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文檔簡介
大γ氨基酸GABA)試盒用法檢范:0.5μmol/g-24使目:
96T本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本γ氨丁(GABA)含。實(shí)原本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大γ氨基丁酸GABA)水。用純化的大鼠γ氨基丁酸GABA)抗包被微孔板制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加γ氨丁酸GABA),與標(biāo)的γ氨基丁(GABA)體結(jié)合,形成抗抗原-標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB色在酶催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中γ氨丁酸(GABA)呈正相關(guān)。用酶儀在波長下測定吸光值準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大γ氨基丁(GABA)濃。試盒成
倍縮洗滌液酶標(biāo)試劑酶標(biāo)包被板樣品稀釋液顯色劑A液顯色劑液
20ml×1瓶6ml×1瓶孔×8條6ml×1瓶6ml×1瓶6ml×瓶
終止液標(biāo)準(zhǔn)品(48μ)標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液說明書封板膜密封袋
×1瓶0.5ml1瓶1.5ml1瓶標(biāo)要.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑辣根過氧化物酶的HRP活性。操步標(biāo)品的稀釋試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支戶按下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。24mol/g12mol/gμμμmol/g
標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)品
μl的倍準(zhǔn)品加150l標(biāo)品稀釋液μl的標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)品釋液μl的標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)品釋液μl的標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)品釋液μl的標(biāo)準(zhǔn)品加入150l標(biāo)品釋液
加樣分設(shè)空白(白對照不加樣品及酶標(biāo)試劑其各步操作相同準(zhǔn)、待測樣品孔標(biāo)被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣μl樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l樣品最終稀釋度為倍樣樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。溫育:用封板膜封板后置37溫育3鐘。配液:將30倍縮洗滌液用蒸餾水30倍釋備用洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒棄去,如此重復(fù)次,拍干。
加:每孔加入酶標(biāo)試劑μl,空白孔除外。
溫育:操作同。洗滌:操作同。顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50μl輕輕震蕩混勻,37避光顯色15分.10.終:孔加終止液μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色11.測:空白空調(diào)零450nm長依序測量各孔的吸光度OD值測應(yīng)在加終止液后15分以內(nèi)進(jìn)行。操程總:計(jì)以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品OD值標(biāo)準(zhǔn)曲線查相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與O值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式樣的OD值入方程式算出樣品濃度乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。注事.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡分后方可使用,酶包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)最好
控制在鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。.請次測定的同做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣D大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)倍后再測定,計(jì)算時(shí)請最后乘以總稀釋倍數(shù)(n.封膜只限一次使用,以避免交叉污染。.底物請避光保存。.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為.所
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