本文格式為Word版，下載可任意編輯——EGFRKi67和P16在宮頸鱗狀上皮內病變分級中的應用

【摘要】目的：探討EGFR、Ki67和P16在宮頸鱗狀上皮內病變（SIL）分級中的應用。方法：應用免疫組化SP法標記60例宮頸鱗狀上皮化生、70例低級別宮頸上皮內病變（LSIL）和80例高級別宮頸上皮內病變（HSIL）中EGFR、Ki67和P16的表達。結果：EGFR、Ki67和P16在鱗狀上皮化生、LSIL和HSIL中的蛋白表達對比，差異均有統(tǒng)計學意義（P0.05），具有可比性。

1.2方法本組標本用4%福爾馬林固定，脫水，石蠟包埋，切片機切片4μm，SP法免疫組化染色，EGFR標記采用鼠抗人EGFR單克隆抗體、P16標記采用鼠抗人P16單克隆抗體、Ki67標記采用鼠抗人Ki67單克隆抗體，試劑盒均來自福州邁新生物公司，用磷酸鹽緩沖液（PBS）代替一抗為陰性對照，以已知陽性切片作陽性對照。

1.3結果判定標準EGFR定位于細胞膜或細胞漿，P16定位在細胞核和/或胞漿，Ki67定位在細胞核，均以光鏡下查看顯示棕黃色納入為陽性細胞，均以無陽性細胞或陽性細胞數(shù)25%～50%納入為（++），>50%納入為（+++）。

1.4統(tǒng)計學處理全體數(shù)據(jù)均經(jīng)SPSS20.0統(tǒng)計學軟件舉行統(tǒng)計學分析，計量資料用（x±s）表示，對比采用t檢驗或F檢驗；計數(shù)資料以率（%）表示，對比采用字2檢驗或Z檢驗，采用Pearson相關分析方法分析EGFR、Ki67和P16蛋白在不同病理類型宮頸組織之間表達的相關性，以P0.05），EGFR、Ki67和P16在鱗狀上皮化生與HSIL中蛋白表達兩兩對比，均無明顯相關（r=0.10、0.08、0.08，P>0.05），EGFR、Ki67和P16在LSIL與HSIL中蛋白表達兩兩對比，均呈正相關（r=0.35、0.48、0.47，P<0.05）。

3議論

人乳頭狀瘤病毒感染是宮頸癌發(fā)病的主要致病因素，這與感染后導致宿主癌基因被激活的一系列機制有關，諸如：人乳頭狀瘤病毒的E6、E7基因可整合于宿主的基因組內，分別引起P53、Rb蛋白的奇怪表達，進而引起Ki67、P16蛋白的奇怪表達；EGFR是原癌基因c-erbB-1的表達產(chǎn)物，是信號傳導、細胞周期調控的關鍵分子[8-10]。既往研究顯示，P16基因以缺失、突變方式廣泛參與腫瘤形成，如直接參與細胞周期的調控，負調理細胞增殖及分裂，其失活可能導致細胞惡性增殖[11-12]。Ki67是一種核增殖抗體，表達于GO期以外處于其他細胞周期的細胞，可作為細胞增殖標記物用于腫瘤和回響性增生病變的鑒別[13-14]。EGFR與其受體結合可促進細胞的增殖分化并加速細胞的惡性轉化，與腫瘤的組織學分型緊密相關，已在為胃癌、乳腺癌的診斷中被應用[15-16]。故本研究選取EGFR、Ki67和P16蛋白作為宮頸鱗狀上皮內病變的標記物。同時，選取EGFR、Ki67和P16蛋白作為宮頸鱗狀上皮化生的標記物，宮頸鱗狀上皮化生在組織學中于SIL好像、易混淆[17-21]，以作對照。

本研究結果說明，EGFR、Ki67和P16在鱗狀上皮化生、LSIL和HSIL中的蛋白表達對比，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），且均以HSIL為最高，LSIL次之，鱗狀上皮化生為最低，叢玲華等[20]、姚秀華等[21]的研究有過類似報道，本研究與其持有類似觀點，其指出，三種蛋白在宮頸鱗狀上皮化生等良性病變中幾乎呈陰性，而在LSIL和HSIL中呈陽性，且隨病情進展而陽性強度增高，提示三種蛋白在高表達與宮頸癌的進展緊密關系。但這并缺乏以用于宮頸鱗狀上皮內病變診斷分級。同時，本研究光鏡下查看到宮頸鱗狀上皮化生中EGFR、Ki67和P16較LSIL及HSIL陽性細胞數(shù)目少，LSIL中EGFR較Ki67和P16陽性細胞數(shù)目少，LSIL中EGFR、Ki67和P16較HSIL陽性細胞數(shù)目少，且主要分布于基底層，HSIL中EGFR、Ki67和P16較本組上述組織陽性細胞數(shù)目多，且陽性細胞主要分布于上皮下2/3層以上及呈迷漫性分布。由此，可見LSIL及HSIL中EGFR、Ki67和P16陽性數(shù)目隨病情進展而增加，且陽性細胞分布也隨之變更。本研究顯示，EGFR、Ki67和P16在LSIL與HSIL中蛋白表達兩兩對比均呈正相關（P<0.05）。提示，宮頸癌的進展與多基因調控緊密相關。故聯(lián)合檢測EGFR、Ki67和P16在LSIL和HSIL中的蛋白表達，同時結合LSIL和HSIL的分布特征，以降低假陽性率，提高診斷分級的切實性。

綜上所述，E