6、紀律是自由的第一條件?！诟駹?、紀律是集體的面貌，集體的聲音，集體的動作，集體的表情，集體的信念。——馬卡連柯8、我們現(xiàn)在必須完全保持黨的紀律，否則一切都會陷入污泥中?！R克思9、學校沒有紀律便如磨坊沒有水?！涿兰~斯10、一個人應該：活潑而守紀律，天真而不幼稚，勇敢而魯莽，倔強而有原則，熱情而不沖動，樂觀而不盲目?！R克思細胞與基因治療細胞與基因治療6、紀律是自由的第一條件?！诟駹?、紀律是集體的面貌，集體的聲音，集體的動作，集體的表情，集體的信念?！R卡連柯8、我們現(xiàn)在必須完全保持黨的紀律，否則一切都會陷入污泥中?！R克思9、學校沒有紀律便如磨坊沒有水?！涿兰~斯10、一個人應該：活潑而守紀律，天真而不幼稚，勇敢而魯莽，倔強而有原則，熱情而不沖動，樂觀而不盲目?！R克思細胞與基因治療抗心律失常藥物治療的新方法

——基因與細胞治療基因與細胞治療由于現(xiàn)有的治療心律失常的局限性，近年出現(xiàn)了以基因工程和細胞工程為基礎(chǔ)的心律失常治療新方案。6、紀律是自由的第一條件。——黑格爾細胞與基因治療細胞與基因1細胞與基因治療課件2細胞與基因治療課件3細胞與基因治療課件4細胞與基因治療課件5

在培養(yǎng)的兔心肌細胞(兔心肌細胞在體外培養(yǎng)幾天后通常出現(xiàn)APD延長,EAD發(fā)生率明顯增高)中轉(zhuǎn)入hERG基因,使APD明顯縮短,相對不應期明顯增加,EAD發(fā)生率下降四倍多,且能抑制電交替。所以hERG基因可用于治療與QT間期延長和復極離散度增加相關(guān)的室性心動過速。在培養(yǎng)的兔心肌細胞(兔心肌細胞在體外培養(yǎng)幾天后6APD↓APD↓7EAD發(fā)生率↓EAD發(fā)生率↓8緩慢性心律失常的基因治療1.增強起搏細胞的變時功能2.生物性的起搏細胞緩慢性心律失常的基因治療9

增強起搏細胞的變時功能編碼β2腎上腺素能受體的質(zhì)粒注入約克豬的右房的起搏部位,上調(diào)腎上腺素能受體的表達。電生理的檢測顯示,心房組織的局部過表達腎上腺素能受體可以明顯增強起搏組織的變時效應，使現(xiàn)存的或病變的起搏細胞的功能得到改善和加強。心速108→127→16350%↑

增強起搏細胞的變時功能心速108→127→1610

生物性的起搏細胞

起搏離子流If是一種超極化激活的內(nèi)向離子流,它介導竇房結(jié)的四期自動除極。超極化激活的環(huán)核苷酸門控的(Hyperpolarizationactivatedcyclicnucleotidegated,HCN)通道是心臟起搏離子流If產(chǎn)生的基礎(chǔ)。HCN基因家族的四個成員目前發(fā)現(xiàn)在心臟中存在的有3個：HCN1、HCN2和HCN4。生物性的起搏細胞

起搏離子流If是一種超11ECGleadsI,II,andRA,andLA(overlyinginjectionsite)electrogramsduringnormalsinusrhythminananesthetizeddogpreviouslyinjectedwithHCN2+GFP

（greenfluorescentprotein）intoLA(initial2beats).將含有HCN2基因的腺病毒注射入犬的左房（LA）。4天后進行的電生理標測發(fā)現(xiàn),當刺激迷走神經(jīng)誘發(fā)出竇房結(jié)停搏后,左房的注射部位出現(xiàn)了自發(fā)性的左房節(jié)律。而只注射了GFP的對照犬則無任何的自發(fā)節(jié)律。

QuJetal.Circulation2003;107:1106-1109ECGleadsI,II,andRA,andL12PacemakerfunctionininvitromodelmHCN2轉(zhuǎn)染的hMSCs影響耦合的心臟細胞的興奮性。綜上，過表達HCN2基因可以增大起搏電流,使移植的心肌細胞具有起搏能力。PotapovaIetal.CirculationResearch2004;94:952-959Pacemakerfunctionininvitro13

細胞治療置入體外誘導出的治療細胞或者將干細胞作為載體,進行基因改造。

細胞治療14可從以下幾個層面進行心律失常的治療：替代心臟起搏、傳導系統(tǒng)病變或缺失的細胞；移植基因工程化改造的細胞,表達某種離子通道,和受體組織細胞耦聯(lián),改變受體組織的電生理特性；移植細胞通過局部分泌一些重組蛋白改變心臟的電生理環(huán)境?？蓮囊韵聨讉€層面進行心律失常的治療：15干細胞是一種具有多分化潛能和自我復制功能的早期未分化細胞，在特定的條件下可能分化為不同的功能細胞，形成多種組織和器官。

目前主要進行的是體外干細胞培養(yǎng)移植研究，包括胚胎干細胞（embryonicstemcell，ESC）、骨髓間充質(zhì)干細胞（MesenchymalStemCells,MSCs）等。干細胞是一種具有多分化潛能和自我復制功能的早期16胚胎干細胞（ESC）在體外并不僅僅分化為單個心肌細胞,而是可以形成功能性的心臟合胞體(syncytium),具有穩(wěn)定的起搏和傳導能力,并且對AD和ACh的刺激有反應。但由于來源有限,移植后可能存在免疫排斥反應,且涉及到倫理學問題,故有一定局限性。.早期心肌細胞小而圓的細胞更大和更細長的細胞幾乎所有的心肌細胞，單核。胚胎干細胞（ESC）在體外并不僅僅分化為單個17Morphometricchangesinthecell'slength,width,area,andlength-to-widthratioduringinvitrocardiomyocytematuration.*P<0.05comparedwithbaselinemeasurements.Morphometricchangesinthece18

骨髓間充質(zhì)干細胞（MSCs）在體內(nèi)植入心肌后能向心肌細胞方向分化，表達心肌細胞多種蛋白：肌球蛋白重鏈(MHC)、間隙連接蛋白Cx43(Connexin43)、心肌鋅指轉(zhuǎn)錄因子(GATA-4)等。故MSCs能作為治療心臟疾病的一種移植細胞,替代部分受損心肌細胞。由于MSCs能通過骨髓穿刺反復收集、體外大量擴增,取材方便,擴增后自體回輸,不必應用免疫抑制劑,成為近年來最具吸引力的心肌再生種子細胞。骨髓間充質(zhì)干細胞（MSCs）在體內(nèi)植入心肌后能19

在心肌梗死(myocardialinfarction,MI)治療中有研究發(fā)現(xiàn)MSCs移植后能改善MI后心律失常的發(fā)生。這需要由MSCs分化的細胞具有自律性、興奮性和傳導性。MSCs在5—aza誘導下能分化為具有自主搏動功能的心肌樣細胞，且有關(guān)心肌細胞收縮的基因表達升高。誘導分化后MSCs有一定興奮性,并與正常心肌細胞類似。誘導后MSCs向心肌細胞方向分化時發(fā)現(xiàn)CX43的表達增高，說明MSCs分化細胞有形成縫隙連接的能力，并具有一定傳導功能。故MSCs能夠作為治療功能不全性心律失常的替代細胞。在心肌梗死(myocardialinfarct20MSCs經(jīng)5—aza誘導MSCs經(jīng)5—aza誘導21UpperpanelshowsimmunofluorescenceimagesofhMSCsstainedwithDiI(red).PijnappelsDAetal.CardiovascRes2006;72:282-291CX43表達↑Upperpanelshowsimmunofluore22目前心律失常的基因和細胞治療剛剛起步,許多研究僅僅是概念性的,距離臨床應用為時尚早,然而具有誘人的應用前景,值得廣泛深入的研究探討。深入研究心律失常的分子和細胞機制,將為以后的治療提供最佳的治療靶目標。細胞與基因治療課件2366、節(jié)制使快樂增加并使享受加強?！轮兛死?/p>

67、今天應做的事沒有做，明天再早也是耽誤了?！崴固┞妪R

68、決定一個人的一生，以及整個命運的，只是一瞬之間?！璧?/p>

69、懶人無法享受休息之樂?！伎?/p>

70、浪費時間是一樁大罪過?！R梭66、節(jié)制使快樂增加并使享受加強?！轮兛死?46、紀律是自由的第一條件?！诟駹?、紀律是集體的面貌，集體的聲音，集體的動作，集體的表情，集體的信念。——馬卡連柯8、我們現(xiàn)在必須完全保持黨的紀律，否則一切都會陷入污泥中。——馬克思9、學校沒有紀律便如磨坊沒有水?！涿兰~斯10、一個人應該：活潑而守紀律，天真而不幼稚，勇敢而魯莽，倔強而有原則，熱情而不沖動，樂觀而不盲目?！R克思細胞與基因治療細胞與基因治療6、紀律是自由的第一條件。——黑格爾7、紀律是集體的面貌，集體的聲音，集體的動作，集體的表情，集體的信念?！R卡連柯8、我們現(xiàn)在必須完全保持黨的紀律，否則一切都會陷入污泥中?！R克思9、學校沒有紀律便如磨坊沒有水?！涿兰~斯10、一個人應該：活潑而守紀律，天真而不幼稚，勇敢而魯莽，倔強而有原則，熱情而不沖動，樂觀而不盲目?！R克思細胞與基因治療抗心律失常藥物治療的新方法

——基因與細胞治療基因與細胞治療由于現(xiàn)有的治療心律失常的局限性，近年出現(xiàn)了以基因工程和細胞工程為基礎(chǔ)的心律失常治療新方案。6、紀律是自由的第一條件?！诟駹柤毎c基因治療細胞與基因25細胞與基因治療課件26細胞與基因治療課件27細胞與基因治療課件28細胞與基因治療課件29

在培養(yǎng)的兔心肌細胞(兔心肌細胞在體外培養(yǎng)幾天后通常出現(xiàn)APD延長,EAD發(fā)生率明顯增高)中轉(zhuǎn)入hERG基因,使APD明顯縮短,相對不應期明顯增加,EAD發(fā)生率下降四倍多,且能抑制電交替。所以hERG基因可用于治療與QT間期延長和復極離散度增加相關(guān)的室性心動過速。在培養(yǎng)的兔心肌細胞(兔心肌細胞在體外培養(yǎng)幾天后30APD↓APD↓31EAD發(fā)生率↓EAD發(fā)生率↓32緩慢性心律失常的基因治療1.增強起搏細胞的變時功能2.生物性的起搏細胞緩慢性心律失常的基因治療33

增強起搏細胞的變時功能編碼β2腎上腺素能受體的質(zhì)粒注入約克豬的右房的起搏部位,上調(diào)腎上腺素能受體的表達。電生理的檢測顯示,心房組織的局部過表達腎上腺素能受體可以明顯增強起搏組織的變時效應，使現(xiàn)存的或病變的起搏細胞的功能得到改善和加強。心速108→127→16350%↑

增強起搏細胞的變時功能心速108→127→1634

生物性的起搏細胞

起搏離子流If是一種超極化激活的內(nèi)向離子流,它介導竇房結(jié)的四期自動除極。超極化激活的環(huán)核苷酸門控的(Hyperpolarizationactivatedcyclicnucleotidegated,HCN)通道是心臟起搏離子流If產(chǎn)生的基礎(chǔ)。HCN基因家族的四個成員目前發(fā)現(xiàn)在心臟中存在的有3個：HCN1、HCN2和HCN4。生物性的起搏細胞

起搏離子流If是一種超35ECGleadsI,II,andRA,andLA(overlyinginjectionsite)electrogramsduringnormalsinusrhythminananesthetizeddogpreviouslyinjectedwithHCN2+GFP

（greenfluorescentprotein）intoLA(initial2beats).將含有HCN2基因的腺病毒注射入犬的左房（LA）。4天后進行的電生理標測發(fā)現(xiàn),當刺激迷走神經(jīng)誘發(fā)出竇房結(jié)停搏后,左房的注射部位出現(xiàn)了自發(fā)性的左房節(jié)律。而只注射了GFP的對照犬則無任何的自發(fā)節(jié)律。

QuJetal.Circulation2003;107:1106-1109ECGleadsI,II,andRA,andL36PacemakerfunctionininvitromodelmHCN2轉(zhuǎn)染的hMSCs影響耦合的心臟細胞的興奮性。綜上，過表達HCN2基因可以增大起搏電流,使移植的心肌細胞具有起搏能力。PotapovaIetal.CirculationResearch2004;94:952-959Pacemakerfunctionininvitro37

細胞治療置入體外誘導出的治療細胞或者將干細胞作為載體,進行基因改造。

細胞治療38可從以下幾個層面進行心律失常的治療：替代心臟起搏、傳導系統(tǒng)病變或缺失的細胞；移植基因工程化改造的細胞,表達某種離子通道,和受體組織細胞耦聯(lián),改變受體組織的電生理特性；移植細胞通過局部分泌一些重組蛋白改變心臟的電生理環(huán)境?？蓮囊韵聨讉€層面進行心律失常的治療：39干細胞是一種具有多分化潛能和自我復制功能的早期未分化細胞，在特定的條件下可能分化為不同的功能細胞，形成多種組織和器官。

目前主要進行的是體外干細胞培養(yǎng)移植研究，包括胚胎干細胞（embryonicstemcell，ESC）、骨髓間充質(zhì)干細胞（MesenchymalStemCells,MSCs）等。干細胞是一種具有多分化潛能和自我復制功能的早期40胚胎干細胞（ESC）在體外并不僅僅分化為單個心肌細胞,而是可以形成功能性的心臟合胞體(syncytium),具有穩(wěn)定的起搏和傳導能力,并且對AD和ACh的刺激有反應。但由于來源有限,移植后可能存在免疫排斥反應,且涉及到倫理學問題,故有一定局限性。.早期心肌細胞小而圓的細胞更大和更細長的細胞幾乎所有的心肌細胞，單核。胚胎干細胞（ESC）在體外并不僅僅分化為單個41Morphometricchangesinthecell'slength,width,area,andlength-to-widthratioduringinvitrocardiomyocytematuration.*P<0.05comparedwithbaselinemeasurements.Morphometricchangesinthece42

骨髓間充質(zhì)干細胞（MSCs）在體內(nèi)植入心肌后能向心肌細胞方向分化，表達心肌細胞多種蛋白：肌球蛋白重鏈(MHC)、間隙連接蛋白Cx43(Connexin43)、心肌鋅指轉(zhuǎn)錄因子(GATA-4)等。故MSCs能作為治療心臟疾病的一種移植細胞,替代部分受損心肌細胞。由于MSCs能通過骨髓穿刺反復收集、體外大量擴增,取材方便,擴增后自體回輸,不必應用免疫抑制劑,成為近年來最具吸引力的心肌再生種子細胞。骨髓間充質(zhì)干細胞（MSCs）在體內(nèi)植入心肌后能43

在心肌梗死(myocardialinfarction,MI)治療中有研究發(fā)現(xiàn)MSCs移植后能改善MI