..目錄――基本知識與技能1、藥理實驗的基本操作技術(shù)12、藥理實驗設(shè)計的基本原則63、數(shù)理統(tǒng)計在藥理學實驗中的應(yīng)用94、Casiofx-180p計算器的應(yīng)用165、PowerLab系統(tǒng)基本操作指南226、怎樣寫藥理實驗報告267、處方29――藥代動力學部分8、藥酶誘導劑及抑制劑對戊巴比妥鈉催眠作用的影響319、苯巴比妥鈉對小鼠肝臟細胞色素P450含量的影響3310、堿化尿液對水楊酸鈉經(jīng)腎排泄的影響3511、酚磺酞〔PSP藥代動力學參數(shù)的測定37――藥效動力學部分12、M膽堿受體系列實驗之一有機磷酸酯類中毒解救及膽堿酯酶活性的測定3913、M膽堿受體系列實驗之二藥物對大鼠離體空腸的作用4114、M膽堿受體系列實驗之三M膽堿受體亞型分析4515、三種作用于傳出神經(jīng)系統(tǒng)的未知藥物的初步辨別4716、腎上腺素對大鼠血流動力學的影響4917、抗癲癇藥的辨別及藥效測定5118、氯丙嗪對小白鼠激怒反應(yīng)的影響5319、潑尼松龍和阿司匹林的辨別及藥效測定5520、夾竹桃對離體蟾蜍心臟的作用5721、強心苷的強心作用和毒性作用的觀察59――毒理學部分22、普魯卡因半數(shù)致死量的測定6123、煙堿的毒性作用6424、局麻藥的麻醉作用及毒性比較6525、青霉素G鉀和青霉素G鈉快速靜注的毒性比較67――臨床藥理學部分26、臨床藥理學和新藥臨床研究6827、臨床用藥討論69――附表1、實驗動物用注射針頭的大小及注射藥容量722、動物常用麻醉藥用法和用量723、常用生理溶液成分表734、常用實驗動物生理參731、藥理實驗的基本操作技術(shù)一、常見實驗動物性別的鑒定動物雄性雌性大白鼠與小白鼠生殖器與肛門之間的距離較大。用手指輕捏外生殖器,可見陰莖凸出；天熱時可見下垂的陰囊。較小乳頭明顯青蛙與蟾蜍捏住腰部將之提起時,前肢作環(huán)抱狀,并鳴叫。前肢呈伸直狀,不鳴叫。前肢拇指與食指間趾蹼上有棕黑色小突起〔所謂婚痣。無婚痣家兔左手抓住頸部皮膚；右手拉住尾巴,將之夾在中指與無名指之間,用拇指及食指將靠近生殖器的皮毛扒開。可見陰莖露出。僅呈橢圓形間,無陰莖。豚鼠豚鼠無尾,其他同家兔。二、常用實驗動物捉拿法小白鼠與大白鼠：右手抓住尾部,將之置于鐵絲籠或粗糙的平面上,另一手捏住頸部皮膚,即可將動物捉起。捉拿大白鼠時可戴軟手套。家兔：右手抓住耳后頸部皮膚,左手托住臀部。不可抓雙耳將之提起,因兔耳軟骨脆弱,不能承受全身重量,易損傷；且實驗時常需耳緣靜脈注射給藥,抓耳捉拿更應(yīng)避免。三、給藥方法1、灌胃法：小白鼠：〔圖1左手拇指與食指捏住頸部皮膚,將動物背部置于掌心,用同手無名指與小指將尾部緊壓在掌心,使頸部與口保持平直。右手持灌胃器,灌胃管從口角插進口腔,緊沿上腭插入食道。若通暢未遇阻力,動物安靜無呼吸異常,表示已插進食道,即可將藥液注入；若遇阻力,應(yīng)拔出再插；若藥液誤入氣管,動物立即死亡。家兔：〔圖5一人坐定,用大腿夾住兔身,一手緊握前肢,一手固定兔頭,使之與頸部呈90度角。另一人將木制開口器橫插進兔嘴,向內(nèi)翻轉(zhuǎn),壓住舌部。然后將導管從開口器中央孔插入,直至胃部。將導管外端放在水中,若連續(xù)有氣泡逸出,表示導管插入氣管內(nèi),拔出重插。無氣泡,即可灌藥；灌畢,用少量清水將殘留在導管內(nèi)藥液沖進胃中。2、注射法：皮下注射：〔圖2注射部位為背部皮下。注射時,大動物需固定；小動物用左手小指壓住其頸部,用拇指及食指<或中指>將背部皮膚提起。右手持住注射器,針頭略與體表平行刺入皮下,注藥,退針要快,以免藥液外流。腹腔注射：〔圖3小白鼠腹腔注射可一人操作,捉拿法與灌胃相同,針頭略傾斜約45度自下腹部左或右側(cè)刺入,注藥,針頭插入不宜太深或太近上腹部,避免刺破內(nèi)臟,出針也要快。肌肉注射：注射部位一般多取后大腿外側(cè)肌處。將動物固定,左手抓住大腿,右手持注射器,針頭與皮膚表面垂直刺入肌肉<小動物斜刺>,回抽無回血,即可注藥。靜脈注射：家兔耳緣靜脈注射：〔圖7將耳背外緣注射部位毛拔去,用酒精棉球連續(xù)擦,使血管擴張。注射時將血管向心端捏緊,然后進針,刺入后,將針頭與兔耳一起捏住,避免針頭滑出,注畢退針時,進針處用干棉球按住。小白鼠尾靜脈注射：將動物固定,暴露尾部,用酒精棉球連續(xù)擦尾部<必要時用二甲苯擦,亦可用電燈溫烤>,使血管擴張。尾背與左右兩側(cè)三根血管皆為靜脈,均可選用。選一擴張較好靜脈,左手拇指與中指捏住尾部的近尾端,食指壓迫尾根保持血管淤血擴張,<成敗關(guān)鍵在于尾靜脈是否明顯擴張,若不明顯擴張,則不易成功>向下彎約45度。右手持注射器,于彎曲點處成切線方向進針。推注時遇阻力,且皮下隆起發(fā)白,即針頭不在血管內(nèi),應(yīng)拔出重新進針。針頭在血管內(nèi),推注時不覺阻力。實驗動物用注射針頭的大小及注射藥容量、動物常用非揮發(fā)性麻醉藥用法和用量見附表。四、取血方法小白鼠和大白鼠眼眶后靜脈叢取血法：用左手抓住鼠的頸背部,拇指及中指抓緊頭頸部皮膚,食指按在眼睛后,使眼球輕度突出,鼠側(cè)臥位,眼眶球后靜脈叢就瘀血。右手取一蘸過肝素的9號鈍針頭,沿著內(nèi)眥眼眶后壁刺入,穿刺時針頭應(yīng)由眼內(nèi)角向喉頭方向前進約4～5mm,輕輕轉(zhuǎn)動再縮回,血液就會流出。然后用血紅蛋白吸管取血<血紅蛋白吸管預(yù)先用肝素浸潤管壁>。兔耳緣靜脈取血法：局部去毛,用電燈照射加熱或用酒精或二甲苯棉球涂擦,使靜脈擴張,再以石蠟油涂擦耳緣,防止流出血液凝固。用粗針頭將靜脈刺破或刀切小口讓血自然滴入已放抗凝劑的試管中。3、兔耳中央動脈采血法：將兔置于兔固定箱內(nèi),由于兔耳動脈遇刺易發(fā)生較長時間的痙攣性收縮,因此采血前,必須讓兔耳充分充血,力爭一次刺中動脈。為了更好地使耳中動脈舒張,可用麻醉耳神經(jīng)叢耳支法。即取1%普魯卡因溶液2ml注入一側(cè)耳根后下方冠狀突與側(cè)突間隙的深層軟組織,以麻醉支配耳中動脈的耳神經(jīng)叢,數(shù)秒鐘后可見耳動脈充血,指觸脈搏感強,證明麻醉成功。此時即以左手食指與拇指固定中央動脈離心端,針刺部位從中央動脈末端開始,不要在近耳根部取血,因耳根部軟組織厚,血管位置略深,易刺透血管造成皮下出血。準備好含有1%肝素生理鹽水抗凝液的動脈套針,先以12～16號粗針頭,在中央動脈末端,沿動脈平行地向心性方向穿過皮膚,然后退出針頭,將動脈套針沿剛刺過的孔道刺入動脈,即可見動脈血涌入針管,這時將套針針芯小心抽出,同時將針芯外緊束著的套管送入動脈內(nèi),血即自動涌出,此法一次可迅速取血達15ml。若需連續(xù)多次取血,可在套針口連接含有抗凝液的注射器,5分鐘左右注射0.5~1.0ml抗凝劑,以免針頭處凝血。或注射0.15ml/kg肝素原液<12500u/2ml>使動物肝素化,以免血液凝固。五、藥物濃度及劑量換算1、藥物濃度：是指一定量液體或固體制劑中所含主藥的份量。常用以下幾種表示法。百分濃度：每100毫升<克>溶液所含溶質(zhì)的克<毫升>數(shù),用符號％表示。如：5％氯化鈉溶液,即指100毫升溶液中含有氯化鈉5克。比例濃度：用比例式計算,是指幾克<毫升>溶質(zhì),制成幾毫升溶液,用1：x比例式表示。如：1：1000腎上腺素溶液,即指1000毫升溶液中含有腎上腺素1克。克分子濃度<M>：一升溶液中所含溶質(zhì)的克分子數(shù)稱為該溶液的克分子濃度。如：0.1MNaCl溶液表示1000ml中含NaCl5.844g<NaCl的分子量為58.44g>,現(xiàn)均改為摩爾濃度：1M改為1mol/L?？水斄繚舛?lt;N>：一升溶液中含有溶質(zhì)的克當量數(shù)稱為該溶液的克當量濃度。如：1NH2SO4表示1000ml中含49gH2SO4<H2SO4分子量為98>?，F(xiàn)亦該改為摩爾濃度,凡1價離子者兩值相當,如：1NNaOH=1mol/LNaOH,如2價者：2NH2SO4=1mol/LH2SO4。2、劑量換算：1>動物實驗所用藥物的劑量,一般按mg/kg<或g/kg>體重計算,應(yīng)用時須從已知藥液濃度換算出相當于每公斤體重應(yīng)注射的藥物量<ml>,以便給藥。例：小白鼠體重18g,腹腔注射鹽酸嗎啡10mg/kg,藥物濃度為0.1%,應(yīng)注射多少ml?計算方法：0.1%的溶液每毫升含藥物1毫克,劑量為10mg/kg相當于容積為10ml/kg。小白鼠常以mg/10g計算,換算成容積時也以ml/10g計算,相當于0.1ml/10g,18g重的小鼠注射0.18ml,如20g體重小鼠,給0.2ml,以此類推。2>在動物實驗中有時須根據(jù)藥物的劑量及某種動物給藥途徑的藥液容量,然后配制相當?shù)臐舛纫员阌诮o藥。例：給兔靜注戊巴比妥鈉30mg/kg,注射量為1.2ml/kg,應(yīng)配制戊巴比妥鈉的濃度是多少？計算方法：30mg/kg相當于1.2ml/kg,因此1.2ml藥物應(yīng)含30mg藥物,如要算成百分比濃度1.2:30=100:x,x=2500mg=2.5g,即100ml含2.5克,故應(yīng)配成2.5%的戊巴比妥鈉。2、藥理實驗設(shè)計的基本原則藥理實驗是在整體動物或離體器官標本上進行的科學研究,其目的是闡明藥物的作用或機制。在實驗過程中,由于各種非處理因素如個體差異、實驗條件、儀器設(shè)備等均會不同程度影響實驗結(jié)果,使處理因素〔如藥物的效應(yīng)不容易充分顯示出來。因此,要獲得可靠的實驗結(jié)果,必須精心設(shè)計實驗,嚴格遵循實驗設(shè)計的三大原則：重復、隨機、對照,避免各種誤差和偏性干擾,以最經(jīng)濟的人力、物力和時間揭示出處理因素的效應(yīng),可達到事半功倍的效果。一、重復〔replication重復是實驗設(shè)計的首要原則,可靠的實驗結(jié)果,應(yīng)能在相同的實驗條件下重復出來,即重現(xiàn)性。統(tǒng)計學中顯著性檢驗規(guī)定的P值作為評定重現(xiàn)性的尺度,P<0.05,說明不能重現(xiàn)的概率小于5%,而重現(xiàn)的概率大于95%,即重現(xiàn)性好。若P<0.01,說明重現(xiàn)性非常好。實驗的對象即樣本大小是保證重現(xiàn)性的基本條件。為了達到某一重現(xiàn)性,必須有相應(yīng)的適當?shù)闹貜蛿?shù)〔樣本數(shù),樣本數(shù)過少不行,樣本數(shù)過大造成不必要浪費,因此應(yīng)在保證獲得可靠結(jié)論的前提下,確定最少的樣本例數(shù)。樣本大小的估計與藥效強度、生物的個體差異、對實驗正確性要求、P值的大小及統(tǒng)計學處理的方法等因素有關(guān)。藥效作用強或兩組藥效差別大則樣本數(shù)可小,藥效作用弱或兩組藥效差別小則應(yīng)增加樣本數(shù)。但當兩組藥效差別很小時,單靠增加例數(shù)是不行的,必須用專業(yè)知識判別這種微小差別有無實際意義。大多數(shù)生物指標的變異系數(shù)在515%之間,如果變異系數(shù)小,即該指標穩(wěn)定,數(shù)據(jù)稍有變化即有顯著意義,則只要很小樣本就可得到顯著的差別。如果變異系數(shù)大,可使處理后指標的變化被自身變異所遮蓋,需要增大樣本才能使之區(qū)分。對實驗正確性要求可用可信限表示,可信限愈小,對實驗正確性要求高,樣本應(yīng)愈大,如可信限大,則樣本個體數(shù)可較少。對同一可信限來說,P值愈大,樣本愈小,反之亦然。在上述條件確定的情況下樣本數(shù)〔即需要重復的個體數(shù)可以通過查表獲得。樣本大小還與統(tǒng)計處理的方法有關(guān),采用效率高的統(tǒng)計學方法,可以用較少的實驗例數(shù)取得較好的重現(xiàn)性。當兩組樣本數(shù)相同時,顯著性檢驗的效率最高。計量資料的樣本數(shù)要比計數(shù)資料樣本數(shù)少,每組例數(shù)在1030例即可,如多組或多劑量實驗,有時每組68例就可統(tǒng)計判斷。而計數(shù)資料要大于30例。同體實驗或配對實驗、自身前后對比實驗效率較高,較少例數(shù)即可獲得較好統(tǒng)計效果。某些特殊設(shè)計如拉丁方設(shè)計、正交設(shè)計的效率最高,實驗例數(shù)可大大減少,而獲得信息最多。除了樣本數(shù)量外,重復數(shù)的質(zhì)量也是實驗?zāi)軌蛑噩F(xiàn)的重要條件。只有在相同實驗條件、相同材料及相同動物模型上進行的實驗,所得的結(jié)果才能說明結(jié)論的可靠正確。二、隨機〔randomization不論是抽樣還是分組,都必須遵守隨機化原則。也就是在抽樣時,必須使總體中每一個體都有被抽到機會,這樣所抽的樣本對總體就會有較好的代表性。同樣,在分組時,必須使每個實驗對象都有相同的機會接受分配和處理,這樣可消除主觀因素或其它偏性誤差的影響。這是實驗設(shè)計的重要原則之一,具有統(tǒng)計意義和實際意義。隨機化是統(tǒng)計學的基礎(chǔ)。在顯著性檢驗中,通常的無效假設(shè)是：實驗結(jié)果的差別是非處理因素的作用,即純系機遇引起,機遇出現(xiàn)的概率就是P。如果P<0.05,說明實驗結(jié)果按機遇情況100次中少于5次,這種情況夠少見的,無效假設(shè)不能成立,即實驗結(jié)果非機遇引起,而是由處理因素引起。所以,無效假設(shè)來源于隨機過程,是在機遇與處理并存的條件下,使每個個體都有被選中的機會。避免人為干預(yù),保證了無效假設(shè)的基礎(chǔ),提高了顯著性檢驗的靈敏度。如果實驗不是隨機進行,即使有系統(tǒng)誤差,顯著性檢驗也毫無意義。在實驗中,我們要求各組除處理因素外的其它條件都應(yīng)完全一致。實際上在絕大多數(shù)實驗中是做不到的。動物的年齡、性別、體重、儀器的性能、實驗操作、環(huán)境及其它人力無法控制的因素都會影響實驗結(jié)果的正確性。隨機化是一種最簡單、方便、經(jīng)濟的均衡非處理因素的方法,使各組非處理因素基本一致,各組間具有可比性,提高了顯著性檢驗的靈敏度。隨機分組的方法很多,簡單的是拋硬幣法,按照出現(xiàn)正面或反面的機遇分配。也可用擲骰子方法,標準的是用隨機數(shù)字表,使實驗對象分組的機會均等。隨機并不是隨便,也不是隨意。隨機有絕對隨機和均衡隨機。絕對隨機也稱完全隨機,把實驗動物完全隨機分配到各實驗組中去,一般用于單因素大樣本實驗。此法簡單、常用,但效率較差。在藥理實驗中,樣本例數(shù)有限,常采用均衡隨機法,將全部動物按性別、年齡、體重及其它條件等分成若干組,每組動物數(shù)與擬劃分的組數(shù)相等,每組內(nèi)動物的體質(zhì)條件相似,再給每組的每只動物編號,利用隨機數(shù)字表把動物分配到各組。根據(jù)劃分組數(shù)不同,有配對隨機、區(qū)組隨機和拉丁方隨機法。這種方法使易控制的影響實驗結(jié)果的主要因素如動物性別、體重等在各組均衡一致,比絕對隨機優(yōu)越,應(yīng)用廣泛。三、對照〔control對照是藥理實驗必不可缺的條件。對照是比較的基礎(chǔ),沒有對照就沒有比較、沒有鑒別。對照應(yīng)符合齊同可比的原則。除了實驗處理因素〔如藥物的種類、劑量、途徑等外,對照組的一切條件〔如動物的年齡、性別、體重,實驗的時間、環(huán)境、儀器、方法、操作人員,對照組的溶劑、容量等,均應(yīng)與實驗組完全一致。即實驗組與對照組應(yīng)做到四同：同時、同地、同批動物和同條件。這樣才具有齊同可比性,突出處理因素的效果,才能得出準確的結(jié)論。在藥理實驗中,對照組的類型很多,有陰性對照或空白對照〔對照組給同量生理鹽水、陽性對照或標準藥對照〔采用藥典收載的或療效確切的藥物對照和模型對照〔對照組制作病理模型等。對照組的例數(shù)應(yīng)與實驗組相等,這樣統(tǒng)計效率最高。對照組一方面起對照作用,同時又起監(jiān)控實驗條件的作用,這樣保證了實驗的可靠性。3、數(shù)理統(tǒng)計在藥理學實驗中的應(yīng)用一、數(shù)理統(tǒng)計的幾個基本概念1、總體、樣本與抽樣"總體"是指同質(zhì)的研究對象所構(gòu)成的集體。例如研究的是宮頸癌,總體應(yīng)是全部宮頸癌患者,不能把患其它病的病人也納入其中?？傮w中個體數(shù)目的多少要視研究范圍而定。例如,研究某藥對乙型肝炎的療效,總體就是全部乙型肝炎患者。假如研究的是對遷延性乙型肝炎的療效,總體就是全部遷延性乙型肝炎患者,比前面的就小了。在科學研究中,由于種種原因,不能將總體中的每一個體都加以觀察,而只能抽取總體中的一部分作為直接研究的對象,這就是樣本。藥理實驗中所用的樣本都是小樣本。從總體中抽取樣本的過程稱為抽樣。由于總體中各個體存在變異,各樣本均數(shù)〔或率會各不相同,與總體的均數(shù)〔或率也會有差異。這種由抽樣而引起的差異稱為"抽樣誤差"。抽樣誤差是不可避免的客觀規(guī)律。一般說,樣本愈大,抽樣誤差就愈小,和總體情況也就愈接近。但是,在實際工作中,往往不可能觀察太多的個體,只能從較小的樣本所得的資料來分析、推論總體。這就要求樣本在質(zhì)量上對總體有較好的代表性,并具有一定數(shù)量,盡量減少抽樣誤差。2、顯著性檢驗顯著性檢驗的意義可舉一例子說明。在觀察抗凝血藥對心肌梗塞死亡率的影響的某一試驗中,有二組病人,一組用了抗凝血藥,該組病人的死亡百分率為25%,另一組未用藥作為對照,其死亡率為41%,問抗凝血藥是否可以降低心肌梗塞病人的死亡率？在這一研究樣本所得的實驗結(jié)果中,抗凝血藥組的死亡率小于對照組,但是這種結(jié)果是否可以推論總體,究竟是總體的真實反映〔二組的死亡率確實有差異還是純屬機遇〔即碰巧所發(fā)生的？這種探究機遇引起的兩組療效的差異超過實際由兩個不同總體引起差異的概率有多大,這必須經(jīng)過統(tǒng)計學中顯著性檢驗。顯著性檢驗的步驟可分為三步：1>提出"無效假設(shè)"H0,即兩組數(shù)據(jù)均來自同一總體,其差別是由于抽樣誤差所引起。在上述例子中,無效假設(shè)是"抗凝血藥并不能降低心肌梗塞病人的死亡率,兩組病人均接受相同死亡率支配,實際死亡率的差別純系機遇所造成"。2>根據(jù)總體抽樣的規(guī)律,可由兩組樣本的實測數(shù)據(jù)計算出"無效假設(shè)"的可能性〔概率有多大,通常用大寫的"P"表示。3>如果P<0.05或0.01,說明兩組間純屬按機遇所發(fā)生的概率100次中不到5次或1次,這種可能性很小,因而否定"無效假設(shè)"。即兩組樣本來自同一總體的可能性很小,它們的差別在統(tǒng)計學上有顯著或極顯著意義。反之,如果P>0.05,說明兩組機遇概率大于5%,即來自同一總體的概率大于5%,這時不能輕易否定"無效假設(shè)",盡管兩組間有差別,但這種差別無統(tǒng)計學意義。值得注意的是統(tǒng)計學結(jié)論的意義并不等于專業(yè)結(jié)論的意義,兩組差異有統(tǒng)計學的顯著、極顯著或無顯著意義并不說明兩組均數(shù)〔或率的差別大、很大或不大。統(tǒng)計學上差異非常顯著時,在專業(yè)上未必就有顯著意義。例如某種藥物用藥前后舒張壓平均下降1.3kPa,經(jīng)t值檢驗,P<0.05并得出"用藥前后的差值均數(shù)有顯著意義"的統(tǒng)計學結(jié)論,但并不意味著該藥就有"顯著療效"或臨床應(yīng)用價值。顯著性水平及統(tǒng)計學意義判斷標準統(tǒng)計結(jié)論注意P≤0.01差別有極顯著意義不等于差別極大P≤0.05差別有顯著意義不等于差別大P>0.05差別無顯著意義不等于沒有差別二、定量資料的統(tǒng)計分析定量資料又稱計量資料。是研究量反應(yīng)即測量試驗對象某項目指標數(shù)值大小所得的資料。如身高、體重、心率、血壓等是最為常用的資料類型。資料獲得后,應(yīng)分析其性質(zhì)、分布等,才能選擇適宜的方法進行統(tǒng)計分析。1、計量資料的代表性參數(shù)均數(shù)〔算術(shù)平均數(shù)x均數(shù)是用來描述一組定量數(shù)據(jù)〔符合正態(tài)分布集中特征的統(tǒng)計學參數(shù)。均數(shù)與例數(shù)的乘積應(yīng)等于各觀察值的和,各觀察值與均數(shù)差值之和為0,即〔x－x=0。各觀察值與均數(shù)差值的平方和即〔x－x2為最小。2>標準差〔s標準差是反映一組定量數(shù)據(jù)離散程度的參數(shù)。s大,表示觀察值分散。實際應(yīng)用中,常以均數(shù)標準差〔xs綜合表達一組數(shù)據(jù)集中和離散特性。一般來說,該組數(shù)據(jù)中約有2/3的觀察值在xs范圍內(nèi),約有95%的觀察值在x2s范圍內(nèi)。由此可了解數(shù)據(jù)的大致分布。3>標準誤〔SE,Sx標準誤表示抽樣誤差的大小,是反映均數(shù)可靠性的參數(shù)。標準誤小,說明抽樣誤差較小,樣本均數(shù)與總體均數(shù)較接近,用樣本均數(shù)代表總體均數(shù)的可靠性大；反之,標準誤差越大則表示樣本均數(shù)越不可靠。樣本均數(shù)的可靠程度可用均數(shù)±標準誤的范圍來估計。在x范圍內(nèi),總體均數(shù)出現(xiàn)的概率約為68%,也就是說在重復的100次實驗中,約有68次實驗的均數(shù)在該范圍內(nèi),因此越小,由樣本均數(shù)估計總體均數(shù)的誤差范圍也越小,均數(shù)可信性也越好。標準差和標準誤不同,前者表示各個測量值的離散程度,而后者則說明樣本均數(shù)的抽樣誤差,即樣本均數(shù)對總體均數(shù)的離散程度,所以標準誤可稱為"樣本均數(shù)的標準差"。4>可信限可信限是由樣本均數(shù)估計總體均數(shù)所在可信范圍的數(shù)值。95%可信限=x－t0.05SEx+t0.05SE,99%可信限=x－t0.01SEx+t0.01SE,根據(jù)自由度〔df=n－1查t值表,查出t0.05及t0.01值再按公式計算而得,其中95%可信限最為常用。2、配對比較的t檢驗配對t檢驗是最常用的同體比較的顯著性檢驗,適用于同一實驗對象用藥前后的比較,也可用于實驗對象〔同窩、同種按年齡、體重和性別等進行配對后隨機分為實驗組和對照組,對每對動物的觀察值的差值進行顯著性檢驗。該檢驗的效率較高。d為差值的均數(shù),s為差值標準差用Casiofx-180p計算器操作：Mode3,INVKAC,輸入第一對差值d1按DATA輸入第二對差值d2按DATA輸入第三對差值d3按DATA輸入第n對差值dn按DATAINVxKo3INVˉINVXn-1=<t值>根據(jù)自由度〔df=n－1查t值表,檢驗用藥前后差別是否顯著。3、成組比較的t檢驗由于常常很難找到條件相同的個體來配對比較,可把動物隨機分成兩組,各施以不同處理,算出各組均數(shù),然后進行均數(shù)比較,這就是團體t檢驗。適用于獨立分組的定量數(shù)據(jù)的比較。根據(jù)自由度df=n1＋n2－2查t值表,確定P值。用Casiofx-180p計算器操作：當兩樣本數(shù)不等<n1n2>時：ModeINVKACINVMins1<n11>INVˉM+s2<n21>INVˉM+x1x2=INVX2MRn1n2<n1+n2>〔N－2>=INVˉ<t值>例題：在某一藥理實驗中,測得的數(shù)據(jù)如下：第1組：n1=5,x1=10.16,s1=1.14第2組：n2=6,x2=9.92,s2=1.65問這兩組的差別是否顯著？操作：ModeINVKACINVMin1.14<51>INVˉM+1.65<61>INVˉM+10.169.92=INVx2MR56<5+6><11－2>=INVˉ<t值0.274>t=0.274,df=5+6－2=9,t<9>0.05=2.26,t<t<9>0.05P>0.05,差別無顯著意義。當兩樣本相等<n1=n2>時：ModeINVKACINVMins1INVR-Ps2M+x1x2=MRnINVˉ=<t值>例題：在某一藥理實驗中,測得的數(shù)據(jù)如下：第1組：n1=8,x1=12,s1=1.2第2組：n2=8,x2=10,s2=0.8問這兩組的差別是否顯著？操作：ModeINVKACINVMin1.2INVR-P0.8M+1210=MR8INVˉ=<3.92>t=3.92,df=8+8－2=14,t<14>0.01=2.98,t>t<14>0.05P<0.01,兩組差別非常顯著。4、直線回歸與相關(guān)在醫(yī)學或藥理實驗中,許多事物都是相互聯(lián)系、相互制約,如藥物的劑量與效應(yīng)、年齡與血壓、身高與體重等,所以,有許多問題須同時考慮變量間的關(guān)系。要研究兩個變量間的關(guān)系,須將該關(guān)系用方程式表達出來,這樣便可以從一個變量推算另一個變量。求這種推算方程總稱為回歸。直線回歸是最簡單的一種。當測量指標值x與y呈線性相關(guān),可用最小二乘法求直線回歸方程y=bx+a,x是自變量,y是應(yīng)變量,a、b分別為直線在縱軸上的截距與斜率。由直線回歸方程可計算與x值相應(yīng)的y值〔理論值。y理論值較y觀察值可靠,因為它是根據(jù)各對觀察值的總趨勢決定的,而y觀察值僅根據(jù)一對實驗值決定的,故y理論值的意義更大。直線回歸方程的求法如下：用Casiofx-180p計算器操作：INVKACMode2輸入x按XDYD,輸入y按DATA〔成對數(shù)據(jù)輸入INVA<a>INVB<b>INVr<r>三、定性資料的統(tǒng)計分析定性資料又稱計數(shù)資料,是觀察質(zhì)反應(yīng)所得的資料。即將每一個觀察對象歸入定性的兩個〔陰性、陽性；有效、無效；死亡、存活……或多個〔痊愈、顯效、有效、無效或輕度、中度、重度……檔次,清點各組例數(shù)所得的資料。描述定性數(shù)據(jù)的統(tǒng)計參數(shù)主要是出現(xiàn)率〔陽性率、有效率、例數(shù)、陽性率的95%可信限等。常用的統(tǒng)計方法有卡方〔2、G檢驗、直接概率法等。1、四格表2檢驗適用于單因素試驗,如兩樣本率的比較,是醫(yī)藥學中最常用的顯著性檢驗。四格表中每一格的理論個體數(shù)必須5,總例數(shù)40。a、b、c、d為實際例數(shù),N為總例數(shù),自由度df=〔21〔21=1如2>20.01<6.63>則P<0.01,差別有非常顯著意義。如2>20.05<3.84>則P<0.05,差別有顯著意義。如2<20.05<3.84>則P>0.05,差別無顯著意義。例題：A、B兩藥的治療情況如下,問兩藥的療效有無差別？藥物治愈未愈合計A藥組30<a>10<b>40<a+b>B藥組11<c>49<d>60<c+d>合計41<a+c>59<b+d>100<N>無效假設(shè)H0：A、B兩藥的療效相同。確定P值：因為2=31.859>20.01<6.63>,故P<0.01。判斷結(jié)果：A、B兩藥的療效差別有非常顯著差異。2、直接概率法直接概率法適合小樣本的計數(shù)資料〔如兩樣本個體數(shù)之和少于40,且有0的數(shù)據(jù)。該方法比2檢驗靈敏、方便、且不用查表,直接計算P值。3、G檢驗G檢驗是近代較廣泛應(yīng)用的定性顯著性檢驗,靈敏度與2相當,其優(yōu)點是不受組別及分類多少限制,用同一公式解G值,用金正均教授研制的計算器MP〔手動程序操作法,加之口訣,計算就快捷多了。計算方法：在原始值外以及總和外畫一框框,凡框內(nèi)值均乘以自然對數(shù)再M+,框外之值則乘以自然對數(shù)再M。凡遇1,不必打入,因為1的自然對數(shù)為0。凡遇0,跳過不打,但在最后結(jié)果1,有2個0,則2?？騼?nèi)外有相同數(shù)可相互約去,節(jié)約時間。遇同樣數(shù)不必打全,只要重復M+或M即可。其口訣是：框內(nèi)為正框外負,以自然對數(shù)M+,遇1不打,臨了結(jié)束取雙倍,遇0減1,一G在手勝百卡〔卡方。例題：18只小鼠隨機分為3組,每組6只,分別腹腔注射地西泮、苯妥因鈉和生理鹽水。10分鐘后再給小鼠注射戊四氮致驚厥,實驗結(jié)果如下,問給藥組和對照組的驚厥發(fā)生率有無顯著差異？組別動物反應(yīng)情況合計不驚厥〔只驚厥〔只對照組156地西泮組516苯妥因鈉組066合計61218無效假設(shè)H0：三組動物的驚厥數(shù)無顯著差別。計算G值：操作：ModeINVKAC,INVMIN,5lnM+,M+18lnM+,6lnINVM,INVM,INVM,12lnINVM,MRM+,MR<12.10>。遇一個0減1得G=11.10自由度計算：df=<R1><C1>=<31><21>=2確定P值：查2表,自由度為2的20.01=9.21,本答案G=11.10>9.21,故P<0.01。判斷結(jié)果：三組差別非常顯著。t值表自由度P0.05P0.01自由度P0.05P0.01112.7163.66182.102.8824.39.93192.092.8633.185.84202.092.8542.784.60212.082.8352.574.03222.072.8262.453.71232.072.8172.373.50242.062.8082.313.36252.062.7992.263.25262.062.78102.233.17272.052.77112.203.11282.052.76122.183.06292.042.76132.163.01302.042.75142.152.98402.022.70152.132.95602.002.66162.122.921201.982.92172.112.901.962.584、Casiofx-180P計算器的使用Casiofx-180P是一種可進行基本運算、常數(shù)運算、含有較多函數(shù)和統(tǒng)計功能的計算器,它有7個貯存器,可編38步程序,并有自動斷電和持續(xù)保存數(shù)據(jù)或程序的特性。隨著定量生物學、藥理學及生理學的發(fā)展,一般藥理實驗結(jié)果都要求進行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析,180P計算器是較為實用方便的計算工具,價格適中,為此我們將180P計算器上常用的鍵作一介紹。為使同學盡快掌握180P計算器的使用,現(xiàn)把180P計算器上的常用鍵按功能分成六大類。同學首先要弄清楚每一大類鍵的主要功能是什么,然后再對這一類中的各鍵稍加區(qū)別,就能較快掌握180P計算器的使用。下面就六大類功能鍵分別介紹：一、狀態(tài)功能鍵〔MODE狀態(tài)功能鍵的主要功能是計算器根據(jù)我們計算的要求進入或退出某種工作狀態(tài)。比如我們要進行統(tǒng)計分析計算,那么一定要計算器進入統(tǒng)計分析工作狀態(tài)；又如,我們要編一個程序,那么就一定要使計算器進入編程序的工作狀態(tài)。只有讓計算器進入我們計算的要求相適應(yīng)的狀態(tài),才能獲得正確答案。在進行任何計算前,一定要看一下計算器所處的狀態(tài)是否對。要讓計算器進入某種狀態(tài)是通過按MODE這個鍵。這個狀態(tài)功能鍵可分·、0、1、2、3、4、5、6、7、8、9這十一個數(shù)字鍵構(gòu)成十一種狀態(tài),具體十一種狀態(tài)如下：MODE·<RUN>：一般運算狀態(tài)MODE0<LRN>：編程序狀態(tài)MODE1<∫dx>：定積分計算狀態(tài)MODE2<LR>：線性回歸計算狀態(tài)MODE3<SD>：一般統(tǒng)計狀態(tài)MODE4<DEG>：度<直角＝90°>MODE5<RAD>：不同的角度單位狀態(tài)弧度<直角＝π/2>MODE6<GRA>：百分度<直角＝100>MODE7<FIX>：保留小數(shù)位數(shù)狀態(tài)。如保留3位小數(shù),按MODE,7,3即可。MODE8<SCI>：以科學表達法表示數(shù)值的狀態(tài),如0.00000123=1.23×10-6就是科學表達法。應(yīng)按MODE,8,3。MODE9<NORM>：主要是去除保留小數(shù)位數(shù),去除科學表達法等狀態(tài),恢復到正常狀態(tài)。二、轉(zhuǎn)換功能鍵〔第二功能鍵,INV180P計算器共有38個按鍵,功能達七、八十種以上,因此一個按鍵一般都有二種功能,為使計算器能區(qū)別執(zhí)行第一功能還是第二功能,因此在執(zhí)行第二功能<紅色所標的功能>都要先按一下轉(zhuǎn)換功能鍵INV。比如：求對數(shù)時,直接按一下第一行第五個鍵,便是求對數(shù)log,但如果要求反對數(shù)時,就要先按INV這個鍵,然后還是按第一行第五個鍵,便是求反對數(shù)10x。三、儲存、清除功能鍵這類鍵的主要功能是將一些需要保留的數(shù)字或信息儲存起來,需要用時,可反復叫出使用。如不需再保留,可用清除鍵清除它,以便接受新的保留的數(shù)字或信息。180P計算器有7個儲存器,可分為二種,一種稱K儲存器,共有6個,一種稱M儲存器,只有一個。K儲存器的使用：Kin<1-6><把信息存入K儲存器>Kout<1-6><把K儲存器的內(nèi)容叫出>KAC<K儲存器全清除>XK<顯示屏內(nèi)容與K儲存內(nèi)容互換>M儲存器的使用：Min<把信息存入M儲存器>MR<把M儲存器的內(nèi)容叫出>M+<在M儲存器內(nèi)部進行加法>M―<在M儲存器內(nèi)部進行減法>現(xiàn)將這二種儲存器的用法和區(qū)別列表如下：K儲存器M儲存器存入X,Kin<1-6>如：9kin3X,INVMin如：6INVMin叫出Kout<1-6>如：kout3<顯示9>MR如：MR<顯示6>儲存器內(nèi)運算可進行四則運算：X,kin+、、×、÷<1-6>只能進行加減M+,INVM―對顯示屏影響當在K儲存器內(nèi)四則運算時,顯示屏上數(shù)據(jù)不變當進行加減時,顯示屏數(shù)據(jù)變化與顯示屏交換可以,X,INVXK<1-6>不可清除INVKAC0INVMin統(tǒng)計工作狀態(tài)時K1,K2,K3不能作他用能使用直線回歸狀態(tài)時K1～K6都不能作他用能使用注：X為顯示屏上的數(shù)字。<1-6>為K儲存器編號。除了清除儲存器的清除功能鍵外,還有二個清除鍵C和AC。C：清除剛輸入的那個錯誤數(shù)據(jù),故可作為輸錯數(shù)據(jù)時修改之用。AC：除了對K、M儲存器的內(nèi)容和程序內(nèi)容不能清除外,其余它都能清除。四、計算功能鍵這類鍵雖多,但其含意都較清楚,可分為二類簡介：1、基本計算功能鍵：＋、－、×、÷、1/x〔倒數(shù)、ab/c〔分數(shù)如1/4、%〔百分數(shù)、X!〔階乘、X2、ˉ、Xy<求任何次方如55>、X1/y<求任何次方根如864>、π<圓周率>。2、函數(shù)及換算功能鍵：log<普通對數(shù)>、10x<反普通對數(shù)>、ln<自然對數(shù)>、ex<反自然對數(shù)>、sin、cos、tan<三角函數(shù)>、sin-1、cos-1、tan-1<反三角函數(shù)>、←<度分秒與度的互換>、R→P、P→R<直角坐標與極坐標的互換>。除上述的各種計算外,180P計算器還有常數(shù)的計算功能,比如：我們要按體重計算動物的藥量<單位劑量×動物體重>,其中的單位劑量是不變的,是一個常數(shù),體重是變量,就可利用計算器的常數(shù)計算功能方便地算得。操作順序如下：先輸入常數(shù),然后連續(xù)按二次運算符號鍵<＋、－、×、÷>,以后只要輸入變量,再按等號即可。[例]：計算20只小白鼠給藥量,單位劑量：0.0026ml/g鼠重：10.5g,13.7g,18.6g,……15.5g操作：0.0026××10.5=<顯示0.0273>13.7=<顯示0.03562>18.6=<顯示0.04836>15.5=<顯示0.0403>*如果是÷,則運算結(jié)果必須再倒數(shù)一下,才為正確結(jié)果。五、統(tǒng)計及線性回歸功能鍵這類鍵有：DATA<統(tǒng)計數(shù)據(jù)、線性回歸中Y值輸入>XDYD〔線性回歸中X值輸入DEL<Delete><修改輸錯的統(tǒng)計及線性回歸數(shù)據(jù)>Σx2,Σx,n,Σy2,Σy,Σxy<中間值,可通過Kout1－6叫出>x,y<均數(shù)>,Xσn,Yσn<總體標準差>Xσn-1,Yσn-1<樣本標準差>A<截距>B<斜率>r<相關(guān)系數(shù)>y<期望值,已知x,求y,在線性回歸中用>x<期望值,已知y,求x,在線性回歸中用>RAN＃<隨機數(shù)發(fā)生器>以上鍵主要用于統(tǒng)計和線性回歸的計算,因此,要在MODE2和MODE3的狀態(tài)下使用,現(xiàn)舉例說明這些鍵的使用。[例]10只正常大鼠肝中維生素A含量〔單位分別為：3950,3800,3450,3350,3700,3900,3800,3050,2000,2650求其均數(shù)和標準差。用Casiofx-180p計算器操作：MODE3,INVKAC3950DATA,3800DATA,3450DATA,3350DATA,3700DATA,3900DATA,3800DATA,3050DATA,2000DATA,2650DATAINVx〔均數(shù),顯示3365INVXn-1〔標準差,顯示632.4774919[例]年齡<x>1634.5812體重<y>102014172432求其線性方程,并算出5歲兒童的體重。用Casiofx-180p計算器操作：MODE2,INVKAC1XDYD10DATA,6XDYD20DATA,3XDYD14DATA,成對輸入數(shù)據(jù),然后求A、B、r及線性方程y=A+Bx。INVA〔截距,顯示8INVB〔斜率,顯示2INVr〔相關(guān)系數(shù),顯示1方程為y=8+2x求5歲兒童體重：5y〔期望值,顯示18六、編、用程序功能鍵：這類鍵的主要功能是編制程序和使用程序,與編用程序有關(guān)的鍵有：P1,P2<程序編號,并能啟動程序>PCL<清除以前編入的程序>HLT<暫停標志,有中斷程序的作用,可供看中間結(jié)果>ENT<變量輸入標志,有停止程序的作用>RUN<啟動停下來的程序>X>0,X≤M,RTN<有條件及無條件轉(zhuǎn)移指令>180P計算器編用程序的一般過程是：①編程序時,首先要進入編程序狀態(tài)〔MODE0②指定編在哪一個程序中<P1或INVP2>③根據(jù)公式編程序,凡需輸入變量的地方,一般要使用ENT鍵,其后一般要跟一假設(shè)數(shù)?！渤阒馊魏螖?shù)④程序編完要立即退出編程序狀態(tài),而進入使用程序狀態(tài),一般可用MODE·。⑤記錄使用方法,以防忘卻。[例]編一個X+3＝？的加法程序,并用程序求X＝4的答案。用Casiofx-180p計算器操作：INVKACINVMinMODE0INVPCLP1ENT①+3=MODE·注：①為假設(shè)數(shù)。使用程序：P14RUN<顯示7>利用180P計算器可編程序的功能,可把常用統(tǒng)計公式編成程序,提高計算的正確性和速度。注意事項：1、計算器所處的狀態(tài)要與計算要求一致。2、在做第二功能時不要忘按INV鍵。3、在＋,－,×,÷,XY,X1/Y六鍵鍵后要用等號,不然無答案。其他計算不用等號。4、計算操作時,一般是先數(shù)值鍵后功能鍵,如:－5的按鍵順序5,＋/－。5、＋/－與＋、－不要混淆,前者是符號鍵,而后者是加、減鍵。6、一般在進行新的計算前,都要按INVKAC,INVMin,在編入新程序前都要按INVPCL,以防出錯。7、在使用儲存器時Kin<1-6>,Min與Kin＋、－、×、÷<1-6>,M＋M－結(jié)果不同,前者把原來儲存的數(shù)據(jù)沖掉,而后者是在原來儲存的數(shù)據(jù)上進行運算。8、在統(tǒng)計和線性回歸時,不能把數(shù)據(jù)再存入K儲存器,不然會把統(tǒng)計和線性回歸中間值沖掉。9、180P計算器有優(yōu)先順序。如：可自動進行先乘除后加減等。10、當計算器顯示屏上出現(xiàn)"E",表示溢出或出錯,一般由兩種原因造成：<1>計算中超過本機范圍或能力,如：>69！>38步程序等<括號對數(shù)>6對時出現(xiàn)"E">；<2>數(shù)學出錯：如5÷0等。附：Casiofx-3800P與Casiofx-180P計算器的異同Casiofx-3800P與Casiofx-180P計算器均屬Casio系列,故基本上是兼容的。兩者主要不同之處如下：1、在3800P,M＋和統(tǒng)計的輸入DATA鍵是合用的,而不是與RUN鍵合用了,因此在統(tǒng)計工作狀態(tài)下,即MODE3,面板上顯示SD時,不能同時應(yīng)用M＋以及INV,M－,而180P可直接應(yīng)用,但INVMin,MR可用。故3800P在SD狀態(tài)下,同時需用M＋時,則要大作修改：＋,MR,＝,SHF,Min或MODE,0<可消除SD或LR狀態(tài)>。M＋,MODE,3,均為一步改成五步。2、其他不同：項目180P3800P1．第二功能鍵INVSHF<SHIFT簡寫>2．進入編程MODE,0MODE,EXP3．結(jié)束統(tǒng)計<SD,LR>MODE,·MODE,04．程序總步數(shù)381355．程序標號2<P1,P2>4<I,II,SHFI,SHFII>6．MODE,3程序不能包括統(tǒng)計程序可包括統(tǒng)計7．運算速度慢快3、180P為第二功能的鍵,在3800P上為第一功能的鍵有：X2,ˉ,1/x,10X,對于這些鍵,3800P可不必打SHF,若誤打了SHF鍵,則再打一次,即可消除。相反180P為第一功能的ln鍵<自然對數(shù)>,在3800P為第二功能,故需先打SHF,然后再打ln鍵,即可得結(jié)果。也可利用第一功能的log鍵<普通對數(shù)>,結(jié)果×2.303即轉(zhuǎn)為自然對數(shù)值了。4、3800P有135步程序容量,更易得到精確P值,操作比180P簡便。用計算器編程功能,求精確P值,可省去查表之苦,且可對不同類型資料<定性、定量、半定量數(shù)據(jù)>在共同P值基礎(chǔ)上,加以比較或合并。從傳統(tǒng)的粗糙的P>0.05或P<0.05,走向確切P值,將大大節(jié)約人力、動物和時間,并與國際要求接軌。5、PowerLab系統(tǒng)基本操作指南PowerLab系統(tǒng)是國際流行的應(yīng)用于生命科學研究的數(shù)據(jù)采集和分析系統(tǒng)。在擴展性和升級性甚佳的軟件如Chart,Scope支持下,若選用合適的傳感器和前置放大器,即可采集、記錄和分析所需要的生物信號；若與一臺電腦相連,則幾乎可完全替代多通道實時生物信號記錄儀、多導生理記錄儀、X-Y繪圖儀、數(shù)字電壓計、記憶示波器以及色譜工作站的全部功能。全套系統(tǒng)提供了強大的顯示、記錄和分析數(shù)據(jù)的功能,可進行機體血液動力學、心電、腦電、藥物量效關(guān)系、細胞內(nèi)外電生理記錄和色譜分析等方面的研究,是強大的藥理學研究工具。該系統(tǒng)有如下特點：1、記錄功能強大：高速、高精度采樣,長時程記錄,多通道顯示。2、分析和處理功能強大：兼有實時分析和記錄后分析。3、后處理方便：與通用辦公軟件融洽連接,方便提供數(shù)據(jù)、圖表報告。PowerLab是一個程控儀器,需要在軟件的支持下發(fā)揮強大作用。我們藥法。一、一般步驟1、首先,確定PowerLab是否與計算機正確連接,是否打開電源。2、雙擊桌面上的"Chart4.0"圖標,啟動PowerLab,出現(xiàn)Chart應(yīng)用窗口和文件窗口〔figure1、23、點擊Chart文件窗口右下角的"Start"按鈕,就可以開始采樣了〔此時右下方按鈕變?yōu)?Stop"。4、改變采樣速率,可以使用速率改變下拉菜單：〔如fig2所示按下Chart文件窗口右上方帶向下箭頭的按鈕。采樣速率顯示在這個按鈕的下方,點擊鼠標右鍵關(guān)閉通道控制區(qū)域,否則指針所在位置顯示時間。5、如果信號范圍太大或太小,可以使用增幅范圍下拉菜單改變通道的靈敏度〔如fig2所示。按下通道名稱左邊的有向下箭頭的按鈕。6、點擊Chart窗口右下方的"Stop"按鈕停止采樣,從文件菜單選擇"save"文件,從文件菜單選擇退出,退出Chart。二、常用參數(shù)的設(shè)置1、工具欄Chart中的工具欄以一排按鈕的方式為一些常用功能提供了快捷方式。如果光標處于按鈕上方,會有對按鈕功能的說明；Chart窗口底部的狀態(tài)欄會提供更多的有關(guān)信息。2、通道設(shè)置〔channel通道設(shè)置對話框讓你方便地設(shè)置對個通道：你可以在一個地方觀看和修正每個通道的顯示和記錄。從Setup菜單選擇"Channelsettings…"選項或按Ctrl+Y可產(chǎn)生對話框。3、采樣速率設(shè)置可以使用速率下拉菜單直接選擇采樣速率。若光標不在數(shù)據(jù)顯示區(qū),采樣速率將顯示在Chart窗口右上部的速度時間顯示上。4、通道控制通過兩個下拉式菜單：完成通道的范圍和功能的設(shè)置,每個通道都可以獨立運作。5、零點設(shè)置〔zero點擊"BrindgeAmplifier"按鈕,出現(xiàn)對話框。點擊活動窗口數(shù)軸旁的▼按鈕,在彈出的子菜單內(nèi)：①選擇"Bipolar",②"Lowpass"選擇"100Hz",③單擊"Zero"使信號記錄從零點出發(fā),④最后點擊"OK"。6、單位轉(zhuǎn)換〔Unitsconversion點擊"Units",出現(xiàn)一對話框。點擊此對話框內(nèi)"Unitsconversion"項的"ON"；點擊Units小窗旁▼按鈕選擇下拉式菜單中的單位。7、記錄Chart從視覺上看類似機械紙式的記錄儀：記錄數(shù)據(jù)就象機械設(shè)備中的一卷紙,從窗口的右側(cè)滾動地通過數(shù)據(jù)顯示區(qū),新的數(shù)據(jù)被寫在右側(cè),舊的數(shù)據(jù)移到左側(cè)。單擊Chart窗口右下部的開始"Start"按鈕將開始采樣〔并記錄。在Chart窗口右下部,"Start"按鈕的左邊有一個"Record/Monitor"按鈕,點擊它你可以快速記錄數(shù)據(jù)/僅僅顯示數(shù)據(jù)。8、注釋〔Comment在記錄的任意的一個點都可以加上注釋,這樣可以標示為特定的時間、通道或選取的數(shù)據(jù)。使用Chart窗口,題目欄下方的注解欄可以在記錄時填加注釋。點擊主題框內(nèi)部并鍵入你想加上的注釋內(nèi)容,然后點擊主題框右邊的"Add"按鈕就可以加上新的注釋。如果光標仍在主題框內(nèi),你可以按回車鍵加以注釋。從注釋菜單中選取加入注釋"AddComment"命令或鍵入Ctrl+K,可以在記錄后給已存在的數(shù)據(jù)加上注釋。那時出現(xiàn)一個對話框,你可以在那里鍵入新的注釋。加了注釋后,你可以把鼠標置于注釋框上,點擊鼠標鍵,這樣就可以看你所加的注釋。9、打開文件如果Chart已經(jīng)打開,其它的文件可以在Chart中打開,從文件菜單中選擇"open.."命令或鍵入Ctrl+O就可以直接打開對話框?？梢栽谀愕挠嬎銠C的文件中找到你想要的文件,并打開。10、保存文件選擇文件菜單中的"Save"命令或鍵入Ctrl+S可以保存數(shù)據(jù)記錄文件。當你選擇了文件菜單中的"Saveas..."命令,就會出現(xiàn)另存為的對話框,通過計算機的文件夾系統(tǒng)選擇你文件將要保存的地點。11、振幅的軸調(diào)節(jié)如果實驗描記曲線超出記錄窗口,可移動窗口旁數(shù)軸。使描記曲線完整地出現(xiàn)在記錄窗口內(nèi)〔或點擊數(shù)軸左下方按鈕以調(diào)節(jié)數(shù)軸刻度。6、怎樣寫藥理實驗報告藥理學實驗是模擬的科學研究,從實驗設(shè)計、實驗操作、實驗觀察記錄、資料的整理、統(tǒng)計分析到實驗報告撰寫,不僅讓學生體驗科學研究的基本程序,掌握藥理實驗的基本技術(shù),而且還可培養(yǎng)學生觀察分析客觀事物、獨立思考和解決實際問題的能力。實驗報告的撰寫是每項實驗完成后必須進行的工作,通過實驗中觀察到的現(xiàn)象、對原始資料的整理和分析,可揭示某些事物的規(guī)律性或是新的發(fā)現(xiàn)、明確已取得的成績和尚未解決的問題、總結(jié)成功或失敗的原因,為以后繼續(xù)研究、查閱資料或他人提供經(jīng)驗。實驗報告要求結(jié)構(gòu)完整、條理分明、文字簡練、用詞規(guī)范,措詞應(yīng)注意科學性和邏輯性。一般應(yīng)包括實驗題目、目的、方法、結(jié)果、討論和結(jié)論六個部分。實驗題目能高度概括整個實驗工作,應(yīng)具體、簡潔、明確,一般不超過20個字。實驗?zāi)康闹饕f明為什么做該實驗。方法是實驗報告的基礎(chǔ),雖然在實驗指導上已寫明了實驗方法,但對實驗條件〔動物種類、品系、體重、藥物來源〔批號、劑型、劑量、給藥途徑、實驗環(huán)境〔時間、溫度、濕度、儀器性能、實驗進程及觀察指標等仍應(yīng)簡單加以表述。特別是實驗步驟及方法應(yīng)詳細紀錄,方法還需說明所用的統(tǒng)計學方法,以便對今后的工作提供基礎(chǔ)。最好通過預(yù)初實驗后擬出實驗記錄格式,詳細記錄要觀察的項目,以保證實驗有條理、按次序進行,不至于遺漏重要觀察項目。實驗結(jié)果是實驗報告的關(guān)鍵,是導出推理、引起討論及得出結(jié)論的依據(jù)。結(jié)果內(nèi)容應(yīng)包括可靠的觀察和分析的結(jié)果。原始數(shù)據(jù)資料、圖象記錄和現(xiàn)象描述均應(yīng)真實而準確,經(jīng)必要的統(tǒng)計處理后可以用文字、列表和繪圖加以表述。實驗報告上一般只寫經(jīng)歸納整理的東西,但原始記錄應(yīng)于保存?zhèn)洳?。原始?shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計處理后才能揭示出隱藏在其中的必然規(guī)律。討論是實驗報告的精華,應(yīng)針對實驗中觀察到的現(xiàn)象和結(jié)果,運用已知的理論知識進行分析討論,以驗證藥理學基本理論或闡明自己的"發(fā)現(xiàn)",討論時應(yīng)密切聯(lián)系實驗?zāi)康暮蛯嶒灲Y(jié)果,導出恰如其分的設(shè)想和建議,避免離開實驗結(jié)果空談理論或推想太遠,要判斷實驗結(jié)果是否與預(yù)期目的相一致,如果是非預(yù)期的或?qū)嶒炇?應(yīng)著重分析其原因,做出可能的推測。結(jié)論是從實驗結(jié)果中歸納出來的概括性判斷,也就是對本實驗所能說明的問題、驗證的概念或理論的總結(jié),應(yīng)簡明扼要、符合實際。[思考題]1、寫實驗報告的意義何在？2、藥理實驗報告應(yīng)包括哪幾部分內(nèi)容？每一部分應(yīng)注意什么？實驗報告示例室溫：18°C[題目]對乙酰氨基酚的鎮(zhèn)痛作用[目的]觀察不同劑量對乙酰氨基酚的鎮(zhèn)痛作用,了解測定鎮(zhèn)痛療效的光輻射熱甩尾法。[動物與材料]動物：小白鼠3只,20g左右,雌雄均可藥品：7.5%、15%對乙酰氨基酚,生理鹽水器材：天平、1ml注射器、5號針頭、秒表、鼠瓶、光輻射熱測痛儀[方法與步驟]1、測小白鼠正常痛閾：將小鼠置入鼠瓶內(nèi),拉出尾巴,放入光輻射熱測痛儀溝槽中,光照鼠尾下1/3處,用秒表計時,從光照開始到甩尾時間作為痛閾值。每只小鼠測痛閾2次〔間隔5分鐘,取其均值作為正常痛閾值。2、篩選痛閾值在24秒的小鼠3只,稱重并做標記,以灌胃法給藥,分別灌注7.5%、15%對乙酰氨基酚0.2ml/10g〔分別相當于150、300mg/kg,對照小鼠灌注等容量生理鹽水。3、在小鼠灌胃給藥后第1、2、3、5、6小時各測一次痛閾值,每個時間點均測2次,取其均值。4、計算痛閾提高百分率〔%痛閾提高百分率〔%=[結(jié)果與統(tǒng)計]本組3個動物給藥后的痛閾變化值見表1。 表1給藥后小鼠的痛閾變化〔秒鼠號藥物劑量<mg/kg>藥前藥后1h2h3h5h6h17.5%對乙酰氨基酚1502.83.03.54.23.83.5215%對乙酰氨基酚3002.73.74.95.45.04.93生理鹽水等容量2.72.92.82.72.82.62、全班實驗結(jié)果,見表2、表3。表2對乙酰氨基酚對小鼠痛閾的影響〔秒,x±s,n=12組別藥前藥后1h2h3h5h6h對照組2.8±0.42.8±0.32.8±0.53.0±0.52.7±0.32.5±0.37.5%對乙酰氨基酚2.7±0.43.8±1.24.1±0.8*4.1±0.7*4.0±0.93.4±0.315%對乙酰氨基酚2.8±0.54.0±0.45.1±1.6*5.1±2.6*5.0±1.4*與對照組比*P<0.05**P<0.01表3給藥后痛閾提高百分率〔%組別藥后1h2h3h5h6h對照組1.81.07.6-2.9-11.27.5%對乙酰氨基酚45.149.147.644.723.615%對乙酰氨基酚42.883.484.996.079.1[討論]本組實驗順利,實驗結(jié)果和全班結(jié)果一致,各組動物給藥前的痛閾無顯著差別〔P>0.05,灌注對乙酰氨基酚后1小時小鼠痛閾均有提高,于23小時達最大效應(yīng),并顯著高于生理鹽水對照組〔P<0.05,痛閾提高幅度和持續(xù)時間呈劑量依賴性。而灌注生理鹽水的小鼠痛閾無顯著變化,在灌注后56小時反而降低,表明實驗操作本身并沒有提高痛閾的作用。本實驗中用藥后小鼠痛閾的提高是藥物作用的結(jié)果,而對照組痛閾的降低,可能是由于反復光照,使皮膚損傷對痛感所致。[結(jié)論]對乙酰氨基酚對熱刺激所致的小鼠痛反應(yīng)有明顯抑制作用。鎮(zhèn)痛作用強度和持續(xù)時間隨著劑量增加而增強。7、處方一、處方的結(jié)構(gòu)處方是醫(yī)生為病人診治時所開寫的取藥憑單,也是調(diào)劑人員配藥、發(fā)藥的依據(jù)。處方包括下列幾項：1、病人的姓名、年齡、科別、處方日期、門診或住院號。2、處方箋上常印有?〔Rp.的符號,它是拉丁文Recipe的縮寫,意思是"請取"。3、藥名、劑型和份量：藥名和份量應(yīng)一起寫,每藥寫一行。劑量和份量寫在藥名的右側(cè)。藥物的用量,固體以克〔g為單位,液體〔或溶液以毫升〔ml為單位。一般情況,克〔g與毫升〔ml不必寫出,其它單位,如：毫克〔mg、微克〔g、國際單位〔i.u.則須注明。藥量小于1單位時,在小數(shù)點前必須加零〔如0.5,整數(shù)后加小數(shù)點和零如3.0,以免出差錯。4、調(diào)配方法和用法：必要時必須寫清調(diào)配方法。用法包括每次劑量、每日用藥次數(shù)、給藥途徑與給藥時間〔一般可用拉丁文簡寫字或用中文。5、處方醫(yī)生簽名。二、處方示例??????三、處方的注意事項1、處方必須認真、嚴肅。字跡要清楚,不得任意涂改。不得用鉛筆書寫。2、藥品名稱一律使用經(jīng)正式注冊的藥名或國際非專用藥品名稱〔INN,不可使用含義不清未經(jīng)公認的藥名縮寫,以免造成誤解或藥名混淆。3、用藥方法的文字說明應(yīng)準確明了。藥量不應(yīng)超過中國藥典的極量。因特殊需要超過的,應(yīng)加簽醫(yī)生姓名,或用"！"號示意。4、急診處方,須立即取藥的,應(yīng)在處方上寫"急"字。5、處方開好,核對無誤后,才可交與病人。6、開寫英文處方時,制劑名放于藥名后,而拉丁文處方時,制劑名置于藥名前,藥名一般用第二格。處方中常見拉丁文簡縮字表分類拉丁縮寫中文意義分類拉丁縮寫中文意義藥物制劑Amp.Caps.Emul.Extr.Inj.Lot.Loz.Mist.<Mixt>Ocul.Ol.Past.Sol.Syr.Tab.Tr.Ung.安瓿劑膠囊劑乳劑浸膏注射劑洗劑喉片合劑眼膏劑油劑糊劑溶液劑糖漿劑片劑酊劑軟膏劑給藥次數(shù)和給藥時間a.c.a.m.b.i.d.h.s.p.c.p.m.q.d.q.o.d.q.i.d.q.4.h.q.6.h.q.8.h.q.m.q.n.sosst<stat.>t.i.d.飯前上午每日二次睡前飯后下午每日一次隔日一次每日四次每四小時一次每六小時一次每八小時一次每晨每晚必要時用立即每日三次劑量單位gttg.或gmi.u.gmgml滴克國際單位微克毫克毫升其它a.a.,aaa.d.Aq.dest.CO.et.No.?或RpS或SigQ.S各加至蒸餾水復方的及數(shù)量請取注明用法適量給藥途徑i.m.i.v.p.o.p.r.S.c.或H肌內(nèi)注射靜脈注射口服直腸給藥皮下注射8、藥酶誘導劑及抑制劑對戊巴比妥鈉催眠作用的影響[目的]以戊巴比妥鈉催眠時間作為肝藥酶體內(nèi)活性指標,觀察苯巴比妥及氯霉素對戊巴比妥鈉催眠作用的影響,從而了解它們對肝藥酶的誘導及抑制作用。[原理]苯巴比妥為肝藥酶誘導劑,可誘導肝藥酶活性,使戊巴比妥鈉在肝微粒體的氧化代謝加速,藥物濃度降低,表現(xiàn)為戊巴比妥鈉藥理作用減弱,即催眠潛伏期延長,睡眠持續(xù)時間縮短。而氯霉素則為肝藥酶抑制劑,能抑制肝藥酶活性,導致戊巴比妥鈉藥理作用增強,即催眠潛伏期縮短,睡眠持續(xù)時間延長。[動物]小白鼠8只,18~22g[藥品]生理鹽水、0.75%苯巴比妥鈉溶液、0.5%氯霉素溶液、0.5%戊巴比妥鈉溶液[器材]天平、鼠籠、秒表、注射器1ml×4、5號針頭×4[方法與步驟]一、藥酶誘導劑對藥物作用的影響1、取小鼠4只,隨機分為甲、乙兩組。甲組小鼠腹腔注射0.75%苯巴比妥鈉溶液0.1ml/10g,乙組小鼠腹腔注射生理鹽水0.1ml/10g,每天1次,共2天。2、于第三天,給各小鼠腹腔注射0.5%戊巴比妥鈉溶液0.1ml/10g,觀察給藥后小鼠的反應(yīng)。記錄給藥時間、翻正反射消失和恢復的時間,計算戊巴比妥鈉催眠潛伏期及睡眠持續(xù)時間。二、藥酶抑制劑對藥物作用的影響1、取小鼠4只,隨機分為甲、乙兩組。甲組小鼠腹腔注射0.5%氯霉素溶液0.1ml/10g；乙組小鼠腹腔注射生理鹽水0.1ml/10g。2、30分鐘后,給各小鼠腹腔注射0.5%戊巴比妥鈉溶液0.1ml/10g,觀察給藥后小鼠的反應(yīng)。記錄給藥時間、翻正反射消失和恢復的時間,計算戊巴比妥鈉催眠潛伏期及睡眠持續(xù)時間。[統(tǒng)計與處理]以全班結(jié)果〔睡眠持續(xù)時間,分作分組t檢驗,檢驗用藥組與對照組有無顯著性差異?！矃⒁?數(shù)理統(tǒng)計在藥理學實驗中的應(yīng)用"[注意事項]1、催眠潛伏期為開始給藥到動物翻正反射消失的間隔時間,睡眠持續(xù)時間為翻正反射消失至恢復的間隔時間。2、本實驗過程中,室溫不宜低于20C,否則戊巴比妥鈉代謝減慢,使動物不易蘇醒。3、氯霉素溶液有結(jié)晶析出時可在水浴中加熱溶解。4、吸取氯霉素溶液的注射器應(yīng)預(yù)先干燥,否則易結(jié)晶堵塞針頭。[思考題]1、何謂肝藥酶誘導劑與抑制劑？2、試從理論上解釋苯巴比妥及氯霉素對戊巴比妥鈉睡眠時間的影響。9、苯巴比妥鈉對小鼠肝臟細胞色素P-450含量的影響[目的]學習小鼠肝細胞色素P-450含量的簡易測定方法,并了解苯巴比妥對其含量的影響。[原理]肝藥酶誘導劑苯巴比妥能誘導肝臟細胞色素P-450的合成,小鼠腹腔注射苯巴比妥每天一次,兩天后,P-450含量即明顯增加。P-450為血紅素蛋白,其還原型與一氧化碳結(jié)合后在450nm波長處出現(xiàn)強吸收,據(jù)此可應(yīng)用示差光譜法<differencespectrophotometry>對其含量加以測定。通常在樣品通入一氧化碳后加還原劑連二亞硫酸鈉〔保險粉,Na2S2O4,然后測定樣品在450nm和490nm波長處吸收度,求其差值,代入公式即可計算得到P-450含量。[動物]小白鼠4只,18~22g[藥品]生理鹽水、0.75%苯巴比妥鈉溶液[試劑]〔1一氧化碳〔2連二亞硫酸鈉〔30.1NHCl：取濃鹽酸8.3ml,加蒸餾水至1000ml?！?0.2MTris：取三羥甲基氨基甲烷24.23g,加蒸餾水至1000ml?！?Tris-HCl緩沖液〔0.05M,pH7.36：取0.2MTris250ml,0.1NHCl425ml混合,加蒸餾水至1000ml?！?0.25M蔗糖溶液：稱取蔗糖85.57g,用0.05MTris-HC緩沖液溶解并稀釋至1000ml?！?含KCl、MgCl2的Tris-HCl緩沖液：稱取KCl11.18g、MgCl22.033g,用Tris-HCl緩沖液溶解并稀釋至1000ml。[器材]天平、玻璃勻漿器〔20ml、試管〔20ml、移液管〔1ml,5ml,10ml、分光光度計、小漏斗、冰浴、紗布[方法與步驟]1、取小鼠4只,隨機分為甲、乙兩組。甲組為誘導組,腹腔注射0.75%苯巴比妥鈉溶液0.1ml/10g,每天1次,共2天；乙組為對照組,腹腔注射等容量的生理鹽水。2、于第三天,將小鼠斷頭放血,迅速剖腹取出整個肝臟,去除膽囊,用濾紙拈去血液、稱重、置玻璃勻漿器中,加5倍量已在冰浴中冷卻的0.25M蔗糖溶液,在冰浴下研磨制備肝勻漿,雙層紗布過濾后,吸取1ml濾液移入另一試管內(nèi),加入經(jīng)冰浴冷卻的含KCl、MgCl2的0.05MTris-HCl緩沖液9ml,使勻漿濃度為0.02g肝臟/ml,向稀釋后的肝勻漿通以一氧化碳,每分鐘100個左右氣泡,共2分鐘。3、通一氧化碳后,將勻漿等量轉(zhuǎn)入兩個比色杯中,其中一個作為參照杯,另一個作為樣品杯。向樣品杯中加入連二亞硫酸鈉固體5mg,充分混勻,用分光光度計以參照杯作為空白調(diào)零,測定樣品杯吸收度,取波長450nm和490nm處的吸收度〔A450、A490,計算P-450含量,計算公式如下：E：P-450從490nm到450nm波長的示差光譜消光系數(shù),本實驗中E=104cm-1mmol-1L：比色杯厚度本公式中乘以50000系由于E的單位以mmol-1表示,化成nmol-1時需乘以1000,又因?qū)嶒炛懈闻K稀釋50倍,故100050=50000[統(tǒng)計與處理]以全班結(jié)果〔P-450含量,nmol/g肝臟作分組t檢驗,檢驗藥物誘導組與對照組有無顯著性差異?！矃⒁?數(shù)理統(tǒng)計在藥理學實驗中的應(yīng)用"[注意事項]1、本實驗的全部操作應(yīng)嚴格在低溫〔0C~4C下進行,所用緩沖液應(yīng)預(yù)先置冰浴中冷卻,特別是肝勻漿制備時應(yīng)將勻漿器置冰浴中進行。此外,整個操作應(yīng)力求迅速,以避免肝藥酶分解。2、本實驗中細胞色素P-450含量低,A490往往低于零,此時可將樣品杯改為空格調(diào)零,測定參照杯的吸收度,其吸收度取負值,即為樣品杯在490nm處的吸收度。3、如無純一氧化碳供應(yīng),也可用普通煤氣代替。[思考題]1、試述細胞色素P-450在藥物代謝中的意義。2、從實驗結(jié)果分析苯巴比妥的藥酶誘導作用。10、堿化尿液對水楊酸鈉經(jīng)腎排泄的影響[目的]比較尿液pH不同時對水楊酸鈉排泄的影響。[原理]藥物排泄與尿液的pH值有密切的關(guān)系,弱酸性藥物在酸性尿中非解離型多,易于再吸收,排泄較慢,在堿性尿中則再吸收少,排泄較快,弱堿性藥物則正好相反。因此,通過改變尿液的pH來改變藥物的排泄率,可用于藥物解毒,或用于增強藥物療效。水楊酸鈉為酚類化合物,能與Fe3+生成紫色絡(luò)合物,可在一定條件下比色測定。[動物]雄性家兔2只[藥品]3%戊巴比妥鈉溶液、10%水楊酸鈉溶液、10%FeCl3溶液、4%NaHCO3溶液、2mol/LHCl溶液、0.9%NaCl溶液[器材]兔板、注射器〔50ml1、5ml1、1ml3、試管〔10ml6、量杯〔100ml1、量筒〔10ml1、導尿管、液體石蠟、膠布、記號筆、比色杯〔0.5ml３、酒精棉球、pH試紙、分光光度計[方法與步驟]1、取雄性家兔2只,稱重,耳靜脈注射3%戊巴比妥鈉1ml/kg,麻醉后背位固定于兔板上,將導尿管尖端用液體石蠟潤滑后從尿道慢慢插入膀胱約8cm左右,見有尿液滴出即可。用膠布將導尿管固定,導尿管另一端接量筒。2、用pH試紙測定兩兔尿液pH。給尿pH值較高的兔耳靜脈注射4%NaHCO310ml/kg,10分鐘后再測其pH,使pH值≥8,若pH＜8,再按上述劑量耳靜脈注射4%NaHCO3。pH值較低兔耳靜脈注射0.9%NaCl1