實(shí)驗(yàn)二果蠅的性別鑒定、性狀觀察及飼養(yǎng)方法一、實(shí)驗(yàn)原理

普通果蠅（Drosophilamelenogaster）為雙翅目昆蟲，具完全變態(tài)，與家蠅是不同的種。作為實(shí)驗(yàn)材料的優(yōu)點(diǎn)是：生活史短，生長(zhǎng)迅速，每12天左右即可完成一個(gè)世代；繁殖能力較強(qiáng)，每只受精的雌蠅約可產(chǎn)卵400-500個(gè)，因此在短時(shí)間內(nèi)即可獲得多數(shù)子代，有利于遺傳分析；容易飼養(yǎng)，飼料如玉米粉簡(jiǎn)便易得；突變性狀多達(dá)400以上，且多數(shù)是形態(tài)變異，便于觀察。因此在遺傳學(xué)研究中得到廣泛應(yīng)用，尤其在基因分離、連鎖、交換等二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

1.了解果蠅生活史中各個(gè)階段的形態(tài)特征2.幾種常用突變型的主要性狀3.掌握果蠅的性別鑒定方法4.掌握果蠅的飼養(yǎng)管理以及培養(yǎng)基的配制方法四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和步驟

生活史的觀察

用放大鏡從培養(yǎng)瓶外觀察果蠅生活史中的四個(gè)時(shí)期。卵—幼蟲—蛹—成蟲成蟲卵蛹幼蟲

卵：孵化后的雌蠅一般在12小時(shí)后開始交配，兩天以后才能產(chǎn)卵。卵長(zhǎng)約0.5毫米，橢圓形，腹面稍扁平，在背面的前端伸出一對(duì)觸絲，它能使卵附著在食物（或瓶壁）上，不致深陷到食物中去。

幼蟲：幼蟲從卵中孵化出來后，經(jīng)過兩次蛻皮到第三齡期，此時(shí)體長(zhǎng)可達(dá)4-5毫米，肉眼觀察下可見一端稍尖為頭部，并且有一黑點(diǎn)即口器；稍后有一對(duì)半透明的唾腺管向后延伸，然后匯合成一條導(dǎo)管通向消化道。神經(jīng)節(jié)位于消化道前端的上方。通過體壁，還可以看到一對(duì)生殖腺位于身體后半部的上方兩側(cè)，精巢較大，外觀為一明顯的黑色斑點(diǎn)，卵巢則較小，熟悉觀察后可借以鑒別雌雄。2.幾種常見突變類型的觀察

突變名稱基因符號(hào)形狀特征染色體上座位白眼W復(fù)眼白色X1.5棒眼B復(fù)眼橫條紋,小眼數(shù)少X57.0黑檀體e身體呈烏黑色,黑亮ⅢR70.7黑體b體黑色,比黑檀體深ⅡL48.5黃體y全身呈淺橙黃色X0.0殘翅vg翅明顯退化,部分殘留ⅡR67.0不能飛焦剛毛Sn3剛毛卷曲如燒焦?fàn)頧21.0野生型(+)突變型Eyecolor：（w）Eyecolor（v-朱紅眼）Eyeshape（B）Wingsize（m-小翅）Wingshape（Cy-卷曲翅）Wingshape（vg）Cv-無橫隔脈f-叉剛毛腹部尖端細(xì)長(zhǎng)腹部尖端呈鈍圓形第一對(duì)足的跗節(jié)基部：性梳3.果蠅雌雄鑒別果蠅雌雄外形判別（體形大?。┐菩鄹共矿w節(jié)數(shù)目雌果蠅6節(jié)，腹部底部為產(chǎn)卵管，呈現(xiàn)圓錐狀凸出。腹部體節(jié)數(shù)目雄果蠅4節(jié)，腹部底部為交尾器，呈現(xiàn)黑色圓形外觀。雄果蠅在前肢先端具有性梳性梳性梳雌雄在幼蟲期區(qū)分較難，雌雄成蠅的區(qū)別很明顯，可以用放大鏡或直接觀察鑒別，其特點(diǎn)如下：

雌果蠅①體型較大②腹部橢圓形、末端稍尖③腹部背面外觀有5條黑色條紋④腹部腹面有6個(gè)腹片⑤無性梳⑥外生殖器的外觀比較簡(jiǎn)單雄果蠅

①體型較?、诟共磕┒蒜g圓③腹部背面有三條黑色條紋，前兩條細(xì)，后一條寬而延伸至腹面，呈一明顯的黑斑④腹部腹面有4個(gè)腹片⑤第一對(duì)足的付節(jié)基部有黑色鬃毛狀流蘇稱性梳⑥外生殖器的外觀較復(fù)雜，用低倍鏡觀察剛羽化的幼蠅，可見到明顯的生殖弧，肛上板及陽莖等。

性梳的有無是鑒別雌雄果蠅的明顯標(biāo)志之一。性狀觀察方法為了便于細(xì)致的觀察，需將果蠅進(jìn)進(jìn)行麻醉處理，可使用專用的麻醉瓶，或者以適當(dāng)大小的廣口瓶代用,麻醉時(shí)，先取下麻醉瓶塞倒立放在瓶側(cè)，再取培養(yǎng)瓶輕拍瓶壁，使果蠅落在培養(yǎng)瓶底部，用右手兩指取下培養(yǎng)瓶的棉塞（夾在指間不要放在臺(tái)上），迅速和麻醉瓶口對(duì)接緊密，左手握緊兩瓶口稍微傾斜，右手輕拍培養(yǎng)瓶將果蠅震落麻醉瓶中，然后迅速蓋好兩個(gè)瓶塞?；蛘吲囵B(yǎng)瓶在下，麻醉瓶在上，去塞對(duì)接口，達(dá)到一定數(shù)量后，迅速分別蓋好兩個(gè)瓶口。

如果用自制的麻醉瓶，可在瓶塞的棉花團(tuán)上先加幾滴乙醚，隨即迅速塞緊瓶口，果蠅對(duì)乙醚很敏感，易麻醉，約經(jīng)半分鐘，果蠅便被麻醉，麻醉的深度看實(shí)驗(yàn)要求而定（作種蠅以輕度麻醉為宜，作觀察可深度麻醉，致死也無妨），這時(shí)可傾倒在用酒精擦過的白磁板上進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)果蠅蘇醒時(shí)，可用一條吸水紙加幾滴乙醚貼在培養(yǎng)皿內(nèi)蓋住果蠅，再次麻醉。注意勿使麻醉過度，如蠅翹外展和身體呈450角，表明已麻醉致死不能復(fù)蘇。4、培養(yǎng)基的配制成熟的柔質(zhì)水果，如葡萄、香蕉等，特別是成熟過度開始發(fā)酵時(shí)，?？烧兄潞芏嘁吧?。因?yàn)楣壥且怨系慕湍妇鸀槭车?，所以根?jù)果蠅的生活習(xí)性，可以在一些發(fā)酵的基質(zhì)上進(jìn)行飼養(yǎng)，常用的有香蕉飼料、玉米粉瓊脂飼料等。玉米粉—糖—瓊脂培養(yǎng)基：配方水瓊脂紅糖玉米粉丙酸酵母粉175ml1.5g13.5g10.0g0.15-0.2g適量2380ml3.0g31.0g42.0g2.5ml適量按配方（2）：可將瓊脂放入190ml水中加熱溶解后，再加糖煮沸，另將玉米粉和所余190ml水調(diào)勻，然后將二液混合，繼續(xù)加熱煮沸幾分鐘，最后加入丙酸攪勻傾入培養(yǎng)瓶中，冷置待用。

五、作業(yè)

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