)及DNA不受外界因素的影響而被破壞，變性和降解。防止溫度、酸堿、化學(xué)試劑等對(duì)檢材的影響 應(yīng)根據(jù)檢驗(yàn)工程處理和保存檢材。如由于唾液中含有一些能破壞ABH血型物質(zhì)的酶，收集唾液后，應(yīng)立即在沸水浴中煮沸10分鐘使酶滅活。用作DNA分析的人體組織，應(yīng)用酒精固定，不能用福爾馬林液固定；用于DNA分析的血樣，最好用乙二胺四乙酸鈉(EDTA-Na2)抗凝；有條件的應(yīng)盡量用冷凍方式保存用于DNA分析的生物樣本等。 三檢材的送檢原那么 送檢過(guò)程中應(yīng)使檢材保持完好。 附上送檢單位公

15、函、委托書(包括委托單位名稱、委托人姓名、簡(jiǎn)要案情、送檢的目的與要求等)、送檢物品清單(檢材的名稱、數(shù)量、提取方法、包裝方式等)。如系復(fù)檢，應(yīng)同時(shí)附送原鑒定書或其復(fù)印件。假設(shè)郵寄送檢，應(yīng)注明送檢者姓名，發(fā)文日期、復(fù)函地址、聯(lián)系 和郵政編碼等3. General principles of Delivering for Examination(1) Keep in intact；(2) Attach official letter and proxy. 四法醫(yī)物證檢驗(yàn)遵循原那么 接案后，應(yīng)及時(shí)進(jìn)行檢驗(yàn)，以免因拖延時(shí)間使檢材中的蛋白質(zhì)變性或DNA降解。 選用靈敏可靠的方法進(jìn)行檢驗(yàn)，盡量節(jié)約檢材，保

16、存一局部檢材(約23)備復(fù)檢之用。微量檢材需全部用完時(shí)，需征得送檢單位的同意。 檢驗(yàn)過(guò)程中不能用手直接觸摸檢材，應(yīng)用鑷子鑷取，每取完一種檢材后，應(yīng)將鑷子擦拭干凈，以免交叉污染。檢驗(yàn)工具和器皿必須清潔。 嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠。 認(rèn)真記錄檢驗(yàn)方法和結(jié)果。 根據(jù)檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，作出客觀、公正的結(jié)論，寫出完整、標(biāo)準(zhǔn)的法醫(yī)物證檢驗(yàn)鑒定書。4. GeneralPrinciples of forensic material evidence examination(1) Timely inspect;(2) Select sensitive and reliable detectio

17、n method;(3) Avoid cross contamination；(4) Strictly follow the experimental procedure；(5) Carefully record inspection methods and results；(7) Make objective and fair conclusion.五、血痕檢驗(yàn) 血痕(blood stain)是法醫(yī)物證檢驗(yàn)中最常遇到的檢材. Bloodstain examination Blood stain is the most commonly encountered material in the

18、forensic evidence.一血痕檢驗(yàn)需要解決問(wèn)題 對(duì)疑似血痕確定是否為血痕； 是人血痕還是動(dòng)物血痕； 如果是人血，通過(guò)血型測(cè)定或作DNA分析，解決個(gè)人識(shí)別問(wèn)題； 有時(shí)還需要檢驗(yàn)血痕的性別，推斷出血時(shí)間、出血部位及估算出血量等，協(xié)助分析或重建作案情況。1. Problems to be solved1) Bloodstain?2) Human or animal bloodstain；3) Human bloodstain: Blood determination or DNA analysis;4) Sex determination. 1、血痕的證明 血痕的證明是指對(duì)疑為血痕的檢材

19、通過(guò)肉眼檢查、預(yù)實(shí)驗(yàn)和確證實(shí)驗(yàn)等判斷是否為血痕(1) Gross examination Such as:suspicious bloodstains distribution, direction, location, shape, size, quantity and color etc.2. Proof method of bloodstain 1肉眼檢查(gross examination) 此項(xiàng)檢查常在現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行。 主要觀察可疑血痕的分布、方向、位置、形狀、大小、數(shù)量及顏色等，初步判斷是否血痕，出血部位及出血量，血液噴濺或流注的方向，血液滴落的高度。 由血痕特征推斷死亡原因、尸體位置、

20、有無(wú)被移動(dòng)、原始現(xiàn)場(chǎng)與第二現(xiàn)場(chǎng)等，幫助分析案件發(fā)生時(shí)的情況。 2預(yù)試驗(yàn)(preliminary test) 預(yù)試驗(yàn)即篩選試驗(yàn)。 是通過(guò)化學(xué)或物理學(xué)的方法篩選出可能含血的檢材，以作進(jìn)一步的檢驗(yàn) 預(yù)試驗(yàn)方法有：聯(lián)苯胺試驗(yàn)、鄰聯(lián)甲苯胺試驗(yàn)、酚酞試驗(yàn)、無(wú)色孔雀綠試驗(yàn)及氨基比林試驗(yàn)等。 最常用最靈敏的血痕預(yù)試驗(yàn)方法是聯(lián)苯胺試驗(yàn)(benzidine test) 原理：利用血痕中血紅蛋白或正鐵血紅戴白具有過(guò)氧化物酶活性，使過(guò)氧化氫釋放出生態(tài)氧，將無(wú)色的聯(lián)苯胺氧化為苯胺藍(lán) 無(wú)色的復(fù)原酚酞-紅色酚酞 無(wú)色孔雀綠-孔雀綠藍(lán)(2) Preliminary test 1) Benzidine test;2) Phen

21、olphthalein test;3) Leucomalachite green test;4) Aminopyrine test, etc. 3確證試驗(yàn)(conclusive tests) 血痕確實(shí)證試驗(yàn)主要是通過(guò)檢驗(yàn)血液的特有成分(如血紅蛋白及其衍生物)來(lái)判斷檢材是否是血痕 假設(shè)確證試驗(yàn)為陽(yáng)性反響，那么證明檢材為血痕 假設(shè)呈陰性反響，那么不能完全排除血痕的可能性，因?yàn)檠劢?jīng)日曬、雨淋、水洗、加熱、發(fā)霉、腐敗或混有雜質(zhì)時(shí)，確證試驗(yàn)均可能呈陰性反響 確證試驗(yàn)的靈敏度較低血痕確證試驗(yàn)常用方法 血色原結(jié)晶試驗(yàn)或稱高山(Takayama)結(jié)晶試驗(yàn)：血紅蛋白在堿性溶液中分解為正鐵血紅素及變性珠蛋白，在

22、復(fù)原劑的作用下，正鐵血紅蛋白復(fù)原為血紅素，與變性珠蛋白和其它含氮化合物結(jié)合，形成血色原結(jié)晶。 氯化血紅素結(jié)晶試驗(yàn)或稱古煙(Teichmann)結(jié)晶試驗(yàn)：血紅蛋白在酸性作用下分解為正鐵血紅素，與氯離子反響形成氯化血紅素結(jié)晶褐色針狀結(jié)晶 吸收光譜檢查 顯微鏡下查找紅細(xì)胞等(3) Conclusive tests1) Hemochromogen crystal test or Takayama crystal test;2) Hemin crystal test or Teichmann crystal test;3) Absorption Spectroscopy ;4) Find the red

23、 blood cells use the microscope.2、血痕的種屬鑒定 種屬鑒定(species identification)是指對(duì)已經(jīng)證明的血痕確定其種屬來(lái)源。 即判斷其是人血痕還是動(dòng)物血痕。 必要時(shí)還需要確定是何種動(dòng)物血。2. Species Identification of Bloodstain Species identification that defined as a distinguish method to determine the species source of the bloodstain (human or animal bloodstain).

24、血痕種屬鑒定的方法主要有以下幾類： 1沉淀試驗(yàn)(precipiting test) 2血紅蛋白的等電聚焦(hemoglobin isoelectrofocusing) 3抗-人球蛋白抑制試驗(yàn)(antihuman-globulin nihibition test) 又稱抗-人球蛋白消耗試驗(yàn)。 4酶聯(lián)免疫吸附分析法(enzyme immunosorbent assay，ELISA) 5膠體金標(biāo)記免疫層析分析技術(shù)(colloid gold labelling immuno-chromatography) 6PCR方法(PCR technique)：Alu序列檢測(cè)、28SrRNA序列、細(xì)胞色素b基因序

25、列Species identification methods：(1) Precipiting test；(2) Hemoglobin isoelectrofocusing； (3) Antihuman-globulin nihibition test； (4) Enzyme immunosorbent assay (ELISA)；(5) Colloid gold labelling immuno-chromatography；(6) PCR technique: Alu Sequence detection, 28 SrRNA Sequence.3、血痕的個(gè)人識(shí)別 血痕的個(gè)人識(shí)別主要是通過(guò)檢

26、測(cè)血痕中的遺傳標(biāo)記來(lái)進(jìn)行的，如血型、酶型測(cè)定及DNA分型等 枯燥血痕中的血型抗原及酶蛋白等易受外界因素的影響而變性失活，以至檢測(cè)不出 隨著血痕保存時(shí)間的延長(zhǎng)，能檢出的遺傳標(biāo)記亦逐漸減少 因此，對(duì)血痕檢材應(yīng)盡早測(cè)定血型。 血痕個(gè)人識(shí)別內(nèi)容 1血痕紅細(xì)胞血型的測(cè)定 2血痕中血清型的測(cè)定 3血痕中紅細(xì)胞酶型的測(cè)定 4血痕中HLA血型的測(cè)定 5血痕的DNA多態(tài)性分析 6血痕的性別判定3. Individual Identification of Bloodstain(1) Red Cell Blood Groups testing; (2) Serotype testing; (3) Red cell

27、 isoenzymes testing;(4) HLA distribution testing;(5) DNA polymorphism analysis; (6) Sex determination.六、精斑檢驗(yàn) 在法醫(yī)學(xué)實(shí)踐中，強(qiáng)奸、同性戀等案件常涉及到精斑的檢驗(yàn). Semen Stain Examination In the practice of forensic medicine, rape and homosexuality cases often involve the examination of the semen stain.一精液的組成 精液主要由精子和精漿組成 精子分

28、頭、尾兩局部，頭部由頂體和致密精子細(xì)胞核組成 精漿主要由精囊液及前列腺液等組成 精漿中含有很多蛋白質(zhì)、酶、游離氨基酸、血型抗原和無(wú)機(jī)鹽類 精液中90是水，10是固體成分。固體成分除大量的精子外，還有睪丸細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、上皮細(xì)胞、前列腺卵磷脂小體、精素結(jié)晶、色素顆粒及脂肪球等 二精液的特點(diǎn) 新鮮精液為乳白色粘稠狀液體 排出體外后約經(jīng)1小時(shí)左右，即液化成灰白色米湯樣液體 正常精液呈中性，1. Features of Semen(1) Fresh semen: milky white sticky liquid;(2) After1h: gray soup liquid;(.(三精斑的特點(diǎn) 精斑為精

29、液枯燥后形成的斑跡。 多附著于衣褲、被褥、床單、毛巾、紙張或現(xiàn)場(chǎng)地面等處 精斑多呈乳白色，其外觀常因其附著物的不同而有較大差異。白色布類上的精斑多呈黃白色地圖狀或漿糊狀，邊緣較中間明顯。有色布類上的濃厚精斑多呈灰白色。稀薄的精斑，肉眼檢查不易察見。精斑手觸之有硬感 含有核黃素，在紫外線下呈銀白色熒光，邊緣呈淡紫藍(lán)色。2. Features of Semen Stain(1) More attached to the underwear, bedding, bed sheets, towels and ground, etc.;(2) Milky white, with a hard sense

30、 of touch;(3) Containing riboflavin: silver white fluorescence and lavender blue edge are observed under the ultraviolet light.四、精斑檢驗(yàn)需要解決的問(wèn)題 可疑斑痕是否為精斑 是人精斑還是動(dòng)物精斑 假設(shè)是人精斑，那么需進(jìn)行個(gè)人識(shí)別3. Problems to be solved(1) Semen stain?(2) Human or nimal semen stain;(3) Human semen stain: personal identification.五精斑的

31、證明 1肉眼檢查 2紫外線檢查 3精斑的預(yù)試驗(yàn)：酸性磷酸酶檢驗(yàn)、磷酸苯二鈉實(shí)驗(yàn) 、碘化鉀結(jié)晶實(shí)驗(yàn)、苦味酸結(jié)晶實(shí)驗(yàn) 4精斑確實(shí)證試驗(yàn) 主要有以下幾類：精子檢出法；免疫學(xué)檢測(cè)法；生物化學(xué)方法4. Proof method of Semen Stain(1) Gross examination;(2) UV inspection;(3) Preliminary test: Acid phosphatase test; Kind-King test; Florence crystal test; Barberio crystal test;(4) Conclusive tests：1) Sperm d

32、etection method; 2) Immunological assay; 3) Biochemical methods.七精斑的個(gè)人識(shí)別 1、精斑的ABO血型測(cè)定 2、精斑的同工酶型測(cè)定 3、精斑中血清型的檢測(cè) 4、精斑的DNA多態(tài)性分析5. Individual identification of Semen Stain(1) ABO blood typing;(2) Isoenzyme detection;(3) Serotype testing; (4) DNA polymorphism analysis.八精液與其他體液混合斑的檢驗(yàn) 在鑒定強(qiáng)奸案和其他性犯罪案件時(shí)，現(xiàn)場(chǎng)提取的斑

33、痕中除精液外?；煊惺芎θ说年幍婪置谝?、血液、尿液或汗液等，此種斑痕稱混合斑。 由于陰道分泌液、血液及汗液等均含有血型物質(zhì)或其他遺傳標(biāo)記，故從混合斑中測(cè)得的血型或其他遺傳標(biāo)記的表現(xiàn)型或基因型并不一定能準(zhǔn)確地反映精液的表現(xiàn)型或基因型，而往往是混合斑中各種成分遺傳標(biāo)記的總和。 目前主要采用DNA分型技術(shù)、Y染色體DNA分析法 檢驗(yàn)混合斑，首先要檢查斑痕的組成成分，判斷它是單一斑痕還是混合斑 檢查混合斑的成分，可采用形態(tài)學(xué)、化學(xué)及免疫學(xué)的方法。如用顯微鏡查見斑痕中含有精子和陰道脫落上皮細(xì)胞，證明是精液與陰道分泌液的混合斑；如要檢查斑痕中有無(wú)血液，可作聯(lián)苯胺試驗(yàn)或抗人血紅蛋白沉淀反響；如檢查斑痕中有無(wú)唾

34、液成分可作淀粉消化試驗(yàn) 假設(shè)斑痕中未查見精子，可用特異性抗人精液或抗P30血清等與斑痕浸液作沉淀反響，確證斑痕中的精液成分 強(qiáng)奸案中，最常見的是精液與陰道分泌液混合斑。檢測(cè)精液與陰道分泌液混合斑的三大類方法。 1、比照推斷法 根本原理是：用常規(guī)方法檢測(cè)混合斑的血型及酶型等，同時(shí)取被害人的血液、唾液等進(jìn)行檢驗(yàn)，比照分析檢驗(yàn)結(jié)果。如果混合斑的血型或酶型與被害人不相同，那么說(shuō)明混合斑中這種血型或酶型必然來(lái)自強(qiáng)奸犯的精液，如與嫌疑人的血型或酶型不同，那么可否認(rèn)嫌疑人；假設(shè)相同，那么不能否認(rèn)嫌疑人。 例如，假設(shè)被害人的血型為O型，而混合斑的血型檢測(cè)結(jié)果為A型時(shí)，O型、B型及AB的嫌疑人可被排除，但A型的

35、嫌疑人那么不能被排除 比照推斷法結(jié)果的可靠程度取決于被害人與罪犯之間血型及酶型。此法簡(jiǎn)便易行，但在加害人與受害人血型相同時(shí)，解決問(wèn)題受到限制 2混合斑中精子ABO血型的測(cè)定 用熒光抗體或酶標(biāo)抗體免疫組化法可直接測(cè)出混合斑中精子的ABO血型，不受陰道分泌液的影響。 此法也可測(cè)出分泌型陰道脫落上皮細(xì)胞的ABO血型，即被害人的ABO血型。 當(dāng)需要了解被害者的ABO血型而又無(wú)被害者的血液(或血痕)檢材時(shí)，此法尤為有用。 非分泌型人陰道復(fù)層鱗狀上皮細(xì)胞的ABH物質(zhì)含量少或缺如。6. Examination of Mixed Stain(1) Main method: DNA typing techniq

36、ue, Y chromosome DNA analysis;(2) Morphology, Chemical and Immunological methods;(3) Specific Anti human semen or Anti P30 serum.3DNA分析法 用DNA分型技術(shù)對(duì)混合斑、被害人及嫌疑人血樣進(jìn)行DNA分析比對(duì) 是迄今為止作混合斑個(gè)人識(shí)別的最好方法 The most common is a mixture of semen and vaginal secretions found in the case of Rape. Detection method : 1) Co

37、mparative inference method; 2) ABO blood typing; 3) DNA typing (the best method). 七、唾液斑檢驗(yàn) 唾液是唾液腺(腮腺、頜下腺、舌下腺、口腔粘膜下小唾液腺)的分泌液 唾液中含有蛋白質(zhì)、酶、ABH血型物質(zhì)和口腔脫落上皮細(xì)胞等 唾液斑是法醫(yī)物證檢驗(yàn)中常見的檢材. Salivary Stain Examination Saliva is the salivary secretion and contains proteins, enzymes, ABH blood group substances , oral epit

38、helial cells, etc. Salivary stain is the commonly encountered material in the forensic evidence.一唾液斑的證明 唾液中含有豐富的淀粉酶和口腔脫落上皮細(xì)胞，檢驗(yàn)這些成分可確證唾液斑在紫外線照射下呈淡青色熒光1. Proof method of Salivary Stain(1) Starch-iodine assay;(2) Oral epithelial cells ;(3) UV inspection: observation the light blue fluorescence. 1、唾液淀粉

39、酶的測(cè)定 一般采用淀粉消化試驗(yàn)判別檢材中有無(wú)淀粉酶。在人體分泌液中，唾液中淀粉酶的含量最大，精液、陰道液中無(wú)淀粉酶，鼻涕、糞便及尿液中含有微量的淀粉酶 幾乎所有植物、動(dòng)物、發(fā)芽的種子及酵母菌均含有淀粉酶，故本試驗(yàn)陽(yáng)性并非唾液斑所特有 本試驗(yàn)陽(yáng)性，結(jié)合在可疑斑痕中找到口腔脫落上皮細(xì)胞方能確證唾液斑(1) Determination of salivary amylase 1) Starch digestion test positive;2) And Suspicious spots found the oral exfoliated epithelial cells. 2、口腔粘膜脫落上皮細(xì)胞

40、的檢查 將檢材用生理鹽水浸泡后離心，取沉渣涂片，HE染色鏡檢，假設(shè)查見鱗狀上皮細(xì)胞可佐證唾液斑 假設(shè)查見唾液中含有痰液成分，以及氣管或支氣管的脫落纖毛柱狀上皮細(xì)胞，那么可證明唾液斑2) Examination of Oral mucosal epithelial cells 1) HE staining microscopy:Found the squamous cells;2) Found the sputum components, tracheal or bronchial ciliated cells.二唾液斑的個(gè)人識(shí)別 1.唾液斑的ABO血型測(cè)定 2.唾液斑中多態(tài)性蛋白質(zhì)及酶的檢測(cè)

41、3.唾液斑的性別測(cè)定 4.唾液斑的DNA多態(tài)性分析2. Individual identification of Salivary Stain(1) ABO blood typing;(2) Polymorphic proteins and enzymes detection;(3) Sex determination; (4) DNA polymorphism analysis.八、毛發(fā)檢驗(yàn) 毛發(fā)為皮膚的附屬器官，由排列規(guī)律的角化鱗狀上皮細(xì)胞組成 在兇殺、強(qiáng)奸、搶劫、盜竊、交通事故等案件中，有時(shí)毛發(fā)可能成為重要的物證. Hair examination of hair In the case

42、 of murder, rape, robbery, theft, traffic accident and so on， hair may become an important material evidence.一毛發(fā)檢驗(yàn)的意義 毛發(fā)很容易脫落，并留在作案現(xiàn)場(chǎng)及有關(guān)物體上 毛發(fā)的主要成分是角蛋白，其理化性質(zhì)較穩(wěn)定，能抵抗蛋白分解酶及酸的作用，不易腐敗和毀壞，可長(zhǎng)期保存，有助于個(gè)人識(shí)別 在交通事故中，將肇事車輛上的毛發(fā)與死(傷)者的毛發(fā)進(jìn)行比對(duì)檢驗(yàn)，有助于分析事故責(zé)任 毛發(fā)的形態(tài)結(jié)構(gòu)、血型、同工酶型、DNA多態(tài)性及無(wú)機(jī)元素含量等均具有個(gè)體特征，可作為個(gè)人識(shí)別的重要依據(jù) 1. Signifi

43、cance of Hair testing(1) Easy to fall off and stay at the scene of the crime; (2) Long-stem storage; (3) Contribute to the analysis of the responsibility of traffic accidents;(4) With individual characteristics: morphology and structure of hair, blood type, isozyme pattern, DNA polymorphism. 二毛發(fā)檢驗(yàn)需要

44、解決的問(wèn)題 區(qū)分檢材是毛發(fā)還是纖維 鑒別是人毛還是動(dòng)物毛 區(qū)別毛發(fā)來(lái)自人體何部位 檢驗(yàn)毛發(fā)的遺傳標(biāo)記及性別進(jìn)行個(gè)人識(shí)別 檢驗(yàn)毛發(fā)的損傷，推斷致傷物暴力拔出、熱作用損傷、銳器損傷、鈍器損傷2. Problems to be solved(1) Distinguish between hair and fiber; (2) Identification of human hair and animal hair;(3) Distinguish the source of hair;(4) Genetic marker and sex determination;(5) Examination th

45、e cause of damage to the hai: Pull out,sharp instrument injury, Blunt injury.三毛發(fā)確實(shí)認(rèn) 根據(jù)毛發(fā)的結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)，一般即可確認(rèn)毛發(fā) 毛發(fā)可分為毛根、毛干和毛尖三局部。 露于皮膚外的游離部稱為毛干 其游離末端漸細(xì)而尖，稱為毛尖 埋在皮膚內(nèi)的局部稱毛根 毛根始端膨大呈球狀，稱為毛球 毛球的下端凹陷，容納結(jié)締組織，稱為毛乳頭3. Hair Confirmation1) Structure of hair: hair shaft, hair root, hair tip;2) Physical and chemical p

46、roperties of hair. 在顯微鏡下，毛發(fā)的結(jié)構(gòu)由外向內(nèi)可分為三層，即毛小皮、毛皮質(zhì)和毛髓質(zhì) 毛小皮位于毛發(fā)的最外層，由極薄的角化無(wú)核扁平鱗狀上皮細(xì)胞組成，呈疊瓦狀或鱗片狀重疊，其游離端指向毛尖，形成具有特征的紋理 毛皮質(zhì)位于毛小皮的內(nèi)側(cè)，由縱行排列的長(zhǎng)紡錘形細(xì)胞組成，有散在分布的色素 毛髓質(zhì)位于毛干中心，由退化的多角形上皮細(xì)胞組成，細(xì)胞內(nèi)有黑色素顆粒和空泡 毛發(fā)的主要組成成分為角蛋白中的硬角蛋白，其理化性質(zhì)穩(wěn)定 毛發(fā)的角蛋白中含有3-5的硫(S)，故燃燒時(shí)發(fā)出特殊的臭味 毛發(fā)中還含鈣、鎂、鋅、銅、鐵、磷等20多種微量的無(wú)機(jī)元素，其含量具有個(gè)體差異，可供個(gè)人識(shí)別 有的纖維外形與毛發(fā)

47、很相似，故疑似毛發(fā)的檢材，首先要區(qū)別是不是毛發(fā) 纖維無(wú)上述毛發(fā)的結(jié)構(gòu)，且其組成成分亦與毛發(fā)不同四人毛與動(dòng)物毛的鑒別 在確認(rèn)檢材為毛發(fā)后，要鑒別是人毛還是動(dòng)物毛4. Identification of human hair and animal hair 五毛發(fā)的個(gè)人識(shí)別 測(cè)定毛發(fā)的性別、遺傳標(biāo)記及微量元素的含量可進(jìn)行個(gè)人識(shí)別 毛發(fā)性別的測(cè)定方法主要有： 從毛根中提取DNA，用Y染色體特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，根據(jù)有無(wú)Y染色體特異的擴(kuò)增產(chǎn)物來(lái)判斷其性別 采用能同時(shí)特異擴(kuò)增X和Y染色體上的牙釉基因(amelogenin)的引物對(duì)檢材DNA進(jìn)行擴(kuò)增，同時(shí)檢出X和Y兩條特異性擴(kuò)增產(chǎn)物片段者為男性，只檢

48、出一條X特異性片段者為女性 用Y染色體特異性DNA探針與從毛根中提取的目的DNA作Southem雜交，根據(jù)有無(wú)Y染色體特異性的DNA序列判斷性別 毛發(fā)中含有ABH血型物質(zhì)，且不易被破壞，可長(zhǎng)期保存 采用解離試驗(yàn)、紅細(xì)胞粘連試驗(yàn)及免疫組化(ABC)法等方法，可檢測(cè)毛發(fā)的ABO血型 對(duì)有毛根的毛發(fā)，可從毛根部有核細(xì)胞中提取DNA，用PCR方法對(duì)其進(jìn)行STR位點(diǎn)或VNTR位點(diǎn)的擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性(Amp-FLP)分析。假設(shè)能獲得足夠量的DNA，還可作DNA指紋的檢測(cè) 對(duì)無(wú)毛根的毛發(fā)檢材，可從毛干細(xì)胞中提取其線粒體DNA(mtDNA)，用DNA測(cè)序技術(shù)對(duì)mtDNA-D環(huán)區(qū)域的堿基序列多態(tài)性作測(cè)序分析，

49、可進(jìn)行個(gè)人識(shí)別 通過(guò)中子活化分析測(cè)定毛發(fā)中的微量元素含量也可進(jìn)行毛發(fā)的個(gè)人識(shí)別。一般男性毛發(fā)氯、硫、鐵等元素含量高于女性，而鈣、鎂、鋅等元素含量那么低于女性 根據(jù)毛發(fā)的形態(tài)特征及外表附著物等可推測(cè)毛發(fā)供者的年齡、職業(yè)和種族等 有時(shí)根據(jù)案情的需要，還要進(jìn)行人體各部位毛發(fā)的鑒別及毛發(fā)損傷鑒定等 對(duì)某些疑為金屬性毒物中毒的案件，有時(shí)通過(guò)毛發(fā)的毒物含量分析，可判斷是否中毒5. Individual Identification of Hair(1) Sex determination; (2) Genetic marker detection;(3) Trace element content det

50、ection.親子鑒定Paternity Testing一、親子鑒定的定義 應(yīng)用醫(yī)學(xué)及生物學(xué)的理論和技術(shù)，通過(guò)對(duì)遺傳特征的檢驗(yàn)來(lái)判斷假設(shè)父母與子女間的親緣關(guān)系稱為親子鑒定或親權(quán)鑒定(disputed parentage testing)。. Definition Parentage testing: Based on the theory and technology of medicine and biology, analyzing the relationship between suppose parents and children by detecting the genetic

51、characteristics. 自從人類社會(huì)中以婚姻關(guān)系為紐帶的家庭出現(xiàn)以來(lái)，父母與子女間血緣關(guān)系的鑒定問(wèn)題也相應(yīng)產(chǎn)生。 早期人們主要是根據(jù)孩子的臉型、外貌及指紋等來(lái)作出判斷 “滴骨驗(yàn)親法三國(guó) “合血法宋慈等記載 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)及遺傳學(xué)的開展，為親子鑒定提供了理論依據(jù)和技術(shù)血型、電泳、DNA(電泳、STR及VNTR)。Early paternity testing: based on the childrens faces, appearance and fingerprints, etc. Modern paternity testing: Blood type, DNA fingerprint

52、 analysis (RFLP), STR, SNPs, etc. 血型作為遺傳標(biāo)記(genetic marker，GM)被用于親子鑒定。但由于血型的多態(tài)性有限，單靠血型檢驗(yàn)結(jié)果來(lái)判定親權(quán)關(guān)系，一般只能作出排除的結(jié)論，難以作出肯定的結(jié)論。 用DNA指紋分析技術(shù)，通過(guò)分析具有高度個(gè)體特異性的DNA限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(RFLP)進(jìn)行親權(quán)鑒定，大大地提高了親權(quán)鑒定的否認(rèn)機(jī)率，當(dāng)親權(quán)不能否認(rèn)時(shí)，大多數(shù)情況下能夠肯定親權(quán)關(guān)系，使親權(quán)鑒定取得了劃時(shí)代的進(jìn)展10ml新鮮血 PCR技術(shù)的建立為分析DNA多態(tài)性提供了新的方法 應(yīng)用DNA指紋技術(shù)和PCR技術(shù)分析DNA多態(tài)性STR、VNTR已成為親權(quán)鑒定的主要方

53、法親權(quán)鑒定案件涉及情況： 確定非婚生子女的生父或否認(rèn)被誤控的“父親包括二奶，領(lǐng)導(dǎo)超生 家庭糾紛，疑心子女不是親生廣州打工 強(qiáng)奸致孕，需證實(shí)胎兒的生父 疑心醫(yī)院產(chǎn)房抱錯(cuò)嬰兒； 拐買兒童案件，確認(rèn)孩子的生父及生母； 失散家庭成員血緣關(guān)系確實(shí)認(rèn)； 移民案件； 遺產(chǎn)繼承； 確定人工受精及試管嬰兒的生父。Paternity cases(1) Paternity determine; (2) Individual recognition; (3) Family disputes;(4) Pregnant by rape;(5) Confirm separated family members;(6) Ca

54、ses of child trafficking;(7) Immigration cases;(8) Heritage disputes;(9) Abduction;(10) Artificial insemination. 二、親子關(guān)系鑒定的原那么 人類的遺傳特征可分為兩大類： 一類是由等位基因控制，與環(huán)境因素?zé)o關(guān)的單純的遺傳特征，如血型與DNA多態(tài)性 另一類是由基因和環(huán)境因素(包括營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)、疾病)等共同作用后形成的遺傳特征，如體形、容貌、膚色、頭發(fā)顏色、耳毛、耳垢、短指、多指畸形及皮膚紋理等，以及推算受精期 單純的遺傳特征遵循盂德爾定律遺傳，故親權(quán)鑒定主要依據(jù)單純的遺傳特征. Princi

55、ples of Parentage testing Mendemian Laws: 1)The Law of Segregation;2) The Law of Independent Assortment. 雙等位基因遺傳標(biāo)記親子鑒定的遺傳原理可推廣到多等位基因的遺傳標(biāo)記，如STR系統(tǒng) 單純遺傳特征的遺傳規(guī)律是： 孩子不可能有父母均無(wú)的基因 孩子必定得到父母雙方的一對(duì)等位基因中的一個(gè) 只有在父母雙方均攜帶一個(gè)相同基因的情況下，孩子才有可能為該基因的純合子 當(dāng)父母的一方或雙方為某個(gè)基因的純合子時(shí)，這個(gè)基因必定要在孩子中表現(xiàn)出來(lái)三、父權(quán)否認(rèn) 當(dāng)被控父親(alleged father，AF)與孩子

56、的遺傳標(biāo)記不符合盂德爾遺傳定律時(shí)，可否認(rèn)他們之間的血緣關(guān)系，稱父權(quán)否認(rèn)(exclusion of paternity). Exclusion of Paternitywhen the genetic markers of the alleged father (AF) and children do not meet Mendemian Laws, we could deny the blood relationship between them. 以下四種情況可以否認(rèn)父權(quán)： 1當(dāng)孩子有某種遺傳標(biāo)記，而母親沒(méi)有，那么該遺傳標(biāo)記必來(lái)自生父，如果AF沒(méi)有這種遺傳標(biāo)記，那么可否認(rèn)其為生父。例如孩子為

57、A型，母親為B型或O型，那么B型或O型的AF被否認(rèn)為孩子的生父 2如果AF查出一對(duì)遺傳標(biāo)記，其中之一必定遺傳給他的孩子，假設(shè)孩子沒(méi)有這兩種遺傳標(biāo)記中的一種，那么該AF不是孩子的生父。例如AF為AB型，孩子是O型，可否認(rèn)AF是孩子的生父 3孩子是某遺傳標(biāo)記的純合子，但AF沒(méi)有這種遺傳標(biāo)記，可否認(rèn)其為孩子的生父。例如孩子為Hp1-1型，AF是Hp22型，那么AF不是孩子的生父 4孩子缺乏某種遺傳標(biāo)記(如M-)，AF是該遺傳標(biāo)記的純合子(如MM)，可否認(rèn)AF為孩子的生父 測(cè)定遺傳標(biāo)記的數(shù)目越多，否認(rèn)父權(quán)的時(shí)機(jī)就越大理論上只要有一個(gè)遺傳標(biāo)記的遺傳不符合孟德爾遺傳規(guī)律即可否認(rèn)父權(quán) 但由于血型及DNA多態(tài)

58、性有遺傳變異(如孟買型，Cis-AB型等)，某些血型系統(tǒng)存在沉默基因(如Hp0基因等)，為了防止錯(cuò)判，一般要求有兩個(gè)或兩個(gè)以上的遺傳標(biāo)記參與否認(rèn)，才能作出排除父權(quán)的結(jié)論 假設(shè)單側(cè)STR位點(diǎn)的DNA多態(tài)性，最好有三個(gè)或三個(gè)以上的位點(diǎn)參與否認(rèn)四、父權(quán)時(shí)機(jī) 父權(quán)時(shí)機(jī)(probability of aternity)指不能否認(rèn)AF為孩子的生父時(shí)，其與孩子有親緣關(guān)系的可能性。. Probability of AternityWhen can not negate the AF was the childs father, we could calculate the possibility of genetic relationships between them. 例如，孩子的某些基因必定來(lái)自生父，當(dāng)AF有這些基因時(shí)，不能排除他是孩子生父的可能。 根據(jù)基因頻率，可計(jì)算出 父權(quán)指數(shù)(PI) 及相對(duì)父權(quán)時(shí)機(jī)(RCP)。 檢查遺傳標(biāo)記的數(shù)目越多，那么RCP值越高，AF是孩子生父的可能性也就愈大。 1. Paternity Index (PI) and Combined Paternity Index (CPI); 2. Relative Chance of paterity (RCP). 父權(quán)指數(shù)(PI)是AF具備必需基因(obligatory gene，OG)或必需單倍型成為孩子生父的時(shí)機(jī)與