青霉素的制備1青霉素的制備1（A）、理化性質(zhì)：1、溶解性：受pH影響游離酸：易溶于有機(jī)溶劑，難溶于水鹽：易溶于水，幾乎不溶于有機(jī)溶劑，當(dāng)有機(jī)溶劑中含少量水時(shí)，溶解度增大。2、酸堿性：有機(jī)弱酸2（A）、理化性質(zhì)：23、穩(wěn)定性：干燥純凈的鹽固體穩(wěn)定；純有機(jī)溶劑溶液穩(wěn)定；遇酸堿易分解；в-內(nèi)酰胺環(huán)易為親核或親電試劑作用而打開失活；青霉素的水溶液不穩(wěn)定。

溫度、pH對(duì)其穩(wěn)定性的影響---------------------------------------------33、穩(wěn)定性：干燥純凈的鹽固體穩(wěn)定；純有機(jī)溶劑溶液穩(wěn)定；遇酸堿4降解反應(yīng)44降解反應(yīng)45、聚合反應(yīng)氨芐青霉素在水溶液中易形成聚合物，是氨芐青霉素過敏反應(yīng)的主要過敏原之一。55、聚合反應(yīng)56、過敏反應(yīng)

可能為青霉噻唑多肽和青霉噻唑蛋白66、過敏反應(yīng)6（B）、制備工藝1、菌種最早的原始菌種是點(diǎn)青霉菌(Penicilliumnotatum)；現(xiàn)用產(chǎn)黃青霉菌(Pen.chrysogenum)按菌絲的形態(tài)分為絲狀菌（黃孢子和綠孢子）和球狀菌（綠孢子和白孢子）兩種。國內(nèi)青霉素生產(chǎn)廠大都采用綠色絲狀菌，有的廠家用白孢子球狀菌。7（B）、制備工藝1、菌種72、發(fā)酵工藝流程1）絲狀菌發(fā)酵工藝流程大米茄子瓶82、發(fā)酵工藝流程1）絲狀菌發(fā)酵工藝流程大米茄子瓶82）球狀菌培養(yǎng)工藝流程球狀菌菌種親米孢子生產(chǎn)米孢子種子液發(fā)酵液

（親米孢子培養(yǎng)）親米錐形瓶25度，6-8d冷凍管（生產(chǎn)米孢子培養(yǎng)）大米茄子瓶25度，8-10d種子罐培養(yǎng)種子罐28度，50-60h，1.5v/(v*min)發(fā)酵罐培養(yǎng)發(fā)酵罐26度，PH6.7-7.0，6-7d，0.8-1.0v/(v*min)92）球狀菌培養(yǎng)工藝流程（親米孢子培養(yǎng)）25度，6-8d冷凍管3、發(fā)酵工藝要點(diǎn)1）絲狀菌：種子：砂土孢子接入斜面上，25℃培養(yǎng)6～7天，制成懸液，接入大米茄子瓶內(nèi)，經(jīng)25℃培養(yǎng)6～7天，制成大米孢子，真空干燥。生產(chǎn)時(shí)按接種量移入種子罐（葡萄糖、玉米漿、尿素），25℃培養(yǎng)40～45小時(shí)，菌絲濃度達(dá)40%以上，按10%-15%接種量移入繁殖罐（花生餅粉、葡萄糖）內(nèi)。經(jīng)25℃培養(yǎng)13～15小時(shí)，菌絲體積40%以上，殘?zhí)窃?.0%左右，無菌檢查合格便可作為種子，按30%接種量移入發(fā)酵罐。

103、發(fā)酵工藝要點(diǎn)1）絲狀菌：種子：砂土孢子接入斜面上，25℃2）球狀菌：首先由冷凍管孢子接入混合有0.5-1.0%玉米漿的搖瓶培養(yǎng)原始親米孢子，再接入大米茄子瓶生產(chǎn)大米孢子，兩者都是在25度下靜置培養(yǎng)10天可收獲。保存在5度冰箱。種子培養(yǎng)：冷藏10天以內(nèi)的生產(chǎn)米，接入種子罐（花生餅粉、玉米胚芽粉、葡萄糖、飴糖）28度培養(yǎng)50-60h，當(dāng)PH降為5.5-5.0，菌絲呈菊花團(tuán)狀，平均直徑在100-130微米，每毫升球菌數(shù)6萬-8萬只，沉降率在85%以上，可用。接入發(fā)酵罐。112）球狀菌：首先由冷凍管孢子接入混合有0.5-1.0%玉米漿培養(yǎng)基碳源：提供能量如乳糖、蔗糖、葡萄糖、淀粉、天然油脂等。乳糖能被產(chǎn)生菌緩慢利用而維持青霉素分泌的有利條件，故為最佳碳源，但價(jià)格高，普遍使用有困難。天然油脂如玉米油、豆油也能被緩慢利用作為有效的碳源，但不可能大規(guī)模使用。目前生產(chǎn)上用的碳源是葡萄糖母液和工業(yè)用葡萄糖。絲狀菌補(bǔ)糖一般在殘?zhí)墙抵?.6%左右、PH上升后開始加，0.07-0.15%/次，次/h;球狀菌在PH高于6.5時(shí)開始加糖。12培養(yǎng)基碳源：提供能量12氮源：提供蛋白合成原料

玉米漿?，F(xiàn)因國內(nèi)玉米漿產(chǎn)量少，經(jīng)調(diào)整配方以花生餅粉代替，生產(chǎn)水平也可達(dá)到技術(shù)指標(biāo)。目前生產(chǎn)上用的氮源是花生餅粉、麩質(zhì)粉玉米胚芽粉及尿素等。

13氮源：提供蛋白合成原料13前體作為芐青霉素生物合成的前體有苯乙酸、苯乙酰胺等。它們一部分能直接結(jié)合到青霉素分子中。這些前體對(duì)青霉菌都有一定的毒性，加入量不能大于0.1%。加入硫代硫酸鈉能減少它們的毒性。14前體14無機(jī)鹽①硫和磷:硫濃度降低時(shí)青霉素產(chǎn)量減少3倍，磷濃度降低時(shí)青霉素產(chǎn)量減少1倍。②鈣、鎂和鉀：青霉素的生物合成中合適的陽離子比例以鉀30%、鈣20%、鎂41%為宜。如鎂離子少，鉀離子多時(shí)，菌絲細(xì)胞將培養(yǎng)基中氮源轉(zhuǎn)化成各種氨基酸的能力強(qiáng)。鈣離子影響細(xì)胞的生長和培養(yǎng)基的pH。③鐵離子：鐵易滲入菌絲內(nèi)，它對(duì)青霉素發(fā)酵有毒害作用。發(fā)酵液中鐵含量6微克/毫升時(shí)無影響；60微克/毫升時(shí)降低產(chǎn)量30%；300微克/毫升時(shí)降低產(chǎn)量90%。要低于30微克/ml

15無機(jī)鹽15培養(yǎng)條件控制

產(chǎn)黃青霉菌分三個(gè)不同代謝時(shí)期。①菌絲生長繁殖期:發(fā)芽、菌絲增殖、形成脂粒、積累藏物。

②青霉素分泌期:菌絲生長趨勢(shì)減弱，間隙添加葡萄糖作碳源和間隙加入花生餅粉、尿素作氮源，并間隙加入前體，此期間球狀菌pH要求6.6～6.9，絲狀菌pH要求6.2～6.4，青霉素分泌旺盛。③菌絲自溶期:16培養(yǎng)條件控制產(chǎn)黃青霉菌分三個(gè)不同代謝時(shí)期。16控制要點(diǎn)：

1）加糖控制：一般殘?zhí)墙抵?.6%左右、pH上升后可開始加糖。

2）補(bǔ)料及添加前體：絲狀菌發(fā)酵于接種后8～12小時(shí)，發(fā)酵液中殘余苯乙酰胺濃度為0.05～0.08%。球狀菌在發(fā)酵10h后加入尿素、氨水和苯乙酸的混合料，每3h加入一次，加入量視生長狀況。

3）pH控制：主要通過加葡萄糖控制pH，在PH大于6.5時(shí)可以加入硫酸銨4）溫度控制：青霉菌生長最適溫度（27度）高于青霉素分泌的最適溫度（20度）。種子罐培養(yǎng)絲狀和球狀菌菌要求25℃，發(fā)酵罐培養(yǎng)絲狀菌要求26℃-24℃-23℃-22℃、球狀菌要求26℃--25℃-24℃，前期罐溫高于后期。17控制要點(diǎn)：175）通氣與攪拌深層培養(yǎng)需通入一定量空氣，并不停地?cái)嚢枰员ＷC溶氧的濃度。試驗(yàn)證明，通氣量0.8-1.0v/v*min.中、后期減慢轉(zhuǎn)速對(duì)球狀菌的生理生化代謝有利，它能提高發(fā)酵單位，并能節(jié)約能源。6）泡沫與消沫用化學(xué)合成消沫劑——“泡敵”等185）通氣與攪拌深層培養(yǎng)需通入一定量空氣，并不停地?cái)嚢枰员?、提煉工藝流程工業(yè)鉀鹽生產(chǎn)工藝流程p581194、提煉工藝流程工業(yè)鉀鹽生產(chǎn)工藝流程p581191.工業(yè)鉀鹽生產(chǎn)工藝流程發(fā)酵液一次濾液和其余發(fā)酵液二次濾液一次丁酯萃取液緩沖液萃取液二次丁酯萃取液脫色脫水液結(jié)晶液青霉素鉀濕結(jié)晶體洗滌后濕晶體過篩顆粒干燥粉末青霉素鉀成品（鼓式真空過濾）

1/3-1/2發(fā)酵液10度以下（板框過濾）10%硫酸，0.07%PPB,0.7%硅藻土，28%水PH4.5-5.0，10度以下（一次丁酯萃?。?0%硫酸，1/3體積醋酸丁酯，0.1%PPBPH1.8-2.2，10度以下（緩沖液萃?。?.6%碳酸氫鈉PH6.8-7.4，10度以下二次丁酯萃取，硫酸，丁酯PH1.8-2.2，10度以下脫色脫水過濾活性炭-10度以下無菌過濾結(jié)晶，過濾醋酸鉀乙醇溶液10--20度洗滌丁醇，醋酸乙酯過篩，制粒真空干燥90-95度，20mmHg,8-10h涼粉40度左右201.工業(yè)鉀鹽生產(chǎn)工藝流程（鼓式真空過濾）10度以下2.青霉素鈉鹽制備（共沸蒸餾結(jié)晶）發(fā)酵液二次丁酯萃取液脫色二次丁酯萃取液青霉素鈉鹽水萃取液結(jié)晶液青霉素鈉鹽濕結(jié)晶洗后濕結(jié)晶干燥粉末青霉素鈉鹽成品過濾，一次丁酯萃取，緩沖液萃取，二次丁酯萃取與制青霉素鉀鹽相同脫色過濾活性炭水萃取，0.5molNaOH溶液，10度以下共沸蒸餾2.5倍體積丁醇PH6.4-6.8，16-26度，5-10mmHg過濾洗滌分離丁醇，乙酸乙酯真空干燥90-95度，10mmHg,8-10h涼粉40度左右212.青霉素鈉鹽制備（共沸蒸餾結(jié)晶）過濾，一次丁酯萃取，緩沖液5、提煉工藝要點(diǎn)1）發(fā)酵液預(yù)處理和過濾放罐后，首先要冷卻目前采用鼓式過濾及板框過濾，加助濾劑。酸化時(shí)pH應(yīng)控制得高些(pH4～5)，再加些絮凝劑如十五烷基溴代吡啶(PPB)等,過濾。隨著高效高速萃取離心機(jī)的出現(xiàn)，如德國Westfalia公司出品的傾析器(decantor)，可革去過濾工序，比用板框過濾除去菌絲后再提取的收率高出2～3%。225、提煉工藝要點(diǎn)1）發(fā)酵液預(yù)處理和過濾222）影響青霉素提取的主要因素青霉素提取效果除了已選定適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶媒，破乳化劑和離心分離設(shè)備外，還與下列主要因素有關(guān):pH值一般從濾液萃取到醋酸丁酯時(shí)，pH選擇2.0～2.5，而從丁酯反萃取到水相時(shí)，pH選擇6.8～7.2之間。溫度要求提取在低溫(10℃以下)條件下進(jìn)行較為有利。在設(shè)備上要考慮用冷鹽水進(jìn)行冷卻，以降低溫度，特別是酸化崗位，溫度要求更低些。232）影響青霉素提取的主要因素23時(shí)間

酸化時(shí)速度應(yīng)快些。堿化時(shí)速度可放慢些，因青霉素在中性下半衰期要長些，破壞要緩和些，故以能分離得清為原則。萃取方式和濃縮比

萃取劑和萃取方式選擇目前生產(chǎn)上采用二級(jí)逆流萃取方式。濃縮比的選擇也很重要，因?yàn)槎□サ挠昧颗c收率和質(zhì)量都有關(guān)系。丁酯用量為濾液體積的25～30%時(shí)，色素相對(duì)含量低，濃縮比為1.5～2.5倍。24時(shí)間酸化時(shí)速度應(yīng)快些。堿化時(shí)速度可放慢些，因青霉素在中性3）精制脫色脫水：活性碳脫色；冰凍脫水法，用冷鹽水降溫至-18----20度，水結(jié)冰析出。青霉素鉀鹽結(jié)晶：青霉素丁酯二次提取液中，加入醋酸鉀乙醇溶液，青霉素鉀鹽結(jié)晶析出。青霉素鈉鹽：A、從二次丁酯萃取液中直接結(jié)晶，加入醋酸鈉乙醇溶液。253）精制25B、共沸蒸餾結(jié)晶：0.5mol/L濃度的NaOH溶液、在PH6.4-6.8下萃取，得到青霉素鈉的水萃取液，濃度為15*104--25*104U/ml。然后加入2.5倍體積的丁醇，在16-26度、5-10mmHg下蒸餾，當(dāng)濃縮到原來水萃取液體積時(shí)，停止蒸餾，有鈉鹽析出。26B、共沸蒸餾結(jié)晶：0.5mol/L濃度的NaOH溶液、在PH青霉素的制備27青霉素的制備1（A）、理化性質(zhì)：1、溶解性：受pH影響游離酸：易溶于有機(jī)溶劑，難溶于水鹽：易溶于水，幾乎不溶于有機(jī)溶劑，當(dāng)有機(jī)溶劑中含少量水時(shí)，溶解度增大。2、酸堿性：有機(jī)弱酸28（A）、理化性質(zhì)：23、穩(wěn)定性：干燥純凈的鹽固體穩(wěn)定；純有機(jī)溶劑溶液穩(wěn)定；遇酸堿易分解；в-內(nèi)酰胺環(huán)易為親核或親電試劑作用而打開失活；青霉素的水溶液不穩(wěn)定。

溫度、pH對(duì)其穩(wěn)定性的影響---------------------------------------------293、穩(wěn)定性：干燥純凈的鹽固體穩(wěn)定；純有機(jī)溶劑溶液穩(wěn)定；遇酸堿4降解反應(yīng)304降解反應(yīng)45、聚合反應(yīng)氨芐青霉素在水溶液中易形成聚合物，是氨芐青霉素過敏反應(yīng)的主要過敏原之一。315、聚合反應(yīng)56、過敏反應(yīng)

可能為青霉噻唑多肽和青霉噻唑蛋白326、過敏反應(yīng)6（B）、制備工藝1、菌種最早的原始菌種是點(diǎn)青霉菌(Penicilliumnotatum)；現(xiàn)用產(chǎn)黃青霉菌(Pen.chrysogenum)按菌絲的形態(tài)分為絲狀菌（黃孢子和綠孢子）和球狀菌（綠孢子和白孢子）兩種。國內(nèi)青霉素生產(chǎn)廠大都采用綠色絲狀菌，有的廠家用白孢子球狀菌。33（B）、制備工藝1、菌種72、發(fā)酵工藝流程1）絲狀菌發(fā)酵工藝流程大米茄子瓶342、發(fā)酵工藝流程1）絲狀菌發(fā)酵工藝流程大米茄子瓶82）球狀菌培養(yǎng)工藝流程球狀菌菌種親米孢子生產(chǎn)米孢子種子液發(fā)酵液

（親米孢子培養(yǎng)）親米錐形瓶25度，6-8d冷凍管（生產(chǎn)米孢子培養(yǎng)）大米茄子瓶25度，8-10d種子罐培養(yǎng)種子罐28度，50-60h，1.5v/(v*min)發(fā)酵罐培養(yǎng)發(fā)酵罐26度，PH6.7-7.0，6-7d，0.8-1.0v/(v*min)352）球狀菌培養(yǎng)工藝流程（親米孢子培養(yǎng)）25度，6-8d冷凍管3、發(fā)酵工藝要點(diǎn)1）絲狀菌：種子：砂土孢子接入斜面上，25℃培養(yǎng)6～7天，制成懸液，接入大米茄子瓶內(nèi)，經(jīng)25℃培養(yǎng)6～7天，制成大米孢子，真空干燥。生產(chǎn)時(shí)按接種量移入種子罐（葡萄糖、玉米漿、尿素），25℃培養(yǎng)40～45小時(shí)，菌絲濃度達(dá)40%以上，按10%-15%接種量移入繁殖罐（花生餅粉、葡萄糖）內(nèi)。經(jīng)25℃培養(yǎng)13～15小時(shí)，菌絲體積40%以上，殘?zhí)窃?.0%左右，無菌檢查合格便可作為種子，按30%接種量移入發(fā)酵罐。

363、發(fā)酵工藝要點(diǎn)1）絲狀菌：種子：砂土孢子接入斜面上，25℃2）球狀菌：首先由冷凍管孢子接入混合有0.5-1.0%玉米漿的搖瓶培養(yǎng)原始親米孢子，再接入大米茄子瓶生產(chǎn)大米孢子，兩者都是在25度下靜置培養(yǎng)10天可收獲。保存在5度冰箱。種子培養(yǎng)：冷藏10天以內(nèi)的生產(chǎn)米，接入種子罐（花生餅粉、玉米胚芽粉、葡萄糖、飴糖）28度培養(yǎng)50-60h，當(dāng)PH降為5.5-5.0，菌絲呈菊花團(tuán)狀，平均直徑在100-130微米，每毫升球菌數(shù)6萬-8萬只，沉降率在85%以上，可用。接入發(fā)酵罐。372）球狀菌：首先由冷凍管孢子接入混合有0.5-1.0%玉米漿培養(yǎng)基碳源：提供能量如乳糖、蔗糖、葡萄糖、淀粉、天然油脂等。乳糖能被產(chǎn)生菌緩慢利用而維持青霉素分泌的有利條件，故為最佳碳源，但價(jià)格高，普遍使用有困難。天然油脂如玉米油、豆油也能被緩慢利用作為有效的碳源，但不可能大規(guī)模使用。目前生產(chǎn)上用的碳源是葡萄糖母液和工業(yè)用葡萄糖。絲狀菌補(bǔ)糖一般在殘?zhí)墙抵?.6%左右、PH上升后開始加，0.07-0.15%/次，次/h;球狀菌在PH高于6.5時(shí)開始加糖。38培養(yǎng)基碳源：提供能量12氮源：提供蛋白合成原料

玉米漿?，F(xiàn)因國內(nèi)玉米漿產(chǎn)量少，經(jīng)調(diào)整配方以花生餅粉代替，生產(chǎn)水平也可達(dá)到技術(shù)指標(biāo)。目前生產(chǎn)上用的氮源是花生餅粉、麩質(zhì)粉玉米胚芽粉及尿素等。

39氮源：提供蛋白合成原料13前體作為芐青霉素生物合成的前體有苯乙酸、苯乙酰胺等。它們一部分能直接結(jié)合到青霉素分子中。這些前體對(duì)青霉菌都有一定的毒性，加入量不能大于0.1%。加入硫代硫酸鈉能減少它們的毒性。40前體14無機(jī)鹽①硫和磷:硫濃度降低時(shí)青霉素產(chǎn)量減少3倍，磷濃度降低時(shí)青霉素產(chǎn)量減少1倍。②鈣、鎂和鉀：青霉素的生物合成中合適的陽離子比例以鉀30%、鈣20%、鎂41%為宜。如鎂離子少，鉀離子多時(shí)，菌絲細(xì)胞將培養(yǎng)基中氮源轉(zhuǎn)化成各種氨基酸的能力強(qiáng)。鈣離子影響細(xì)胞的生長和培養(yǎng)基的pH。③鐵離子：鐵易滲入菌絲內(nèi)，它對(duì)青霉素發(fā)酵有毒害作用。發(fā)酵液中鐵含量6微克/毫升時(shí)無影響；60微克/毫升時(shí)降低產(chǎn)量30%；300微克/毫升時(shí)降低產(chǎn)量90%。要低于30微克/ml

41無機(jī)鹽15培養(yǎng)條件控制

產(chǎn)黃青霉菌分三個(gè)不同代謝時(shí)期。①菌絲生長繁殖期:發(fā)芽、菌絲增殖、形成脂粒、積累藏物。

②青霉素分泌期:菌絲生長趨勢(shì)減弱，間隙添加葡萄糖作碳源和間隙加入花生餅粉、尿素作氮源，并間隙加入前體，此期間球狀菌pH要求6.6～6.9，絲狀菌pH要求6.2～6.4，青霉素分泌旺盛。③菌絲自溶期:42培養(yǎng)條件控制產(chǎn)黃青霉菌分三個(gè)不同代謝時(shí)期。16控制要點(diǎn)：

1）加糖控制：一般殘?zhí)墙抵?.6%左右、pH上升后可開始加糖。

2）補(bǔ)料及添加前體：絲狀菌發(fā)酵于接種后8～12小時(shí)，發(fā)酵液中殘余苯乙酰胺濃度為0.05～0.08%。球狀菌在發(fā)酵10h后加入尿素、氨水和苯乙酸的混合料，每3h加入一次，加入量視生長狀況。

3）pH控制：主要通過加葡萄糖控制pH，在PH大于6.5時(shí)可以加入硫酸銨4）溫度控制：青霉菌生長最適溫度（27度）高于青霉素分泌的最適溫度（20度）。種子罐培養(yǎng)絲狀和球狀菌菌要求25℃，發(fā)酵罐培養(yǎng)絲狀菌要求26℃-24℃-23℃-22℃、球狀菌要求26℃--25℃-24℃，前期罐溫高于后期。43控制要點(diǎn)：175）通氣與攪拌深層培養(yǎng)需通入一定量空氣，并不停地?cái)嚢枰员ＷC溶氧的濃度。試驗(yàn)證明，通氣量0.8-1.0v/v*min.中、后期減慢轉(zhuǎn)速對(duì)球狀菌的生理生化代謝有利，它能提高發(fā)酵單位，并能節(jié)約能源。6）泡沫與消沫用化學(xué)合成消沫劑——“泡敵”等445）通氣與攪拌深層培養(yǎng)需通入一定量空氣，并不停地?cái)嚢枰员?、提煉工藝流程工業(yè)鉀鹽生產(chǎn)工藝流程p581454、提煉工藝流程工業(yè)鉀鹽生產(chǎn)工藝流程p581191.工業(yè)鉀鹽生產(chǎn)工藝流程發(fā)酵液一次濾液和其余發(fā)酵液二次濾液一次丁酯萃取液緩沖液萃取液二次丁酯萃取液脫色脫水液結(jié)晶液青霉素鉀濕結(jié)晶體洗滌后濕晶體過篩顆粒干燥粉末青霉素鉀成品（鼓式真空過濾）

1/3-1/2發(fā)酵液10度以下（板框過濾）10%硫酸，0.07%PPB,0.7%硅藻土，28%水PH4.5-5.0，10度以下（一次丁酯萃?。?0%硫酸，1/3體積醋酸丁酯，0.1%PPBPH1.8-2.2，10度以下（緩沖液萃取）1.6%碳酸氫鈉PH6.8-7.4，10度以下二次丁酯萃取，硫酸，丁酯PH1.8-2.2，10度以下脫色脫水過濾活性炭-10度以下無菌過濾結(jié)晶，過濾醋酸鉀乙醇溶液10--20度洗滌丁醇，醋酸乙酯過篩，制粒真空干燥90-95度，20mmHg,8-10h涼粉40度左右461.工業(yè)鉀鹽生產(chǎn)工藝流程（鼓式真空過濾）10度以下2.青霉素鈉鹽制備（共沸蒸餾結(jié)晶）發(fā)酵液二次丁酯萃取液脫色二次丁酯萃取液青霉素鈉鹽水萃取液結(jié)晶液青霉素鈉鹽濕結(jié)晶洗后濕結(jié)晶干燥粉末青霉素鈉鹽成品過濾，一次丁酯萃取，緩沖液萃取，二次丁酯萃取與制青霉素鉀鹽相同脫色過濾活性炭水萃取，0.5molNaOH溶液，10度以下共沸蒸餾2.5倍體積丁醇PH6.4-6.8，16-26度，5-10mmHg過濾洗滌分離丁醇，乙酸乙酯