基因工程產(chǎn)品的鑒定美國(guó)食品與藥品管理局的要求：分子量,溶解度,等電點(diǎn),氨基酸序列,肽譜,二硫鍵配對(duì),糖脂電泳圖譜,二級(jí)結(jié)構(gòu),三級(jí)結(jié)構(gòu),與內(nèi)源性物質(zhì)的關(guān)系,受體的分布和結(jié)合等。一、蛋白質(zhì)含量和純度含量:mg/ml,mg/g材料純度:每單位重量樣品中目標(biāo)蛋白質(zhì)占總蛋白的比例.是一個(gè)相對(duì)指標(biāo),可用百分比表示.一般指是否含有雜蛋白,而不包括是否含有鹽、離子等小分子的物質(zhì)。純度等級(jí)可分為95%，99%和99.9%等。蛋白質(zhì)含量和純度測(cè)定方法含量測(cè)定:凱氏定氮法、TCA比濁法、雙縮脲法、福林-酚法、紫外線(xiàn)法和考馬斯亮蘭法（Bradford法）。純度衡量:電泳法、層析法、質(zhì)譜法等。一般應(yīng)采用二種以上方法鑒定純度，而且同一原理的方法不應(yīng)該采用二次。五種蛋白質(zhì)測(cè)定方法比較方法靈敏度時(shí)間原理干擾物質(zhì)說(shuō)明凱氏定氮法靈敏度低，適用于0.2~1.0mg氮，誤差為

2％費(fèi)時(shí)

8～10小時(shí)將蛋白氮轉(zhuǎn)化為氨，用酸吸收后滴定非蛋白氮（可用三氯乙酸沉淀蛋白質(zhì)而分離）用于標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)含量的準(zhǔn)確測(cè)定；干擾少；費(fèi)時(shí)太長(zhǎng)雙縮脲法靈敏度低1～20mg中速

20~30分鐘多肽鍵＋堿性Cu2＋紫色絡(luò)合物硫酸銨；Tris緩沖液；某些氨基酸用于快速測(cè)定，但不太靈敏；不同蛋白質(zhì)顯色相似紫外吸收法較為靈敏50～100g快速

5～10分鐘蛋白質(zhì)中的酪氨酸和色氨酸殘基在280nm處的光吸收各種嘌吟和嘧啶；各種核苷酸用于層析柱流出液的檢測(cè)；核酸的吸收可以校正Folin－酚試劑法靈敏度高～5g慢速

40～60分鐘雙縮脲反應(yīng)；磷鉬酸－磷鎢酸試劑被Tyr和Phe還原硫酸銨；Tris緩沖液；甘氨酸；各種硫醇耗費(fèi)時(shí)間長(zhǎng)；操作要嚴(yán)格計(jì)時(shí)；顏色深淺隨不同蛋白質(zhì)變化考馬斯亮藍(lán)法靈敏度最高1～5g快速5～15分鐘考馬斯亮藍(lán)染料與蛋白質(zhì)結(jié)合時(shí)，其max由465nm變?yōu)?95nm強(qiáng)堿性緩沖液；TritonX-100;SDS最好的方法；干擾物質(zhì)少；顏色穩(wěn)定；

顏色深淺隨不同蛋白質(zhì)變化氨基酸分析柱后反應(yīng)法：將游離氨基酸經(jīng)過(guò)色譜柱分離后，氨基酸再與顯示劑（茚三酮、熒光胺、鄰苯二甲醛）作用。柱前衍生法：將各種氨基酸和熒光試劑先生成氨基酸衍生物，然后再用柱把各種衍生物分開(kāi)。蛋白質(zhì)的分子量測(cè)定超離心法光散射方法凝膠過(guò)濾法（測(cè)完整蛋白質(zhì)分子）SDS電泳法（測(cè)亞基）

較新的方法：毛細(xì)管電泳、質(zhì)譜等電聚焦法測(cè)定蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)鑒定蛋白質(zhì)的純度肽譜指蛋白質(zhì)被酶解或化學(xué)降解后肽段的分離分析或制備。蛋白質(zhì)突變點(diǎn)分析天然蛋白質(zhì)和突變蛋白質(zhì)肽譜的比較熒光標(biāo)記Cys;同位素標(biāo)記法；紫外吸收法二硫鍵分析同位素標(biāo)記化學(xué)修飾直接分析二硫鍵的異構(gòu)物質(zhì)譜定位二硫鍵蛋白質(zhì)的序列測(cè)定測(cè)定蛋白質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)方法：蛋白質(zhì)化學(xué)法：（Edman降解法測(cè)定N端和羧肽酶或化學(xué)法