第二節(jié)食品中大腸菌群的檢驗

第二節(jié)食品中大腸菌群的檢驗

1一、實驗目的1.了解大腸菌群在食品檢驗中的意義。2.掌握檢驗的程序和步驟。3.通過MPN檢索表的檢索得出實驗結果。一、實驗目的1.了解大腸菌群在食品檢驗中的意義。2二、基本原理大腸菌群系指一群在32～37℃下24h內，能發(fā)酵乳糖產酸、產氣、需氧或兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。該菌群主要來源于人畜糞便，故以此作為糞便污染指標，來評價食品衛(wèi)生質量，具有廣泛的衛(wèi)生學意義。食品中大腸桿菌群數(shù)是以每100mL（g）檢樣內大腸菌群最近似數(shù)（MPN）來表示，據此含義，所有食品衛(wèi)生標準中所規(guī)定的大腸菌群數(shù)均應為100mL（g）食品內允許含有大腸菌群的實際數(shù)值，為報告標準。二、基本原理大腸菌群系指一群在32～37℃下24h內，能發(fā)酵31、牛天貴主編《食品微生物學實驗技術》實驗十二大腸菌群檢驗2、GB4789.3-2010《大腸菌群計數(shù)》3、大腸菌群PetrifilmTM測試紙片法4、美國FDA標準方法（行業(yè)標準采用兩步法）：用于對出口食品中大腸菌群進行檢驗三、檢測方法1、牛天貴主編《食品微生物學實驗技術》實驗十二大腸菌群檢驗4初發(fā)酵分離培養(yǎng)復發(fā)酵（證實試驗）初發(fā)酵分離培養(yǎng)復發(fā)酵（證實試驗）5實驗操作步驟：乳糖發(fā)酵試驗分離培養(yǎng)證實試驗樣品稀釋后，選擇三個稀釋度，每個稀釋度接種三管乳糖膽鹽發(fā)酵管。36±1℃培養(yǎng)48±2h，觀察是否產氣。將產氣發(fā)酵管培養(yǎng)物轉種于伊紅美藍瓊脂平板上，36±1℃培養(yǎng)18-24h，觀察菌落形態(tài)。挑取平板上的可疑菌落，進行革蘭氏染色觀察。同時接種乳糖發(fā)酵管36±1℃培養(yǎng)24±2h，觀察產氣情況。

根據證實為大腸桿菌陽性的管數(shù)，查MPN表，報告每100ml（g）大腸菌群的MPN值。

實驗操作步驟：乳糖發(fā)酵試驗分離培養(yǎng)證實試驗樣品稀釋后，選擇三6實驗所需培養(yǎng)基及作用乳糖膽鹽發(fā)酵管（初發(fā)酵）伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基（鑒別培養(yǎng)基分離培養(yǎng)）乳糖發(fā)酵管（復發(fā)酵）實驗所需培養(yǎng)基及作用乳糖膽鹽發(fā)酵管（初發(fā)酵）71、乳糖膽鹽發(fā)酵管成分：蛋白胨20g、豬膽鹽5g、乳糖10g、0.04%溴甲酚紫水溶液25mL、蒸餾水1000mL，pH值7.4制法：略實驗現(xiàn)象：如圖1、乳糖膽鹽發(fā)酵管成分：蛋白胨20g、豬膽鹽5g、乳糖10g82、伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基（EMB）成分：蛋白胨10g、乳糖10g、K2HPO42g、瓊脂17g，2%伊紅Y溶液20mL、0.65%美藍溶液10mL，蒸餾水1000mL，pH值7.1制法：將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中，校正pH值，分裝于燒瓶內，121℃高壓滅菌15min備用；臨用時加入乳糖（115℃20min）并加熱融化瓊脂，冷至50～55℃，加入伊紅和美藍溶液），搖勻后傾注平板。2、伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基（EMB）成分：蛋白胨10g、乳糖109現(xiàn)象及原理大腸桿菌：菌落深紫色，且有綠色金屬光澤；產酸能力較弱的幾種腸道菌：也有相應的棕色；不發(fā)酵乳糖的腸道菌：菌落是無色透明的，比如變形菌屬，沙門氏菌屬2、伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基（EMB）現(xiàn)象及原理2、伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基（EMB）103、乳糖發(fā)酵管成分：蛋白胨20g、乳糖10g、0.04%溴甲酚紫水溶液25mL、蒸餾水1000mL，pH值7.4制法：將蛋白胨及乳糖溶于水中，校正pH值，加入指示劑，分裝3mL試管，并放入一個小倒管，115℃滅菌15min。3、乳糖發(fā)酵管成分：蛋白胨20g、乳糖10g、0.04%溴甲11實驗操作步驟：1）檢樣稀釋（無菌操作）①將25mL（或g）檢樣置于含225mL滅菌生理鹽水的滅菌玻璃瓶，充分振搖（固體檢樣用勻漿器，用8000－10000r/min的速度處理1min）制成1：10的均勻稀釋液。②用1mL滅菌吸管吸取1：10稀釋液1mL，注入含有9mL滅菌生理鹽水的試管內，混勻，制成1：100的稀釋液。③另取1mL滅菌吸管，按②操作依次做10倍遞增稀釋液，每稀釋一次，換用一支1mL滅菌吸管。實驗操作步驟：1）檢樣稀釋（無菌操作）122）乳糖發(fā)酵實驗

接種1mL待檢樣品于乳糖膽鹽發(fā)酵管內。接種3個稀釋度，每一稀釋度接種3管，置（36土1)℃溫箱內培養(yǎng)（24士2)h。如所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產氣，則可報告為大腸桿菌群陰性，如有產氣者，則按下列程序進行。2）乳糖發(fā)酵實驗133）分離培養(yǎng)將產氣的發(fā)酵管分別轉接在伊紅美藍瓊脂平板上，置（36士1)℃恒溫箱內培養(yǎng)18～24h。取出，觀察菌落形態(tài)，并做革蘭氏染色和證實試驗。3）分離培養(yǎng)144）證實試驗在上述平板上，挑取可疑大腸菌群菌落1一2個進行革蘭氏染色，同時接種乳糖發(fā)酵管，置（36士1)℃恒溫箱內培養(yǎng)（24士2)h，觀察產氣情況。凡乳糖產酸產氣、革蘭氏染色為陰性的無芽袍桿菌，即可報告為大腸菌群陽性。4）證實試驗15取產酸產氣的發(fā)酵管中培養(yǎng)液在伊紅美蘭平板上進行劃線取有核心和帶金屬光澤的深紫色菌落進行革蘭氏染色乳糖蛋白胨培養(yǎng)液鏡檢（革蘭氏陰性菌）37℃培養(yǎng)48h證實產氣（陽性）結果與否37℃培養(yǎng)24h37℃培養(yǎng)24h

取產酸產氣的發(fā)酵管中培養(yǎng)液在伊紅美蘭平板上進行劃線取有核心和16實驗報告

根據證實為大腸菌群陽性的管數(shù)，查MPN檢索表，報告每100mL（或g）大腸菌群的MPN。結果表示方法：120MPN/100mL（g）附表：大腸菌群最大可能數(shù)（MPN）檢索表實驗報告根據證實為大腸菌群陽性的管數(shù)，查17動物性食品中大腸菌群的檢驗課件18動物性食品中大腸菌群的檢驗課件19動物性食品中大腸菌群的檢驗課件20注：①本表采用3個稀釋度：1ML(g)，0.1mL(g）和0.01mL(g)。每稀釋度3管。②表內所列檢樣量如改用10mL(g)，1mL(g）和0.1mL(g）時，表內數(shù)字應相應降低10倍；如改用0.1ML(g),0.01ML(g）和0.001mL(g）時，則表內數(shù)字應相應增加10倍，其余可類推。注：21表10毫升、1毫升、0.1毫升檢樣各接種3管的大腸桿菌最近似數(shù)檢索表

陽性管MPN陽性管MPN陽性管MPN10ml1ml0.1ml10ml1ml0.1ml10ml1ml0.1ml00131201123353002612115300230039122203013901031232430264011613016303950129131203104301312132243117502061332931212002192009313160022122011432093023162022032115003092032632221003113210153232900321621120330240033192122733146010042133433211001017220213331100+1021122128

1031522235

110722342

1111123029

1121523136

1131923244

表10毫升、1毫升、0.1毫升檢樣各接種3管的大腸桿菌最近2250ml管陽性數(shù)10ml管陽性數(shù)1ml管陽性數(shù)每100ml的MPN000000110022010101120123020202130224030303150326100110131024103611031115112711391205121712210123121308表2-350毫升檢樣接種1管、10毫升、1毫升檢樣各接種3管的大腸桿菌最近似數(shù)檢索表50ml管陽性數(shù)10ml管陽性數(shù)1ml管陽性數(shù)每100ml的23二、GB4789.3-2010《大腸菌群計數(shù)》第一法：大腸菌群MPN計數(shù)法第二法：大腸菌群平板計數(shù)法二、GB4789.3-2010《大腸菌群計數(shù)》第一法：24第一法：大腸菌群MPN計數(shù)法第一法：大腸菌群MPN計數(shù)法25

需要用到的培養(yǎng)基（1）LST肉湯培養(yǎng)基：月桂基硫酸鹽胰蛋白胨成分：胰蛋白胨或胰酪胨（Tryticase）20g，NaCL5.0g，乳糖5.0g，K2HPO42.75g，KH2PO42.75g，月桂基硫酸鈉0.1g，蒸餾水1000mL。制法：將各成分溶解于蒸餾水中。分裝到有倒立發(fā)酵管的20mm×150mm試管中，每管10mL。121℃高壓滅菌15min。最終pH6.8±0.2。需要用到的培養(yǎng)基（1）LST肉湯培養(yǎng)基：月桂26（2）BGLB：煌綠乳糖膽鹽肉湯成分：蛋白胨10.0g，乳糖10.0g，牛膽粉溶液200mL，0.1%煌綠水溶液13.3mL，蒸餾水800mL，pH7.2±0.1。制法：略（2）BGLB：煌綠乳糖膽鹽肉湯27抑菌劑的選擇大腸菌群檢驗中常用的抑菌劑有膽鹽、十二烷基硫酸鈉、洗衣粉、煌綠、龍膽紫、孔雀綠等。抑菌劑的主要作用是抑制其它雜菌，特別是革蘭氏陽性菌的生長。國家標準中LST肉湯利用十二烷基硫酸鈉作為抑菌劑，BGLB肉湯利用煌綠和膽鹽作為抑菌劑。抑菌劑雖可抑制樣品中的一些雜菌，而有利于大腸菌群細菌的生長和挑選，但對大腸菌群中的某些菌株有時也產生一些抑制作用。抑菌劑的選擇大腸菌群檢驗中常用的抑菌劑有膽鹽、十二烷基硫酸鈉28實驗步驟及操作要點：1）無菌取樣并制作梯度稀釋液；2）樣品勻液的pH值應在6.5～7.5之間，必要時分別用1mol/LNaOH或1mol/LHCl調節(jié)。3）從制備樣品勻液至樣品接種完畢，全過程不得超過15min。實驗步驟及操作要點：1）無菌取樣并制作梯度稀釋液；294）初發(fā)酵試驗每個樣品，選擇3個適宜的連續(xù)稀釋度的樣品勻液（液體樣品可以選擇原液），每個稀釋度接種3管月桂基硫酸鹽胰蛋白胨（LST）肉湯，每管接種1mL（如接種量超過1mL，則用雙料LST肉湯），36℃±1℃培養(yǎng)24h±2h，觀察倒管內是否有氣泡產生，24h±2h產氣者進行復發(fā)酵試驗，如未產氣則繼續(xù)培養(yǎng)至48h±2h，產氣者進行復發(fā)酵試驗。未產氣者為大腸菌群陰性。4）初發(fā)酵試驗30LST結果判斷大腸菌群的產氣量，多者可以使發(fā)酵倒管全部充滿氣體，少者可以產生比小米粒還小的氣泡。如果對產酸但未產氣的乳糖發(fā)酵如有疑問時，可以用手輕輕打動試管。LST結果判斷大腸菌群的產氣量，多者可以使發(fā)酵倒管全部充滿氣315）復發(fā)酵試驗用接種環(huán)從產氣的LST肉湯管中分別取培養(yǎng)物1環(huán)，移種于煌綠乳糖膽鹽肉湯（BGLB）管中，36℃±1℃培養(yǎng)48h±2h，觀察產氣情況。產氣者，計為大腸菌群陽性管。5）復發(fā)酵試驗326）大腸菌群最可能數(shù)（MPN）的報告按5）確證的大腸菌群LST陽性管數(shù)，檢索MPN表（見附錄B），報告每g（mL）樣品中大腸菌群的MPN值。6）大腸菌群最可能數(shù)（MPN）的報告33表B.1大腸菌群最可能數(shù)（MPN）檢索表表B.1大腸菌群最可能數(shù)（MPN）檢索表34

三大腸菌群PetrifilmTM測試紙片法三大腸菌群PetrifilmTM測試紙片法35四、美國FDA標準方法——行業(yè)標準采用兩步法：用于對出口食品中大腸菌群進行檢驗

推測試驗證實試驗樣品稀釋后，選擇三個稀釋度，每個稀釋度接種三管LST肉湯發(fā)酵管。36±1℃培養(yǎng)48±2h，觀察是否產氣。將產氣發(fā)酵管培養(yǎng)物轉種于煌綠乳糖膽鹽（BGLB）肉湯中，36±1℃培養(yǎng)48±2h，觀察是否產氣。以BGLB產氣為陽性，查MPN表，報告每ml（g）樣品中大腸菌群的MPN值。

四、美國FDA標準方法——行業(yè)標準采用兩步法：用于對出口食品36思考題1．大腸菌群的檢驗分哪幾個步驟？各有何作用？2．在糖發(fā)酵試驗中，若發(fā)現(xiàn)發(fā)酵倒管內存在極微小的氣泡，這種情況可否算作產氣陽性？3．造成本實驗誤差的主要原因有哪些？思考題1．大腸菌群的檢驗分哪幾個步驟？各有何作用？37

第二節(jié)食品中大腸菌群的檢驗

第二節(jié)食品中大腸菌群的檢驗

38一、實驗目的1.了解大腸菌群在食品檢驗中的意義。2.掌握檢驗的程序和步驟。3.通過MPN檢索表的檢索得出實驗結果。一、實驗目的1.了解大腸菌群在食品檢驗中的意義。39二、基本原理大腸菌群系指一群在32～37℃下24h內，能發(fā)酵乳糖產酸、產氣、需氧或兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌。該菌群主要來源于人畜糞便，故以此作為糞便污染指標，來評價食品衛(wèi)生質量，具有廣泛的衛(wèi)生學意義。食品中大腸桿菌群數(shù)是以每100mL（g）檢樣內大腸菌群最近似數(shù)（MPN）來表示，據此含義，所有食品衛(wèi)生標準中所規(guī)定的大腸菌群數(shù)均應為100mL（g）食品內允許含有大腸菌群的實際數(shù)值，為報告標準。二、基本原理大腸菌群系指一群在32～37℃下24h內，能發(fā)酵401、牛天貴主編《食品微生物學實驗技術》實驗十二大腸菌群檢驗2、GB4789.3-2010《大腸菌群計數(shù)》3、大腸菌群PetrifilmTM測試紙片法4、美國FDA標準方法（行業(yè)標準采用兩步法）：用于對出口食品中大腸菌群進行檢驗三、檢測方法1、牛天貴主編《食品微生物學實驗技術》實驗十二大腸菌群檢驗41初發(fā)酵分離培養(yǎng)復發(fā)酵（證實試驗）初發(fā)酵分離培養(yǎng)復發(fā)酵（證實試驗）42實驗操作步驟：乳糖發(fā)酵試驗分離培養(yǎng)證實試驗樣品稀釋后，選擇三個稀釋度，每個稀釋度接種三管乳糖膽鹽發(fā)酵管。36±1℃培養(yǎng)48±2h，觀察是否產氣。將產氣發(fā)酵管培養(yǎng)物轉種于伊紅美藍瓊脂平板上，36±1℃培養(yǎng)18-24h，觀察菌落形態(tài)。挑取平板上的可疑菌落，進行革蘭氏染色觀察。同時接種乳糖發(fā)酵管36±1℃培養(yǎng)24±2h，觀察產氣情況。

根據證實為大腸桿菌陽性的管數(shù)，查MPN表，報告每100ml（g）大腸菌群的MPN值。

實驗操作步驟：乳糖發(fā)酵試驗分離培養(yǎng)證實試驗樣品稀釋后，選擇三43實驗所需培養(yǎng)基及作用乳糖膽鹽發(fā)酵管（初發(fā)酵）伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基（鑒別培養(yǎng)基分離培養(yǎng)）乳糖發(fā)酵管（復發(fā)酵）實驗所需培養(yǎng)基及作用乳糖膽鹽發(fā)酵管（初發(fā)酵）441、乳糖膽鹽發(fā)酵管成分：蛋白胨20g、豬膽鹽5g、乳糖10g、0.04%溴甲酚紫水溶液25mL、蒸餾水1000mL，pH值7.4制法：略實驗現(xiàn)象：如圖1、乳糖膽鹽發(fā)酵管成分：蛋白胨20g、豬膽鹽5g、乳糖10g452、伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基（EMB）成分：蛋白胨10g、乳糖10g、K2HPO42g、瓊脂17g，2%伊紅Y溶液20mL、0.65%美藍溶液10mL，蒸餾水1000mL，pH值7.1制法：將蛋白胨、磷酸鹽和瓊脂溶解于蒸餾水中，校正pH值，分裝于燒瓶內，121℃高壓滅菌15min備用；臨用時加入乳糖（115℃20min）并加熱融化瓊脂，冷至50～55℃，加入伊紅和美藍溶液），搖勻后傾注平板。2、伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基（EMB）成分：蛋白胨10g、乳糖1046現(xiàn)象及原理大腸桿菌：菌落深紫色，且有綠色金屬光澤；產酸能力較弱的幾種腸道菌：也有相應的棕色；不發(fā)酵乳糖的腸道菌：菌落是無色透明的，比如變形菌屬，沙門氏菌屬2、伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基（EMB）現(xiàn)象及原理2、伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基（EMB）473、乳糖發(fā)酵管成分：蛋白胨20g、乳糖10g、0.04%溴甲酚紫水溶液25mL、蒸餾水1000mL，pH值7.4制法：將蛋白胨及乳糖溶于水中，校正pH值，加入指示劑，分裝3mL試管，并放入一個小倒管，115℃滅菌15min。3、乳糖發(fā)酵管成分：蛋白胨20g、乳糖10g、0.04%溴甲48實驗操作步驟：1）檢樣稀釋（無菌操作）①將25mL（或g）檢樣置于含225mL滅菌生理鹽水的滅菌玻璃瓶，充分振搖（固體檢樣用勻漿器，用8000－10000r/min的速度處理1min）制成1：10的均勻稀釋液。②用1mL滅菌吸管吸取1：10稀釋液1mL，注入含有9mL滅菌生理鹽水的試管內，混勻，制成1：100的稀釋液。③另取1mL滅菌吸管，按②操作依次做10倍遞增稀釋液，每稀釋一次，換用一支1mL滅菌吸管。實驗操作步驟：1）檢樣稀釋（無菌操作）492）乳糖發(fā)酵實驗

接種1mL待檢樣品于乳糖膽鹽發(fā)酵管內。接種3個稀釋度，每一稀釋度接種3管，置（36土1)℃溫箱內培養(yǎng)（24士2)h。如所有乳糖膽鹽發(fā)酵管都不產氣，則可報告為大腸桿菌群陰性，如有產氣者，則按下列程序進行。2）乳糖發(fā)酵實驗503）分離培養(yǎng)將產氣的發(fā)酵管分別轉接在伊紅美藍瓊脂平板上，置（36士1)℃恒溫箱內培養(yǎng)18～24h。取出，觀察菌落形態(tài)，并做革蘭氏染色和證實試驗。3）分離培養(yǎng)514）證實試驗在上述平板上，挑取可疑大腸菌群菌落1一2個進行革蘭氏染色，同時接種乳糖發(fā)酵管，置（36士1)℃恒溫箱內培養(yǎng)（24士2)h，觀察產氣情況。凡乳糖產酸產氣、革蘭氏染色為陰性的無芽袍桿菌，即可報告為大腸菌群陽性。4）證實試驗52取產酸產氣的發(fā)酵管中培養(yǎng)液在伊紅美蘭平板上進行劃線取有核心和帶金屬光澤的深紫色菌落進行革蘭氏染色乳糖蛋白胨培養(yǎng)液鏡檢（革蘭氏陰性菌）37℃培養(yǎng)48h證實產氣（陽性）結果與否37℃培養(yǎng)24h37℃培養(yǎng)24h

取產酸產氣的發(fā)酵管中培養(yǎng)液在伊紅美蘭平板上進行劃線取有核心和53實驗報告

根據證實為大腸菌群陽性的管數(shù)，查MPN檢索表，報告每100mL（或g）大腸菌群的MPN。結果表示方法：120MPN/100mL（g）附表：大腸菌群最大可能數(shù)（MPN）檢索表實驗報告根據證實為大腸菌群陽性的管數(shù)，查54動物性食品中大腸菌群的檢驗課件55動物性食品中大腸菌群的檢驗課件56動物性食品中大腸菌群的檢驗課件57注：①本表采用3個稀釋度：1ML(g)，0.1mL(g）和0.01mL(g)。每稀釋度3管。②表內所列檢樣量如改用10mL(g)，1mL(g）和0.1mL(g）時，表內數(shù)字應相應降低10倍；如改用0.1ML(g),0.01ML(g）和0.001mL(g）時，則表內數(shù)字應相應增加10倍，其余可類推。注：58表10毫升、1毫升、0.1毫升檢樣各接種3管的大腸桿菌最近似數(shù)檢索表

陽性管MPN陽性管MPN陽性管MPN10ml1ml0.1ml10ml1ml0.1ml10ml1ml0.1ml00131201123353002612115300230039122203013901031232430264011613016303950129131203104301312132243117502061332931212002192009313160022122011432093023162022032115003092032632221003113210153232900321621120330240033192122733146010042133433211001017220213331100+1021122128

1031522235

110722342

1111123029

1121523136

1131923244

表10毫升、1毫升、0.1毫升檢樣各接種3管的大腸桿菌最近5950ml管陽性數(shù)10ml管陽性數(shù)1ml管陽性數(shù)每100ml的MPN000000110022010101120123020202130224030303150326100110131024103611031115112711391205121712210123121308表2-350毫升檢樣接種1管、10毫升、1毫升檢樣各接種3管的大腸桿菌最近似數(shù)檢索表50ml管陽性數(shù)10ml管陽性數(shù)1ml管陽性數(shù)每100ml的60二、GB4789.3-2010《大腸菌群計數(shù)》第一法：大腸菌群MPN計數(shù)法第二法：大腸菌群平板計數(shù)法二、GB4789.3-2010《大腸菌群計數(shù)》第一法：61第一法：大腸菌群MPN計數(shù)法第一法：大腸菌群MPN計數(shù)法62

需要用到的培養(yǎng)基（1）LST肉湯培養(yǎng)基：月桂基硫酸鹽胰蛋白胨成分：胰蛋白胨或胰酪胨（Tryticase）20g，NaCL5.0g，乳糖5.0g，K2HPO42.75g，KH2PO42.75g，月桂基硫酸鈉0.1g，蒸餾水1000mL。制法：將各成分溶解于蒸餾水中。分裝到有倒立發(fā)酵管的20mm×150mm試管中，每管10mL。121℃高壓滅菌15min。最終pH6.8±0.2。需要用到的培養(yǎng)基（1）LST肉湯培養(yǎng)基：月桂63（2）BGLB：煌綠乳糖膽鹽肉湯成分：蛋白胨10.0g，乳糖10.0g，牛膽粉溶液200mL，0.1%煌綠水溶液13.3mL，蒸餾水800mL，pH7.2±0.1。制法：略（2）BGLB：煌綠乳糖膽鹽肉湯64抑菌劑的選擇大腸菌群檢驗中常用的抑菌劑有膽鹽、十二烷基硫酸鈉、洗衣粉、煌綠、龍膽紫、孔雀綠等。抑菌劑的主要作用是抑制其它雜菌，特別是革蘭氏陽性菌的生長。國家標準中LST肉湯利用十二烷基硫酸鈉作為抑菌劑，BGLB肉湯利用煌綠和膽鹽作為抑菌劑。抑菌劑雖可抑制樣品中的一些雜菌，而有利于大腸菌群細菌的生長和挑選，但對大腸菌群中的某些菌株有時也產生一些抑制作用。抑菌劑的選擇大腸菌群檢驗中常用的抑菌劑有膽鹽、十二烷基硫酸鈉65實驗步驟及操作要點：1）無菌取樣并制作梯度稀釋液；2）樣品勻液的pH值應在6