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文檔簡介
沙門氏菌的生物學(xué)特性
及鑒定要點1.形態(tài)與染色:革蘭氏陰性桿菌,菌體細(xì)長,有周鞭毛。2.培養(yǎng)特性:在麥康凱平板上35℃培養(yǎng)18~24小時,形成無色、透明的菌落。SS平板上顯無色、透明菌落,但大部分菌落中央顯黑色(產(chǎn)H2S)沙門氏菌分為6個亞屬,2200多個血清變型。D群中的傷寒沙門氏菌是臨床上最為重要的沙門氏菌。3.生化反應(yīng):氧化酶(-),發(fā)酵葡萄糖,乳糖(-),TSI或KIA為K/A,有動力,賴氨酸脫羧酶(+),硝酸鹽還原試驗(+),大多菌主H2S(+)。KIA:斜面(K),底層(A),H2S"(+)或(-)"MIU:動力(+),吲哚(-),脲酶(-)4.鑒別要點:4.1本菌屬特點:選擇SS平板上無色透明、半透明或中心黑色的菌落,TSI為K/A,H2S(+)或(-),動力(+),氧化酶(-),脲酶(-)符合上述特性者,可通過血清凝集試驗做出診斷。4.2與志賀菌屬的鑒別:少數(shù)傷寒沙門氏菌在TSI或KIA上H2S(-),動力不明顯,易于志賀氏菌相混淆,可用血清凝集試驗相鑒別。5.操作步驟5.1觀察菌落特征,挑取可疑菌落做KIA,MIU或TSI初篩。5.2血清學(xué)鑒定5.3從SS平板上挑取純菌落,傳統(tǒng)生化反應(yīng)進(jìn)行菌落堅定。5.4初步鑒定KIA斜面、底層、產(chǎn)氣、H2SMIU動力、吲哚、脲酶診斷血清凝集甲型副傷寒KA+-/++--AFO多價+A+乙型副傷寒KA++++--AFO多價+B+丙型副傷寒KA++++--AFO多價+C+Vi+傷寒沙門氏菌KA-+/-+--AFO多價+D+Vi+其它沙門氏菌KA+++--AFO多價+腸炎+6.血清凝集步驟6.1篩選:取營養(yǎng)瓊脂斜面(或KIA斜面)培養(yǎng)物與AFO多價抗血清作玻片凝試驗,若呈明顯凝集,提示被檢菌可能屬于AFO6個0群范圍內(nèi),再按0抗原血清凝集定群。若與多價0抗血清不凝集,有如下3種可能:(1),含有Vi抗原(2),AFO群之外的沙門氏菌(3),沙門氏菌以外的細(xì)菌,按下述方法進(jìn)一步檢驗。將營養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)物用1ml無菌生理鹽水或蒸餾水洗下,制成濃厚菌液,再合成2份,1份不經(jīng)處理,為洗菌液,另一份放100℃水浴中30分鐘,為加熱菌液。取活菌與Vi抗血清,取加熱菌與Vi抗血清,AFO多價抗血清分別進(jìn)行玻片凝集試驗。根據(jù)結(jié)果作如下分析:
(1)活菌與Vi抗血清凝集,加熱菌與Vi抗菌,按下述定群用O7和O9抗血清定群;
(2)活菌與Vi抗血清不凝集,可能屬于AFO群意外的沙門氏菌或其他菌屬細(xì)菌,應(yīng)進(jìn)行全面生化試驗定屬,若符合沙門氏菌屬細(xì)菌特征,宜送專門機(jī)構(gòu)鑒定;
(3)加熱菌也與Vi抗血清凝集,而與AFO多價O抗血清不凝集者,可報告為陰性。6.2定群取O2(A群),O4(B群),O7(C1群),O8(C2群),O9(D群),O3.10(E群),O11(F群)分別進(jìn)行玻片凝集試驗。若與其中1種因子血清凝集,可報告為陽性。6.3血清型分析:
菌群確定后先分析第1相鞭毛抗原,再分析第2相鞭毛抗原。A:第1相鞭毛抗原分析:根據(jù)菌群分析結(jié)果,分別選用第1相鞭毛因子血清進(jìn)行玻片凝集試驗。B:第2相鞭毛抗原分析:
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