2010版中國藥典培訓(xùn)回答（第2部分：微生物限度）廣東省藥檢所對《中國藥典》2010版微生物專題培訓(xùn)班的相關(guān)問題解答答案。1、微生物方法考據(jù)，要求菌株回收率≧70%，能否有上限要求？（如不得高于100%也許110%）。答：沒有上限。但一般不會高于100%，因?yàn)榧舆M(jìn)去的菌量是相同的，假如超出100%可看作是操作上的偏差。按微生物的特征，假如不超出太多，是可以接受的，但沒有詳細(xì)上限。（本所控制在110%之內(nèi)）。2、在微生物方法考據(jù)時(shí)，霉菌、酵母菌計(jì)數(shù)考據(jù)只用黑曲霉及白色念珠菌做方法學(xué)驗(yàn)證，在操作培育過程中發(fā)現(xiàn)：在玫瑰紅鈉瓊脂培育生長的白色念珠菌的形態(tài)太小與營養(yǎng)瓊脂上培育的細(xì)菌的某些形態(tài)大小相同，這樣如何判斷營養(yǎng)瓊脂上生長的菌落是不是白色念珠菌？為什么這兩種菌落形態(tài)相似？答：菌落形態(tài)相似不等于就是同一種菌。在考據(jù)時(shí)，營養(yǎng)瓊脂的考據(jù)菌株為大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌，假如本底菌為0，則營養(yǎng)瓊脂上長的菌應(yīng)當(dāng)不是白色念珠菌。要判斷能否為白色念珠菌，應(yīng)進(jìn)行白色念珠菌的相應(yīng)判定方法后才能確立。任何微生物都不行能不過從菌落就可以進(jìn)行判斷，只好判斷為疑似，而后再做一系列相應(yīng)的判定實(shí)驗(yàn)后才能進(jìn)行判斷。3、生孢梭菌的適合計(jì)數(shù)用培育基？（很多考據(jù)需對生孢梭菌進(jìn)行計(jì)數(shù)）答：最簡易的方法是用硫乙醇酸鹽流體培育基。該培育基上層為含氧層，適合需氧菌生長，基層為厭氧層（基層高度最好7cm以上），適合厭氧菌生長。在培育16~18小時(shí)這個(gè)時(shí)間進(jìn)行觀察，計(jì)數(shù)，超出20小時(shí),因?yàn)樯沉看?，培育基將污濁，點(diǎn)計(jì)不清。也許是用哥倫比亞瓊脂培育基，澆注后，置厭氧罐（袋）里，再置培育箱培育，計(jì)數(shù)。4、微生物限度檢查法中所用的培育基要進(jìn)行合用性檢查試驗(yàn)，請問這些培育基還需要做無菌檢查試驗(yàn)嗎？答：微生物限度檢查，藥典上沒有特別說明對培育基作無菌性檢查，但每次都要做陰性比較實(shí)驗(yàn)，陰性比較是檢查整個(gè)檢驗(yàn)系統(tǒng)能否被微生物污染，實(shí)質(zhì)上也包含了培育基的無菌性檢查。5、微生物限度檢查法中所用的培育基如：營養(yǎng)瓊脂、EMB、Macl等培育基其分裝容器需要早先滅菌嗎？答：不用。只若是干凈的就行，因?yàn)榉盅b后還要滅菌。6、擁有抑菌性的供試品，細(xì)菌、霉菌、都是用薄膜過濾法來檢查的，那么沙門菌可以用慣例法來檢查嗎？就是可以不經(jīng)過過濾直接接種到營養(yǎng)肉湯中嗎？答：這要看你考據(jù)的結(jié)果。假如經(jīng)過考據(jù)，你的品種是對沙門菌有克制作用，且用培育基稀釋法不可以除掉其抑菌性，則就必需考慮用薄膜過濾法。7、微生物限度檢查中，稀釋劑比較組，是在稀釋液中加入稀釋液制成含量50~100cfu的濃度呢？

50~100cfu

的菌，還是把答：是把稀釋液制成含50~100cfu/ml菌的濃度。（在這里，我對上一次授課時(shí)關(guān)于稀釋劑比較組操作的PPT進(jìn)行糾正，關(guān)于離心薄膜過濾法的稀釋劑比較組的操作應(yīng)當(dāng)是：含50~100cfu/ml菌的稀釋液離心取稀釋液（與試驗(yàn)組相同取上層液）過濾、沖洗貼平板）8、稀釋級比較組

:含

50~100cfu/ml

菌稀釋液→離心→取供試液

稀釋液過濾、沖洗→貼平板。這里需要加供試液嗎？能否應(yīng)為上述離心后的菌液？答：不需要取供試液，只取“上述離心后的菌液”。關(guān)于這一狀況，我在第7題里已經(jīng)作了說明。9、當(dāng)要做稀釋劑比較組時(shí)，能否就是從制備供試品時(shí)就同時(shí)做一份不含供試品而是含菌50~100cfu的樣品？等于按同一個(gè)方法制備一個(gè)供試品，五個(gè)含菌稀釋液比較組？答：是的。、菌落計(jì)數(shù)能否需要將每天計(jì)數(shù)的數(shù)據(jù)登記在記錄本上，能否可以只記錄最后的數(shù)據(jù)？答：可以。每天計(jì)數(shù)的目的是預(yù)防菌落洋溢相互覆蓋，攪亂最后的點(diǎn)計(jì)。你可以用油性筆將每天點(diǎn)計(jì)的數(shù)記錄在培育皿上，發(fā)報(bào)告時(shí)只需最后菌落數(shù)就行了。、若樣品中有不溶物（如片劑中的輔料顆粒），常常會影響培育先期的結(jié)果，藥典要求每日計(jì)數(shù)，所以報(bào)告中會出現(xiàn)第二、三日菌落數(shù)小于第一日的現(xiàn)象，請問該如何向客戶或監(jiān)檢機(jī)構(gòu)解說這類結(jié)果？也許能否可以不計(jì)第一、二日菌落數(shù)，待輔料顆粒與菌落可以劃分后再計(jì)數(shù)？答：報(bào)告書不需要顯示第一、第二天的結(jié)果，只需報(bào)告最后結(jié)果。原由請見第復(fù)。也許是在營養(yǎng)瓊脂中加入TTC試劑（每100ml加入0.1%）

9題答、因?yàn)槲⑸餀z驗(yàn)的特別性，關(guān)于樣品的微生物限度檢查計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)能否可登記在表格內(nèi)（此表格僅含樣品名稱、批號及檢查結(jié)果）。以后再將檢測結(jié)果移至詳細(xì)記錄中？答：原始記錄應(yīng)當(dāng)只有1份。假如你說的詳細(xì)記錄是屬于一般記錄，是沒有必需的，假如是指報(bào)告書，就應(yīng)當(dāng)沒問題。這要看你自己訂的SOP。13、直接接種法培育后的菌落報(bào)告：原液230cfu,稀釋10倍后40cfu,請問按2010版藥典的菌落數(shù)報(bào)告規(guī)則如何報(bào)告菌落數(shù)？答：報(bào)告菌落數(shù)為40×10=400cfu。應(yīng)以菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)后的最大值作為報(bào)告結(jié)果。14、05版藥典供試品離心5分鐘，而10版藥典改用離心3分鐘，本來按5分鐘考據(jù)的產(chǎn)品能否需要重新考據(jù)？答：是的。需要再確認(rèn)一下。15、10版藥典附錄微生物限度檢查法中結(jié)果判斷的菌落計(jì)數(shù)單位是以“cfu”表示，但正文品種項(xiàng)下是以“個(gè)”表示，最后應(yīng)以哪位為準(zhǔn)呢？答：應(yīng)當(dāng)是以cfu為單位。正文是因?yàn)橛∷r(shí)沒一致修悔悟來，關(guān)于這個(gè)問題，在補(bǔ)充本上訂正過來。（在補(bǔ)充本沒出來以前，正文品種還是以個(gè)為單位）16、為什么控制菌液的濃度為50-100cfu/ml。答：50-100cfu在平板上比較好點(diǎn)計(jì)，菌落不簡單重疊。少于50，則實(shí)驗(yàn)偏差會增大，重現(xiàn)性不好，大于100則簡單造成菌落太密或重疊不好計(jì)數(shù)。、藥典上控制菌檢查的方法考據(jù)，不過說把菌加至增菌培育基中檢出即可，那我們實(shí)質(zhì)做考據(jù)與記錄時(shí)，能否要做增菌此后的步驟呢？答：要。否則你怎么知道檢出來的菌是你加進(jìn)去的試驗(yàn)菌呢？、采納薄膜過濾法檢驗(yàn)，陽性菌，計(jì)數(shù)能否也用此方法計(jì)數(shù)？答：是的。19、關(guān)于10版藥典延長培育時(shí)間，控制菌35-37℃改為30-35℃培育溫度，一些已經(jīng)考據(jù)（按05版藥典）檢品能否需要重新考據(jù)？能否有必需進(jìn)行延長時(shí)間前后菌生長狀況變化的考據(jù)試驗(yàn)？答：目前沒有相關(guān)性規(guī)定，我們以為可按本來已經(jīng)考據(jù)的方法，用2010年版的培育時(shí)間和溫度再確認(rèn)一下，假如結(jié)果吻合藥典要求，則可用。假如不行行，則調(diào)整后再進(jìn)行考據(jù)。20、若無需都重新考據(jù)，那么參照標(biāo)準(zhǔn)為05版藥典，又可以經(jīng)過什么文件來改正為參照10版藥典？答：請看上一題。、檢驗(yàn)控制菌用培育基促生長能力的檢查，也需要比較培育基嗎？比方：大腸埃希菌用的BL增菌液。答：是的。請看附錄“微生物限度檢查法”中的表2。22、10版藥典增添貼膏劑的檢查，狗皮貼膏藥屬于貼膏劑嗎？答：應(yīng)當(dāng)是的。請比較《中國藥典》一部附錄P8進(jìn)行確立。、請問若試驗(yàn)條件限制未能使用勻漿儀制備非規(guī)定滅菌制劑能否可采納溫?zé)幔ú怀?5℃）的稀釋液？答：假如可以充分分別樣品，可以的。、請問若采納薄膜過濾法進(jìn)行考據(jù)，因?yàn)檫^濾難度大，能否可以每膜過濾相當(dāng)于供試品0.1g，報(bào)告以結(jié)果乘以10？答：考據(jù)計(jì)數(shù)時(shí)可以的，考據(jù)控制菌時(shí)檢驗(yàn)總量應(yīng)達(dá)到藥典要求，假如一張膜檢驗(yàn)量達(dá)不到，可分幾個(gè)膜。、請問采納靜置分層取上清液薄膜過濾，能否需要加稀釋劑比較組？答：個(gè)人看法可以不用,但未經(jīng)考據(jù)。、供試品靜置分層取上清液進(jìn)行試驗(yàn)，靜置3~5分鐘，能否經(jīng)過考據(jù)供試品的本底菌不會沉究竟部？答：未經(jīng)考據(jù)。、培育基合用性檢查，克制能力檢查用菌種是哪些？答：控制菌的培育基合用性檢查,請看藥典“微生物限度檢查法”中表2，計(jì)數(shù)用培育基請看“計(jì)數(shù)培育基的合用性檢查”。、投猜中有神曲提取物，限度應(yīng)界定為多少？答：不是藥材原粉投料，標(biāo)準(zhǔn)均按“不含藥材原粉的制劑”執(zhí)行。29、微生物限度檢查里相關(guān)經(jīng)驗(yàn)類的東西都一定經(jīng)過考據(jù)才可以使用,那么考據(jù)的內(nèi)容包含哪些數(shù)據(jù)應(yīng)記錄，能否也應(yīng)當(dāng)有文件與記錄？答：參照藥典，你是作什么樣的檢驗(yàn)，就作什么樣的考據(jù)，有考據(jù)就應(yīng)當(dāng)有記錄。30、比方

10倍稀釋級菌落數(shù)為

0，100

倍稀釋級菌落數(shù)為

2，按

2005

年版藥典應(yīng)以低稀釋級菌落數(shù)報(bào)告為＜

10，還是按最高均勻菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告為

200個(gè)/g，能否理解正確？答：按《中國藥典》2005年版報(bào)告應(yīng)為＜10個(gè)/g（或ml），按《中國藥典》2010年版報(bào)告應(yīng)為200cfu/g（或ml）。、計(jì)數(shù)方法的考據(jù)：執(zhí)行新版藥典能否就延長培育時(shí)間做方法考據(jù)？答：是。32、平皿法中提到“每個(gè)稀釋級每種培育基最少檢驗(yàn)2ml供試液”，是每皿注2ml還是每皿注1ml？如要做0.5ml或0.2ml，本級能否還需做1ml?答：慣例平皿法時(shí)每皿注1ml，做2個(gè)皿；培育基稀釋法（即每皿0.5ml或0.2ml）時(shí)，供試液總量也應(yīng)是2ml，每1ml菌落數(shù)合計(jì)后，2ml的菌落數(shù)再均勻；本級就不需做1ml了，但下一級就只做

1ml/皿就行了。33、在細(xì)菌霉菌計(jì)數(shù)檢查中，老師提到的每個(gè)稀釋級每種培育基最少檢驗(yàn)液，但2010版藥典上并無要求要這樣做，那應(yīng)以哪個(gè)做法為準(zhǔn)？

2ml

供試答：藥典中對平皿法的描述：平皿法“取供試液1ml，置直徑90mm的無菌平皿中，注入15～20ml溫度不超出45℃的熔解的營養(yǎng)瓊脂培育基或玫瑰紅鈉瓊脂培育基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培育基，混勻，凝固，倒置培育。每稀釋級每種培育基最少制備2個(gè)平板?！边@里的描述是以慣例平皿法進(jìn)行描述的，所以“每稀釋級每種培育基最少制備2個(gè)平板”，也就是2ml的量。關(guān)于培育基稀釋法，請看藥典供試液的制備中3.(6)①。34、10版藥典要求檢查沙門菌的供試品，其檢驗(yàn)量應(yīng)增添20g或20ml，（此中10g或10ml用于陽性比較試驗(yàn)）能否指20g或20ml樣品中10g或10ml直接用于沙門菌控制檢查，另10g或10ml加pH7.0的緩沖液100ml作為1：10的供試品溶液作為細(xì)菌，霉菌，酵母菌的檢驗(yàn)嗎？還是指20g都用于沙門菌檢查？答：20g都是用于沙門菌檢查。沙門菌的檢查法是：取3份200ml營養(yǎng)肉湯，此中2份分別加入10g或10ml樣品，取此中1份加入10~100cfu菌液作陽性比較。第3份加入10ml稀釋劑作陰性比較進(jìn)行檢查，所以。細(xì)菌，霉菌，酵母菌檢驗(yàn)的樣品不包含在這里。35、沙門菌檢查為10g或10ml，為什么一次檢查量又為20g或20ml？（P130）答：其中10g（或10ml）是檢驗(yàn)用的，另10g（或10ml）是用于陽性比較試驗(yàn)的。請看上一題目解說。、采納薄膜過濾法時(shí)，濾膜采納何種方法滅菌最好？答：據(jù)我們經(jīng)驗(yàn)，最好采納一次性過濾器。假如用多次使用的過濾器，則濾膜用濕熱滅菌比較好，因?yàn)楦蔁釡缇螅瑸V膜較脆，試驗(yàn)時(shí)不簡單保證濾膜完好。、方法學(xué)考據(jù)時(shí)，采納平皿法稀釋級計(jì)數(shù)，能否要做稀釋級比較組？答：稀釋級比較組？是指本底菌組嗎？假如是，那就要。因?yàn)橐叫性囼?yàn)，才能知道同一稀釋級的本底菌是多少。假如是指稀釋劑比較組，就不用，因?yàn)樗玫南♂寗┦撬幍湟?guī)定的，是無毒性的稀釋劑。38、方法考據(jù)的培育基稀釋法考據(jù)（樣品0.2ml）只做2個(gè)平皿，每個(gè)平皿的加菌量是多少？假如同步加0.2ml菌，其加菌量就達(dá)不到50~100cfu。答：無論每皿加的供試液的量是多少，每皿加菌液的量都是1ml,即都是50~100cfu。39、平皿法（稀釋法）計(jì)數(shù)考據(jù)時(shí)，取最低稀釋供試液如0.5ml和50~100cfu試驗(yàn)菌，那50~100cfu的試驗(yàn)菌是指50~100cfu還是50~100cfu∕0.5ml？我們是要加1ml還是0.5ml的試驗(yàn)菌？答：平皿法（稀釋法）計(jì)數(shù)考據(jù)時(shí)，每皿要加的菌液是50~100cfu，一般我們配制的菌液濃度是50~100cfu/ml，所以就加1ml。假如你配制的菌液不是這個(gè)濃度，你可以折算，只需加的菌數(shù)是50~100cfu/皿就行了。40、細(xì)菌霉菌方法考據(jù)，同時(shí)做

1ml，0.5ml，0.2ml

供試品組及供試品考據(jù)組時(shí)，菌液能否也按1ml，0.5ml，0.2ml的菌數(shù)能否也達(dá)到50~100cfu？

分別加入？此時(shí)

1ml，0.5ml，0.2ml

供試品考據(jù)組中答：考據(jù)時(shí)，無論是1ml，0.5ml，0.2ml的供試液，每皿的加菌量都是即1ml（假如你配制的菌液濃度是50~100cfu/ml）。

50~100cfu

，41、培育基稀釋方法考據(jù)，每皿0.2ml，加菌液0.2ml，那么0.2ml的菌液計(jì)數(shù)能否在50~100cfu∕0.2ml。答：請看上一題的解說。42、微生物限度檢查霉菌、酵母菌要求不超出100的狀況下，這兩種菌是不是要分開來檢，用不一樣培育基檢測？目前只用玫瑰紅鈉瓊脂培育基檢測這兩種菌，有沒有必需改正？答：按藥典規(guī)定，一般品種是用玫瑰紅鈉瓊脂培育基檢測這兩種菌；含蜂蜜、王漿的液系統(tǒng)劑，用玫瑰紅鈉瓊脂培育基測定霉菌數(shù)，用酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培育基測定酵母菌數(shù)，合并計(jì)數(shù)。43、測表面微生物時(shí)，直接接觸藥品與間接接觸藥品的限度（≤25）一致，能否有不妥，假若有不一樣建議，能否供給其計(jì)數(shù)方法？別的，假如檢測到菌落數(shù)超出100以上，那么報(bào)告規(guī)則的菌數(shù)也是取兩位有效數(shù)字嗎？答：“測表面微生物”？這應(yīng)當(dāng)是藥包材的檢測標(biāo)準(zhǔn)吧？因?yàn)槲覀冞€沒有展開這項(xiàng)業(yè)務(wù)，所以對其標(biāo)準(zhǔn)狀況不認(rèn)識，但既然已經(jīng)成為標(biāo)準(zhǔn)，就必定有其合理性，若有不一樣建議，可向標(biāo)準(zhǔn)制定部門反響，并提出你以為合理的解決方法。微生物的報(bào)告規(guī)則一般都是取兩位有效數(shù)字。44、內(nèi)包裝資料PVC硬片，鋁箔等樣品的微生物檢驗(yàn)（限度）方法？答：是藥包材的檢驗(yàn)？應(yīng)當(dāng)有相應(yīng)的檢驗(yàn)方法吧！45、控制菌檢查，大腸埃希菌IMViC試驗(yàn)，結(jié)果顯示未檢出，有沒有硬性規(guī)定一定要進(jìn)一步判定？答：關(guān)于大腸埃希菌檢查，IMViC試驗(yàn)已經(jīng)是判定試驗(yàn)了，假如IMViC試驗(yàn)結(jié)果顯示未檢出，那么就可以報(bào)告未檢出大腸埃希菌。、菌數(shù)報(bào)告按兩位有效數(shù)字報(bào)告，是按數(shù)字修約方法進(jìn)行數(shù)據(jù)修約，還是只用保留兩位有效數(shù)字，如菌數(shù)為364報(bào)告菌數(shù)為360，還是370；若菌數(shù)為3670報(bào)告菌數(shù)應(yīng)為多少？答：修約原則是4舍6入5留雙。即菌數(shù)為364報(bào)告菌數(shù)為360；若菌數(shù)為3670報(bào)告菌數(shù)應(yīng)為3700；假如是3650，則報(bào)告菌數(shù)應(yīng)為3600。、在平常檢驗(yàn)中控制菌檢驗(yàn)方法經(jīng)過考據(jù)的控制菌檢驗(yàn)?zāi)芊癫蛔鲫栃员容^？理解：在考據(jù)時(shí)已做過控制菌供試液，考據(jù)時(shí)供試液對控制菌無抑菌性，若不過做控制菌（不加供試液）則在培育基合用性時(shí)已證明培育基的質(zhì)量，那么每次試驗(yàn)做陽性比較的意義是什么？也許陽性比較試驗(yàn)怎么做？答：從理論上來說是可以的，考據(jù)試驗(yàn)實(shí)質(zhì)上就是檢驗(yàn)時(shí)的陽性比較試驗(yàn)。但藥典要求控制菌檢查時(shí)必需同時(shí)從陽性比較和陰性比較，這應(yīng)當(dāng)是考慮到檢驗(yàn)過程的檢驗(yàn)系統(tǒng)的偏差吧。自己以為，生產(chǎn)廠家對自己的產(chǎn)品在經(jīng)考據(jù)后，檢驗(yàn)時(shí)假如每天同一產(chǎn)品批量很大，可以只做一個(gè)陽性比較，但關(guān)于藥檢所則一定每批都做，因?yàn)殛P(guān)于同一品種，不一樣廠家其生產(chǎn)工藝不盡相同，在檢驗(yàn)過程中對被檢微生物的攪亂也不一樣。所以，藥檢所應(yīng)每批都做。48、取樣量藥典要求“從2個(gè)以上最小包裝單位中抽取供試品”，能否包含2個(gè)？答：包含。、請問藥廠自行做的微生物方法考據(jù)能否需要經(jīng)過藥檢所的審查？若產(chǎn)品改正為輔料，重新做方法考據(jù)，能否需要到藥檢所存案或需要藥檢所審查？答：藥廠自行做的微生物方法考據(jù)不需要經(jīng)過藥檢所的審查。相同，重新考據(jù)后也不需要。但假如你的檢品需要報(bào)注冊檢驗(yàn)，則你必需供給你的整個(gè)考據(jù)資料，藥檢所將依據(jù)狀況對你的方法進(jìn)行確認(rèn)，看方法能否可行。、能否每次做培育基合用性都一定與比較培育基進(jìn)行比較？假如第一批培育基與對照培育基比較回收率為90%，那么第二批培育基與第一批培育基比較回收率為80%，則折算為第二批培育基與比較培育基比較回收率為72%，以后購買的培育基與前一批比較，而不用每次培育基合用性都與比較培育基比較，這樣可不行行？答：請按藥典要求做，至于內(nèi)部控制則要自己掌握。但你要保證第一批培育基在你用于與第二、第三批比較時(shí)，質(zhì)量保持其與比較培育基比較時(shí)相同，因?yàn)楦鴷r(shí)間的推移，培育基的質(zhì)量必定有所降落。、微生物檢驗(yàn)考據(jù)時(shí)，如我用一瓶一般脫水培育基與比較培育基測定菌落數(shù)，如普通脫水培育基吻合合用性檢查，那么該瓶一般脫水培育基能否作為此后工作中的比較培育基來用？答：請看上一題的解說。52、培育時(shí)間有要求24~48h，也有要求24~72h的，像這類時(shí)間要求范圍比較大的情況，假如在最短的時(shí)間內(nèi)（如：24h）就已經(jīng)長菌，但需進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)判斷該菌能否為控制菌，那么，能否需要培育到最長時(shí)間（如：48h或72h）再進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)？答：長勢好的話可以進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)不用等到最長時(shí)間。53、操作結(jié)果的RSD%的范圍比較寬裕，能否可信？（eg：黑曲霉若＞20cfu∕皿時(shí)，菌落將擴(kuò)散至難以分別，所以回收率精確度較低）答：這個(gè)問題要詳細(xì)問題詳細(xì)解析。菌落漫延，這是要求每日觀察的主要原由之一，應(yīng)在菌落能分辨的時(shí)候點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)。加菌量太少，簡單出現(xiàn)偏差大，重現(xiàn)性差，所以要求加的菌數(shù)在50~100cfu。、含藥材細(xì)粉的膠囊如何制備供試液？答：按固系統(tǒng)劑供試液的制備方法制備，可用45℃水浴融化溶解膠囊殼。、大腸菌群檢查，需陽性比較嗎？答：要的。陽性比較菌為大腸埃希菌。、菌液涂布時(shí)，用接種棒還是涂布棒涂？答：用L型涂布棒，也可用玻棒自制。、控制菌的培育基促生長能力檢查，比較菌加于固體培育基如何涂布，用什么工具來涂布？答：請看上一題。58、三部藥典中有些產(chǎn)品細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)用每g多少cfu，但有些為每g多少個(gè)，應(yīng)如何記錄？答：應(yīng)當(dāng)是cfu才對的，這些應(yīng)當(dāng)是在轉(zhuǎn)版時(shí)沒轉(zhuǎn)過來吧，在補(bǔ)充本應(yīng)當(dāng)會轉(zhuǎn)過來。但是在沒轉(zhuǎn)過來以前，它還是法定的，必需按藥典上的寫法來執(zhí)行。、如樣品的控制菌為大腸埃希菌沒檢出，但檢出其余種菌，結(jié)果該如何判斷？答：假如是其余致病菌，請看微生物限度檢查法的結(jié)果判斷第一句。、我們是做糖衣片的，微生物限度檢查汲取供試液時(shí)，吸管有時(shí)會被粉末塞住，那能不可以讓供試液積淀后取其上清液呢？這樣操作結(jié)果靠譜嗎？答：請將藥片盡可能打碎，假如還不可以解決問題，我們的經(jīng)驗(yàn)是：可讓大藥渣沉降后取上層液進(jìn)行試驗(yàn)，但沉降時(shí)間盡可能短(在3-5分鐘內(nèi))，這樣做對結(jié)果會有必定影響，但應(yīng)當(dāng)在可接受范圍內(nèi)。、微生物限度檢查控制菌檢查時(shí)，如供試液的增菌后無菌生長，能否直接發(fā)供試液的未檢出控制菌，此時(shí)，陽性比較試驗(yàn)還需連續(xù)做下去嗎？答：只需能判斷供試液增菌后無菌生長，陽性比較試驗(yàn)菌長出，即可發(fā)未檢出控制菌。62、如何理解“菌落延伸成片不以計(jì)數(shù)”？如10-1級有1個(gè)皿的菌落成片能否用10-級來計(jì)數(shù)？答：是的。、如何防備菌落成片？答：1、培育基傾注時(shí)溫度不宜過高，可減少傾注后培育皿里的水蒸汽太多而造成菌落簡單漫延，也許加蓋“陶瓦蓋”汲取水蒸汽；2、細(xì)菌計(jì)數(shù)時(shí)，在每100ml營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中加入滅菌的1%氯化四氮唑0.1ml，可使生成的菌落變紅色，簡單點(diǎn)計(jì)，也可在必定程度上克制菌落漫延。、請問一下關(guān)于生長速度快、易延伸的菌有什么好的方法控制，該如何計(jì)數(shù)，如采納陶瓦蓋培育時(shí)間要不要延長？答：請看上一題的說明。如用陶瓦蓋，培育時(shí)間不需要延長。65、請問若細(xì)菌、酵母菌均勻菌落數(shù)不在其宜采納的范圍內(nèi)，即大于300及100cfu時(shí)，該如何報(bào)告菌數(shù)？另05版藥典的規(guī)定范圍是30~300/30~100，若是當(dāng)菌落數(shù)大于300及100，如何報(bào)告？答：應(yīng)當(dāng)重新試驗(yàn)，將稀釋級再往高級進(jìn)一步稀釋，直到能有可報(bào)告的稀釋級。可在工作中以對產(chǎn)品的認(rèn)識將稀釋級調(diào)整到可報(bào)告的級別進(jìn)行檢驗(yàn)。、請問關(guān)于抑菌性難以除掉的粉末狀樣品，采納最好的除掉抑菌性的方法是什么？答：假如能溶于水，目前來說，最好的除菌方法是薄膜過濾法；其次是找到相應(yīng)的中和劑。、我們生產(chǎn)的產(chǎn)品為外用搽劑非無菌產(chǎn)品，需要對全部原輔料做微生物限度檢查嗎？答：生產(chǎn)企業(yè)對原輔料的微生物限度檢查，應(yīng)依據(jù)自己的狀況進(jìn)行控制。拜見一部附錄P88（或二部附錄P116），微生物限度標(biāo)準(zhǔn)第7點(diǎn)。（個(gè)人建議：假如所用的原輔料直接投料，就要控制，假如還要進(jìn)一步提取等，則可經(jīng)過控制中間產(chǎn)品的微生物限度來控制。）、原輔料能否要單獨(dú)做方法考據(jù)？答：全部要檢查微生物限度的品種（自然包含原輔料），都要做方法考據(jù)。、中藥材的微生物限度如何檢測？如超標(biāo)應(yīng)如何控制？答：1.中藥材的微生物限度檢查，參照固系統(tǒng)劑的供試液制備，并依據(jù)給藥門路執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)，如用于直接投料至口服制劑的，還應(yīng)檢大腸菌群。2.如超標(biāo)，詳細(xì)問題詳細(xì)解析。、中間產(chǎn)品能否不做微生物檢測？答：中間產(chǎn)品應(yīng)當(dāng)控制微生物限度，各企業(yè)應(yīng)內(nèi)部質(zhì)控相關(guān)的詳細(xì)要求。71、廠家用10-2稀釋級作考據(jù)，那我們藥檢所作檢查時(shí)能否從10-2稀釋級開始做？答：是的。、省所做微生物限度時(shí)，廠家沒有做考據(jù)，那省所是自己做考據(jù)，還是退回去？又也許廠家的控制菌考據(jù)沒有做全（比方漏了沙門菌沒做），那省所怎么辦理？答：1、假如是注冊檢驗(yàn)，廠家沒有做考據(jù)，我們是不會接收樣品的，也就是說，沒做考據(jù)或考據(jù)不全，必定退回去。2、假如是拜托檢驗(yàn)，因?yàn)槭菂f(xié)議性質(zhì)，我們就按協(xié)議進(jìn)行檢驗(yàn)。、微生物限度檢查時(shí)，只有細(xì)菌數(shù)不合格，那么復(fù)試能否可以只做細(xì)菌數(shù)檢查就行了？答：可以。74、樣品制備中，如羧甲淀粉鈉等崩解劑遇水膨脹，經(jīng)試驗(yàn)1g∕100ml仍為膠體漿糊狀，沒法過濾且難與培育基交融，再加大稀釋倍數(shù)，則代表量太少，請問這類輔料采納何種方法進(jìn)行微生物限度檢查？答：羧甲淀粉鈉應(yīng)當(dāng)沒有抑菌作用，沒法過濾可用平皿法進(jìn)行檢查，且供試液制備時(shí)，稀釋劑的溫度適合調(diào)低些。、若樣品對微生物生長有促進(jìn)性，采納薄膜過濾法應(yīng)如何除掉此影響，也許有什么其余方法可以除掉促進(jìn)性以獲取改正確結(jié)果？答：采納薄膜過濾法就是很好的除掉影響的方法；藥典上規(guī)定“供試液從制備到加入檢驗(yàn)用培育基不得超出1個(gè)小時(shí)”，就是考慮到樣品對微生物存在促進(jìn)也許克制作用的影響。所以要獲取改正確的結(jié)果，就必需盡量縮短從供試液的制備到加入培育基的時(shí)間。別的，也可依據(jù)樣品的特征有針對性的加入中和劑等。76、控制菌檢查關(guān)于大腸的檢查，MUG試驗(yàn)中顯陽性或難以判斷時(shí)，“將培育液轉(zhuǎn)接到EMB”，這里的培育液是指MUG還是以前擴(kuò)增的BL？答：藥典上并無“將培育液轉(zhuǎn)接到EMB”這一描述。但關(guān)于MUG和靛基質(zhì)試驗(yàn)結(jié)果不一致時(shí)，是這么規(guī)定的：“如MUG陽性、靛基質(zhì)陰性，或MUG陰性、靛基質(zhì)陽性，則應(yīng)取膽鹽乳糖培育基的培育物劃線接種于曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培育基或麥康凱瓊脂培育基的平板上，培育18～24小時(shí)?！薄⒛懴惚茄缀胸i膽汁膏，毛雞藥酒含有毛雞浸出夜，霍膽丸含豬膽粉，這三個(gè)產(chǎn)品需要檢沙門菌嗎？答：是的。（因含豬膽汁膏、毛雞、豬膽粉）。、微生物檢驗(yàn)時(shí)，勻漿機(jī)應(yīng)把轉(zhuǎn)速調(diào)到多少才不會對微生物有損害？答：沒有相關(guān)的規(guī)定，目前一般使用轉(zhuǎn)速為3000-4000轉(zhuǎn)/分鐘。79、假如使用藥典之外的培育基進(jìn)行微生物限度檢查（比方TSA），怎么進(jìn)行培育基合用性檢查，能否有適合的比較培育基？答：可以參照“藥品微生物檢驗(yàn)代替方法考據(jù)指導(dǎo)原則”對所用培育基的質(zhì)量進(jìn)行控制。至于能否有相應(yīng)的比較培育基，要看中檢所能否來得及研制。80、微生物限度檢查的方法考據(jù)，最少應(yīng)進(jìn)行3次獨(dú)立平行試驗(yàn)，每個(gè)獨(dú)立平行試驗(yàn)?zāi)芊袷褂貌灰粯优柕臉悠?？答：可以，且最好是?個(gè)不一樣批號樣品進(jìn)行考據(jù)。81、每個(gè)獨(dú)立的平行試驗(yàn)?zāi)芊裼斜匦栌?個(gè)不一樣批號的樣品進(jìn)行考據(jù)？答：用3個(gè)不一樣批號的樣品進(jìn)行考據(jù)，可以增添考據(jù)結(jié)果的重現(xiàn)性。、微生物限度檢查中，培育基的合用性檢查時(shí)對每個(gè)批號的培育基進(jìn)行還是對每次制備好的培育基進(jìn)行？答：請看《藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范指導(dǎo)原則》中，關(guān)于培育基第3點(diǎn)，質(zhì)量控制試驗(yàn)的描述：“除藥典附錄還有規(guī)定外，在實(shí)驗(yàn)室中，若采納已考據(jù)的配制和滅菌程序制備培育基且過程受控，那么同一批脫水培育基的合用性檢查試驗(yàn)可只進(jìn)行一次。假如培育基的制備過程未經(jīng)考據(jù)，那么每一批培育基均要進(jìn)行合用性檢查試驗(yàn)，試驗(yàn)的菌種可依據(jù)培育基的用途從相關(guān)附錄中進(jìn)行選擇，也可增添從生產(chǎn)環(huán)境及產(chǎn)品中常有的污染菌株?！?、能否舉例說明哪些培育基是指示能力檢查培育基？答：請看“微生物限度檢查法”中表2。84、05版SOP中有說經(jīng)考據(jù)后控制菌可以不用做陽性比較，10版能否有相同的說法？已建立控制菌方法能否還需作陽性比較？答：藥典規(guī)定，控制菌檢查必需同時(shí)檢查陽性比較和陰性比較。05版SOP《中國藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作》中并無說