節(jié)抗體的制備抗血清：指抗原人工免疫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，獲得含特異性抗體的血清。多克隆抗體(PAb)：多個(gè)抗原決定簇免疫機(jī)體所產(chǎn)生的多種抗體的混合物。單克隆抗體（monoclonalantibody，MAb）：只針對(duì)某一特定的抗原決定簇，純度高的抗體。

第四章抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第1頁!Back

抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第2頁!抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第3頁!一、抗血清的制備

1、免疫動(dòng)物抗原佐劑免疫動(dòng)物2、抗血清的純化與保存采血純化與保存3、抗血清的鑒定效價(jià)

親和力抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第4頁!Affinity=attractiveandrepulsiveforcesAbAgHighAffinityAbAgLowAffinityAffinityStrengthofthereactionbetweenasingleantigenicdeterminantandasingleAbbiningsite抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第5頁!二、單抗的制備1、單抗的制備原理2、單抗的制備方法抗原提純和動(dòng)物免疫骨髓瘤細(xì)胞及飼養(yǎng)細(xì)胞的制備細(xì)胞融合篩選陽性株單克隆抗體的制備和凍存單克隆抗體的純化

GO抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第6頁!抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第7頁!BACK抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第8頁!抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第9頁!抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第10頁!

三、單抗的應(yīng)用

臨床檢測(cè)、抑制器官移植排斥、治療自身免疫疾病、生物導(dǎo)彈等?？乖贵w反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第11頁!抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第12頁!

抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第13頁!CrossReactivityTheabilityofanindividualAbbiningsitetoreactwithmorethanoneantigenicdeterminant.TheabilityofapopulationofAbmoleculestoreactwithmorethanoneAgAnti-AAbAgAAnti-AAbAgBSharedepitopeAnti-AAbAgCSimilarepitopeCrossreactions抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第14頁!三、影響抗原抗體反應(yīng)的因素FactorsAffectingMeasurementofAg/AbReactionsAffinityAg:AbratioPhysicalformofAgAbexcessAgexcessEquivalence–LatticeformationPHTemperamentElectrolyte

抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第15頁!Agglutination/HemagglutinationDefinition-teststhathaveastheirendpointtheagglutinationofaparticulateantigenYYY+QualitativeagglutinationtestAgorAb抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第16頁!Agglutination/HemagglutinationDefinitionQualitativetestQuantitativetestApplications

BloodtypingBacterialinfectionsFourfoldriseintiterPracticalconsiderations

EasySemi-quantitative1/21/41/81/161/321/641/1281/2561/512抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第17頁!抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第18頁!BACK抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第19頁!抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第20頁!BACK抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第21頁!BACK抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第22頁!直接法－抗原包被AgYLabeledAbTissueSection抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第23頁!

夾心法－直接夾心

SolidPhaseYAgImmobilizedYAginPatient’ssampleLabeledAb抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第24頁!直接夾心法直接法抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第25頁!抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第26頁!BACK抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第27頁!CalculationofAffinityAg+AbAg-AbKeq=

[Ag-Ab][Ag]x[Ab]ApplyingtheLawofMassAction:抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第28頁!

骨髓瘤細(xì)胞脾臟淋巴細(xì)胞（HGPRT-TK-)（HGPRT+TK+）在HAT中不能生長(zhǎng)體外培養(yǎng)過程中死亡↓←PEG雜交瘤細(xì)胞(HGPRT+、TK+)↓在HAT中大量長(zhǎng)期繁殖↓克隆化↓產(chǎn)生單抗BACK抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第29頁!抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第30頁!BACK抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第31頁!抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第32頁!BACK抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第33頁!抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第34頁!

第二節(jié)抗原抗體反應(yīng)的原理一、抗原抗體反應(yīng)的原理1.親水膠體轉(zhuǎn)化疏水膠體2.抗原抗體結(jié)合力電荷引力（靜電引力）范登華引力氫鍵結(jié)合力疏水作用力抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第35頁!二、抗原抗體反應(yīng)的特性

NatureofAg/AbReactions

LockandKeyConcept

antibodybiningsitetoreactwithonlyoneantigenicdeterminant.Theabilityofapopulationofantibodymoleculestoreactwithonlyoneantigen.Specificity抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第36頁!Non-covalentBondsHydrogenbondsElectrostaticbondsVanderWaalforcesHydrophobicbondsReversibleMultipleBonds

Source:Li,Y.,Li,H.,Smith-Gill,S.J.,Mariuzza,R.A.,Biochemistry39,6296,2000

:85/chime2/lyso-抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第37頁!

第三節(jié)常見的免疫分析方法

一、凝聚反應(yīng)(Agglutination)二、沉淀反應(yīng)1、溶液中的沉淀反應(yīng)2、凝膠擴(kuò)散沉淀3、免疫電泳

血清免疫電泳

火箭電泳

對(duì)流免疫電泳三、補(bǔ)體參與的反應(yīng)四、免疫標(biāo)記的抗原抗體技術(shù)

酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第38頁!Agglutination/HemagglutinationQuantitativeagglutinationtestTiterProzone1/21/41/81/161/321/641/1281/2561/5121/1024Pos.Neg.Titer648512<232128324Patient12345678抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第39頁!抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第40頁!抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第41頁!ImmunoelectrophoresisMethodAgsareseparatedbyelectrophoresisInterpretationPrecipitinarcrepresentindividualantigensAgAgAbAgAbAbisplacedintroughcutintheagarBACK+-抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第42頁!CountercurrentelectrophoresisMethodAgandAbmigratetowardeachotherbyelectrophoresisUsedonlywhenAgandAbhaveoppositechargesQualitativeRapidAgAb-+BACK抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第43頁!ComplementFixationAgmixedwithtestserumtobeassayedforAbStandardamountofplementisaddedErythrocytescoatedwithAbsisaddedAmountoferythrocytelysisisdeterminedAgYYPatient’sserum

YYYYYYYYAgNoAgAgMethodologyBACK抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用共49頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第44頁!

酶標(biāo)記抗體技術(shù)

免疫酶技術(shù)的基本程序：將酶分子與抗體或抗抗體分子共價(jià)結(jié)合，酶標(biāo)記抗體可與存在于組織細(xì)胞或吸附于固相載體上的抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下催化底物水解、氧化或還原等反應(yīng)，產(chǎn)生有顏色的物質(zhì)。酶降解底物的量與呈現(xiàn)的顏色成正比。用于標(biāo)記的酶