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關(guān)于流式細(xì)胞術(shù)在白血病和淋巴瘤中的應(yīng)用第一頁,共五十頁,2022年,8月28日免疫分型的作用區(qū)分淋系、髓系白血病區(qū)分淋系白血病中的T、B-ALL鑒定混合細(xì)胞性白血病的類型:T-M、B-M、T-B、T-B-M于治療過程中監(jiān)測(cè)MRD,評(píng)價(jià)療效提示某些遺傳學(xué)異常:CD56+APL---t(11;17)?CD19+AML---t(8;21)(q22;q21)?提示預(yù)后:CD7、CD11b、CD56等陽性的AML患者預(yù)后不良CD15陽性的AML患者CR率高
第二頁,共五十頁,2022年,8月28日免疫分型的原理正常造血細(xì)胞白血病細(xì)胞
抗原表達(dá)遵循系列保守性出現(xiàn)抗原跨系表達(dá)
髓系:CD33+,T系:CD7+髓系:CD33+CD7+
抗原表達(dá)有一定的時(shí)序性出現(xiàn)抗原時(shí)序混亂表達(dá)
原始細(xì)胞:CD34+CD11B- 原始細(xì)胞:CD34+CD11B+
各階段細(xì)胞按一定的比例分布出現(xiàn)分化阻滯
原幼細(xì)胞<5%原幼細(xì)胞>20%第三頁,共五十頁,2022年,8月28日免疫分型需要掌握什么理論知識(shí)?正常造血細(xì)胞的抗原表達(dá)規(guī)律不同系列的細(xì)胞表達(dá)的抗原?同一系列不同階段的細(xì)胞表達(dá)的抗原?每種抗原的表達(dá)強(qiáng)度?第四頁,共五十頁,2022年,8月28日正常B系細(xì)胞分化圖
源于王建中等編著的《臨床流式細(xì)胞分析》第五頁,共五十頁,2022年,8月28日正常T系細(xì)胞分化圖源于王建中等編著的《臨床流式細(xì)胞分析》第六頁,共五十頁,2022年,8月28日正常粒細(xì)胞分化圖源于王建中等編著的《臨床流式細(xì)胞分析》第七頁,共五十頁,2022年,8月28日正常單核細(xì)胞分化圖源于王建中等編著的《臨床流式細(xì)胞分析》第八頁,共五十頁,2022年,8月28日免疫分型中的重要抗原CD45正常成人骨髓標(biāo)本成熟粒細(xì)胞:約占40-60%,表達(dá)CD11b、CD13、CD33、CD15、CD16、CD10、CD64,不表達(dá)CD34、HLA-DR、CD14、CD117有核紅細(xì)胞:<50%,表達(dá)GPA成熟單核細(xì)胞:約占2-8%,表達(dá)CD11b、CD64、CD14、HLA-DR,不表達(dá)CD34、CD117成熟淋巴細(xì)胞:約占20-40%T細(xì)胞:表達(dá)CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD7,不表達(dá)CD10、CD34、TDT等
B細(xì)胞:表達(dá)CD19、CD20、CD22,不表達(dá)CD10、CD34、TDT等NK細(xì)胞:CD3-(CD16+CD56)+正常幼稚B細(xì)胞:<5.0%,表達(dá)CD10、CD19、CD22、弱表達(dá)CD20,少量CD10stCD34+TDT+幼稚髓系細(xì)胞:〈5.0%第九頁,共五十頁,2022年,8月28日免疫分型常用的抗體AMLCD34、CD117、CD33、CD13、HLA-DR、CD11b、CD15、CD64、CD14、CD65s、MPO懷疑M6加做CD71、GPA懷疑M7加做CD61、CD41B-ALLCD34、CD10、CD19、CD20、CD22、c/mIg、TDT、cCD22/CD79aT-ALLCD34、CD10、CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD7、HLA-DR、CD1a、TDT、cCD3NK細(xì)胞CD16、CD56、CD57漿細(xì)胞CD38、CD138、cκ、cλ、CD19、CD56第十頁,共五十頁,2022年,8月28日免疫分型的步驟一第一步:初篩,初步篩選白血病類型CD7/CD19/CD33/CD10/CD117/HLA-DR/CD34/CD45CD7+CD19-CD33+/-HLA-DR-CD117+/-疑為T-ALLCD7+CD19-CD33+HLA-DR+CD117+疑為AML伴CD7+CD19+CD7-CD33-CD10+/-CD117-疑為B-ALLCD19+CD7-CD33+CD10+CD117-疑為B-ALL伴CD33+CD19+CD7-CD33+CD10-CD117+疑為AML伴CD19+CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR+疑為AMLCD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR-疑為APL第十一頁,共五十頁,2022年,8月28日免疫分型的步驟二第二步:確診,進(jìn)一步確定白血病類型,并且將某一系別的白血病根據(jù)分化程度的不同再分為不同亞型根據(jù)初篩結(jié)果加做其他系別特異性標(biāo)記T-ALL:CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD1a、TDT、cCD3B-ALL:CD20、CD22、c/mIg、TDT、cCD22/CD79aAML:CD13、CD11b、CD15、CD64、CD14、CD65s、MPO,懷疑M6加做CD71、GPA,懷疑M7加做CD61、CD41第十二頁,共五十頁,2022年,8月28日B-ALL免疫亞型亞型CD19CD34TdTCD10CyIgSmIgFAB分型earlyB-precursorALL+++(-)--L1、L2CommonB-ALL++++(-)-L1、L2PreB-ALL+-/+++(+)-L1B-ALL+----/+(+)L3第十三頁,共五十頁,2022年,8月28日T-ALL免疫亞型分型CD7CD2TdTCD3c/mCD1aFAB分型急性早期T前體細(xì)胞白血病earlyT-precursorALL+-+-/+-L1、L2胸腺皮質(zhì)T-ALL+++++L1、L2急性T細(xì)胞白血病T-ALL++-+-L1、L2第十四頁,共五十頁,2022年,8月28日示例:T-ALL
初篩CD7+CD19-CD33+/-HLA-DR-CD117+/-第十五頁,共五十頁,2022年,8月28日示例:AML伴CD7+
初篩CD7+CD19-CD33+HLA-DR+CD117+第十六頁,共五十頁,2022年,8月28日示例:B-ALL
初篩CD19+CD7-CD33-CD10+/-CD117-第十七頁,共五十頁,2022年,8月28日示例:BALL+CD33
初篩CD19+CD7-CD33+CD10+CD117-第十八頁,共五十頁,2022年,8月28日示例:AML+CD19
初篩CD19+CD7-CD33+CD10-CD117+第十九頁,共五十頁,2022年,8月28日示例:AML
初篩CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR+第二十頁,共五十頁,2022年,8月28日示例:AML-M3
初篩CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR-第二十一頁,共五十頁,2022年,8月28日示例:AML-M3V
初篩CD33+CD7-CD19-CD10-CD117+/-HLA-DR-第二十二頁,共五十頁,2022年,8月28日混合細(xì)胞性白血病的免疫分型雙表型:一種白血病細(xì)胞同時(shí)表達(dá)兩個(gè)或兩個(gè)以上系列標(biāo)志。雙克隆型:同時(shí)存在兩種或兩種以上異常細(xì)胞,分別表達(dá)各自的系列特異性標(biāo)志。類型:T-M、B-M、T-B、T-B-M第二十三頁,共五十頁,2022年,8月28日白血病中各種抗原的積分情況PointsB-lymphoidT-lymphoidMyeloid2CD79acCD22cIgMCD3TCRa/bTCRg/dMPO1CD19CD10CD20CD2CD5CD8CD10CD117CD65CD13CD330.5TdTCD24TdTCD7CD1aCD14CD15CD64混合細(xì)胞性白血病判斷標(biāo)準(zhǔn):每個(gè)系列積分>或=2.5分第二十四頁,共五十頁,2022年,8月28日示例:B-M型AL第二十五頁,共五十頁,2022年,8月28日示例:T-M型AL第二十六頁,共五十頁,2022年,8月28日示例:T-B-M型AL第二十七頁,共五十頁,2022年,8月28日免疫表型的預(yù)后價(jià)值第二十八頁,共五十頁,2022年,8月28日第二十九頁,共五十頁,2022年,8月28日第三十頁,共五十頁,2022年,8月28日第三十一頁,共五十頁,2022年,8月28日第三十二頁,共五十頁,2022年,8月28日第三十三頁,共五十頁,2022年,8月28日免疫分型在慢淋、淋巴瘤中的應(yīng)用簡(jiǎn)介腫瘤性B細(xì)胞鑒別關(guān)鍵:κ、λ輕鏈出現(xiàn)單克隆表達(dá)或雙陰性或表達(dá)強(qiáng)度明顯異常。腫瘤性T細(xì)胞鑒別關(guān)鍵:CD3、CD4、CD8、CD2、CD5、CD7中出現(xiàn)抗原表達(dá)缺失或抗原表達(dá)強(qiáng)度的改變;CD45RA、CD45RO的表達(dá)情況出現(xiàn)異常;表達(dá)TDT、CD10等幼稚抗原;TCRVβ系列抗原出現(xiàn)單克隆表達(dá)。漿細(xì)胞腫瘤鑒別關(guān)鍵:CD138+細(xì)胞表達(dá)CD56,不表達(dá)CD19,出現(xiàn)cyκ、cyλ輕鏈的單克隆表達(dá)。NK細(xì)胞腫瘤鑒別關(guān)鍵:出現(xiàn)CD16、CD56、CD7、CD2等抗原的缺失,CD45表達(dá)強(qiáng)度的改變每種類型都必須關(guān)注異常細(xì)胞CD45表達(dá)強(qiáng)度、SSC、FSC的變化。第三十四頁,共五十頁,2022年,8月28日示例:正常淋巴細(xì)胞正常T細(xì)胞正常B細(xì)胞正常NK細(xì)胞第三十五頁,共五十頁,2022年,8月28日示例:B-CLL/SLL第三十六頁,共五十頁,2022年,8月28日示例:MCL第三十七頁,共五十頁,2022年,8月28日示例:HCL第三十八頁,共五十頁,2022年,8月28日示例:Burkkit淋巴瘤第三十九頁,共五十頁,2022年,8月28日示例:FL第四十頁,共五十頁,2022年,8月28日示例:脾邊緣區(qū)淋巴瘤第四十一頁,共五十頁,2022年,8月28日示例:NK-T淋巴瘤第四十二頁,共五十頁,2022年,8月28日示例:T-NHL82.5%15.6%第四十三頁,共五十頁,202
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