、固相萃取基本原理與操作1、固相萃取吸附劑與目標(biāo)化合物之間的作用機(jī)理固相萃取主要通過(guò)目標(biāo)物與吸附劑之間的以下作用力來(lái)保留/吸附的1）疏水作用力：如C18、C8、Silica、苯基柱等2）離子交換作用：SAX,SCX,COOH、NH2等3）物理吸附:Florsil、Alumina等2、pH值對(duì)固相萃取的影響pH值可以改變目標(biāo)物/吸附劑的離子化或質(zhì)子化程度。對(duì)于強(qiáng)陽(yáng)/陰離子交換柱來(lái)講，因?yàn)槲絼┍旧硎峭耆x子化的狀態(tài)，目標(biāo)物必須完全離子化才可以保證其被吸附劑完全吸附保留。而目標(biāo)物的離子化程度則與pH值有關(guān)。如對(duì)于弱堿性化合物來(lái)講，其pH值必須小于其pKa值兩個(gè)單位才可以保證目標(biāo)物完全離子化，而對(duì)于弱酸性化合物，其pH值必須大于其pKa值兩個(gè)單位才能保證其完全離子化。對(duì)于弱陰/陽(yáng)離子交換柱來(lái)講，必須要保證吸附劑完全離子化才保證目標(biāo)物的完全吸附，而溶液的pH值必須滿足一定的條件才能保證其完全離子化。3、固相萃取操作步驟及注意事項(xiàng)針對(duì)填料保留機(jī)理的不同（填料保留目標(biāo)化合物或保留雜質(zhì)），操作稍

有不同。1）填料保留目標(biāo)化合物固相萃取操作一般有四步（見圖1）:0活化----除去小柱內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。（注意整個(gè)過(guò)程不要使小柱干涸）0上樣----將樣品用一定的溶劑溶解，轉(zhuǎn)移入柱并使組分保留在柱上。（注意流速不要過(guò)快，以1ml/min為宜，最大不超過(guò)5ml/min）0淋洗----最大程度除去干擾物。（建議此過(guò)程結(jié)束后把小柱完全抽干）0洗脫----用小體積的溶劑將被測(cè)物質(zhì)洗脫下來(lái)并收集。（注意流速不要過(guò)快，以1ml/min為宜）如下圖1:

2）填料保留雜質(zhì)固相萃取操作一般有三步（見圖2）：0活化--除去柱子內(nèi)的雜質(zhì)并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。（注意整個(gè)過(guò)程不要使小柱干涸）0上樣--將樣品轉(zhuǎn)移入柱，此時(shí)大部分目標(biāo)化合物會(huì)隨樣品基液流出，雜質(zhì)被保留在柱上，故此步驟要開始收集（注意流速不要過(guò)快）0洗脫…用小體積的溶劑將組分淋洗下來(lái)并收集，合并收集液。（注意流速不要過(guò)快）此種情況多用于食品或農(nóng)殘分析中去除色素。如下圖2：二、固相萃取方法的建立與優(yōu)化固相萃取技術(shù)使用起來(lái)雖然比液液萃取簡(jiǎn)單，但建立一個(gè)固相萃取的方法并無(wú)快捷方式可走。建立固相萃取方法必須考慮與萃取過(guò)程相關(guān)的多種因素，歸納起來(lái)可通過(guò)下圖來(lái)了解:方法建立如下圖片1.jpg：

②萍盞初步的方法*用標(biāo)淮溶酒過(guò)SPE村F析物被洗脫的情況4用沒有基液的IS淮舞液對(duì)分析物進(jìn)行萃取卩好用標(biāo)淮溶酒過(guò)SPE村F析物被洗脫的情況4用沒有基液的IS淮舞液對(duì)分析物進(jìn)行萃取卩好檢臉從基濟(jì)中萃取務(wù)折物的情況4不好口重新評(píng)怙問(wèn)題Q+JI奸屮檢測(cè)干擾物杲否與幷析物同時(shí)被洗脫屮I好屮'宓E方法卩1、初步固相萃取方法的建立建立初步的萃取方法要考慮：?選擇合適的SPE柱?選擇合適的固相萃取方法?方法的優(yōu)化2、固相萃取柱的選擇＜1）柱填料的選擇首選根據(jù)目標(biāo)化合物與干擾物的差異，如極性，分子量，pka值等，選擇合適的填料。固相萃取柱的選擇如下圖片.jpg：

2）固相萃取柱規(guī)格的選擇對(duì)于反相、正相和吸附型固相萃取柱來(lái)說(shuō)，被萃取樣品的質(zhì)量不超SPE柱填料的5%（參考值，同一種SPE柱對(duì)不同的目標(biāo)物選擇性不同，吸附容量不同）；<POcm="Ocm"Ocm?Opt?>離子交換型的固相萃取柱，必須考慮離子交換的容量。不同廠家的小柱離子交換容量稍有差異。下表附SPE小柱的容量和洗脫參數(shù)SPE柱上樣容量和洗脫體積的選擇規(guī)格最大上樣量最小洗脫體積100mg/1mL5mg規(guī)格最大上樣量最小洗脫體積100mg/1mL5mg200mg/3mL10mg500mg/6mL25mg1g/6mL50mg250pL500pL1.2mL2.4mL3、選擇合適的固相萃取方法固相萃取的保留機(jī)制可分為兩種：?吸附劑（填料）保留目標(biāo)化合物：絕大多數(shù)化合物應(yīng)用此機(jī)制，填料保留其目標(biāo)組分及少量雜質(zhì)，通過(guò)淋洗步驟去除吸附在柱上的少量雜質(zhì)，最后選擇合適的（洗脫）溶劑把目標(biāo)組分洗脫下來(lái)。根據(jù)吸附劑的保留機(jī)理可進(jìn)一步分為：（1）反相（C18,C8,CN,Phenyl,C4,C1）?分析物：非極性至中等極性

?基質(zhì)：水溶性?方法：活化：通常用水溶性有機(jī)溶劑如甲醇活化，然后用水平衡淋洗：含0-50%極性溶劑的緩沖溶液淋洗雜質(zhì)洗脫：極性或非極性溶劑洗脫目標(biāo)物(2)正相(Silica,Florisil,Diol,NH2?分析物：中等極性到強(qiáng)極性?基質(zhì)：非極性至中等極性?方法:a.活化：非極性有機(jī)溶劑b?洗脫：非極性有機(jī)溶劑如下圖片：3己烷p異辛烷*四氯甲烷*壹仿2二氯甲烷d四氫咲喃4乙醸卩乙釀乙裁4丙酮4乙臘2異丙醇4申啟那3正相落劑洗脫離」陽(yáng)離子交換(SCX,PRS,COOH)u分析物：陽(yáng)離子(堿性)化合物u方法：活化：用于非極性有機(jī)溶劑中的樣品時(shí)，可用樣品溶劑來(lái)活化；在用于極性溶劑中的樣品時(shí)，可用水溶性有機(jī)溶劑過(guò)柱后，然后用水平衡，最后再用適當(dāng)pH值的緩沖溶液進(jìn)行平衡。上樣：樣品溶液pH值要小于其pKa兩個(gè)單位(以保證其帶電荷)3?洗脫：洗脫溶液pH值要大于其pKa兩個(gè)單位(中和分析物的電荷)陰離子交換(SAX,PSA,NH2,PAX/MAX)u分析物：陰離子(酸性)化合物u方法：活化：用于非極性有機(jī)溶劑中的樣品時(shí)，可用樣品溶劑來(lái)活化；在用于極性溶劑中的樣品時(shí)，可用水溶性有機(jī)溶劑活化后，然后用水平衡，最后再用適當(dāng)pH值的緩沖溶液進(jìn)行平衡。

上樣：樣品溶液pH值要大于其pKa兩個(gè)單位（以保證其帶電荷）。3?洗脫：洗脫溶液pH值要小于其pKa兩個(gè)單位（中和分析物的電荷）。u吸附劑（填料）保留雜質(zhì)：食品中色素等雜質(zhì)的去除多用此機(jī)制。填料保留雜質(zhì)而不保留或只保留極少量的目標(biāo)組分,所以上樣后即開始收集目標(biāo)組分，最后用目標(biāo)物所在的溶劑進(jìn)一步洗脫。合并兩部分收集液。（1）活化：以樣品所在的有機(jī)溶劑進(jìn)化活化，1-2柱管體積（2）上樣：提取液轉(zhuǎn)移至柱內(nèi)，并收集流出液（3）洗脫：用樣品所在的有機(jī)溶劑進(jìn)一步洗脫，收集流出液。合并上樣和洗脫流出液。4、固相萃取方法的優(yōu)化1）影響萃取效率的因素（1）填料（固定相）一核心選擇合適的SPE柱是保證理想結(jié)果的前提。（2）洗脫溶劑的強(qiáng)度：0采用正相固定相時(shí)，溶劑強(qiáng)度隨其極性增強(qiáng)而增加；0采用反相固定相時(shí)，溶劑強(qiáng)度隨極性減弱而增強(qiáng)。（3）pH值：離子交換固定相、被分析物和干擾物質(zhì)的pKa各不相同。通過(guò)調(diào)節(jié)pH大小，可以使固定相帶電荷，被分析物帶相反電荷，而使干擾物質(zhì)不帶電荷；或者反過(guò)來(lái)，使固定相帶電荷,干擾物質(zhì)帶相反電荷，而使被分析物不帶電荷。（4）操作：控制合適的流速、活化的時(shí)不要讓柱干涸等2）常見問(wèn)題及解決方法?分析物回收率低?萃取重現(xiàn)性差

?洗脫餾分中含有干擾物?SPE柱流速降低或阻塞具體解決方案如下：A.分析物回收率低未保留？被淋洗？未被洗脫或部分洗脫?首先要把上樣液、淋洗液、洗脫液均收集，進(jìn)樣分析，確定問(wèn)題來(lái)源回收率差如下圖片：這先驢叢J；二廳肅洗濮洪脫液均收集，進(jìn)祥分析，確走問(wèn)題耒源“畀示合適，i?選擇對(duì)分析物有明顯選擇性的回收率差如下圖片：這先驢叢J；二廳肅洗濮洪脫液均收集，進(jìn)祥分析，確走問(wèn)題耒源“畀示合適，i?選擇對(duì)分析物有明顯選擇性的5PE柱*如￡柱滾有很好地被預(yù)處理石>反相柱用甲醸或乙晴處理小柱耳后咲水溥液平衡4増加洗脫溶劑體枳屮降低肓磯濬劑的含量或改變調(diào)節(jié)冼脫涓劑極性或卩臨疏水性弱的填料;陽(yáng)離子匸重現(xiàn)性差如下圖片:2）重現(xiàn)性差5PE柱員戟■B歩樣品S-N6埴料的琲攔或選輕大容童祥d洗脫液流逑過(guò)快2降低流速「控制在伽L/E齦內(nèi),最大流速不超過(guò)5nnL/min*1洗脫液流逑過(guò)快2在使用非極性滾劑之前對(duì)SPEjja紅干燥心在使用非極性滾劑之前對(duì)SPEjja紅干燥心隆低淋洗液的強(qiáng)度空勞析物在洶洗時(shí)被詵掉心―相關(guān)圖片如下：C.洗麻藹分中含有干擾物屮在柱手預(yù)處理之前用洗脫溶劑洗滌卯E柱4干擾1S未自卻E柱屮JP.第吒柱涼速降悵或陰塞心相關(guān)圖片如下：D.:SPE柱潦速降低或腿塞屮舉例說(shuō)明參考文獻(xiàn)方法用C18柱做相關(guān)藥物的凈化，過(guò)柱方法如下：分別用乙酸乙酯、甲醇和水活化小柱，然后把處理過(guò)的樣品過(guò)柱（溶劑為具一定pH值得緩

沖溶液），水淋洗小柱后，用乙酸乙酯洗脫目標(biāo)物。結(jié)果：接受液混濁狀，回收率和重現(xiàn)性都不理想，可能是什么原因呢？答案：正確的做法是要在淋洗過(guò)程結(jié)束后把小柱完全抽干。原因有二，其一因?yàn)榱芟慈軇ㄋ┡c洗脫溶劑（乙酸乙酯）不互溶，如果不抽干洗脫溶劑與目標(biāo)物不能充分作用，所以造成回收率和重現(xiàn)性都沒有保證，同時(shí)從外觀上看接受液是液混濁液；其二如果淋洗過(guò)程不抽干小柱，洗脫溶劑里會(huì)引入水（淋洗劑），對(duì)下一步濃縮造成很大的困難。相關(guān)圖片如下：H口吐滬？加2、水中的滅草松前處理方法取500ml水樣過(guò)濾，待過(guò)CleanertPEP柱（相當(dāng)于WatersHLB）凈化1）用5mL四氫咲喃洗柱子，除掉雜質(zhì)2）用5mL甲醇1mL/min活化柱子3）用5mL純水1mL/min活化柱4）500mL的水樣以5mL/min的速度過(guò)柱5）5mL純水2mL/min淋洗6）小柱真空抽干20min7）0.9mL的甲醇1mL/min淋洗，棄去淋洗液8）3mL四氫咲喃1mL/min的速度洗脫柱子，收集洗脫液濃縮定容至3mL液相檢測(cè)。結(jié)果：回收率不理想，請(qǐng)問(wèn)此方法有何問(wèn)題？答案：因?yàn)槟繕?biāo)物滅草松呈酸性，pKa=3?3,而選擇的小柱PEP是極性的。所以正確的做法是樣品在過(guò)柱之前一定要調(diào)節(jié)水樣的pH值小于等于3,使目標(biāo)物分子化，以保證目標(biāo)物能被小柱充分保留，否則在上柱的過(guò)程中容易造成“漏”的現(xiàn)象，從而造成回收率差。

三、固相技術(shù)應(yīng)用實(shí)例解析食品領(lǐng)域應(yīng)用1）動(dòng)物組織中鹽酸克侖特羅等4種仕激動(dòng)劑藥物殘留檢測(cè)（CleanertPCX,P/N:CX1506）1?實(shí)驗(yàn)材料1.1固相萃取小柱：PCX（150mg/6mL）1.2四種B-激動(dòng)劑藥物：鹽酸克侖特羅、沙丁胺醇、西馬特羅、萊克多巴胺等4種B-激動(dòng)劑藥物。試樣的制備取豬肝空白樣品，經(jīng)過(guò)液液萃取初步處理后，添加適宜濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液作為空白添加試樣。凈化依次用甲醇5mL、水5mL和30mmol/L鹽酸5mL潤(rùn)洗固相萃取小柱,將上述備用液過(guò)柱，依次用水5mL、甲醇5mL淋洗，真空抽干，用4%氨化甲醇5mL洗脫P(yáng)CX小柱，收集洗脫液于具塞玻璃試管中，50°C下氮?dú)獯蹈伞Ｔ跇右哼^(guò)柱和洗脫過(guò)程中流速控制在1mL/min左右。衍生化及檢測(cè)將上述盛有殘?jiān)木呷Ａг嚬芊湃?0C烘箱中加熱片刻，除去水分后，加入甲苯100mL和雙三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）100mL，渦旋振蕩20s,密封玻璃塞，置于80C恒溫烘箱中加熱1小時(shí)，冷卻后加入300mL甲苯，作為試樣溶液，供氣相色譜質(zhì)譜分析（色譜柱：DA-5MS,30mx0.25mmx0.25pm，P/N:1525-3002）。結(jié)果5.1回收率實(shí)驗(yàn)（精密度和準(zhǔn)確度）將豬肝空白樣品經(jīng)過(guò)液液萃取初步處理后，分別添加一定量的標(biāo)準(zhǔn)溶液，配制1pg/L、2pg/L、5pg/L、10pg/L和100pg/L五個(gè)濃度的試樣溶液，每批次內(nèi)同一濃度做5次平行實(shí)驗(yàn)，共4個(gè)批次（樣品典型回收率色譜圖見附圖）。豬肝中實(shí)驗(yàn)結(jié)果列表如下

添加濃度回收濃度平均回收值平均回收率相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（pg/L）（pg/L）0.750.67（pg/L）（%）（%）10.720.700.781.621.660.7272.405.9321.601.611.644.024.101.6381.301.2354.274.384.438.248.354.2484.804.16108.778.628.2590.2487.158.4584.452.8110091.779.1291.152.8692.6293.955.2重復(fù)性實(shí)驗(yàn)（批間誤差實(shí)驗(yàn)）：豬肝中實(shí)驗(yàn)結(jié)果列表如下添加濃度（pg/L）12510100批間平均平均平均平均平均RSD%回收RSD%回收RSD%RSD%RSD%回收率%回收率%回收率%率%率%172.405.9381.303.4984.806.1684.453.5991.152.86

275.376.1280.475.3784.747.5587.464.6890.053.86370.097.8580.806.5783.108.1783.215.3989.534.16476.734.9078.508.3582.905.1185.955.7288.275.93平均值73.656.2080.255.9583.886.7585.274.8489.754.20RSD%12.9510.799.437.005.75附圖：豬肝中0.5|jg/L、1pg/L、2pg/L、5pg/L、10pg/L和100pg/L六個(gè)濃度檢測(cè)結(jié)果總離子流圖（TIC）代表圖譜：豬肝+1ppb（PCX）2）雞蛋中三聚氰胺的檢測(cè)（CleanertPCX,P/N:CX0603）1材料和方法1.1主要儀器和試劑，色譜柱（VenusilASBC8,4.6*250mm,5pm，艾杰爾科技），混合型陽(yáng)離子交換固相萃取柱（CleanertPCX，60mg/3mL,艾杰爾科技），12位固相萃取裝置（艾杰爾科技），高效液相色譜儀；高速離心機(jī)；超聲波震蕩儀；渦旋混合器；分析天平（萬(wàn)分之一）；溶劑過(guò)濾器（帶0.45pm有機(jī)、水系過(guò)濾膜和真空泵）；乙腈HPLC級(jí)）；三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品。99.0%）；檸檬酸（分析純）；庚烷磺酸鈉（色譜級(jí)）；水（二次蒸餾水以上）。1.2色譜條件：色譜柱：VenusilASBC8，4.6*250mm，5pm；流動(dòng)相：乙腈：10mM/L檸檬酸+10mM/L庚烷磺酸鈉緩沖液=7:93（pH=3.0）

檢測(cè)波長(zhǎng)：240nm；流速：1mL/min；進(jìn)樣20pL。2實(shí)驗(yàn)部分2.1三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液配制：稱取三聚氰胺標(biāo)樣lO.Omg，加流動(dòng)相溶解定容至100mL,即得濃度為1OOmg/L的三聚氰胺標(biāo)樣溶液。將濃度為1OOmg/L的三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液分別用水稀釋成濃度為1mg/L、5mg/L、1Omg/L、15mg/L、2Omg/L的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，用0.45pm濾膜過(guò)濾后進(jìn)液相色譜檢測(cè)。2.21%三氯乙酸溶液溶液的配制稱取三氯乙酸I.OOg，加水溶解定容至1OOOmL即得。2?35%氨化甲醇的配制準(zhǔn)確量取5mL氨水和95mL甲醇，混勻后備用。2.45%醋酸鉛溶液的配制稱取5.Og醋酸鉛，加水溶解定容至1OOmL即得。2.5混合型陽(yáng)離子交換固相萃取柱(CleanertPCX60mg/3mL)的活化取CleanertPCX固相萃取柱，以3mL甲醇，3mL水依次過(guò)柱活化，棄去流出液，備用。2.5加標(biāo)樣本處理將雞蛋打開攪勻，分別稱取I.OOg雞蛋樣本置于1OmL具塞離心管中，分別加入1OOmg/L三聚氰胺標(biāo)樣溶液10川、20pil、100pl，分別得到添加濃度為1.Omg/kg、2.Omg/kg、1O.Omg/kg的樣本。往裝有上述樣本的具塞離心管中分別加入1OmL1%三氯乙酸溶液，2mL5%醋酸鉛溶液，搖勻，超聲20分鐘，8000rpm離心10分鐘，全部上清液轉(zhuǎn)入活化好的混合型陽(yáng)離子交換固相萃取柱(CleanertPCX，60mg/3mL)，依次使用3mL水，3mL甲醇淋洗，抽干，棄去淋洗液。最后用5mL5%的氨化甲醇洗脫(V/V),接收洗脫液，50r氮?dú)獯蹈?，?mL流動(dòng)相定容，0.45pm濾膜過(guò)濾后進(jìn)液相色譜檢測(cè)。另取空白雞蛋樣本1.00g，不添加三聚氰胺照上述方法處理，作為空白對(duì)照樣品。3實(shí)驗(yàn)結(jié)果:

3.1峰型與分離度3.1峰型與分離度圖片如下A雞蛋添加lDpp±n樣品國(guó)譜A由圖1A雞蛋添加lDpp±n樣品國(guó)譜A由圖1可見，用該方法處理，三聚氰胺峰型對(duì)稱尖銳，且與雜質(zhì)分離良好3?2精密度分別移取濃度為1.0mg/L、5.0mg/L的三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別連續(xù)進(jìn)樣6次，結(jié)果如表1所示。表1保留時(shí)間與峰面積的穩(wěn)定性數(shù)據(jù)國(guó)1聘蛋空白樣品和雞蛋添加Wppm的樣晶圖譜屮鷗蛋空白樣品團(tuán)譜屮濃度mg/mL指標(biāo)1#2#3#4#5#6#平均值RSD%1.0保留時(shí)間（min）18.83018.82918.82918.83818.84018.83418.8330.026峰面積898184888480844.2865.0保留時(shí)間（min）18.94918.95218.94718.94918.95018.94618.9490.011峰面積4234404384394374384361.461由表1結(jié)果可見，本方法具有很好的精密度和重現(xiàn)性。

3.3標(biāo)準(zhǔn)校正曲線表2標(biāo)準(zhǔn)校正曲線實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)濃度峰面積峰面積峰面積mg/kg第1次進(jìn)樣第2次進(jìn)樣均值1.08979845.042344043110.083284483815.012651299128220.0168918231756圖2淞度竺堅(jiān)壷暫的回歸曲唆#圖2淞度竺堅(jiān)壷暫的回歸曲唆#y~S7.a38x-13.672穢=0.^23.4添加回收率表3添加濃度與回收率數(shù)據(jù)添加濃度(mg/kg)峰面積計(jì)算含量回收率(%)1.019.91.158892115.891.021.01.214532121.452.041.72.261587113.082.040.82.216062110.8010.0188.89.70224797.0210.0219.611.26018112.60

由表3可見，本方法檢測(cè)雞蛋中三聚氰胺回收率較好。4結(jié)論通過(guò)上述實(shí)驗(yàn)可見，運(yùn)用本方法測(cè)定雞蛋中三聚氰胺，基質(zhì)凈化效果好，雜質(zhì)干擾小，色譜峰型良好對(duì)稱度高，操作簡(jiǎn)單方便，和準(zhǔn)確度高等優(yōu)點(diǎn)，非常適用于雞蛋中三聚氰胺的檢測(cè)。[2010-9-1512:53:21Lasteditbypjs123]儀器專場(chǎng)展示：離子色譜色譜柱離子色譜柱關(guān)鍵詞：固相萃取原理及應(yīng)用萃取技術(shù)2、環(huán)境檢測(cè)應(yīng)用1)水中酚類檢測(cè)(CleanertPEP,P/N:PE0603)1實(shí)驗(yàn)材料：SPE小柱：CleanertPEP500mg/6mL7種酚類：苯酚，4-硝基酚，間甲酚，2-氯酚，2,4-二氯酚，2,4,6-三氯酚，五氯酚2實(shí)驗(yàn)過(guò)程樣品前處理方法活化：依次用5mL甲基叔丁基醚(10:90,V/V)、5mL甲醇活化富集柱、5mL去離子水活化CleanertPEP柱，5mL/min上樣：1L的水樣過(guò)柱，＜5mL/min淋洗：10mL去離子水淋洗小柱，5mL/min,然后真空抽干20min洗脫：2mL甲醇/甲基叔丁基醚(10:90,V/V)分兩步洗脫，收集洗脫液至尖嘴瓶中濃縮：將收集的2mL洗脫液，氮?dú)鉂饪s至1mL色譜條件色譜柱：VenusilMPC18(4.6*150,5ym)流動(dòng)相：A：1%乙酸B：1%乙酸甲醇檢測(cè)器：UV檢測(cè)器梯度洗脫程序：時(shí)間流動(dòng)相比例流速(mL/min時(shí)間流動(dòng)相比例流速(mL/min)檢測(cè)波長(zhǎng)(nm)0-15min0-15minA:B=50:50127515-30minA:B=15:851.8295US圖1.七種酣的色譜圖心注；h苯酣2415-30minA:B=15:851.8295US圖1.七種酣的色譜圖心注；h苯酣24雀基蜀3；間甲配4、2-氮酣樂(lè)2,4-二氯酚E.2.4.S-Z：氯殽幾五氯蜀屮圖片如下:-OK*』?匕實(shí)驗(yàn)結(jié)果表1.七種酚在水中的添加回收率見表表1.1加標(biāo)23平均值標(biāo)準(zhǔn)偏差平均回收率(%)苯酚1.3671.5411.5241.4770.096100.34-硝基酚1.2291.3081.4301.3220.10190.0間甲酚1.2941.5401.5481.4610.144106.32-氯酚0.5270.6840.6410.6170.081100.62,4-二氯酚1.3051.6131.6211.5130.18092.82,4,6-三氯酚1.3651.6091.5111.4950.12390.3五氯酚1.2591.4871.4721.4060.12895.6七種酚類在水中的添加回收率結(jié)果PE0603)2)水中的多環(huán)芳烴固相萃取方法(CleanertPEP,P/N:PE0603)1.材料1.1目標(biāo)物成分萘，苊，苊烯，芴，菲，蒽，熒蒽，芘，屈，苯并(a)蒽，苯并(k)熒蒽，苯并(a,h)熒蒽，苯并(a)芘，苯并(g,h,i)芘，茚并(1,2,3-cd)芘1.2.SPE柱：CleanertPEP（60g/3mL）樣品處理：1L水中加入20mL10%的硝酸SPE方法1）活化：5mL異丙醇和5mL水分別依次活化PEP柱2）上樣：把處理好的水樣過(guò)PEP柱3）淋洗：用5mL淋洗液（300mL水+700mL甲醇+2.1gNa2HPO4+2.04gKH2PO4）淋洗4）抽干：抽真空干燥柱管30min5）洗脫：用4mL洗脫液（90mL異丙醇+10mL冰醋酸+200mL甲苯，加入到1L石油醚中）,混合均勻洗脫，收集洗脫液6）濃縮，定容色譜條件：色譜柱：VenusilPAH專用柱（4.6x250mm，5pm,200A）樣品：溶于MeOH:CH2Cl2（1:1）16PAHs標(biāo)品，用MeOH:CH2Cl2（1:1）稀釋10倍流速：1.2mL/min進(jìn)樣量：10pL柱溫：30°C波長(zhǎng)：254nm甲醇/水線性梯度洗脫，梯度表如下T(min)MeOH(%)H2O(%)0851528515795540955圖片如下■Il?1iII,1.kJj1；.AAZV/V2團(tuán)1壓種劣環(huán)芳姪供試話色譜團(tuán)41曠叢；潔；今：荷烯f二氫危；4,^；5\菲；疔、恵I..7＞熒蔥;SvtE;9、苯并辺)恵；1CK屈；1.1爐苯并(匕)熒；12、苯并Cki熒弭13\苯并\a)?r.j14-,苯并(ghi：1;1久二苯并〔jh.)蔥：1方、煢并Jl!3?'3-cd)-'tE*:3)水中硝基苯的固相萃取方法(CleanertPEP,PIN:PE0603)SPE柱：CleanertPEP(500mg/6mL)樣品制備：分析前應(yīng)先調(diào)節(jié)水樣pH值為中性，向每份水樣中加人甲醇使甲醇濃度為0.5%?；靹?。SPE方法：3.1PEP柱活化：將PEP柱置于固相萃取裝置的針座圈上，用3mL正己烷預(yù)洗萃取柱，加人5mL甲醇，在甲醇完全流過(guò)萃取柱前加入10mL試劑水，使柱床處于濕潤(rùn)和活化狀態(tài)。3.2樣品的富集：根據(jù)水樣濃度準(zhǔn)確量取適量水樣于分液漏斗中，開啟固相萃取裝置真空系統(tǒng)，使水樣連續(xù)通過(guò)活化過(guò)的萃取柱保持流速不超過(guò)5mL/min進(jìn)行萃取，在萃取過(guò)程中要始終保持柱床上至少有1cm高水樣。當(dāng)所有樣品都通過(guò)萃取柱后，用10mL超純水沖洗分液漏斗內(nèi)壁，繼續(xù)真空抽吸20min。3.3干燥柱預(yù)處理：向帶篩板的干燥管中加入5g處理過(guò)無(wú)水硫酸鈉，使用前分別用10mL丙酮和正己烷，再以10mL丙酮洗以凈化干燥柱3.4萃取柱的洗脫：保