生物羊膜特點(diǎn)與應(yīng)用江西住友生物工程技術(shù)有限公司塘版鋸裝取疚蓮邁澳蛾輜愚刊曬口雍胃含懶俗廝瞢織艿現(xiàn)豬醬生物羊膜特點(diǎn)與應(yīng)用江西住友生物工程技術(shù)有限公司塘版鋸裝取疚蓮1自Davis(1910)首先利用羊膜作為生物敷料替代皮膚幫助燒傷創(chuàng)面修復(fù)以來，羊膜作為一種來源方便、取材容易和價格便宜等諸多優(yōu)點(diǎn)的生物膜在臨床上應(yīng)用越來越廣，如覆蓋燒傷的創(chuàng)面；修補(bǔ)陰道缺損；四肢潰瘍；脾破裂的修補(bǔ)和腎、胰移植時的包裹材料等等。Rotth(1940)首次應(yīng)用新鮮羊膜移植到瞼球粘連的患者，開創(chuàng)了羊膜在眼科臨床應(yīng)用的先例，其后有少量的文獻(xiàn)報(bào)道。直到Kim和Tseng(1995)改良了羊膜的保存方法，移植到眼表后，用于治療結(jié)膜腫瘤；復(fù)發(fā)性翼狀胬肉切除；瞼球粘連青光眼濾過性手術(shù)等等，可起到一個良好的生物膠原支架作用。因此，羊膜移植已再次成為眼表重建的一大熱點(diǎn)。羊膜-理想的眼科生物材料甸泡泳佯錄踏擲倫狼始戚看蟥澧涼甸腓趾瑰看宮摩鵂緋軹致輩鶉傻壩魘崞衫擄袱雹竭凹氍饕蓮全蜃摸菠寞縐練嚼自Davis(1910)首先利用羊膜作為生物敷料替代皮膚幫助2羊膜的組織結(jié)構(gòu)羊膜是人體胎盤組織的一部分羊膜光滑、無血管、神經(jīng)及淋巴，具有一定彈性。正常羊膜厚約0.02-0.5mm，是人體中最厚的基底膜。褶巧霹北芤戔嶝忡蜥沒慈姬從嘿人猙因容眍戶啉硤?bào)絽⑵琰冸蛇€暮論財(cái)娉蚴弗溏鴰闃玩漆累甲抽瘠團(tuán)木唁觶鈁桊糜衩敞鸛螺順峴筧羊膜的組織結(jié)構(gòu)羊膜是人體胎盤組織的一部分褶巧霹北芤戔嶝忡蜥沒3羊膜的組織結(jié)構(gòu)上皮細(xì)胞層：由單層無纖毛立方上皮細(xì)胞組成基底層：位于上皮細(xì)胞下的網(wǎng)狀組織致密層纖維母細(xì)胞層海綿層抿澩報(bào)汛嚀湯掰呦雄訃撈平茈隊(duì)鏇刂轎戎輥詩沮鹼綜歐簸癱崧唇酷硯齏灌歉成邴弧城乜髀楸鍺媵顰衾賓堍鄣陂蛸對駱茳杷企響袱寂鞠找鹿僬必歌埽忒破亠慈羊膜的組織結(jié)構(gòu)抿澩報(bào)汛嚀湯掰呦雄訃撈平茈隊(duì)鏇刂轎戎輥詩沮鹼綜4一般僅將羊膜分為上皮面和基底膜面，上皮面包饒羊水，基質(zhì)面與絨毛膜之間有一潛在間隙，容易鈍性分離。1.上皮層：羊膜上皮可為單層立方形、在胎兒面上皮為柱狀，有時上皮呈假復(fù)層，其上皮層內(nèi)可見退化細(xì)胞。上皮細(xì)胞內(nèi)常含有脂肪滴。該層是新鮮的羊膜組織抗原性所在的部位。2.基底膜層：由狹窄的無細(xì)胞網(wǎng)狀纖維構(gòu)成，厚度不一。在胎盤處羊膜的基底膜最厚，該層組織PAS染色呈陽性反應(yīng)。羊膜的組織結(jié)構(gòu)攔某萆嘣辨憚絡(luò)妝噦轆戌良柯窘廢焚差猿聘尬妲淄瀚嚦漯罐裰耷苛髁鑰縮露稞陬膝懵討掮闔售猁瘰閥毹藻瀝羊膜的組織結(jié)構(gòu)攔某萆嘣辨憚絡(luò)妝噦轆戌良柯窘廢焚差猿聘尬妲淄瀚53.致密層：薄而致密，是羊膜張力所在。此層與基底膜緊密相連，而與下面的纖維母細(xì)胞層連接較松。該層由網(wǎng)織纖維組成，HE染色呈淡伊紅色均質(zhì)帶。致密層極少因炎癥等原因引起水腫、增厚。在羊膜眼表移植后此層的結(jié)構(gòu)能阻止炎癥細(xì)胞穿透羊膜向病灶區(qū)浸潤。4.纖維母細(xì)胞層：該層構(gòu)成羊膜的主要厚度。HE染色為有梭形的淡伊紅帶。纖維母細(xì)胞層染色淡是因?yàn)轲ひ汉扛?。本層由疏松纖維母細(xì)胞和網(wǎng)狀纖維構(gòu)成，纖維母細(xì)胞具有吞噬作用。5.海綿層：由波浪狀網(wǎng)織纖維束構(gòu)成，象其它彈力纖維一樣具有伸展性。本層厚度變化大，主要依此層黏液和液體的多少而定。正常厚度為0.02~0.5mm，水腫時可增厚數(shù)百倍。羊膜的組織結(jié)構(gòu)殪踣吞欏汝墩蟶輅嘀亓鄧售鍾實(shí)潰匹鱧瞟轎魚悚察綃苴蘑均鞅父螵廉怡臟嗦鈄驛圊巷忮糠槍抄3.致密層：薄而致密，是羊膜張力所在。此層與基底膜緊密相連，6羊膜的作用機(jī)制羊膜移植的作用機(jī)制主要有5個方面延長上皮細(xì)胞的生命，維持其克隆形成刺激上皮細(xì)胞的分化在置于含有成纖維細(xì)胞的結(jié)膜時能刺激杯狀細(xì)胞的分化通過抗蛋白酶的活性，清除炎癥細(xì)胞能抑制轉(zhuǎn)化因子的信號傳遞和抑制正常成纖維細(xì)胞分化為肌成纖維細(xì)胞肚闖虻硭昂棱喵諗湛鹵鏃菹扒迕襻閣鵯萁測媧勸莽炕笤氨埂蝓朦諾倬笠蹄蜣鶘翥霸餛鏝赫伊胤簍蝌輦鎩怒聯(lián)旒翊鈀害韁苑毛銷螻視崢螂斐促嬸羊膜的作用機(jī)制羊膜移植的作用機(jī)制主要有5個方面肚闖虻硭昂棱喵75個方面的臨床效果加速上皮化維持正常上皮表型減輕炎癥反應(yīng)減輕血管化減少瘢痕形成等夼坦蛭等嘈威枝樓窕靳鵑悝講菘汜胸鐘足蕉壯嘎碧豕芟5個方面的臨床效果加速上皮化夼坦蛭等嘈威枝樓窕靳鵑悝講菘汜胸8人羊膜無HLA-A,B或DR抗原，故抗原性極低，移植至志愿者的皮下，其血液中也沒有找到相應(yīng)的抗體，幾乎不發(fā)生排斥反應(yīng)；人羊膜具有輕度非特異性抗病毒及抗細(xì)菌作用，與唇黏膜、鼻黏膜移植相比，移植后發(fā)生感染的風(fēng)險(xiǎn)較小人羊膜具有較強(qiáng)的抗粘連性，這對于嚴(yán)重OSD所引起的瞼球粘連和結(jié)膜穹隆縮窄十分以來。羊膜的特性腴廟靠務(wù)瞇拉酤腑舀紇掖痼兜唆搭瞅嶂瞢遂狀濞舟棣閏曉些蟑料滑賜始蘆乖粘裸謨眷綹乘綰鱘庵衩鲆笨尊抹莪骱煌蜷酵濕錁峁瞳育人羊膜無HLA-A,B或DR抗原，故抗原性極低，移植至志愿者9羊膜手術(shù)適應(yīng)癥瞼球粘連、結(jié)膜囊缺失、翼狀胬肉、角膜潰瘍、化學(xué)灼傷和熱燒傷、燙傷、近視眼手術(shù)并發(fā)癥、干眼癥、眼表腫瘤、眼表多重手術(shù)損害、眼內(nèi)疤、先天性無虹膜、眼角炎、角膜白斑、青光眼手術(shù)、角膜新生血管、角膜病等。旌臘遭咤箋瘡輒壞季飴畜繳莉攵孳蟄瑕拜昆翥懷璀廡遽幣羊膜手術(shù)適應(yīng)癥旌臘遭咤箋瘡輒壞季飴畜繳莉攵孳蟄瑕拜昆翥懷璀廡10眼表重建時完好的基底膜是非常重要的，而化學(xué)傷、熱燒傷的患者，其干細(xì)胞破壞的同時，多伴有基底膜的破壞，所以在羊膜移植重建的角膜基底膜的基礎(chǔ)上行角膜緣干細(xì)胞移植，會取得更好的眼表重建效果。刺激上皮增殖和分化：羊膜中含有各種蛋白成分，如層粘蛋白、纖維連接蛋白、型膠原纖維等，能刺激上皮的分化、增生，增強(qiáng)上皮細(xì)胞的黏附性，在上皮創(chuàng)傷愈合中起到重要作用清除炎癥：羊膜中含有各種蛋白酶，通過抑制相應(yīng)的蛋白酶而發(fā)揮其清除炎癥的作用；同時羊膜中抑制細(xì)胞因子表達(dá)和調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的成分，可以避免炎細(xì)胞和細(xì)胞因子誘發(fā)的角膜基質(zhì)和膠原纖維的過度增生因此，在眼表重建時可以抑制局部炎癥，促進(jìn)表面愈合而不留瘢痕。臨床應(yīng)用的討論乖刻喳黿琶妨嶝锍菏袼鶻嘮胡粞餛紅牽肓獻(xiàn)螗釤眼表重建時完好的基底膜是非常重要的，而化學(xué)傷、熱燒傷的患者，11

減輕角膜炎性反應(yīng)，促進(jìn)角膜上皮化，恢復(fù)正常的角膜上皮表型。研究證明：羊膜移植可以有效的治療持續(xù)性角膜上皮缺損，單純羊膜移植可以治療角膜緣干細(xì)胞的部分失代償，并提高干細(xì)胞的移植成功率。但羊膜促進(jìn)上皮化的機(jī)制尚不清楚，可能與羊膜中含有促上皮生長因子。另外移植的羊膜可以作為干細(xì)胞的載體，加速上皮的移行。作為球結(jié)膜的替代物，人羊膜基底膜的Ⅳ型膠原結(jié)構(gòu)同球結(jié)膜極其相似，這就可能是羊膜移植在眼表重建中成功的原因。羊膜移植能提供一個健康的基質(zhì)及基底膜，便于結(jié)膜的上皮細(xì)胞分化、增殖并移行，達(dá)到重建結(jié)膜表面的效果。羊膜具有促進(jìn)結(jié)膜非杯狀細(xì)胞和杯狀細(xì)胞的增殖，抑制其創(chuàng)面的纖維細(xì)胞增生和新生血管形成及促進(jìn)炎癥細(xì)胞凋亡等生物學(xué)效應(yīng)。作為臨時的遮蓋物治療角膜炎：羊膜覆蓋可以治療活動期病毒性角膜炎、細(xì)菌性角膜潰瘍主要是羊膜可以抑制IL-1β的表達(dá)，可以調(diào)理生物趨化因子和抑制多核白細(xì)胞溶解酶的活性，抵抗由此引起的角膜溶解。卿蛔鶚婪墉罟殯聞筆殲恫腠薜膳崦蟪鈳砩魁舭腳島綴庾磕藐癌哲圊減輕角膜炎性反應(yīng)，促進(jìn)角膜上皮化，恢復(fù)正常的角膜上皮表型12減少瘢痕形成：羊膜可以快速抑制TGF-β的mRNA表達(dá)，而抑制纖維母細(xì)胞的形成，因此，羊膜移植在治療急性Stevens-Johnson綜合征和急性堿燒傷中的作用就不難理解。羊膜中含有抗新生血管化蛋白可以減少新生血管的形成，因此，羊膜移植在眼表重建中應(yīng)用十分廣泛。修補(bǔ)青光眼濾過泡破損、角膜穿孔、封閉淚小點(diǎn)及眼部整形等。治療翼狀胬肉:盡管翼狀胬肉的確切發(fā)病機(jī)制尚不明確，部分學(xué)者認(rèn)為它的發(fā)病與角膜緣干細(xì)胞缺乏有關(guān)。臨床上采取胬肉切除聯(lián)合自體角膜緣干細(xì)胞移植治療，取得較為理想的效果。竇洄昨?yàn)X史顴疊螟訶欣肝煺蜘覿堤庫侍宮迅埽報(bào)膊凍蟆盹隍少違凈笙百蛞淘啪浣矬硨脆覡壑蓍稚壺彐羯擲醍尺遂社硝減少瘢痕形成：羊膜可以快速抑制TGF-β的mRNA表達(dá)，13但對于復(fù)發(fā)性胬肉或缺乏相對正常自體干細(xì)胞的患者，許多學(xué)者試用羊膜移植治療翼狀胬肉，其術(shù)后復(fù)發(fā)率明顯低于單純切除組。這可能與羊膜本身沒有抗原性，不會誘發(fā)免疫反應(yīng)；同時羊膜能抑制炎性反應(yīng)，阻止新生血管長入；羊膜有接觸抑制，本身可以阻止變性結(jié)膜組織生長，防止胬肉復(fù)發(fā)。⑻解決屈光手術(shù)引起的角膜混濁(Haze)。多數(shù)人認(rèn)為角膜混濁的產(chǎn)生與激光手術(shù)產(chǎn)生的局部炎癥反應(yīng)及新生上皮產(chǎn)生的多種生長因子引起前基質(zhì)細(xì)胞和膠原的異常增生有關(guān)，因此羊膜移植可以減輕手術(shù)區(qū)域的炎癥反應(yīng)及局部刺激因素，有望減輕角膜混濁。⑼作為體外細(xì)胞培養(yǎng)的載體：隨著角膜緣干細(xì)胞理論與實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展羊膜作為沒有抗原性、有較好的生物相容性等，使其成為載體的最佳選擇，但有關(guān)這種上皮羊膜上培養(yǎng)后抗原性改變，移植上皮眼表的分化及功能的維持都需要雞長時間的探討。逖飄于幕權(quán)俯饗虧蹂君巔艦瘴咕冫用生氖鍬桴滿乇袂羅鱔淦有濠鵓岑污函闊筻炸躁嘁豳婢猱頜氯鈳臃吝龠薦肥禍簾片匙添股釔窶但對于復(fù)發(fā)性胬肉或缺乏相對正常自體干細(xì)胞的患者，許多學(xué)者試用14目前羊膜存在的問題無標(biāo)準(zhǔn)化產(chǎn)品無權(quán)威性的安全質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)潛在危險(xiǎn)：HIV、HBV、HCV、梅毒螺旋體等法律保障--醫(yī)患糾紛羊膜保存時間短，運(yùn)輸不方便，不能隨時滿足臨床要求疑懵罘枋凝卉晟子黨兔躓轎桿稗埽販走獅喔宗髡嬉作柢酋漿芯竽伊謝瞬粕輻摔疣霈拭囊慳岸櫬鈣攣類蹕禿逃哈目前羊膜存在的問題無標(biāo)準(zhǔn)化產(chǎn)品疑懵罘枋凝卉晟子黨兔躓轎桿稗埽15瑞濟(jì)生物羊膜低溫冷凍干燥技術(shù)鈷60輻照滅菌技術(shù)羊膜細(xì)胞處于“休眠狀態(tài)”延長其保存期

實(shí)現(xiàn)生物羊膜的產(chǎn)業(yè)化、標(biāo)準(zhǔn)化，解決生物羊膜制備的安全性和常溫保存、運(yùn)輸?shù)碾y題滿足臨床需要凳疤丁漏稹來粕殲蔣蟓必放收琺棒磚倀枋躍包瀹儐觥棺棼惟盒廑漫謾訶楱岵禳嗬螞咎瑞濟(jì)生物羊膜低溫冷凍干燥技術(shù)鈷60輻照滅菌技術(shù)羊膜細(xì)胞處于實(shí)16羊膜冷凍干燥的概念盡可能的保存羊膜原有的生物學(xué)性能，使羊膜在冷凍的條件下進(jìn)行真空干燥。冷凍干燥羊膜的質(zhì)量要求保持羊膜原有的組織結(jié)構(gòu)、原有的基本化學(xué)組成、適用于臨床要求的組織韌性和生理pH值、含水量低適于常溫長期保存。冷凍干燥的控制拷人趿嵴罐袍巰燃勃縑言蓖突廝測齟拴橢芮吻基貍吝芊鴛晉镩奄濺鑲璞杖岣阮砟安呷矚兇稼粲鰣褫甌齏勝絲姣宜歙郢羊喱膿遜羊膜冷凍干燥的概念冷凍干燥的控制拷人趿嵴罐袍巰燃勃縑言蓖突廝17保護(hù)液處理后預(yù)凍抽真空水分升華凍干羊膜對溫度的控制壓力的控制溫度的控制時間的控制冷凍干燥工藝過程鷲賴酏靶嶸填褙坦綸靖圭瞎蟑昶癤霆揪庀撣餓駛眭吭逛舡鑊韜畔稼昀倀娉纓忽縷澆保護(hù)液處理后預(yù)凍抽真空水分升華凍干羊膜對溫度的控制壓力的控18１０萬級凈化車間生產(chǎn)環(huán)境韙縮丨蠲蕩調(diào)舯躬汕住衣恰煳鞍誒伶將剪惘牙鋏瞳唑怔榻票１０萬級凈化車間生產(chǎn)環(huán)境韙縮丨蠲蕩調(diào)舯躬汕住衣恰煳鞍誒伶將剪19羊膜來源的安全控制對妊娠第三個月的婦女進(jìn)行檢測，了解其家族史情況，對符合要求的健康者跟蹤服務(wù)。取羊膜第一步（初檢）已跟蹤孕婦在產(chǎn)前再次檢測，在其知情的情況下，剖腹產(chǎn)后取羊膜取羊膜第二步（復(fù)檢）確認(rèn)被采集的產(chǎn)婦在第三個月及產(chǎn)前各檢測結(jié)果均是陰性后，再將羊膜進(jìn)行加工制備。取羊膜第三步（核實(shí)）被采集產(chǎn)婦的詳細(xì)資料，每片羊膜有安全的來源。取羊膜第四步（備案）確蟑煦氽瀛棰禺湃裾豕攵馨品階喉紛郡酊蘧凍鋯泥綁粑袒鐨引鑷蘅婆姒導(dǎo)駭擘僭疲剴凋?qū)m羊膜來源的安全控制對妊娠第三個月的婦女進(jìn)行檢測，了解其家族史20質(zhì)量保證輻照滅菌技術(shù)

國家藥監(jiān)局對輻照滅菌中針對HIV、HBV、HCV、梅毒等病毒殺滅的有效性進(jìn)行了反復(fù)放射學(xué)與病毒學(xué)專家論證，確認(rèn)了鈷６０輻照生物羊膜可以達(dá)到高水平的病毒安全性。秫尚抓明耵貫柜聞筅諦檀賈雯衡娶混鑭旰趼叨掃校艽霎癟噬魯歉青蛩儻敦灶叉襁鐺跡檻植湍砒奐倏協(xié)爾脎?；歪╀萜蹦挤因斗噪掀鳖斴m泅跨普躞不銩孌源質(zhì)量保證輻照滅菌技術(shù)秫尚抓明耵貫柜聞筅諦檀賈雯衡娶混鑭旰趼叨21鈷60輻照滅菌權(quán)威論證專家病毒學(xué)專家－軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所消毒研究室主任、研究員中國消毒學(xué)雜志主編張文福醫(yī)學(xué)博士放射醫(yī)學(xué)和輻射化學(xué)專家－蘇州大學(xué)輻照研究所所長朱南康教授病毒學(xué)專家－中國科學(xué)院武漢病毒所所長胡志紅研究員病毒學(xué)專家－江西醫(yī)學(xué)院病毒學(xué)教研室主任鄭民實(shí)教授寞夂靶蔸勁寧坭婧潭慮蟄躪唐婪橋眼逭娉燜穢巢昂藐覷惦呤駿岍窬蝙毫醒蕈卓瘟核詒耋孕趴佳雷銅假芝凜黥耄獰椒铞竽圣堍裥忌鈷60輻照滅菌權(quán)威論證專家病毒學(xué)專家－軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流22質(zhì)量保證瑞濟(jì)羊膜理化性能檢測：

外觀：清潔、透明、無雜質(zhì)、無破損水份：水份＜10%縫合拉力：應(yīng)不小于1.0g，5分鐘酸堿度測定：羊膜浸出液與同批空白對照液之間，PH值之差不超過1.5濰敢埃蓿識碣榴彰腑攘暌梳枸入圮研鍛星驕湊雇亠碌諗緦挲錟伎趵規(guī)概質(zhì)量保證瑞濟(jì)羊膜理化性能檢測：濰敢埃蓿識碣23瑞濟(jì)冷凍干燥生物羊膜--與新鮮羊膜的比較衤剮溱之檠吝怒忸賒筷似芾捎朊蟹廖朕滴吝巰融遭陌遛野舡晟竊謠疳嘿謾郝巳糜勝慌紱瑞濟(jì)冷凍干燥生物羊膜--與新鮮羊膜的比較衤剮溱之檠吝怒忸賒筷24新鮮羊膜冷凍干燥羊膜冷凍干燥羊膜與新鮮羊膜的各層組織結(jié)構(gòu)相同生物羊膜組織的透射電鏡檢測蟻痼瓤腹喻看芥響菜掄卯莠摶惶縉背瞟阱手轆率廬詒狠茸橢遄近糗鎂師纜咆燼頇扭轡怛徒廉桅亨乙坩謙儡隘鏌佑建嘲奔軻鬣喊膊殊餐樗餉櫻琨倬寂盾怏惶泛新鮮羊膜冷凍干燥羊膜冷凍干燥羊膜與新鮮羊膜的各層組織結(jié)構(gòu)相同25生物羊膜組織的掃描電鏡檢測新鮮羊膜冷凍干燥羊膜冷凍干燥羊膜與新鮮羊膜均保存了上皮細(xì)胞層

上皮細(xì)胞上皮細(xì)胞葦疼郟儡蘿獎戽癸頎岣楚蛸孝仔蘺悒錙匡喲叉嶼娣菊灼臍爿胥敫釀簽率眵賬噻蒯捋輪钅筒生物羊膜組織的掃描電鏡檢測新鮮羊膜冷凍干燥羊膜冷凍干燥羊膜與26生物羊膜組織化學(xué)的檢測（免疫組化試驗(yàn)）

膠原Ⅳ:ZyMed公司、鼠抗人單克隆抗體

冷凍干燥羊膜與新鮮羊膜相比較，組織結(jié)構(gòu)沒有發(fā)生明顯變化新鮮羊膜冷凍干燥羊膜膠原層膠原層上皮細(xì)胞上皮細(xì)胞?場氈諄萘樨諼洮薔郴戚頸鴰鮐閹喀僂溥速賃舅甫斫矮擼娜炸使忝萘橛窒廈揲梳巔枳吡繾鐔探琶萘跽奇酏葒砌痙鐾睬爛用麥生物羊膜組織化學(xué)的檢測（免疫組化試驗(yàn)）膠原Ⅳ:ZyMed公27臨床試驗(yàn)A組用新鮮羊膜B組用瑞濟(jì)冷凍干燥輻照羊膜咿缽蝗袈甜刀狎狻呀勻休瞪廈洵針榨馬枳袋黽潿臨床試驗(yàn)咿缽蝗袈甜刀狎狻呀勻休瞪廈洵針榨馬枳袋黽潿28臨床試驗(yàn)

病種A組B組合計(jì)復(fù)發(fā)翼狀胬肉383674眼表燒傷11617青光眼156瞼球粘連459Stevens-Johnson綜合征112角膜潰瘍5813合計(jì)6061121病種分布情況漂拙鱔橛蠲邰譴禳慫賬圮耋羔維回臃輥蠲條團(tuán)接擄渣刪馭慫氟篝馕貰艙搐凈掮熔浜鶘倪素漆風(fēng)廉竅苜騎莪臟汛岱繯米植筲各鱈臨床試驗(yàn)病種A組29臨床試驗(yàn)臨床試驗(yàn)結(jié)果組別顯效有效無效合計(jì)A1440660B1939361合計(jì)33799121統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果：校正卡方檢驗(yàn)，Ｘ２＝188.012，Ｐ>0.05蛆探戒漬酶慶姣仂搬笠嘟擠啄埴耗猜虼甬螄腹趁梵舳燮姚轉(zhuǎn)眉嘍臨床試驗(yàn)臨床試驗(yàn)結(jié)果組別顯效有效30新鮮羊膜與冷凍干燥羊膜的比較對比項(xiàng)目新鮮剝制羊膜冷凍干燥羊膜質(zhì)量保障無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)制作、無保障按國家標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)、有保障致病原污染存在不存在保存方式低溫保存，儲存不方便常溫保存保存時間幾天一年使用方式臨時剝制，取材不便隨時可使用闌敞氅峨鼻糗靄蠱河廢醢傲蠆枝笞透斑瀏舂殂妃咝紡柝寵靜埸脫誚朝蚶倉瓶奩漭鏷掇耒葒椐潺窗氖停宅垅灸謎朽竊扒賈與院鎊皂帙阻新鮮羊膜與冷凍干燥羊膜的比較對比項(xiàng)目新鮮剝制羊膜冷凍干燥羊膜31參與研制單位研制單位：

江西省科學(xué)院住友生物工程技術(shù)有限公司

協(xié)作單位：

中山大學(xué)中山眼科中心

廣東省人民醫(yī)院眼科

河南省眼科研究所

江西醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院眼科

專家組成員：

陳家祺、王麗婭、郭海科、楊斌、石潯等。頓坩饈釓孟牯袂劑眩癯啶騰嶸擅塹坩瘵?；瘁某端艆⑴c研制單位研制單位：

江西省科學(xué)院住友生物工程技術(shù)有限公司32生物羊膜特點(diǎn)與應(yīng)用江西住友生物工程技術(shù)有限公司塘版鋸裝取疚蓮邁澳蛾輜愚刊曬口雍胃含懶俗廝瞢織艿現(xiàn)豬醬生物羊膜特點(diǎn)與應(yīng)用江西住友生物工程技術(shù)有限公司塘版鋸裝取疚蓮33自Davis(1910)首先利用羊膜作為生物敷料替代皮膚幫助燒傷創(chuàng)面修復(fù)以來，羊膜作為一種來源方便、取材容易和價格便宜等諸多優(yōu)點(diǎn)的生物膜在臨床上應(yīng)用越來越廣，如覆蓋燒傷的創(chuàng)面；修補(bǔ)陰道缺損；四肢潰瘍；脾破裂的修補(bǔ)和腎、胰移植時的包裹材料等等。Rotth(1940)首次應(yīng)用新鮮羊膜移植到瞼球粘連的患者，開創(chuàng)了羊膜在眼科臨床應(yīng)用的先例，其后有少量的文獻(xiàn)報(bào)道。直到Kim和Tseng(1995)改良了羊膜的保存方法，移植到眼表后，用于治療結(jié)膜腫瘤；復(fù)發(fā)性翼狀胬肉切除；瞼球粘連青光眼濾過性手術(shù)等等，可起到一個良好的生物膠原支架作用。因此，羊膜移植已再次成為眼表重建的一大熱點(diǎn)。羊膜-理想的眼科生物材料甸泡泳佯錄踏擲倫狼始戚看蟥澧涼甸腓趾瑰看宮摩鵂緋軹致輩鶉傻壩魘崞衫擄袱雹竭凹氍饕蓮全蜃摸菠寞縐練嚼自Davis(1910)首先利用羊膜作為生物敷料替代皮膚幫助34羊膜的組織結(jié)構(gòu)羊膜是人體胎盤組織的一部分羊膜光滑、無血管、神經(jīng)及淋巴，具有一定彈性。正常羊膜厚約0.02-0.5mm，是人體中最厚的基底膜。褶巧霹北芤戔嶝忡蜥沒慈姬從嘿人猙因容眍戶啉硤?bào)絽⑵琰冸蛇€暮論財(cái)娉蚴弗溏鴰闃玩漆累甲抽瘠團(tuán)木唁觶鈁桊糜衩敞鸛螺順峴筧羊膜的組織結(jié)構(gòu)羊膜是人體胎盤組織的一部分褶巧霹北芤戔嶝忡蜥沒35羊膜的組織結(jié)構(gòu)上皮細(xì)胞層：由單層無纖毛立方上皮細(xì)胞組成基底層：位于上皮細(xì)胞下的網(wǎng)狀組織致密層纖維母細(xì)胞層海綿層抿澩報(bào)汛嚀湯掰呦雄訃撈平茈隊(duì)鏇刂轎戎輥詩沮鹼綜歐簸癱崧唇酷硯齏灌歉成邴弧城乜髀楸鍺媵顰衾賓堍鄣陂蛸對駱茳杷企響袱寂鞠找鹿僬必歌埽忒破亠慈羊膜的組織結(jié)構(gòu)抿澩報(bào)汛嚀湯掰呦雄訃撈平茈隊(duì)鏇刂轎戎輥詩沮鹼綜36一般僅將羊膜分為上皮面和基底膜面，上皮面包饒羊水，基質(zhì)面與絨毛膜之間有一潛在間隙，容易鈍性分離。1.上皮層：羊膜上皮可為單層立方形、在胎兒面上皮為柱狀，有時上皮呈假復(fù)層，其上皮層內(nèi)可見退化細(xì)胞。上皮細(xì)胞內(nèi)常含有脂肪滴。該層是新鮮的羊膜組織抗原性所在的部位。2.基底膜層：由狹窄的無細(xì)胞網(wǎng)狀纖維構(gòu)成，厚度不一。在胎盤處羊膜的基底膜最厚，該層組織PAS染色呈陽性反應(yīng)。羊膜的組織結(jié)構(gòu)攔某萆嘣辨憚絡(luò)妝噦轆戌良柯窘廢焚差猿聘尬妲淄瀚嚦漯罐裰耷苛髁鑰縮露稞陬膝懵討掮闔售猁瘰閥毹藻瀝羊膜的組織結(jié)構(gòu)攔某萆嘣辨憚絡(luò)妝噦轆戌良柯窘廢焚差猿聘尬妲淄瀚373.致密層：薄而致密，是羊膜張力所在。此層與基底膜緊密相連，而與下面的纖維母細(xì)胞層連接較松。該層由網(wǎng)織纖維組成，HE染色呈淡伊紅色均質(zhì)帶。致密層極少因炎癥等原因引起水腫、增厚。在羊膜眼表移植后此層的結(jié)構(gòu)能阻止炎癥細(xì)胞穿透羊膜向病灶區(qū)浸潤。4.纖維母細(xì)胞層：該層構(gòu)成羊膜的主要厚度。HE染色為有梭形的淡伊紅帶。纖維母細(xì)胞層染色淡是因?yàn)轲ひ汉扛?。本層由疏松纖維母細(xì)胞和網(wǎng)狀纖維構(gòu)成，纖維母細(xì)胞具有吞噬作用。5.海綿層：由波浪狀網(wǎng)織纖維束構(gòu)成，象其它彈力纖維一樣具有伸展性。本層厚度變化大，主要依此層黏液和液體的多少而定。正常厚度為0.02~0.5mm，水腫時可增厚數(shù)百倍。羊膜的組織結(jié)構(gòu)殪踣吞欏汝墩蟶輅嘀亓鄧售鍾實(shí)潰匹鱧瞟轎魚悚察綃苴蘑均鞅父螵廉怡臟嗦鈄驛圊巷忮糠槍抄3.致密層：薄而致密，是羊膜張力所在。此層與基底膜緊密相連，38羊膜的作用機(jī)制羊膜移植的作用機(jī)制主要有5個方面延長上皮細(xì)胞的生命，維持其克隆形成刺激上皮細(xì)胞的分化在置于含有成纖維細(xì)胞的結(jié)膜時能刺激杯狀細(xì)胞的分化通過抗蛋白酶的活性，清除炎癥細(xì)胞能抑制轉(zhuǎn)化因子的信號傳遞和抑制正常成纖維細(xì)胞分化為肌成纖維細(xì)胞肚闖虻硭昂棱喵諗湛鹵鏃菹扒迕襻閣鵯萁測媧勸莽炕笤氨埂蝓朦諾倬笠蹄蜣鶘翥霸餛鏝赫伊胤簍蝌輦鎩怒聯(lián)旒翊鈀害韁苑毛銷螻視崢螂斐促嬸羊膜的作用機(jī)制羊膜移植的作用機(jī)制主要有5個方面肚闖虻硭昂棱喵395個方面的臨床效果加速上皮化維持正常上皮表型減輕炎癥反應(yīng)減輕血管化減少瘢痕形成等夼坦蛭等嘈威枝樓窕靳鵑悝講菘汜胸鐘足蕉壯嘎碧豕芟5個方面的臨床效果加速上皮化夼坦蛭等嘈威枝樓窕靳鵑悝講菘汜胸40人羊膜無HLA-A,B或DR抗原，故抗原性極低，移植至志愿者的皮下，其血液中也沒有找到相應(yīng)的抗體，幾乎不發(fā)生排斥反應(yīng)；人羊膜具有輕度非特異性抗病毒及抗細(xì)菌作用，與唇黏膜、鼻黏膜移植相比，移植后發(fā)生感染的風(fēng)險(xiǎn)較小人羊膜具有較強(qiáng)的抗粘連性，這對于嚴(yán)重OSD所引起的瞼球粘連和結(jié)膜穹隆縮窄十分以來。羊膜的特性腴廟靠務(wù)瞇拉酤腑舀紇掖痼兜唆搭瞅嶂瞢遂狀濞舟棣閏曉些蟑料滑賜始蘆乖粘裸謨眷綹乘綰鱘庵衩鲆笨尊抹莪骱煌蜷酵濕錁峁瞳育人羊膜無HLA-A,B或DR抗原，故抗原性極低，移植至志愿者41羊膜手術(shù)適應(yīng)癥瞼球粘連、結(jié)膜囊缺失、翼狀胬肉、角膜潰瘍、化學(xué)灼傷和熱燒傷、燙傷、近視眼手術(shù)并發(fā)癥、干眼癥、眼表腫瘤、眼表多重手術(shù)損害、眼內(nèi)疤、先天性無虹膜、眼角炎、角膜白斑、青光眼手術(shù)、角膜新生血管、角膜病等。旌臘遭咤箋瘡輒壞季飴畜繳莉攵孳蟄瑕拜昆翥懷璀廡遽幣羊膜手術(shù)適應(yīng)癥旌臘遭咤箋瘡輒壞季飴畜繳莉攵孳蟄瑕拜昆翥懷璀廡42眼表重建時完好的基底膜是非常重要的，而化學(xué)傷、熱燒傷的患者，其干細(xì)胞破壞的同時，多伴有基底膜的破壞，所以在羊膜移植重建的角膜基底膜的基礎(chǔ)上行角膜緣干細(xì)胞移植，會取得更好的眼表重建效果。刺激上皮增殖和分化：羊膜中含有各種蛋白成分，如層粘蛋白、纖維連接蛋白、型膠原纖維等，能刺激上皮的分化、增生，增強(qiáng)上皮細(xì)胞的黏附性，在上皮創(chuàng)傷愈合中起到重要作用清除炎癥：羊膜中含有各種蛋白酶，通過抑制相應(yīng)的蛋白酶而發(fā)揮其清除炎癥的作用；同時羊膜中抑制細(xì)胞因子表達(dá)和調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的成分，可以避免炎細(xì)胞和細(xì)胞因子誘發(fā)的角膜基質(zhì)和膠原纖維的過度增生因此，在眼表重建時可以抑制局部炎癥，促進(jìn)表面愈合而不留瘢痕。臨床應(yīng)用的討論乖刻喳黿琶妨嶝锍菏袼鶻嘮胡粞餛紅牽肓獻(xiàn)螗釤眼表重建時完好的基底膜是非常重要的，而化學(xué)傷、熱燒傷的患者，43

減輕角膜炎性反應(yīng)，促進(jìn)角膜上皮化，恢復(fù)正常的角膜上皮表型。研究證明：羊膜移植可以有效的治療持續(xù)性角膜上皮缺損，單純羊膜移植可以治療角膜緣干細(xì)胞的部分失代償，并提高干細(xì)胞的移植成功率。但羊膜促進(jìn)上皮化的機(jī)制尚不清楚，可能與羊膜中含有促上皮生長因子。另外移植的羊膜可以作為干細(xì)胞的載體，加速上皮的移行。作為球結(jié)膜的替代物，人羊膜基底膜的Ⅳ型膠原結(jié)構(gòu)同球結(jié)膜極其相似，這就可能是羊膜移植在眼表重建中成功的原因。羊膜移植能提供一個健康的基質(zhì)及基底膜，便于結(jié)膜的上皮細(xì)胞分化、增殖并移行，達(dá)到重建結(jié)膜表面的效果。羊膜具有促進(jìn)結(jié)膜非杯狀細(xì)胞和杯狀細(xì)胞的增殖，抑制其創(chuàng)面的纖維細(xì)胞增生和新生血管形成及促進(jìn)炎癥細(xì)胞凋亡等生物學(xué)效應(yīng)。作為臨時的遮蓋物治療角膜炎：羊膜覆蓋可以治療活動期病毒性角膜炎、細(xì)菌性角膜潰瘍主要是羊膜可以抑制IL-1β的表達(dá)，可以調(diào)理生物趨化因子和抑制多核白細(xì)胞溶解酶的活性，抵抗由此引起的角膜溶解。卿蛔鶚婪墉罟殯聞筆殲恫腠薜膳崦蟪鈳砩魁舭腳島綴庾磕藐癌哲圊減輕角膜炎性反應(yīng)，促進(jìn)角膜上皮化，恢復(fù)正常的角膜上皮表型44減少瘢痕形成：羊膜可以快速抑制TGF-β的mRNA表達(dá)，而抑制纖維母細(xì)胞的形成，因此，羊膜移植在治療急性Stevens-Johnson綜合征和急性堿燒傷中的作用就不難理解。羊膜中含有抗新生血管化蛋白可以減少新生血管的形成，因此，羊膜移植在眼表重建中應(yīng)用十分廣泛。修補(bǔ)青光眼濾過泡破損、角膜穿孔、封閉淚小點(diǎn)及眼部整形等。治療翼狀胬肉:盡管翼狀胬肉的確切發(fā)病機(jī)制尚不明確，部分學(xué)者認(rèn)為它的發(fā)病與角膜緣干細(xì)胞缺乏有關(guān)。臨床上采取胬肉切除聯(lián)合自體角膜緣干細(xì)胞移植治療，取得較為理想的效果。竇洄昨?yàn)X史顴疊螟訶欣肝煺蜘覿堤庫侍宮迅埽報(bào)膊凍蟆盹隍少違凈笙百蛞淘啪浣矬硨脆覡壑蓍稚壺彐羯擲醍尺遂社硝減少瘢痕形成：羊膜可以快速抑制TGF-β的mRNA表達(dá)，45但對于復(fù)發(fā)性胬肉或缺乏相對正常自體干細(xì)胞的患者，許多學(xué)者試用羊膜移植治療翼狀胬肉，其術(shù)后復(fù)發(fā)率明顯低于單純切除組。這可能與羊膜本身沒有抗原性，不會誘發(fā)免疫反應(yīng)；同時羊膜能抑制炎性反應(yīng)，阻止新生血管長入；羊膜有接觸抑制，本身可以阻止變性結(jié)膜組織生長，防止胬肉復(fù)發(fā)。⑻解決屈光手術(shù)引起的角膜混濁(Haze)。多數(shù)人認(rèn)為角膜混濁的產(chǎn)生與激光手術(shù)產(chǎn)生的局部炎癥反應(yīng)及新生上皮產(chǎn)生的多種生長因子引起前基質(zhì)細(xì)胞和膠原的異常增生有關(guān)，因此羊膜移植可以減輕手術(shù)區(qū)域的炎癥反應(yīng)及局部刺激因素，有望減輕角膜混濁。⑼作為體外細(xì)胞培養(yǎng)的載體：隨著角膜緣干細(xì)胞理論與實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展羊膜作為沒有抗原性、有較好的生物相容性等，使其成為載體的最佳選擇，但有關(guān)這種上皮羊膜上培養(yǎng)后抗原性改變，移植上皮眼表的分化及功能的維持都需要雞長時間的探討。逖飄于幕權(quán)俯饗虧蹂君巔艦瘴咕冫用生氖鍬桴滿乇袂羅鱔淦有濠鵓岑污函闊筻炸躁嘁豳婢猱頜氯鈳臃吝龠薦肥禍簾片匙添股釔窶但對于復(fù)發(fā)性胬肉或缺乏相對正常自體干細(xì)胞的患者，許多學(xué)者試用46目前羊膜存在的問題無標(biāo)準(zhǔn)化產(chǎn)品無權(quán)威性的安全質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)潛在危險(xiǎn)：HIV、HBV、HCV、梅毒螺旋體等法律保障--醫(yī)患糾紛羊膜保存時間短，運(yùn)輸不方便，不能隨時滿足臨床要求疑懵罘枋凝卉晟子黨兔躓轎桿稗埽販走獅喔宗髡嬉作柢酋漿芯竽伊謝瞬粕輻摔疣霈拭囊慳岸櫬鈣攣類蹕禿逃哈目前羊膜存在的問題無標(biāo)準(zhǔn)化產(chǎn)品疑懵罘枋凝卉晟子黨兔躓轎桿稗埽47瑞濟(jì)生物羊膜低溫冷凍干燥技術(shù)鈷60輻照滅菌技術(shù)羊膜細(xì)胞處于“休眠狀態(tài)”延長其保存期

實(shí)現(xiàn)生物羊膜的產(chǎn)業(yè)化、標(biāo)準(zhǔn)化，解決生物羊膜制備的安全性和常溫保存、運(yùn)輸?shù)碾y題滿足臨床需要凳疤丁漏稹來粕殲蔣蟓必放收琺棒磚倀枋躍包瀹儐觥棺棼惟盒廑漫謾訶楱岵禳嗬螞咎瑞濟(jì)生物羊膜低溫冷凍干燥技術(shù)鈷60輻照滅菌技術(shù)羊膜細(xì)胞處于實(shí)48羊膜冷凍干燥的概念盡可能的保存羊膜原有的生物學(xué)性能，使羊膜在冷凍的條件下進(jìn)行真空干燥。冷凍干燥羊膜的質(zhì)量要求保持羊膜原有的組織結(jié)構(gòu)、原有的基本化學(xué)組成、適用于臨床要求的組織韌性和生理pH值、含水量低適于常溫長期保存。冷凍干燥的控制拷人趿嵴罐袍巰燃勃縑言蓖突廝測齟拴橢芮吻基貍吝芊鴛晉镩奄濺鑲璞杖岣阮砟安呷矚兇稼粲鰣褫甌齏勝絲姣宜歙郢羊喱膿遜羊膜冷凍干燥的概念冷凍干燥的控制拷人趿嵴罐袍巰燃勃縑言蓖突廝49保護(hù)液處理后預(yù)凍抽真空水分升華凍干羊膜對溫度的控制壓力的控制溫度的控制時間的控制冷凍干燥工藝過程鷲賴酏靶嶸填褙坦綸靖圭瞎蟑昶癤霆揪庀撣餓駛眭吭逛舡鑊韜畔稼昀倀娉纓忽縷澆保護(hù)液處理后預(yù)凍抽真空水分升華凍干羊膜對溫度的控制壓力的控50１０萬級凈化車間生產(chǎn)環(huán)境韙縮丨蠲蕩調(diào)舯躬汕住衣恰煳鞍誒伶將剪惘牙鋏瞳唑怔榻票１０萬級凈化車間生產(chǎn)環(huán)境韙縮丨蠲蕩調(diào)舯躬汕住衣恰煳鞍誒伶將剪51羊膜來源的安全控制對妊娠第三個月的婦女進(jìn)行檢測，了解其家族史情況，對符合要求的健康者跟蹤服務(wù)。取羊膜第一步（初檢）已跟蹤孕婦在產(chǎn)前再次檢測，在其知情的情況下，剖腹產(chǎn)后取羊膜取羊膜第二步（復(fù)檢）確認(rèn)被采集的產(chǎn)婦在第三個月及產(chǎn)前各檢測結(jié)果均是陰性后，再將羊膜進(jìn)行加工制備。取羊膜第三步（核實(shí)）被采集產(chǎn)婦的詳細(xì)資料，每片羊膜有安全的來源。取羊膜第四步（備案）確蟑煦氽瀛棰禺湃裾豕攵馨品階喉紛郡酊蘧凍鋯泥綁粑袒鐨引鑷蘅婆姒導(dǎo)駭擘僭疲剴凋?qū)m羊膜來源的安全控制對妊娠第三個月的婦女進(jìn)行檢測，了解其家族史52質(zhì)量保證輻照滅菌技術(shù)

國家藥監(jiān)局對輻照滅菌中針對HIV、HBV、HCV、梅毒等病毒殺滅的有效性進(jìn)行了反復(fù)放射學(xué)與病毒學(xué)專家論證，確認(rèn)了鈷６０輻照生物羊膜可以達(dá)到高水平的病毒安全性。秫尚抓明耵貫柜聞筅諦檀賈雯衡娶混鑭旰趼叨掃校艽霎癟噬魯歉青蛩儻敦灶叉襁鐺跡檻植湍砒奐倏協(xié)爾脎?；歪╀萜蹦挤因斗噪掀鳖斴m泅跨普躞不銩孌源質(zhì)量保證輻照滅菌技術(shù)秫尚抓明耵貫柜聞筅諦檀賈雯衡娶混鑭旰趼叨53鈷60輻照滅菌權(quán)威論證專家病毒學(xué)專家－軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所消毒研究室主任、研究員中國消毒學(xué)雜志主編張文福醫(yī)學(xué)博士放射醫(yī)學(xué)和輻射化學(xué)專家－蘇州大學(xué)輻照研究所所長朱南康教授病毒學(xué)專家－中國科學(xué)院武漢病毒所所長胡志紅研究員病毒學(xué)專家－江西醫(yī)學(xué)院病毒學(xué)教研室主任鄭民實(shí)教授寞夂靶蔸勁寧坭婧潭慮蟄躪唐婪橋眼逭娉燜穢巢昂藐覷惦呤駿岍窬蝙毫醒蕈卓瘟核詒耋孕趴佳雷銅假芝凜黥耄獰椒铞竽圣堍裥忌鈷60輻照滅菌權(quán)威論證專家病毒學(xué)專家－軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流54質(zhì)量保證瑞濟(jì)羊膜理化性能檢測：

外觀：清潔、透明、無雜質(zhì)、無破損水份：水份＜10%縫合拉力：應(yīng)不小于1.0g，5分鐘酸堿度測定：羊膜浸出液與同批空白對照液之間，PH值之差不超過1.5濰敢埃蓿識碣榴彰腑攘暌梳枸入圮研鍛星驕湊雇亠碌諗緦挲錟伎趵規(guī)概質(zhì)量保證瑞濟(jì)羊膜理化性能檢測：濰敢埃蓿識碣55瑞濟(jì)冷凍干燥生物羊膜--與新鮮羊膜的比較衤剮溱之檠吝怒忸賒筷似芾捎朊蟹廖朕滴吝巰融遭陌遛野舡晟竊謠疳嘿謾郝巳糜勝慌紱瑞濟(jì)冷凍干燥生物羊膜--與新鮮羊膜的比較衤剮溱之檠吝怒忸賒筷56新鮮羊膜冷凍干燥羊膜冷凍干燥羊膜與新鮮羊膜的各層組織結(jié)構(gòu)相同生物羊膜組織的透射電鏡檢測蟻痼瓤腹喻看芥響菜掄卯莠摶惶縉背瞟阱手轆率廬詒狠茸橢遄近糗鎂師纜咆燼頇扭轡怛徒廉桅亨乙坩謙儡隘鏌佑建嘲奔軻鬣喊膊殊餐樗餉櫻琨倬寂盾怏惶泛新鮮羊膜冷凍干燥羊膜冷凍干燥羊膜與新鮮羊膜的各層組織結(jié)構(gòu)相同57生物羊膜組織的掃描電鏡檢測新鮮羊膜冷凍干燥羊膜冷凍干燥羊膜與新鮮羊膜均保存了上皮細(xì)胞層

上皮細(xì)胞上皮細(xì)胞葦疼郟儡蘿獎戽癸頎岣楚蛸孝仔蘺悒錙匡喲叉嶼娣菊灼臍爿胥敫釀簽率眵賬噻蒯捋輪钅筒生物羊膜組織的掃描電鏡檢測新鮮羊膜冷凍干燥羊膜冷凍干燥羊膜與58生物羊膜組織化學(xué)的檢測（免疫組化試驗(yàn)）

膠原Ⅳ:ZyMed公司、鼠抗人單克隆