1、Department of Microbiology, Harbin Medical UniversityMedical Microbiology醫(yī) 學(xué) 微 生 物 學(xué)Department of Microbiology, GMC第9章 呼吸道傳播的病原微生物第8節(jié)呼吸道途徑傳播的其他細(xì)菌第9章 呼吸道傳播的病原微生物1、棒狀桿菌屬Corynebacterium白喉棒狀桿菌（Cdephtheriae）類白喉桿菌（diphtheroid bacilli） 白喉棒狀桿菌Corynebacterium. dephtheriae形態(tài)與染色革蘭陽性，細(xì)長彎曲，一端或兩端膨大呈棒狀美藍(lán)或奈瑟染色，菌體兩端

2、或一端可見著色較深的異染顆粒變異、抵抗力變異形態(tài)、菌落和毒力S型變?yōu)镽型抵抗力較其他無芽孢細(xì)菌強(qiáng)對青霉素及廣譜抗生素敏感，對磺胺不敏感致病物質(zhì)白喉毒素（diphtheria toxin）索狀因子（cord factor）K抗原白喉棒狀桿菌（鼻咽腔）飛沫、污染物品鼻 咽喉氣管局部細(xì)菌和毒素的作用灰白色假膜粘膜水腫及假膜脫落，引起呼吸道阻塞，甚至窒息死亡。外毒素入血毒血癥心肌肝腎上腺外周神經(jīng)內(nèi)臟出血心肌炎軟腭麻痹 聲嘶 腎上腺功能障礙2-7天潛伏期所致疾?。喊缀砻庖咝钥苟舅孛庖咤a克試驗（Schick test） 原理：毒素和抗毒素的中和試驗 防治原則人工自動免疫 人工被動免疫抗菌治療2、鮑特菌屬（

3、Bordelella）革蘭陰性小球桿菌常寄居于人和動物的上呼吸道引起人類百日咳和急性呼吸道感染百日咳鮑特菌（B. pertussis）人類百日咳的病原體臨床意義是百日咳的致病菌一年四季均可發(fā)病，冬春季多發(fā)，小兒多于成人傳播途徑：飛沫傳染源：病人潛伏期：12周致病因素：百日咳毒素(PT)、絲狀血細(xì)胞凝集素 (FHA)腺嘌呤環(huán)酶毒素(ACT)、氣管細(xì)胞毒素、 皮膚壞死毒素臨床表現(xiàn)：1.卡他期：12周，明顯卡他癥狀，傳染性強(qiáng)，感染標(biāo)本培養(yǎng)陽性率高2.痙攣期：14周，陣發(fā)性劇烈咳嗽，直至咳出粘稠的痰液或嘔吐為止3.恢復(fù)期：12周，陣咳減輕，漸趨停止生物學(xué)特性革蘭陰性短小桿菌無芽孢，有莢膜支氣管鮑特菌、

4、鳥鮑特菌有鞭毛專性需氧，最適溫度35 ， 最適pH6.87.0百日咳鮑特菌革蘭染色 O抗原為共同抗原，K抗原的因子7為百日咳、副百日咳和支氣管炎鮑特菌所共有。經(jīng)多次傳代后，菌落變?yōu)榇植诙识嘈涡?；失去莢膜變?yōu)闊o毒株。變異：相位變異等抵抗力弱，但在低溫能生存，對紫外線敏感，日光照射60分鐘可死亡。 培養(yǎng)：B-G培養(yǎng)基，菌落特點(diǎn)有珠光色澤的菌落。引起百日咳檢查：鼻咽拭子或咳碟法防治：DPT三聯(lián)疫苗我國目前采用百日咳桿菌死菌苗與白喉、破傷風(fēng)類毒素進(jìn)行人工主動免疫，取得良好預(yù)防效果3、軍團(tuán)菌屬（Legionella）軍團(tuán)菌是引起軍團(tuán)菌病的病原體首發(fā)于1976年的美國一次軍人聚會，故稱作軍團(tuán)病 1982

5、年,在我國南京首次證實了軍團(tuán)菌病。 分類軍團(tuán)菌屬(Legionella) 屬于軍團(tuán)菌科（Legionellaceae）常見的與人類疾病有關(guān)的軍團(tuán)菌：嗜肺軍團(tuán)菌（Legionella pneumophila）米克戴德軍團(tuán)菌（L. micdadei）長灘軍團(tuán)菌（L. longbeachae）杜莫夫軍團(tuán)菌（L. dumoffii）波茲曼軍團(tuán)菌（L. bozemanii） 培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求高專性需氧需2.55CO2生長緩慢常用培養(yǎng)基及菌落特征 BCYE培養(yǎng)基：灰白色、圓形光滑濕潤菌落 F-G培養(yǎng)基：針尖大小、黃色熒光軍團(tuán)菌菌落形態(tài)(CYE瓊脂培養(yǎng)基)抗原結(jié)構(gòu)抗原：具有型特異性 軍團(tuán)菌病約90%的是由嗜

6、肺軍團(tuán)菌所致,已發(fā)現(xiàn)15個血清型 ，其中以Lp1血清型最常見, Lp6次之。抵抗力分布廣泛、抵抗力強(qiáng)水中存活時間長軍團(tuán)菌病的主要污染源是供水系統(tǒng)及冷卻塔和空調(diào)系統(tǒng) 臨床意義致病物質(zhì)：內(nèi)毒素、外毒素、侵襲性酶傳染途徑：呼吸道（吸入含有軍團(tuán)菌的氣溶膠）所致疾?。很妶F(tuán)菌病引起肺炎型和非肺炎型(龐蒂亞克熱Pontiac fever)感染 肺炎型:多器官損害，肺部、消化道及神經(jīng)系統(tǒng)癥狀及體征，致死率高。醫(yī)院感染可高達(dá)23% 。 非肺炎型（類似感冒）慢性心、肺、腎病變、艾滋病或接受免疫抑制劑者 易發(fā)本病，且死亡率高達(dá)45%免疫性：感染者血清中出現(xiàn)特異性IgG、 IgM抗體臨床意義引起肺炎型和非肺炎型(龐蒂

7、亞克熱Pontiac fever)感染肺炎型：多器官損害，肺部、消化道及神經(jīng)系統(tǒng)癥 狀及體征，致死率高醫(yī)院感染可高達(dá)23% 慢性心、肺、腎病變、艾滋病或接受免疫抑制劑者 易發(fā)本病，且死亡率高達(dá)45%臨床意義 空氣乳膠微粒傳播 發(fā)病機(jī)制：內(nèi)毒素和細(xì)胞產(chǎn)生的多種酶 裂解紅細(xì)胞 消化卵黃囊定期清洗空調(diào) 預(yù)防軍團(tuán)菌病標(biāo)本采集：臨床標(biāo)本：痰、氣管分泌物、胸水和血液為主。病理組織標(biāo)本：必須制成懸液，再進(jìn)行涂片和分離培養(yǎng)。環(huán)境污染標(biāo)本：應(yīng)先濃縮再接種。微生物學(xué)檢驗檢驗程序 標(biāo)本（痰、支氣管分泌物、血液、） 涂片染色鏡檢 （Giemsa染色） 分離培養(yǎng)（BEYE瓊脂）鑒定試驗結(jié)果報告形態(tài)染色菌落特征氧化酶、觸

8、酶熒光抗體染色等 分離培養(yǎng)：營養(yǎng)要求苛刻，生長緩慢生長溫度為35最適pH6.77.0初次分離必須采用(BCYE)35天可形成12mm直徑的光澤菌落微生物檢驗核酸檢測：是快速特異的方法，采用DNA探針及PCR擴(kuò)增rRNA的方法均可用于軍團(tuán)菌的快速診斷抗體檢測：是檢測軍團(tuán)菌感染臨床常用手段，常采用方法：IFA、MAA、TAT、ELISA法等血清學(xué)試驗檢測指標(biāo)：檢測患者血清中特異性抗體方法：ELISA意義： 檢測特異性IgM：診斷軍團(tuán)菌病 檢測特異性IgG：軍團(tuán)菌病流行病學(xué)調(diào)查軍 團(tuán) 菌 感 染 診 斷 試 驗試驗敏感性(%)特異性(%)評注培養(yǎng)70100參考方法直接免疫熒光257095不推薦常規(guī)應(yīng)

9、用間接免疫熒光709099只用于嗜肺軍團(tuán)菌血清群1酶標(biāo)記免疫709099乳膠凝集55908599血清學(xué)（間接免疫熒光）708095輔助培養(yǎng) 適 應(yīng) 癥：軍團(tuán)菌病、肺炎支原體肺炎、肺炎衣原體肺炎、沙眼衣原體結(jié)膜炎、厭氧菌所致口腔感染、空腸彎曲菌腸炎、百日咳等。4、嗜血桿菌屬（Haemophilus）嗜血桿菌屬是一類革蘭陰性短小桿菌、常呈多形態(tài)性、無鞭毛、無芽胞，可形成莢膜，營養(yǎng)要求高，需要特殊物質(zhì)才能生長的一類細(xì)菌。分類嗜血桿菌屬（Haemophilus）隸屬于巴斯德菌科，嗜血桿菌屬流感嗜血桿菌（H.influenzae）副流感嗜血桿菌（H.parainfluenzae）溶血嗜血桿菌(H.hae

10、molyticus)副溶血嗜血桿菌（H.parahaemolyticus）克雷嗜血桿菌（H.ducreyi）埃及嗜血桿菌（H.aegyptius）嗜沫嗜血桿菌（H.aphrophilus）副嗜沫嗜血桿菌(H.paraphrophilus)遲緩嗜血桿菌（H.segnis）臨床意義菌種常棲部位及所致疾病流感嗜血桿菌 原發(fā)化膿性感染及繼發(fā)性感染，包括腦膜炎、鼻咽炎、關(guān)節(jié)炎、心包炎、鼻竇炎及中耳炎等。副流感嗜血桿菌口腔及陰道正常菌群，偶爾可引起心內(nèi)膜炎、尿道炎。溶血嗜血桿菌鼻咽部正常菌群，常引起兒童上呼吸道感染。副溶血嗜血桿菌口腔、咽部正常菌群，偶可引起咽炎、化膿性口腔炎和心內(nèi)膜炎杜克雷嗜血桿菌軟下疳

11、，為性傳播病菌。常引起外陰膿皰、潰瘍、淋巴結(jié)腫大。埃及嗜血桿菌急性亞急性結(jié)膜炎、兒童巴西紫癜熱嗜沫嗜血桿菌咽部正常菌群、牙菌斑中常見菌、偶致心內(nèi)膜炎和腦膿腫副嗜沫嗜血桿菌咽部及陰道正常菌群，偶可引起亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎、敗血癥、甲溝炎、腦膿腫、腦膜炎。 幾種主要嗜血桿菌常棲部位及所致疾病生物學(xué)特性 G-短小球桿菌呈雙球形或短絲狀或多形性無芽孢、無鞭毛有毒菌株形成莢膜以流感嗜血桿菌（H.influenzae）為例1.形態(tài)與染色 流感嗜血桿菌培養(yǎng)基中需加入血液，以提供X因子和V因子（巧克力色培養(yǎng)基） X因子血紅素 V因子輔酶或輔酶菌落光滑、無色透明、露滴狀初次培養(yǎng)需要CO2培養(yǎng)“衛(wèi)星現(xiàn)象”衛(wèi)星現(xiàn)象

12、流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在血平板上共同孵育時，由于后者能合成較多的V因子，在金黃色葡萄球菌菌落周圍生長的流感嗜血桿菌的菌落較大，離金黃色葡萄球菌菌落越遠(yuǎn)的越小。致病性呼吸道常見菌對人有致病作用的代表菌種是流感嗜血桿菌杜克嗜血桿菌、埃及嗜血桿菌也是致病其余菌種多為條件致病菌根據(jù)莢膜抗原分ABCDEF六型，B型毒力最強(qiáng)可產(chǎn)生自溶酶致病物質(zhì)：莢膜、菌毛、內(nèi)毒素、 IgA蛋白酶所致疾病 原發(fā)感染：腦膜炎、鼻咽炎等，多見于兒童 繼發(fā)感染：鼻竇炎等，多見于成人微生物學(xué)檢查標(biāo)本采集檢驗程序抗原檢測及核酸檢測分離培養(yǎng)與鑒定藥物敏感試驗標(biāo)本采集原則在疾病早期采取標(biāo)本，立即送檢。在取標(biāo)本時以肉湯濕潤，防止干燥

13、。對心內(nèi)膜炎、患者取血液標(biāo)本。痰液標(biāo)本，應(yīng)洗滌、消化，再接種。DNA探針雜交（快速檢測）血液腦脊液膿汁痰 分離培養(yǎng)(巧克力瓊脂) 涂片、鏡檢莢膜腫脹試驗（初步報告）標(biāo)記抗體檢測抗原涂片、莢膜腫脹試驗（初步報告）菌落形態(tài)、衛(wèi)星現(xiàn)象、血清學(xué)現(xiàn)象報告結(jié)果 嗜血桿菌的檢驗程序增菌培養(yǎng)35 5-10%CO2X、V因子需求試驗吲哚、尿素酶、鳥氨酸脫羧酶（生物分型）分離培養(yǎng)培養(yǎng)條件：需要X、V因子營養(yǎng)要求高生長溫度為35血瓊脂平板培養(yǎng)基巧克力瓊脂培養(yǎng)基菌落特征：巧克力瓊脂培養(yǎng)基小、無色透明菌落 流感嗜血桿菌巧克力瓊脂養(yǎng)基菌落 鑒定 培養(yǎng)需要X、V因子菌落形態(tài)衛(wèi)星現(xiàn)象衛(wèi)星現(xiàn)象(satellite phenom

14、enon) 衛(wèi)星現(xiàn)象流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在血平板上共同孵育時，由于后者能合成較多的V因子，在金黃色葡萄球菌菌落周圍生長的流感嗜血桿菌的菌落較大，離金黃色葡萄球菌菌落越遠(yuǎn)的越小。嗜血桿菌因子溶血發(fā)酵XV葡萄糖蔗糖乳糖甘露醇木糖觸酶CO2生長ONPG流感嗜血桿菌+-+-D+-副流感嗜血桿菌-+-+-+-DDD溶血嗜血桿菌+-D+-副溶血嗜血桿菌-+-+-注：D為不同結(jié)果嗜血桿菌屬中種的特征鑒定依據(jù)革蘭陰性小桿菌、多形性培養(yǎng)采用巧克力色培養(yǎng)基，CO2培養(yǎng)血平板上有“衛(wèi)星現(xiàn)象”X、V因子需求試驗5、克雷伯菌屬 Klebsiella肺炎克雷伯菌肺炎亞種引起多種感染，有肺炎、肺膿腫、敗血癥、腦膜炎鼻炎亞種（臭鼻桿菌）慢性萎縮性鼻炎鼻硬結(jié)亞種（鼻硬節(jié)桿菌）慢性肉芽腫樣病變肺 炎 衣 原 體（只有一個血清型：TWAR株）（一）生物學(xué)特性： 1、原體平均直徑0.38um，梨形，有周漿間隙，原體無質(zhì)粒DNA； 2、