生化分離工程實(shí)驗(yàn)試題答案生化分離工程實(shí)驗(yàn)試題答案生化分離工程實(shí)驗(yàn)試題答案資料僅供參考文件編號(hào)：2022年4月生化分離工程實(shí)驗(yàn)試題答案版本號(hào)：A修改號(hào)：1頁(yè)次：1.0審核：批準(zhǔn):發(fā)布日期：生化分離動(dòng)物臟器DNA提取實(shí)驗(yàn)中，加入NaCl-SSC緩沖液的原因？答：①形成等滲液②PH中性，維持DNA穩(wěn)定③抑制DNA酶活動(dòng)物臟器DNA提取實(shí)驗(yàn)中，如何鑒定分析DNA的純化？

答：當(dāng)A260/A280=→DNA最純，<混有Pro，>混有RNA，～→較純DNA提取實(shí)驗(yàn)中，加氯仿-異戊醇的作用是什么震蕩離心后，分幾層每一層的主要成分是什么答：使核蛋白質(zhì)變性、乳化；分三層；上層為DNA和核蛋白的水層，中層為變性蛋白凝膠，下層為氯仿二異戊醇的有機(jī)溶劑層。在DNA提取時(shí)，RNP（脫氧核糖核蛋白）是如何去除的？

答：用氯仿一異戊醇劇烈震蕩10min，使其乳化，然后離心除去變性蛋白。茶葉咖啡因提取實(shí)驗(yàn)中，加生石灰的作用？答：①吸水②吸收單寧酸③使提取液受熱均勻（熱緩沖）索氏提取和傳統(tǒng)提取有何不同？答：傳統(tǒng)提取耗時(shí)，效率低。索氏提取利用溶劑回流、虹吸原理，反復(fù)多次純萃取，減短提取時(shí)間，節(jié)省材料，效率高。茶葉咖啡因提取的原理是什么？答：利用咖啡因易溶于乙醇，易升華等特點(diǎn)，以95%乙醇作溶劑，通過(guò)索氏提取、濃縮、焙炒、升華得到純化咖啡因。離子交換柱層析實(shí)驗(yàn)中，離子交換劑為什么要進(jìn)行預(yù)處理？答：①使離子交換劑充分溶脹②酸堿除雜③把活性離子（反離子）轉(zhuǎn)型為clˉ。離子交換柱層析實(shí)驗(yàn)中，TCA和丙酮的作用是什么？

答：在PH在±時(shí)，TCA：使雜質(zhì)蛋白變性，多得黏蛋白。丙酮：沉淀黏蛋白離子交換柱層析實(shí)驗(yàn)中，加TCA后，為什么要將PH調(diào)答：①TCA變性能力與PH值密切相關(guān)；PH↑，TCA變性能力減弱；PH↓，TCA變性能力增強(qiáng)②當(dāng)PH在時(shí)，黏蛋白是最穩(wěn)定的，卵清蛋白等雜質(zhì)蛋白不穩(wěn)定易沉淀，可得到相對(duì)較純的黏蛋白。離子交換柱層析實(shí)驗(yàn)中，為什么要維持PBS的PH在答：黏蛋白的PI值約，小于，蛋白質(zhì)帶負(fù)電，又由于大多雜蛋白PI值約為10，不易于轉(zhuǎn)型的離子交換劑交換而被洗脫時(shí)利用交換劑與蛋白結(jié)合程度不同而把它們分離開來(lái)，達(dá)到純化的目的。請(qǐng)畫出離子交換柱層析分離雞蛋卵黏蛋白的預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖，并對(duì)該圖作合理分析。答：分析：第一個(gè)波峰：稀土ode雜蛋白；第二個(gè)波峰：目標(biāo)蛋白洗脫簡(jiǎn)述大蒜SOD提取中，SOD活性測(cè)定原理。答：鄰苯三酚在堿性條件下自氧化釋放O2ˉ，生成有色中間產(chǎn)物，初始階段中間產(chǎn)物積累在滯留30~45s后，與時(shí)間成線性關(guān)系（4min內(nèi)），在420nm有強(qiáng)烈吸光值。當(dāng)SOD，它催化O2ˉ與H+結(jié)合生成O2和H2O2，從而阻止中間產(chǎn)物積累，因此，通過(guò)計(jì)算可求出SOD酶活。梔子黃色素提取實(shí)驗(yàn)中，吸附前為什么濾液PH調(diào)制3答：藏紅花素結(jié)構(gòu)中帶R-COOH，在溶液中發(fā)生電離R-COOH=（可逆符號(hào)）R-COOˉ＋H﹢，將PH調(diào)至3時(shí)，溶液中的H+增多，反應(yīng)向逆向進(jìn)行，使藏紅花素不被電離梔子黃色素提取實(shí)驗(yàn)中，如何鑒定梔子黃色素中梔子苷的去除情況？答：根據(jù)吸附前后A238/A440比值確定，比值越變?cè)叫?，去除就越?lái)越干凈。當(dāng)比值小于時(shí)，可以避免變綠現(xiàn)象。16.梔子黃提取實(shí)驗(yàn)中，說(shuō)明D101樹脂的性質(zhì)以及主要吸附何種物質(zhì)？

答：D101性質(zhì)：疏水性、非極性、聚合物吸附劑，具有較大表面比與合適孔徑。主要吸附藏紅花素。17.反膠團(tuán)萃取甘薯中的淀粉酶的實(shí)驗(yàn)中，反膠團(tuán)萃取的主要步驟是什么？

答：①甘薯中淀粉酶提?。ㄇ袎K、攪碎、抽濾）②反膠團(tuán)系統(tǒng)制備③前萃?。ㄈ∩蠈樱芊摧腿。ㄈ∠聦樱莸矸勖富顪y(cè)定18.反膠團(tuán)萃取甘薯中的淀粉酶的實(shí)驗(yàn)中，簡(jiǎn)述淀粉酶活性測(cè)定的原理？

答：一定量淀粉酶在適宜條件下會(huì)分解淀粉產(chǎn)生還原糖，用DNS測(cè)還原糖A540光吸收量，從而求得酶活19.反膠團(tuán)萃取甘薯中的淀粉酶的實(shí)驗(yàn)中，反萃取中加入3MKCl溶液有何作用？

答：破壞水池外的水膜和表面活性劑極性頭，使蛋白質(zhì)又回到水相中，從而分離純化。20．反膠團(tuán)萃取甘薯中的淀粉酶的實(shí)驗(yàn)中，簡(jiǎn)述反膠團(tuán)萃取的原理？

答：表面活性劑在有機(jī)相中自發(fā)形成反膠團(tuán)，其內(nèi)部