光譜實驗三熒光分光光度法測定維生素B2的含【預習了解維生素B2的結構特點和性質(zhì)【實驗目的【實驗原理維生素（2是必需的維生素分子結構中含有異咯嗪結構在呈線性關系。利用此性質(zhì)，用標準曲，測定維生素2的含量?！緝x器與試劑F97Pro熒光分光光度計（棱光技術熒光樣品池；50ml容量瓶；100ml容量瓶；1000ml容量瓶；5ml吸量管；棕色試劑瓶。VB2對照品；市售VB2片（5m；1%HAc【實驗步驟VB2（10.0mg/L）標準貯備溶液配制準確稱取10.0mgVB2，將其溶解于少量的1%HAc中，轉(zhuǎn)移至1L容量瓶1%HAc稀釋至刻度，搖勻。該溶液應裝于棕色試劑瓶中，置避光、陰涼處。VB2一定量（相當于一片的量1%HAc1.00ml、2.00ml、3.00ml、4.00ml5.00mlVB2標準貯備液50ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，備用。VB2最大激發(fā)波長和最大熒光波長的選?。y定條件的選擇VB2的最大激發(fā)波長和最大熒光發(fā)射波長。VB2的熒光光譜，找最佳熒光發(fā)射波長。VB2的熒光激發(fā)光譜，找最佳激發(fā)波長。采用上述實驗找出的最佳熒光激發(fā)波長和最佳熒光發(fā)射波長進。用儀器的定量分析工作模式對標準溶液進定。用最濃的標準樣品找合適（增益0~1000到濃標準溶液的熒光值，得標準工作曲線。取待測液10.00ml置于50ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。用【數(shù)據(jù)處理【注意事項熒光樣品池使用注意事項（裝液量，拿法，如何，方向性，蓋子樣品室翻蓋：向上翻起樣品室蓋，翻起角度勿超過90度，用力過大。在進行未知濃度樣品溶液測試時，儀器增益應從低位到（1-17）逐步設樣品的穩(wěn)定性（應避光陰涼處存放【思考題為什么熒光分析法比紫外-【附注】F97熒光分光光度計使用一 儀器的開機與關（一）開機拔掉連接儀器主機與計算機的USB數(shù)據(jù)線，開啟計算機先開氙燈電源，等待氙燈正常觸發(fā)并點亮后，再開啟主機電源連接儀器主機與計算機的USB數(shù)據(jù)線，儀器自動檢測聯(lián)機狀態(tài)，進運行“F97自動檢測聯(lián)機狀態(tài)，進入初始化工作，儀器開始進入相關工作模式。點擊中最左側(cè)圖標“新建一個測量方法”操由于氙燈與開關次數(shù)密切相關請盡量減少不必要的氙30min只開啟氙燈電源開關而沒有開啟儀器主機開關（二）關機在聯(lián)機狀態(tài)下，應先關聯(lián)機USB關主機電源最后關氙燈開關注意：60如果在聯(lián)機狀態(tài)下先關閉主機電源，聯(lián)機將出現(xiàn)故障，這二、三維波長掃描工作模三維熒光圖譜具有“圖”的特征，通過對三維熒光圖譜的分析可以三維波長掃描流程如下聯(lián)機初始 開機進入新建一個測量方法設置方法參確認方法參 開始掃描輸入光譜文件名掃描完成查看三維圖打印輸三 波長掃描工作模波長掃描流程如下聯(lián)機初始 開機進入新建一個測量方法設置方法參確認方法參 確認掃開始掃描輸入光譜文件名掃描完打印輸 聯(lián)機初始 開機進入新建一個測量方法設置方法參確認方法參 確認掃開始掃描輸入光譜文件名掃描完打印輸 聯(lián)機初始 開機