2023學(xué)年高考生物模擬試卷注意事項1．考生要認真填寫考場號和座位序號。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列有關(guān)生物變異的敘述，錯誤的是（）A．純合子體細胞中的同源染色體上不含等位基因B．純合子雜交產(chǎn)生的后代均為純合子C．等位基因分離導(dǎo)致Aa自交后代出現(xiàn)性狀分離D．基因重組和染色體結(jié)構(gòu)變異均可能引起DNA堿基序列的改變2．下列關(guān)于人類與環(huán)境的敘述，錯誤的是（）A．全球變暖會使我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)能力下降B．臭氧層中臭氧濃度下降會導(dǎo)致皮膚癌患者增加C．酸雨只能影響水體生態(tài)平衡而對陸地生物無影響D．生物多樣性下降是目前人類面臨的全球性環(huán)境問題3．赫爾希和蔡斯精妙的實驗設(shè)計思路使得T2噬菌體侵染大腸桿菌的實驗更具有說服力，相關(guān)敘述錯誤的是A．選擇了化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)簡單的T2噬菌體作為實驗材料B．利用放射性同位素標記技術(shù)區(qū)分DNA和蛋白質(zhì)分子C．被標記的T2噬菌體與大腸桿菌混合后，需長時間保溫培養(yǎng)D．對離心后試管中的上清液和沉淀物進行放射性檢測4．科學(xué)家使用巰基乙醇和尿素處理牛胰核糖核酸酶(一種蛋白質(zhì))，可以將該酶去折疊轉(zhuǎn)變成無任何活性的無規(guī)則卷曲結(jié)構(gòu)。若通過透析的方法除去導(dǎo)致酶去折疊的尿素和巰基乙醇，再將沒有活性的酶轉(zhuǎn)移到生理緩沖溶液中，經(jīng)過一段時間以后，發(fā)現(xiàn)核糖核酸酶活性得以恢復(fù)。下列敘述正確的是（）A．由于巰基乙醇和尿素處理破壞了蛋白質(zhì)中的肽鍵，故該酶失去了活性B．該蛋白質(zhì)的氨基酸序列一定程度上可以影響蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)C．這個實驗證明結(jié)構(gòu)并不一定決定功能D．這個實驗說明蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)從根本上講是由外界環(huán)境決定的5．下列對內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的表述錯誤的是（）A．高等動物體內(nèi)絕大多數(shù)組織細胞與組織液進行物質(zhì)交換B．組織液可以通過毛細血管壁與血漿進行物質(zhì)交換C．高等動物可以依賴血清中的血紅蛋白為全身細胞運送氧D．肝臟的活動除了可以維持血糖濃度穩(wěn)定，還可維持整個組織液中糖濃度的穩(wěn)定6．科學(xué)研究表明，正常細胞的離體培養(yǎng)生長過程一般分為潛伏期、指數(shù)增生期、平臺期和退化消亡期。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．平臺期時細胞分裂速率最快B．各時期細胞計數(shù)前都要用胰蛋白酶處理C．動物細胞培養(yǎng)的原理是細胞的全能性D．若培養(yǎng)的是癌細胞則不會出現(xiàn)平臺期7．如圖是分泌細胞分泌的某種物質(zhì)與靶細胞結(jié)合的示意圖，據(jù)圖判斷下列敘述正確的是（）A．分泌細胞產(chǎn)生的分泌物與靶細胞相互結(jié)合的原因是靶細胞膜上有載體蛋白B．如果分泌細胞是甲狀腺細胞，那么靶細胞不可能是垂體細胞C．如果分泌細胞產(chǎn)生的分泌物為抗利尿激素增加時，可以促進腎小管和集合管對水的重吸收，尿量增加，最終使細胞外液滲透壓升高D．臨床上可以通過抽取血樣來檢測內(nèi)分泌系統(tǒng)的疾病8．（10分）如圖曲線①、②表示完全相同的兩個植物細胞分別放置在A、B溶液中，細胞失水量的變化情況。相關(guān)敘述正確的是（）A．兩曲線均表示隨著時間推移植物細胞失水增多，且A溶液中的植物細胞失水更快B．若B溶液的濃度稍增大，則曲線中b點左移C．兩條曲線的差異主要是由于A、B溶液濃度不同造成的D．5min時取出兩個細胞用顯微鏡觀察，僅根據(jù)細胞狀態(tài)無法判斷細胞是失水還是吸水二、非選擇題9．（10分）秋冬季，為更有效利用秸稈內(nèi)營養(yǎng)成分，在相對密封的塑料大棚內(nèi)，建成秸稈生物反應(yīng)堆如圖。在耕作士上栽培番茄，然后每隔一段時間在生物反應(yīng)堆上進行等距離“澆水---打孔透氣”處理。一段時間后，測定相關(guān)指標，結(jié)果見下表。據(jù)表回答下列問題。指標組別棚內(nèi)CO2濃度地表溫度有效氧含量有效磷含量速效鉀含量微生物密度害蟲卵密度番茄生物量對照組低低低低低低高低處理組高高高高高高低高（1）在生物反應(yīng)堆中加入牛糞，其主要目的是提供______________，以加速秸稈的降解。打孔的目的是___________。（2）表中的__________須通過細胞膜上的載體蛋白進入番茄根尖細胞。（3）與對照組相比，處理組提高了番茄生物量。從能量流動的角度分析，表中可提高能量輸入番茄的直接因素是_________________________，可降低番茄能量輸出的直接因素是_____________________。10．（14分）為使水稻獲得抗除草劑性狀，科研人員將除草劑草甘膦抗性基因轉(zhuǎn)入水稻植株，獲得抗草甘膦轉(zhuǎn)基因水稻。（1）將草甘膦抗性基因作為_____，與Ti質(zhì)粒用相同的_____和DNA連接酶處理構(gòu)建基因表達載體。（2）用_____處理農(nóng)桿菌后獲得感受態(tài)細胞，將其與基因表達載體混合完成轉(zhuǎn)化后，在添加_____的培養(yǎng)基中，經(jīng)篩選1得到含基因表達載體的農(nóng)桿菌。（3）利用PCR技術(shù)，可以鑒定被侵染的愈傷組織中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下：5'﹣﹣﹣ATGGCT………AGGAAC﹣﹣﹣3'3'﹣﹣﹣TACCGA………TCCTTG﹣﹣﹣5'根據(jù)上述序列應(yīng)選擇引物_____（填字母）進行PCR。A．引物：5'﹣TACCGA﹣3'B．引物：5'﹣GTTCCT﹣3'C．引物：5'﹣AUGGCU﹣3'D．引物：5'﹣ATGGCT﹣3'（4）PCR擴增時需要根據(jù)草甘膦抗性基因序列設(shè)計_____種引物，其原因是_____。（5）除了鑒定愈傷組織中是否含有目的基因以外，還可以利用GUS基因表達產(chǎn)物的鑒定進行圖中的篩選2，以確定目的基因是否_____。兩次篩選后得到的轉(zhuǎn)基因愈傷組織經(jīng)過細胞的_____過程，獲得轉(zhuǎn)基因水稻。11．（14分）我國一科研團隊將小麥液泡膜Na+/K+逆向轉(zhuǎn)運蛋白基因（TaNHX2基因）轉(zhuǎn)移到水稻細胞內(nèi)，獲得了轉(zhuǎn)基因耐鹽水稻新品種。圖1是獲取的含有目的基因的DNA片斷，Sau3AI、EcoRI、BamHI為三種限制酶，圖中箭頭所指為三種限制酶的切點；圖2是土壤農(nóng)桿菌中用于攜帶目的基因的Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖。請分析回答：（l）據(jù)圖分析可知，要構(gòu)建基因表達載體，需要用________限制酶對DNA片段和質(zhì)粒進行切割，再用____連接。（2）為了獲得更多的目的基因用于實驗研究，可以用小麥葉肉細胞的基因組為模板，利用TaNHX，基因的特異引物，通過________方法進行擴增，該方法用到的酶是____。（3）常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將耐鹽基因?qū)胨炯毎Ｏ葘⒛望}基因插入Ti質(zhì)粒的_________中，然后導(dǎo)入農(nóng)桿菌中，再通過農(nóng)桿菌侵染水稻細胞，將耐鹽基因插入水稻細胞的_________上，最后通過植物細胞工程中的____技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因植株，從而使其遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達。（4）為了檢測實驗成果，科研工作者在個體水平的檢測方法是____。12．某生物興趣小組的同學(xué)在20℃和相同的光照強度條件下，以菠菜葉為實驗材料，用不同濃度的NaHCO3溶液控制CO2濃度，進行了“探究CO2濃度對光合作用影響”的實驗，獲得如下圖所示的實驗結(jié)果（葉圓片大小相同，實驗前葉圓片細胞間隙中的氣體已抽出；NaHCO3溶液濃度變化對溶液pH的影響忽略不計）。請回答下列問題：（1）該小組同學(xué)在進行上述正式實驗前，先將NaHCO3溶液濃度梯度設(shè)置為0、1%、2%、3%、4%，每組放入20片葉圓片，其他條件均與上述正式實驗相同，2min時得到的結(jié)果如下表。NaHCO3溶液濃度01%2%3%4%上浮葉圓片數(shù)量/片011430該實驗是預(yù)實驗，其目的是________________________。4min后，除蒸餾水組葉圓片未見上浮外，其他組葉圓片均有上浮。NaHCO3溶液在常溫下能分解產(chǎn)生CO2，有人認為葉圓片上浮是由CO2氣泡附著引起的。為此實驗小組另設(shè)計了一個對照實驗，最好選擇上表中濃度為___________的NaHCO3溶液進行對照，將20片葉圓片放到溶液中后進行遮光處理；若結(jié)果為___________________，則說明NaHCO3溶液產(chǎn)生的CO2不足以引起葉圓片的上浮。（2）由曲線圖可以看出，20℃條件下，NaHCO3溶液濃度為________時最有利于葉圓片進行光合作用，在此濃度下若適當增加光照強度，則4min時上浮的葉圓片數(shù)量可能會____________。當NaHCO3溶液濃度大于1%時，上浮的葉圓片數(shù)量減少，其原因可能是________________________________。（3）在進行正式實驗時，若要使得到的曲線更光滑，變化趨勢更細致，則應(yīng)進行的操作是_______________________________________________°

參考答案（含詳細解析）一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【答案解析】

純合子是指遺傳因子（基因）組成相同的個體，如AA或aa；其特點是純合子自交后代全為純合子，無性狀分離現(xiàn)象?！绢}目詳解】A、純合子是由基因型相同的雌雄配子結(jié)合形成的受精卵發(fā)育而成的個體，體細胞中的同源染色體上不含等位基因，A正確；B、純合子雜交產(chǎn)生的后代可能為雜合子，如AA×aa→Aa，B錯誤；C、由于減數(shù)分裂形成配子時等位基因分離，導(dǎo)致Aa自交后代出現(xiàn)性狀分離，C正確；D、基因重組和染色體結(jié)構(gòu)變異使DNA分子中基因的排列順序發(fā)生改變，從而引起了DNA堿基序列的改變，D正確。故選B。2、C【答案解析】

全球性的環(huán)境問題包括全球氣候變化、臭氧層破壞和損耗、生物多樣性減少、土地荒漠化、森林植被破壞、水資源危機和海洋資源破壞、酸雨污染等?！绢}目詳解】A、全球氣候變暖，導(dǎo)致植物代謝紊亂，因此會使得我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)能力下降，A正確；B、臭氧層中臭氧濃度下降，導(dǎo)致照射到地面的紫外線增多，因此會導(dǎo)致皮膚癌患者增加，B正確；C、酸雨不僅會影響水體生態(tài)平衡，對陸地生物也有影響，C錯誤；D、生物多樣性下降是目前人類面臨的全球性環(huán)境問題，D正確。故選C。3、C【答案解析】

本題考查噬菌體侵染細菌的實驗，要求學(xué)生識記噬菌體的結(jié)構(gòu)及噬菌體侵染細菌的過程，明確噬菌體結(jié)構(gòu)簡單，其侵染細菌時只有DNA進入細菌；掌握噬菌體侵染細菌實驗的過程及實驗現(xiàn)象，能運用所學(xué)的知識準確判斷各選項。【題目詳解】A、噬菌體由蛋白質(zhì)和DNA組成，其化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)簡單，是噬菌體侵染細菌實驗獲得成功的原因之一，A正確；B、采用同位素標記法分別標記噬菌體的DNA和蛋白質(zhì)，可以證明噬菌體侵染細菌時只有DNA進入細菌，這也是噬菌體侵染細菌實驗獲得成功的原因之一，B正確；C、被標記的T2噬菌體與大腸桿菌混合后，不能長時間培養(yǎng)，否則，大腸桿菌裂解后，會釋放子代噬菌體，影響實驗結(jié)果，C錯誤；D、離心后檢測到35S標記的一組放射性主要集中在上清液，32P標記的一組放射性主要集中在沉淀物中，則可推測侵入細菌中的物質(zhì)是DNA，噬菌體的蛋白質(zhì)外殼留在細菌的外面，D正確。故選C。4、B【答案解析】

分析題干信息可知：巰基乙醇和尿素可以使牛胰核糖核酸酶失去活性，當通過透析的方法除去去折疊的尿素和巰基乙醇時，該核糖核酸酶又復(fù)性，說明巰基乙醇和尿素沒有改變氨基酸的序列，只是蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)暫時發(fā)生變化?！绢}目詳解】AC、由題意知，由于巰基乙醇和尿素處理后“將該酶去折疊轉(zhuǎn)變成無任何活性的無規(guī)則卷曲結(jié)構(gòu)”，即破壞了蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，才使酶失去了活性，該實驗可證明蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)決定功能，A、C錯誤；

B、蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)與構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸的種類、數(shù)目、排列順序和肽鏈的空間結(jié)構(gòu)有關(guān)，B正確；

D、該實驗?zāi)苷f明外界環(huán)境能影響蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，但不能說明蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)從根本上講是由外界環(huán)境決定的（蛋白質(zhì)是在DNA的指導(dǎo)下經(jīng)轉(zhuǎn)錄和翻譯構(gòu)成形成的，其結(jié)構(gòu)從根本上講是由DNA分子中遺傳信息的多樣性決定的），D錯誤。

故選B?！敬鸢更c睛】本題考查了蛋白質(zhì)變性的有關(guān)知識，要求學(xué)生明確高溫、過酸、過堿條件下酶的空間結(jié)構(gòu)改變而導(dǎo)致其活性喪失，并能將所學(xué)知識遷移運用，題干信息準確判斷各項。5、C【答案解析】

內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)是在神經(jīng)系統(tǒng)和體液的調(diào)節(jié)下，通過各個器官、系統(tǒng)的協(xié)調(diào)活動，共同維持內(nèi)環(huán)境相對穩(wěn)定的狀態(tài)。【題目詳解】A、組織液是絕大多數(shù)組織細胞直接生活的內(nèi)環(huán)境，高等動物體內(nèi)絕大多數(shù)組織細胞與組織液進行物質(zhì)交換，A正確；B、組織液與血漿被血管壁阻隔，故兩者要進行物質(zhì)交換需通過毛細血管壁，B正確；C、高等動物可以依賴紅細胞中的血紅蛋白為全身細胞運送氧，C錯誤；D、肝臟可以通過合成或分解肝糖原來維持血糖濃度穩(wěn)定，血漿和組織液可以進行過物質(zhì)交換，故可組織液中血糖濃度的穩(wěn)定，D正確。故選C。【答案點睛】本題考查穩(wěn)態(tài)的相關(guān)知識，要求考生識記內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的概念、調(diào)節(jié)機制及意義，能結(jié)合所學(xué)的知識準確判斷各選項。6、B【答案解析】

動物細胞培養(yǎng)1、定義：就是從動物機體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個細胞，然后，在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖。2、原理：細胞增殖。3、過程：材料處理→原代培養(yǎng)→轉(zhuǎn)代培養(yǎng)?！绢}目詳解】A、平臺期時細胞分裂速率減少為0，A錯誤；B、各時期細胞計數(shù)前都要用胰蛋白酶處理，形成單個細胞，便于顯微觀察，B正確；C、動物細胞培養(yǎng)的原理是細胞增殖，C錯誤；D、動物細胞培養(yǎng)時，由于資源和空間有限，癌細胞也會出現(xiàn)平臺期，D錯誤。故選B?！敬鸢更c睛】本題考查動物細胞培養(yǎng)，意在考查學(xué)生識記動物細胞培養(yǎng)的原理，掌握S型曲線的增長速率。7、D【答案解析】

本題是不同細胞產(chǎn)生的信息分子作用于靶細胞的過程和引起的生理效應(yīng)，根據(jù)題圖和選項內(nèi)容梳理相關(guān)的過程，分析解答?！绢}目詳解】A、分泌細胞產(chǎn)生的分泌物與靶細胞相互結(jié)合原因是因為靶細胞膜上有受體蛋白，A錯誤；B、如果分泌細胞為甲狀腺細胞，分泌物是甲狀腺激素，甲狀腺激素含量升高會抑制垂體合成和分泌促甲狀腺激素，所以靶細胞可能是垂體，B錯誤；C、當細胞外液滲透壓升高時，可刺激下丘腦滲透壓感受器興奮，分泌抗利尿激素促進腎小管和集合管對水的重吸收，使尿量減少，細胞外液滲透壓降低，C錯誤；D、內(nèi)分泌腺沒有導(dǎo)管，分泌的激素彌散到體液中，隨血液流到全身，傳遞各種信息，因此，臨床上可以通過抽取血樣來檢測內(nèi)分泌系統(tǒng)的疾病，D正確。故選D。8、D【答案解析】

1．據(jù)圖分析，A細胞失水量增加，細胞發(fā)生質(zhì)壁分離；B細胞先失水量增加后減少，說明細胞先發(fā)生質(zhì)壁分離后自動復(fù)原。

2．質(zhì)壁分離和復(fù)原實驗中，要選擇活的成熟的植物細胞，即含有大液泡的植物細胞；若外界溶液的濃度增大，導(dǎo)致濃度差變大，所以單位時間內(nèi)，失水程度大，復(fù)原所需要的時間相對較長。【題目詳解】A、②曲線顯示，在b點后B溶液中的植物細胞開始吸水，A錯誤；B、b點后B溶液中的植物細胞開始吸水，是因為其細胞液濃度大于B溶液濃度，若B溶液濃度增大，要使其中植物細胞的細胞液濃度大于B溶液濃度所需時間廷長，即b點右移，B錯誤；C、①顯示A溶液中的植物細胞失水10nin后達到相對穩(wěn)定狀態(tài)，②顯示B溶液中的植物細胞失水l0min后反過來吸水，說明B溶液中的溶質(zhì)分子進入了液泡，使細胞液濃度增大，所以，兩條曲線的差異主要是由于A、B溶液溶質(zhì)分子不同造成的，C錯誤；D、5min時取岀兩個細胞用顯微鏡觀察，都處于質(zhì)壁分離狀態(tài)，該铏胞可能是處于大于細胞液濃度的外界溶液濃度中，繼續(xù)失水，也可能是處于小于細胞液濃度的外界溶液濃度中，細胞吸水，正在發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原，D正確。故選D?！敬鸢更c睛】本題主要考查質(zhì)壁分離和復(fù)原實驗，要選擇含有大液泡的植物細胞；在一定范圍內(nèi)，外界溶液與細胞液的濃度差越大，失水程度越高，但能否發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原，則取決于質(zhì)壁分離后的細胞的生活狀態(tài)，即活細胞還是死細胞。二、非選擇題9、微生物促進根部有氧呼吸磷、鉀棚內(nèi)CO2濃度高害蟲卵密度低【答案解析】

根據(jù)題干信息和圖形分析，秸稈生物反應(yīng)堆在15cm的耕作土以下的20cm，從上到下按照牛糞-玉米秸稈-牛糞-玉米秸稈的順序排布；與對照組相比，處理組只有害蟲卵密度低于對照組，而棚內(nèi)CO2濃度、地表溫度、有效氧含量、有效磷含量、速效鉀含量、微生物密度、番茄生物量都高于對照組?！绢}目詳解】（1）在生物反應(yīng)堆中加入牛糞的目的是提供更多的微生物，加速秸稈中有機物的降解，進而為番茄提供礦質(zhì)元素；打孔的目的是促進番茄根部有氧呼吸，為根吸收磷、鉀等提供能量。（2）表格中的磷、鉀在土壤中主要是以離子的形式存在的，以主動運輸?shù)姆绞竭M入番茄根細胞，而主動運輸需要細胞膜上載體蛋白的協(xié)助。（3）二氧化碳是光合作用的反應(yīng)物之一，與對照組相比，處理組提高能量輸入番茄的直接因素是其棚內(nèi)CO2濃度高；而處理組的害蟲卵密度低是可降低番茄能量輸出的直接因素。【答案點睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握實驗設(shè)計的基本原則和思路，能夠根據(jù)圖形分析處理組的處理方法，并能夠根據(jù)表格分析處理組的各項指標與對照組的差別，進而結(jié)合題干要求分析答題。10、目的基因限制性核酸內(nèi)切酶CaCl2潮霉素BD2保證基因的兩條反向平行的鏈都做模板，且其上堿基序列不同表達再分化【答案解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成；（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA﹣﹣分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)﹣﹣抗原﹣抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！绢}目詳解】（1）用相同的限制性內(nèi)切酶切割目的基因和質(zhì)粒后露出相同的黏性末端再用DNA連接酶連接，從而構(gòu)建基因表達載體，題中以草甘膦抗性基因作為目的基因。（2）依據(jù)圖中信息，農(nóng)桿菌用CaCl2處理后變成感受態(tài)細胞，將其與基因表達載體混合完成轉(zhuǎn)化后，在含有標記基因表達的潮霉素培養(yǎng)基中篩選，從而獲得含目的基因表達載體的農(nóng)桿菌。（3）根據(jù)已知草甘膦抗性基因的部分序列以及雙鏈DNA分子的結(jié)構(gòu)特點（反向平行），再結(jié)合DNA復(fù)制（PCR中）的特點，即子鏈合成的方向是從5’到3’，應(yīng)選擇引物B、D進行PCR擴增。（4）為使基因的兩條反向平行的鏈都做模板，而且其堿基序列不同，所以，PCR擴增時需要根據(jù)草甘膦抗性基因序列設(shè)計2種引物。（5）除了鑒定愈傷組織中是否含有目的基因以外，還可以利用GUS基因表達產(chǎn)物的鑒定進行圖中的篩選2，以確定目的基因是否表達。兩次篩選后得到的轉(zhuǎn)基因愈傷組織經(jīng)過再分化過程，獲得轉(zhuǎn)基因水稻。【答案點睛】本題主要考查基因工程的應(yīng)用相關(guān)知識，識記和理解目的基因的獲取、表達載體的構(gòu)建以及目的基因的檢測等知識是解答本題的關(guān)鍵。11、EcoRIDNA連接酶PCRTaq酶（或耐高溫的DNA聚合酶）T-DNA染色體DNA植物組織培養(yǎng)將轉(zhuǎn)基因水稻種植在鹽堿地上或用一定濃度的鹽水澆灌觀察結(jié)果【答案解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細胞：根據(jù)受體細胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛毎姆椒ㄓ修r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛毎钣行У姆椒ㄊ秋@微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛毎姆椒ㄊ歉惺軕B(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【題目詳解】（1）如圖所示，用EcoRI酶切可獲得目的基因，同時質(zhì)粒上也具有EcoRI酶切位點，因此可用EcoRI限制酶對DNA片段和質(zhì)粒進行切割，再用DNA