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文檔簡介
浙科版2019版選擇性必修三第一節(jié)體液調節(jié)是通過化學信號實現(xiàn)的調節(jié)第二章植物細胞工程第一節(jié)通過植物組織培養(yǎng)可獲得完整植株(2)植物組織培養(yǎng)的實踐應用菊花的組織培養(yǎng)及幼苗的移栽三、植物組織培養(yǎng)通過多種途徑有效地提高生產效率1.組織培養(yǎng)可快速繁殖植物。根據培養(yǎng)過程,植物組織培養(yǎng)可以分為初代培養(yǎng)和繼代培養(yǎng)。初代培養(yǎng):是指從植物體上分離下來的外植體的第一次培養(yǎng)。初代培養(yǎng)獲得的芽、胚狀體等數(shù)量都不多,需要進一步增殖培養(yǎng)。繼代培養(yǎng):將初代培養(yǎng)獲得的培養(yǎng)物轉移到新的培養(yǎng)基上繼續(xù)擴大培養(yǎng)。繼代培養(yǎng)物可以不斷繼代培養(yǎng),所以離體繁殖速度比常規(guī)方法通常要快數(shù)萬倍。離體繁殖主要以營養(yǎng)器官為外植體,快速繁殖的過程就是植物克隆的過程,因此其本質是無性繁殖。優(yōu)點:保持品種的優(yōu)良性狀為什么快速繁殖可以保持優(yōu)良品種的遺傳特性?提示
植物組織培養(yǎng)過程中細胞只進行有絲分裂,因此是一種無性繁殖的技術,無性繁殖的后代其遺傳物質組成與親代一致。2.組織培養(yǎng)技術可用于植物脫毒原理:植物生長點附近的病毒濃度很低甚至無病毒。利用組織培養(yǎng)方法,取一定大小的植物莖尖進行培養(yǎng),再生的植株有可能不帶病毒,從而獲得脫病毒苗,再用脫病毒苗進行繁殖,則種植的作物就不會或極少發(fā)生病毒。(不帶病毒而不是抗病毒)方法:將植物離體培養(yǎng)產生的體細胞胚、芽、愈傷組織等包埋在含有營養(yǎng)成分和保護功能的物質中制成的。結構:包括體細胞胚、人工胚乳和人工種皮三部分。人工胚乳含體細胞胚萌發(fā)所需的營養(yǎng)成分和植物激素,除草劑優(yōu)點:(1)生產過程不受季節(jié)限制。
(2)可以大量、快速繁殖優(yōu)良品種。
(3)對于生育周期長、育性不良且難于有性繁殖的植物,具有重要意義。3.植物培養(yǎng)技術可用于生產人工種子原理:通過植物細胞、組織的培養(yǎng)來提取有價值的天然產物。實例:生產藥物、食品、調料、香料、顏料等。(紫草,人參)4.植物培養(yǎng)技術可用于細胞代謝產物的工業(yè)化生產5.植物培養(yǎng)技術可用于作物新品種的培育細胞突變體的篩選:在組織培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)物的細胞處于不斷分裂狀態(tài),易受培養(yǎng)條件和外界壓力的影響(如射線,化學物質)而發(fā)生變異,篩選出有利個體。單倍體育種:花藥(花粉)離體培養(yǎng)后獲得單倍體,用秋水仙素處理單倍體體植株,使染色數(shù)目加倍,可獲得純合的可育育植株,大大縮短育種周期。轉基因植物的克?。簩⒅参锝M織培養(yǎng)與基因工程技術相結合,將外源基因導入離體植物細胞,可以培育出抗逆、高產及優(yōu)質的轉基因植株。株植物體細胞雜交:下一節(jié)講述細胞代謝產物的工業(yè)化生產需要將細胞培養(yǎng)成完整個體嗎?提示
不需要。細胞產物的工業(yè)化生產往往需要將組織培養(yǎng)進行到愈傷組織階段,然后對愈傷組織細胞進行懸浮培養(yǎng)。特別提醒
植物組織培養(yǎng)與植物細胞培養(yǎng)的區(qū)別
例題1.將紫草細胞進行細胞培養(yǎng),誘導其脫分化產生愈傷組織,再對愈傷組織進行懸浮培養(yǎng)使其大量增殖,以獲取大量的紫草寧。下列關于紫草寧的工廠化生產的敘述,錯誤的是(
)A.細胞產物的工廠化生產是植物細胞工程的重要用途之一B.培養(yǎng)過程中需要脫分化形成愈傷組織,然后懸浮培養(yǎng)愈傷組織細胞C.培養(yǎng)的愈傷組織需要經過再分化產生特定的組織細胞后才能產生特定的細胞產物D.培養(yǎng)的細胞收集后一般要破碎提取有效成分C四.活動:菊花的組織培養(yǎng)及幼苗的移栽(1)生長素和細胞分裂素的用量生長素和細胞分裂素的比值作用效果大促進根的分化,抑制芽的形成小促進芽的分化,抑制根的形成適中促進愈傷組織的形成原理:通過調節(jié)激素的________可控制菊花外植體的生長發(fā)育比例發(fā)芽培養(yǎng)基:含細胞分裂素相對較多和生長素相對較少:MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L生根培養(yǎng)基:含有一定濃度生長素的培養(yǎng)基:MS+NAA0.1mg/L2010年浙江理科綜合試題例題2.將無根的非洲菊幼苗轉入無植物激素的培養(yǎng)基中,在適宜的溫度和光照等條件下培養(yǎng)一段時間后,應出現(xiàn)的現(xiàn)象是答案:B(2)程序:首先用含細胞分裂素相對較多和生長素相對較少的發(fā)芽培養(yǎng)基培養(yǎng)菊花莖段,使其長出較多的叢狀苗。然后將叢狀苗用含有一定濃度生長素的培養(yǎng)基分株培養(yǎng),使其生根,再將生根的試管植株移至草炭土或蛭石中繼續(xù)生長,苗健壯后可移栽定植。
移栽煉苗、定植目的要求(1).探究植物激素在菊花的組織培養(yǎng)中的作用。(2).接種培養(yǎng)菊花外植體使其長出叢狀苗,接種菊花試管苗進行生根培養(yǎng)。(3).嘗試用無土栽培技術培養(yǎng)菊花試管苗。材料用具盆栽菊花,已滅菌的發(fā)芽培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基,75%酒精,無菌水,10%次氯酸鈉(或0.1%氯化汞),0.5mg/mL的NAA母液,0.5mg/mL的6-BA母液,洗滌靈稀釋液,酒精燈,培養(yǎng)瓶,橡皮筋,記號筆,火柴,內裝75%酒精的廣口瓶,小塊紗布,鑷子,剪刀,解剖刀,滅菌的培養(yǎng)皿或無菌紙,200mL及50mL燒杯,廢物缸,無土栽培育苗盤,報紙,噴壺,一定量的珍珠巖和蛭石,高壓滅菌鍋等。用于接種的無菌紙的制作方法:用報紙或牛皮紙將若干張適當大小的紙包起來,經高壓滅菌鍋滅菌后,放入干燥箱中烘干備用。(分割外植體在無菌紙上)洗滌靈稀釋液(去污、乳化可除掉水果蔬菜表面上農藥中的油性成分)母液:將大量元素、微量元素和有機成分分別配成濃度為配方的5--10倍的溶液即為母液,用時稀釋。(減少每次配制培養(yǎng)基的麻煩及減少稱量微量試劑的誤差。)1.菊花外植體的接種與培養(yǎng)(1)提前打開接種室和超凈工作臺的紫外燈,20~30min后關閉,打開超凈工作臺的風機,
5~10min后進入接種室。(2)洗手(3)75%酒精擦拭雙手、臺面及實驗用具。(4)準備無菌紙(分割外植體在無菌紙上),點燃酒精燈,鑷子灼燒滅菌后,用其夾取包在牛皮紙中的無菌紙,平鋪工作臺面上。(5)外植體消毒:
將帶芽的菊花枝條剪成一定大小,在洗滌靈稀釋液中浸泡2min,用流水沖洗干凈后,在75%酒精中消毒30s,再用流水沖洗后置于10%次氯酸鈉溶液中消毒10min,或者在0.1%氯化汞溶液中消毒5~7min,然后用無菌水多次沖洗。消毒后的材料應放在無菌紙或滅菌培養(yǎng)皿中,待接種。方法步驟(6)分割外植體。如圖2-11A和2-11B所示,取已在火焰滅菌后冷卻的鑷子和剪刀等器具在無菌紙上將菊花枝條切割為1cm左右的莖段,每一莖段至少帶有一個芽。也可根據自己的設計選擇菊花的其他器官如葉片為外植體。(7)接種。裝有培養(yǎng)基的瓶口用酒精擦拭消毒后,打開封口膜,讓瓶口旋轉通過火焰。如圖2-11C所示,用灼燒后冷卻的鑷子夾取莖段插入培養(yǎng)基中,每瓶可放入1~3個莖段。接種后,瓶口過火焰,封上封口膜,標注接種日期和其他相關信息。(8)培養(yǎng)。將接種后的材料置于18~25℃的條件下培養(yǎng),每天光照10~12h觀察記錄外植體的生長狀況,直至得到菊花小植株。
在愈傷組織的誘導階段往往要避光培養(yǎng),有利于細胞脫分化產生愈傷組織(如果是在光照條件下,容易分化產生維管等組織,不利于產生大量的愈傷組織)。當愈傷組織分化出芽和葉時,一定要有光照,有利于葉片內葉綠素的合成。2.菊花試管苗的生根培養(yǎng)。(1)將裝有試管苗培養(yǎng)瓶的瓶口用酒精擦拭消毒,打開瓶蓋,瓶口過火焰,用灼燒后冷卻的鑷子夾取試管苗。(2)在無菌紙上將試管苗分割成單株后,接種在生根培養(yǎng)基中,每瓶培養(yǎng)基插苗4~5棵。(3)培養(yǎng)。將試管苗置于培養(yǎng)室培養(yǎng)。保持溫度為20~28℃,每天光照10~12h,一星期后,觀察試管苗生長情況。2~3星期后,試管苗長出健壯根系。3.菊花試管苗的移栽。(1)煉苗。將生根的組培苗從培養(yǎng)室取出,打開瓶口,放置1~2天,以提高試管苗對外部環(huán)境的適應能力。(2)培養(yǎng)基質的滅菌。將蛭石和珍珠巖分別用聚丙烯塑料袋裝好,在高壓滅菌鍋中滅菌20min,冷卻后備用。(3)育苗盤的準備。將蛭石和珍珠巖按1:1的比例混合,倒入干凈的育苗盤中,用木板刮平,噴水浸透基質,備用。(4)試管苗的清洗。用鑷子將試管苗輕輕取出,去掉褐化部分,在清水中洗掉根部瓊脂,注意不要傷害根系。(5)試管苗的栽種。用鑷子在基質上插孔,將試管苗有序地移栽至育苗盤中,輕輕覆蓋、壓實,待盤穴栽滿后,噴水至培養(yǎng)基質處于水飽和狀態(tài)。(6)培養(yǎng)及管理。將育苗盤置于溫室中,覆蓋保鮮膜以保濕,并定期打開保鮮膜通氣。初期避免強光直射,待幼苗成活后除去保鮮膜。培養(yǎng)后期定期澆灌稀釋的MS或其他營養(yǎng)液,為促其快速生長提供營養(yǎng)。定期觀察和記錄幼苗生長狀況。小思考:在組織培養(yǎng)實驗中,為什么要強調所用器械的滅菌和實驗人員的無菌操作?【答案】植物組織培養(yǎng)中用到的培養(yǎng)基含有豐富的營養(yǎng)成分,有利于培養(yǎng)物的生長,然而各種雜菌同樣也可以在上面迅速生長,所以植物組織培養(yǎng)過程中污染現(xiàn)象經常發(fā)生。培養(yǎng)基一旦被污染,迅速生長的各種雜菌不但會和培養(yǎng)物爭奪營養(yǎng),而且這些雜菌生長的過程中會生成大量對培養(yǎng)物有害的物質,導致培養(yǎng)物迅速死亡。
1.不同植物、不同組織的生根和生芽是否都可使用與本實驗相同的生長素和細胞分裂素濃度?不可以,不同植物或同一植物不同器官脫分化、再分化所需要激素種類和比例可能不同。討論2.本實驗用人工合成的激素,而不用植物
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