藥品質(zhì)量檢驗(yàn)綜合實(shí)訓(xùn)教程中篇藥品質(zhì)量檢驗(yàn)單元實(shí)訓(xùn)目錄

單元實(shí)訓(xùn)一藥品中一般雜質(zhì)檢查法（一）

單元實(shí)訓(xùn)二藥品中一般雜質(zhì)檢查法（二）

單元實(shí)訓(xùn)三藥品中特殊雜質(zhì)檢查法

單元實(shí)訓(xùn)四重量差異和崩解時限檢查法

單元實(shí)訓(xùn)五溶出度測定法

單元實(shí)訓(xùn)六釋放度測定法

單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法

單元實(shí)訓(xùn)八無菌檢查法

單元實(shí)訓(xùn)九熱原檢查法

單元實(shí)訓(xùn)十降壓物質(zhì)檢查法

單元實(shí)訓(xùn)十一異常毒性檢查法中篇藥品質(zhì)量檢驗(yàn)單元實(shí)訓(xùn)

單元實(shí)訓(xùn)一藥品中一般雜質(zhì)檢查法（一）

一.實(shí)訓(xùn)目標(biāo)通過本實(shí)訓(xùn)，掌握限量的計(jì)算方法及檢查結(jié)果的判斷，能夠規(guī)范書寫檢驗(yàn)原始記錄及檢驗(yàn)報(bào)告書。二.實(shí)訓(xùn)資料（一）檢驗(yàn)藥品

1.檢驗(yàn)藥品的名稱：葡萄糖。

2.檢驗(yàn)藥品的來源：市場購買或送檢樣品。

3.檢驗(yàn)藥品的規(guī)格、批號、包裝及數(shù)量：根據(jù)藥品包裝確定，并記錄有關(guān)情況。

單元實(shí)訓(xùn)一藥品中一般雜質(zhì)檢查法（一）

（二）檢驗(yàn)項(xiàng)目檢查葡萄糖的溶液澄清度與顏色；檢查葡萄糖中的氯化物、硫酸鹽、鐵鹽以及重金屬限量。（三）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

【檢查】溶液的澄清度與顏色取本品5.0g，加熱水溶解后，放泠，用水稀釋至10ml，溶液應(yīng)澄清無色；如顯渾濁，與1號濁度標(biāo)準(zhǔn)液比較，不得更濃；如顯色。氯化物取本品0.60g，依法檢查，與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液6.0ml制成的對照液比較，不得更濃（0.01％）。

單元實(shí)訓(xùn)一藥品中一般雜質(zhì)檢查法（一）

硫酸鹽取本品2.0g，依法檢查，與標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液2.0ml制成的對照液比較，不得更濃（0.01％）。鐵鹽取本品2.0g，加水20ml溶解后，加硝酸3滴，緩緩煮沸5分鐘，放冷，加水稀釋使成45ml，加硫氰酸銨溶液3ml，搖勻。重金屬取本品4.0g，加水23ml溶解后，加醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml，依法檢查，含重金屬不得過百萬分之五。

單元實(shí)訓(xùn)一藥品中一般雜質(zhì)檢查法（一）

（四）檢查方法

1.澄清度檢查法在室溫條件下，將用水稀釋至一定濃度的供試液與等量的濁度標(biāo)準(zhǔn)液分別置于配對的比濁用玻璃管中，在暗室內(nèi)垂直同置于傘棚燈下，照度為1000lx，從水平方向觀察、比較。

2.溶液顏色檢查法采用目視比色法，即取規(guī)定量的供試品，加水溶解，置于25ml的納氏比色管中，加水稀釋至10ml。置白色背景上，自上向下透視。

單元實(shí)訓(xùn)一藥品中一般雜質(zhì)檢查法（一）

3.氯化物檢查法取規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml，再加稀硝酸10ml；置50ml納氏比色管中，加水使成約40ml，搖勻,即得供試液。

4.硫酸鹽檢查法取規(guī)定量的供試品，加水溶解使成約40ml，置50ml納氏比色管中，加稀鹽酸2ml，搖勻，即得供試液。另取規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液，置50ml納氏比色管中，加水使成約40ml，加稀鹽酸2ml，搖勻，即得對照液。

單元實(shí)訓(xùn)一藥品中一般雜質(zhì)檢查法（一）

5.鐵鹽檢查法取規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml，置50ml納氏比色管，加稀鹽酸4ml與過硫酸銨50mg，用水稀釋使成35ml后，搖勻即得。

6.重金屬檢查法采用硫代乙酰胺法，即取25ml納氏比色管兩支，甲管中加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量與醋酸鹽緩沖液2ml后，加水稀釋成25ml，乙管中加入質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定方法制成的供試液25ml；在甲乙兩管中分別加硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻。

單元實(shí)訓(xùn)一藥品中一般雜質(zhì)檢查法（一）

三.實(shí)訓(xùn)方案（一）實(shí)訓(xùn)形式試液等的制備分成8人一組，8個同學(xué)分工合作，制備量按8～10人次用量計(jì)算；其余操作由每個學(xué)生獨(dú)立完成。（二）實(shí)訓(xùn)程序

1.儀器的準(zhǔn)備與清洗確定儀器的種類、數(shù)量與規(guī)格洗凈、晾干，備用

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2.試液、濁度標(biāo)準(zhǔn)液、標(biāo)準(zhǔn)比色液及標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備確定試藥及規(guī)格，確定檢驗(yàn)用量按用量制備試液、濁度標(biāo)準(zhǔn)液、標(biāo)準(zhǔn)比色液及標(biāo)準(zhǔn)溶液裝瓶、貼上標(biāo)簽、備用

單元實(shí)訓(xùn)一藥品中一般雜質(zhì)檢查法（一）

3.雜質(zhì)的檢查（1）氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬的檢查對照液的制備供試液的制備同時同法處理比較供試液和對照液所顯顏色深淺（2）溶液澄清度與顏色的檢查標(biāo)準(zhǔn)比色液的制備供試液的制備空白對照液的制備觀察、比較顏色結(jié)果判斷濁度標(biāo)準(zhǔn)液的制備觀察、比較結(jié)果判斷

單元實(shí)訓(xùn)一藥品中一般雜質(zhì)檢查法（一）

（三）實(shí)訓(xùn)時間具體實(shí)訓(xùn)時間安排可參考表2-1-1。表2-1-1氯化物等一般雜質(zhì)檢查的實(shí)訓(xùn)時間安排實(shí)訓(xùn)內(nèi)容實(shí)訓(xùn)時間（分鐘）備注儀器的準(zhǔn)備10備齊實(shí)訓(xùn)用玻璃儀器，除另有規(guī)定外，清洗干凈，備用

試藥準(zhǔn)備及試液、濁度標(biāo)準(zhǔn)液、標(biāo)準(zhǔn)比色液、標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備15試藥由實(shí)訓(xùn)教師準(zhǔn)備。濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液、濁度標(biāo)準(zhǔn)原液、比色用原液由實(shí)訓(xùn)指導(dǎo)教師指導(dǎo)部分學(xué)生在課余時間完成；其余標(biāo)準(zhǔn)溶液、試液由學(xué)生分組制備溶液顏色與澄清度的檢查20按規(guī)定的方法合理、交叉進(jìn)行氯化物的檢查15硫酸鹽的檢查15鐵鹽的檢查10重金屬的檢查15100實(shí)訓(xùn)總時間

單元實(shí)訓(xùn)一藥品中一般雜質(zhì)檢查法（一）

四.實(shí)訓(xùn)過程（一）澄清度與顏色的檢查

1.實(shí)訓(xùn)用儀器與試藥的準(zhǔn)備試藥：重鉻酸鉀、硫酸銅、醋酸鈉、二甲酚橙、硫酸肼及烏洛托品。

2.實(shí)訓(xùn)用液的制備（1）試液的制備鹽酸（1→40）：取鹽酸1ml，加水至40ml，攪拌均勻，即得。

單元實(shí)訓(xùn)一藥品中一般雜質(zhì)檢查法（一）

（2）0.5號濁度標(biāo)準(zhǔn)液的制備依次制備濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液、濁度標(biāo)準(zhǔn)原液，臨用前，取0.25ml于25ml納氏比色管中，加水至10ml，即得。（3）1號濁度標(biāo)準(zhǔn)液的制備（4）比色用對照液的制備依次制備比色用氯化鈷溶液、比色用重鉻酸鉀溶、比色用硫酸銅溶液。（5）空白對照液的制備取25ml納氏比色管，加水至10ml，即得。

3.檢查方法（1）供試液的制備：稱取葡萄糖4.6～5.4g，加熱水溶解后，放冷，置25ml納氏比色管中，用水稀釋至10ml，搖勻，即得。（2）比濁方法：分別將0.5號、１號濁度標(biāo)準(zhǔn)液和供試液置澄明度檢測儀黑色背景前比較。（3）比色方法：將供試液和空白對照液或供試液和比色用對照液同置于白色背景上，打開比色管的蓋子，自上而下透視比較。

單元實(shí)訓(xùn)一藥品中一般雜質(zhì)檢查法（一）

4.結(jié)果判斷（1）溶液澄清度檢查結(jié)果判斷如供試液的濁度和空白對照液的濁度一樣，即為“澄清”，判為符合規(guī)定。供試液的濁度淺于或等于1號濁度標(biāo)準(zhǔn)液，判為符合規(guī)定；如濃于1號濁度標(biāo)準(zhǔn)液，則判為不符合規(guī)定。（2）溶液顏色檢查結(jié)果判斷如供試液和空白對照液顏色一樣，即為“無色”，判為符合規(guī)定。如供試液與比色用對照液比較，顏色相似或更淺，則判為符合規(guī)定；如更深，則判為不符合規(guī)定。

單元實(shí)訓(xùn)一藥品中一般雜質(zhì)檢查法（一）

（二）氯化物的檢查

1.實(shí)訓(xùn)用儀器與試藥的準(zhǔn)備試藥：硝酸、氯化鈉及硝酸銀。

2.實(shí)訓(xùn)用液的制備（1）試液的制備硝酸銀試液：取硝酸銀17.5g，加水適量使溶解成1000ml，搖勻。本液濃度為0.1mol/L。（2）標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液的制備稱取氯化鈉0.165g，置1000ml量瓶中，加水適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。

單元實(shí)訓(xùn)一藥品中一般雜質(zhì)檢查法（一）

3.檢查方法（1）供試液的制備：稱取葡萄糖0.595～0.605g，加水溶解使成約25ml，再加稀硝酸10ml，置50m1納氏比色管中，加水使成約40ml，搖勻，即得。（2）對照液的制備：另取標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液6.0ml，置50ml納氏比色管中，加稀硝酸10ml即得。（3）于供試液與對照液中，分別加入硝酸銀試液1.0ml，用水稀釋至50ml，搖勻，在暗處放置5分鐘。（4）同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察比較，比較供試液和對照品液所顯乳光。

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4.結(jié)果判斷供試液所顯乳光不超過對照液，即為“氯化物限量小于或等于0.01％”，判為符合規(guī)定；超過對照液則判為不符合規(guī)定。

5.限量計(jì)算計(jì)算氯化物限量：

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（三）硫酸鹽的檢查

1.實(shí)訓(xùn)用儀器與試藥的準(zhǔn)備試藥：鹽酸、硝酸、硫酸鉀及氯化鋇。

2.實(shí)訓(xùn)用液的制備（1）試液的制備稀鹽酸：取鹽酸234ml，加水稀釋至1000ml，即得。本液含HCl應(yīng)為9.5％～10.5％。（2）標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液的制備稱取硫酸鉀0.181g，置1000ml量瓶中，加水適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得。

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3.檢查方法（1）供試液的制備：稱取葡萄糖1.95～2.05g，加水溶解使成約40ml；置50ml納氏比色管中，加稀鹽酸2ml，搖勻，即得。（2）對照液的制備：另取標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液2.0ml，置50ml納氏比色管中，加水使成約40ml，加稀鹽酸2ml，搖勻，即得。（3）于供試液與對照液中，分別加入25%的氯化鋇溶液5ml，用水稀釋成50ml，充分搖勻，放置10分鐘。（4）同置黑色背景上，從比色管上方向下觀察比較。

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（四）鐵鹽的檢查

1.實(shí)訓(xùn)用儀器與試藥的準(zhǔn)備試藥：硫酸、硝酸、硫酸鐵銨及硫氰酸銨。

2.實(shí)訓(xùn)用液的制備（1）試液的制備硫氰酸銨溶液：取硫氰酸銨30g，加水適量使溶解成100ml，搖勻，即得。（2）標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液的制備稱取硫酸鐵銨0.863g，置1000ml量瓶中，加水溶解后，加硫酸2.5ml，用水稀釋至刻度，作為貯備液。

單元實(shí)訓(xùn)一藥品中一般雜質(zhì)檢查法（一）

3.檢查方法（1）供試液的制備：稱取葡萄糖1.95～2.05g，加水20ml溶解后，加水稀釋使成45ml。（2）對照液的制備：另取標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液2.0ml，加硝酸3滴，緩緩煮沸5分鐘，加水稀釋使成45ml。（3）于供試液與對照液中，加硫氰酸銨溶液3ml。（4）將供試液和對照液管同置于白色背景上，打開比色管的蓋子，自上而下透視。

4.結(jié)果判斷供試液所顯顏色比對照液顏色淺或持平，判為符合規(guī)定；所顯顏色超過對照液，判為不符合規(guī)定。

單元實(shí)訓(xùn)一藥品中一般雜質(zhì)檢查法（一）

（五）重金屬的檢查

1.實(shí)訓(xùn)用儀器與試藥的準(zhǔn)備試藥：硝酸鉛、醋酸銨、氨水、甘油及氫氧化鈉。

2.實(shí)訓(xùn)用液的制備（1）試液的制備醋酸鹽緩沖液：取醋酸銨25g，加水25ml溶解后，準(zhǔn)確調(diào)節(jié)pH值至3.5,用水稀釋至100ml，即得。（2）標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液的制備稱取硝酸鉛0.160g，置1000ml量瓶中，加硝酸5ml與水50ml溶解后，用水稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。

單元實(shí)訓(xùn)一藥品中一般雜質(zhì)檢查法（一）

3.操作方法（1）對照液的制備：取25ml納氏比色管一支，加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液2ml，加醋酸鹽緩沖液2ml，加水稀釋成25ml。（2）供試液的制備：稱取葡萄糖3.95～4.05g，加水23ml溶解，再加醋酸鹽緩沖液2ml。（3）再在供試液與對照液中分別加硫代乙酰胺試液各2ml，搖勻，放置2分鐘，（4）同置白紙上，自上向下透視，比較顏色。

單元實(shí)訓(xùn)一藥品中一般雜質(zhì)檢查法（一）

4.結(jié)果判斷供試液所顯顏色淺于或與標(biāo)準(zhǔn)溶液持平，判為符合規(guī)定；深于標(biāo)準(zhǔn)溶液則判為不符合規(guī)定。（六）數(shù)據(jù)處理與檢驗(yàn)報(bào)告按規(guī)定要求進(jìn)行數(shù)據(jù)處理并書寫檢驗(yàn)報(bào)告書。

單元實(shí)訓(xùn)一藥品中一般雜質(zhì)檢查法（一）

一.實(shí)訓(xùn)目標(biāo)通過本實(shí)訓(xùn)，要求掌握藥品干燥失重、熾灼殘?jiān)⑸辂}檢查及pH值測定的方法及操作技能。二.實(shí)訓(xùn)資料（一）檢驗(yàn)藥品名稱：葡萄糖、頭孢氨芐（二）檢驗(yàn)項(xiàng)目檢查葡萄糖的干燥失重、熾灼殘?jiān)吧辂}；測定頭孢氨芐的酸度。

單元實(shí)訓(xùn)二藥品中一般雜質(zhì)檢查法（二）

（三）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1.葡萄糖

【檢查】干燥失重取本品，在105℃干燥至恒重，減失重量不得過9.5％。砷鹽取本品2.0g，加水5ml溶解后，加稀硫酸5ml與溴化鉀溴試液0.5ml，置水浴上加熱約20分鐘，加鹽酸5ml與水適量使成28ml，依法檢查應(yīng)符合規(guī)定。

2.頭孢氨芐

【檢查】酸度取本品50mg，加水10ml溶解后，依法測定，pH值應(yīng)為3.5～5.5。

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（四）檢查方法

1.干燥失重測定法干燥失重系指藥品在規(guī)定的條件下，經(jīng)干燥后所減失的量。采用恒溫常壓干燥法，計(jì)算供試品的干燥失重。

2.灼燒殘?jiān)鼨z查法熾灼殘?jiān)抵赣袡C(jī)藥物經(jīng)炭化或揮發(fā)性無機(jī)藥物加熱分解后，高溫?zé)胱?，所產(chǎn)生的非揮發(fā)性無機(jī)雜質(zhì)的硫酸鹽。

單元實(shí)訓(xùn)二藥品中一般雜質(zhì)檢查法（二）

3.砷鹽檢查法采用古蔡氏法。該法是利用金屬鋅與酸作用產(chǎn)生新生態(tài)的氫與藥品中微量砷鹽反應(yīng)生成具有揮發(fā)性的砷化氫，遇溴化汞試紙產(chǎn)生黃色至棕色的砷斑，與同一條件下定量標(biāo)準(zhǔn)砷溶液所產(chǎn)生的砷斑比較，以判定砷鹽的限量。

4.pH值測定法除另有規(guī)定外，水溶液的pH值應(yīng)以玻璃電極為指示電極，飽和甘汞電極為參比電極的酸度計(jì)進(jìn)行測定。酸度計(jì)應(yīng)定期進(jìn)行計(jì)量檢定，并符合國家規(guī)定。

單元實(shí)訓(xùn)二藥品中一般雜質(zhì)檢查法（二）

三.實(shí)訓(xùn)方案（一）實(shí)訓(xùn)形式試液、緩沖液等的制備分成8人一組。干燥失重的測定每4～6人一組，灼燒殘?jiān)臋z查每8～10人一組，其余操作由每個學(xué)生獨(dú)立完成。（二）實(shí)訓(xùn)程序

1.儀器的準(zhǔn)備與清洗

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確定儀器的種類、數(shù)量與規(guī)格洗凈、晾干，備用2.試液的制備

單元實(shí)訓(xùn)二藥品中一般雜質(zhì)檢查法（二）

確定試藥及規(guī)格，確定實(shí)驗(yàn)用量按用量制備試液、緩沖液、標(biāo)準(zhǔn)溶液裝瓶、貼上標(biāo)簽、備用3.雜質(zhì)的檢查（1）干燥失重的測定稱量瓶恒重并精密稱定精密稱定供試品量干燥至恒重記錄、計(jì)算結(jié)果判斷（2）熾灼殘?jiān)臋z查

單元實(shí)訓(xùn)二藥品中一般雜質(zhì)檢查法（二）

坩鍋恒重并精密稱定精密稱定供試品量完全炭化熾燒至恒重記錄、計(jì)算結(jié)果判斷（3）砷鹽的檢查標(biāo)準(zhǔn)砷溶液的制備供試液的制備同時同法處理比較供試液生成的砷斑與標(biāo)準(zhǔn)砷斑的深淺結(jié)果判斷（4）酸度的檢查標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液的制備儀器校正供試液的制備測定溶液的pH值記錄數(shù)據(jù)結(jié)果判斷（三）實(shí)訓(xùn)時間具體實(shí)訓(xùn)時間安排可參考表2-2-1。

表2-2-1砷鹽等一般雜質(zhì)檢查的實(shí)訓(xùn)時間安排

單元實(shí)訓(xùn)二藥品中一般雜質(zhì)檢查法（二）

實(shí)訓(xùn)內(nèi)容實(shí)訓(xùn)時間（分鐘）備注儀器的準(zhǔn)備10儀器由實(shí)訓(xùn)教師準(zhǔn)備，學(xué)生應(yīng)在實(shí)訓(xùn)前檢查所需儀器是否齊全，如有缺少應(yīng)及時補(bǔ)齊，并清洗儀器，備用試藥準(zhǔn)備及試液、標(biāo)準(zhǔn)溶液制備30標(biāo)準(zhǔn)溶液由實(shí)訓(xùn)教師制備，試液由學(xué)生根據(jù)實(shí)訓(xùn)需要分組制備干燥失重的測定－按規(guī)定的方法交叉進(jìn)行稱量瓶及坩鍋恒重、干燥失重恒溫、熾灼及熾灼殘?jiān)銣鼐鑾仔r，可在綜合實(shí)訓(xùn)時間安排熾灼殘?jiān)臋z查－砷鹽的檢查40酸度的測定20100實(shí)訓(xùn)總時間

四.實(shí)訓(xùn)過程（一）熾灼殘?jiān)臋z查

1.實(shí)訓(xùn)用儀器與試藥的準(zhǔn)備試藥：硫酸、五氧化二磷或變色硅膠。

2.操作方法（1）將清洗干凈的坩堝蓋子，放入高溫爐中，經(jīng)700～800℃熾灼約30～60分鐘，取出。（２）在上述條件下繼續(xù)熾灼30分鐘后，取出，置干燥器內(nèi)，放冷，稱重；重復(fù)數(shù)次，直至達(dá)到恒重，將坩堝放入干燥器中備用。

單元實(shí)訓(xùn)二藥品中一般雜質(zhì)檢查法（二）

（３）稱取葡萄糖0.6～1.4g，置已熾灼至恒重的坩堝中，精密稱定其重量。（４）將盛有葡萄糖的坩堝斜置在電爐上緩緩熾灼，熾灼至供試品全部炭化呈黑色，并不冒濃煙，放冷至室溫。（5）滴加濃硫酸0.5～1.0ml，使炭化物全部濕潤，經(jīng)700～800℃熾灼60分鐘，使葡萄糖完全炭化。（６）完全炭化后停止加熱，待溫度降至300℃左右時，用坩堝鉗將坩堝蓋蓋好，取出，放入有干燥劑的干燥器中，放冷至室溫，精密稱定其重量。（７）繼續(xù)熾灼至恒重。

單元實(shí)訓(xùn)二藥品中一般雜質(zhì)檢查法（二）

3.熾灼殘?jiān)?jì)算按下面公式計(jì)算：

單元實(shí)訓(xùn)二藥品中一般雜質(zhì)檢查法（二）

式中W0——坩鍋的恒重，g；

W1——熾灼前供試品與坩鍋的重量，g；

W2——熾灼后殘?jiān)c坩鍋的恒重，g。

4.結(jié)果判斷測定結(jié)果小于或等于規(guī)定限量判為符合規(guī)定，大于規(guī)定限量判為不符合規(guī)定。（二）干燥失重的測定

1.實(shí)訓(xùn)用儀器與試藥的準(zhǔn)備試藥：變色硅膠。

2.操作方法（1）將洗凈的扁形稱量瓶，連同敞開的玻璃蓋在與供試品同在105℃干燥3小時后，在溫度降至70～80℃時，取出并蓋好蓋子，放入干燥器內(nèi)，降至室溫，精密稱定其重量。（2）稱取葡萄糖0.6～1.4g，平鋪在干燥至恒重的扁形稱量瓶中，精密稱定其重量。

單元實(shí)訓(xùn)二藥品中一般雜質(zhì)檢查法（二）

（3）將葡萄糖平鋪在扁形稱量瓶中。（4）將扁形稱量瓶置電熱箱中，干燥箱的溫度計(jì)水銀柱應(yīng)在扁形長量瓶旁邊。（5）調(diào)節(jié)干燥箱的溫度至105℃，記錄時間。（6）繼續(xù)干燥3后，關(guān)閉烘箱。（7）在溫度降至70～80℃時，取出扁形稱量瓶并蓋好蓋子，放入干燥器內(nèi)，降至室溫，精密稱定其重量。繼續(xù)干燥3ｈ后，關(guān)閉烘箱。（8）繼續(xù)在105℃干燥1ｈ后，重復(fù)操作，稱定重量并記錄，直至恒重。

單元實(shí)訓(xùn)二藥品中一般雜質(zhì)檢查法（二）

3.結(jié)果計(jì)算式中W0——稱量瓶的恒重，g；

W1——干燥前供試品與稱量瓶的重量，g；

W2——干燥后供試品與稱量瓶的恒重，g。

4.結(jié)果判斷測定結(jié)果小于或等于規(guī)定限量判為符合規(guī)定，大于規(guī)定限量判為不符合規(guī)定。

單元實(shí)訓(xùn)二藥品中一般雜質(zhì)檢查法（二）

（三）砷鹽的檢查

1.實(shí)訓(xùn)用儀器與試藥的準(zhǔn)備儀器：測砷器、恒溫水浴箱、脫脂棉及濾紙。試藥：三氧化二砷、氯化亞錫及鹽酸。

2.試液的制備（1）乙醇制溴化汞試液：取溴化汞2.5g，加乙醇50ml，微熱使溶解，即得。本液應(yīng)置玻璃塞瓶內(nèi)，在暗處保存。（2）溴化汞試紙：將濾紙條浸入乙醇制溴化汞試液中，1小時后取出，在暗處保存。

單元實(shí)訓(xùn)二藥品中一般雜質(zhì)檢查法（二）

（3）碘化鉀試液：取碘化鉀16.5g，加水溶解稀釋至100ml，即得。（4）酸性氯化亞錫試液：取氯化亞錫1.5g加水10ml少量的鹽酸使溶解，即得。（5）醋酸鉛試液：取醋酸鉛10g，加新沸過的冷水溶解后，滴加醋酸使溶液澄清，再加新沸過的冷水使成100ml，即得。（6）醋酸鉛棉花：取脫脂棉1.0g入醋酸鉛試液與水等容的混合液12ml中，并使之疏松備用。（7）稀硫酸：取硫酸57ml，加水稀釋至1000ml，即得。

單元實(shí)訓(xùn)二藥品中一般雜質(zhì)檢查法（二）

3.標(biāo)準(zhǔn)砷溶液的制備稱取三氧化二砷0.132g，置1000ml量瓶中，加20％氫氧化鈉溶液5ml溶解，用水稀釋至刻度，搖勻。

4.檢查方法（１）檢砷裝置的準(zhǔn)備：取60mg醋酸鉛棉花撕成疏松狀，每次少量，裝管高度為60mm～80mm。（2）標(biāo)準(zhǔn)砷斑的制備：精密量取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2ml，置檢砷器中，加鹽酸5ml與水２1ml，再加碘化鉀試液5ml與酸性氯化亞錫試液5滴，并將檢砷器置25～40℃水浴中，反應(yīng)45分鐘，取出溴化汞試紙，即得。

單元實(shí)訓(xùn)二藥品中一般雜質(zhì)檢查法（二）

（3）供試品砷斑制備：稱取葡萄糖1.95～2.05g，置另一檢砷器中，加水5ml溶解后，加稀硫酸5ml與溴化鉀溴試液0.5ml，置水浴上加熱約20分鐘，加鹽酸5ml與水適量使成28ml，加碘化鉀試液5ml與酸性氯化亞錫試液5滴，加鋅粒2g，迅速將已置有醋酸鉛棉花及溴化汞試紙的導(dǎo)氣管密塞于瓶口上，并將檢砷器置25～40℃水浴中，反應(yīng)45分鐘，取出溴化汞試紙，即得。

5.結(jié)果判斷供試品生成的砷斑比標(biāo)準(zhǔn)砷斑淺或持平判為符合規(guī)定，超過標(biāo)準(zhǔn)砷斑判為不符合規(guī)定。

單元實(shí)訓(xùn)二藥品中一般雜質(zhì)檢查法（二）

（四）pH值的測定（酸度的測定）

1.實(shí)訓(xùn)用儀器與試藥的準(zhǔn)備儀器：酸度計(jì)、玻璃電極、甘汞電極、分析天平、燒杯、玻棒、容量瓶及pH試紙。試藥：鄰苯二甲酸氫鉀、無水磷酸氫二鈉及磷酸二氫鉀。

2.標(biāo)準(zhǔn)緩沖液的制備苯二甲酸氫鉀標(biāo)準(zhǔn)緩沖液和磷酸鹽標(biāo)準(zhǔn)緩沖液的制備

3.供試液的制備稱取葡萄糖49.5～50.4mg，加水10ｍl溶解，即得。

單元實(shí)訓(xùn)二藥品中一般雜質(zhì)檢查法（二）

4.檢查方法（1）接通電源，將電源開關(guān)置開的位置。（2）在供試液規(guī)定值的左右各選一種標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液進(jìn)行定位與校對。（3）將電極和測溫傳感器沖洗干凈，用濾紙吸干，插入與頭孢氨芐pH值接近的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液中，將儀器選擇開關(guān)置“T”處，數(shù)字顯示值即為測溫傳感器所測溫度值，同時溫度值信號送入電路進(jìn)行運(yùn)算，溫度即能自動補(bǔ)償。

單元實(shí)訓(xùn)二藥品中一般雜質(zhì)檢查法（二）

（4）將選擇開關(guān)置于pH處，調(diào)“定位”調(diào)節(jié)器，使數(shù)字顯示值為標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液的pH值。（5）經(jīng)上述校正以后的定位調(diào)節(jié)器和斜率調(diào)節(jié)器不能再變動。取出電極，用水沖洗干凈，并用濾紙吸干，再插入被測溶液中，輕輕搖動溶液，使均勻后顯示的讀數(shù)即為溶液的值，反復(fù)測定兩次，取平均值。（6）測定完畢，斷開電源，收拾儀器。（五）數(shù)據(jù)處理與檢驗(yàn)報(bào)告按規(guī)定要求進(jìn)行數(shù)據(jù)處理并書寫檢驗(yàn)報(bào)告書。

單元實(shí)訓(xùn)二藥品中一般雜質(zhì)檢查法（二）

一.實(shí)訓(xùn)目標(biāo)通過本實(shí)訓(xùn)，要求掌握用目視比色法、薄層色譜法及紫外-可見分光光度法檢查特殊雜質(zhì)的方法及操作技能。二.實(shí)訓(xùn)資料（一）檢驗(yàn)藥品名稱：阿司匹林、鹽酸普魯卡因注射液及腎上腺素。（二）檢驗(yàn)項(xiàng)目阿司匹林中游離水楊酸的檢查，鹽酸普魯卡因注射液中對氨基苯甲酸的檢查，腎上腺素中酮體的檢查。單元實(shí)訓(xùn)三藥品中特殊雜質(zhì)檢查法

（三）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1.阿司匹林

【檢查】游離水楊酸取本品0.10g，加乙醇1ml溶解后，加冷水適量使成50ml，立即加新制的稀硫酸鐵銨溶液1ml，搖勻。

2.鹽酸普魯卡因注射液

【檢查】對氨基苯甲酸精密量取本品，照薄層色譜法試驗(yàn)。

3.腎上腺素

【檢查】酮體照紫外－可見分光光度法，在310nm的波長處測定，吸光度不得過0.05。單元實(shí)訓(xùn)三藥品中特殊雜質(zhì)檢查法

（四）檢查方法

1.目視比色法方法與一般雜質(zhì)如鐵鹽、重金屬檢查法相同。

2.薄層色譜法薄層色譜法，系將供試液點(diǎn)樣于薄層板上，經(jīng)展開、檢視所得的色譜圖，與適宜的對照品按同法所得的色譜圖作對比，用于藥品的鑒別或雜質(zhì)檢查的方法。

3.分光光度法取規(guī)定量的供試品，加水溶解使成10ml，于規(guī)定的波長310nm處測定吸光度，要求吸光度不超過規(guī)定值。單元實(shí)訓(xùn)三藥品中特殊雜質(zhì)檢查法

三.實(shí)訓(xùn)方案（一）實(shí)訓(xùn)形式試液等的制備分成8人一組，8個同學(xué)分工合作，制備量按8～10人次用量計(jì)算；其余操作由每個學(xué)生獨(dú)立完成。（二）實(shí)訓(xùn)程序

1.儀器準(zhǔn)備與清洗單元實(shí)訓(xùn)三藥品中特殊雜質(zhì)檢查法

確定儀器及規(guī)格洗凈，備用（紫外-可見分光光度計(jì)先預(yù)熱）2.試藥的準(zhǔn)備與試液、展開劑的制備單元實(shí)訓(xùn)三藥品中特殊雜質(zhì)檢查法

確定試藥及規(guī)格，確定實(shí)驗(yàn)用量按用量制備試液、展開劑裝瓶、貼上標(biāo)簽、備用

3.薄層板的制備按要求確定薄層板的規(guī)格、類型鋪板晾干、活化、備用供試液的制備備經(jīng)同樣方法處理比較供試液和對照液顏色深淺對照液的制備4.雜質(zhì)的檢查（1）阿司匹林中水楊酸的檢查

結(jié)果判斷（2）鹽酸普魯卡因中對氨基苯甲酸的檢查

（3）腎上腺素酮體的檢查單元實(shí)訓(xùn)三藥品中特殊雜質(zhì)檢查法

選擇制備好的薄層板點(diǎn)樣飽和、展開、涼干顯色、檢視結(jié)果判斷按要求制備供試液測定吸光度結(jié)果判斷儀器調(diào)試（三）實(shí)訓(xùn)時間具體實(shí)訓(xùn)時間安排可參考表2-3-1。單元實(shí)訓(xùn)三藥品中特殊雜質(zhì)檢查法

表2-3-1特殊雜質(zhì)檢查的實(shí)訓(xùn)時間安排實(shí)訓(xùn)內(nèi)容實(shí)訓(xùn)時間（分鐘）備注儀器準(zhǔn)備10備齊實(shí)訓(xùn)用玻璃儀器，除另有規(guī)定外，清洗干凈，備用試藥準(zhǔn)備及試液、展開劑制備20試藥由實(shí)訓(xùn)教師準(zhǔn)備，學(xué)生根據(jù)實(shí)訓(xùn)需要分組合作制備試液、展開劑薄層板的制備－預(yù)先制備，兩個人制備3塊薄層板，由實(shí)訓(xùn)教師負(fù)責(zé)活化、貯存?zhèn)溆冒⑺酒チ种杏坞x水楊酸的檢查70先完成鹽酸普魯卡因中對氨基苯甲酸檢查項(xiàng)下的點(diǎn)樣、飽和、展開過程，然后穿插做阿司匹林中水楊酸的檢查及腎上腺素酮體的檢查紫外-可見分光光度計(jì)應(yīng)先預(yù)熱鹽酸普魯卡因中對氨基苯甲酸的檢查腎上腺素中酮體的檢查100實(shí)訓(xùn)總時間

四.實(shí)訓(xùn)過程（一）阿司匹林中水楊酸的檢查

1.實(shí)訓(xùn)用儀器與試藥的準(zhǔn)備試藥：乙醇、鹽酸、硫酸鐵銨、冰醋酸及水楊酸。

2.實(shí)訓(xùn)用試液的制備硫酸鐵銨指示液：取硫酸鐵銨8g，加水100ml使溶解，即得。稀硫酸鐵銨溶液：取鹽酸液（9→100）1ml，加硫酸鐵銨指示液2ml后，再加水適量使成100ml，即得。單元實(shí)訓(xùn)三藥品中特殊雜質(zhì)檢查法

3.阿司匹林中水楊酸的檢查（1）供試液的制備：稱取阿司匹林0.1g于干燥的50ml比色管中，加乙醇1ml溶解后，加冷水適量即得。（2）對照液的制備：精密稱取水楊酸0.1g，加水溶解后，加冰醋酸1ml，搖勻，再加水使成1000ml。（3）于對照液與對照液中，立即加新制的稀硫酸鐵銨溶液1ml，搖勻，30ｓ內(nèi)比色。

4.結(jié)果判斷若供試液顏色淺于對照液顏色或持平，則判定檢品中游離水楊酸符合規(guī)定；否則不符合規(guī)定。單元實(shí)訓(xùn)三藥品中特殊雜質(zhì)檢查法

（二）鹽酸普魯卡因中對氨基苯甲酸的檢查

1.實(shí)訓(xùn)用儀器與試藥的準(zhǔn)備

2.實(shí)訓(xùn)用試液的制備及薄層板的制備（1）供試液：加乙醇稀釋使成每1ml中含鹽酸普魯卡因2.5mg的溶液。（2）對照液：用稀釋法制成每1ml中含30μg的溶液。（3）展開劑：精密量取28ml苯、2ml冰醋酸、2ml丙酮、8ml甲醇混勻，即得。（４）對二甲氨基苯甲醛溶液：稱取對二甲氨基苯甲醛2g，加乙醇100ml，攪拌使其溶解，加入冰醋酸5ml，混合均勻，即得。單元實(shí)訓(xùn)三藥品中特殊雜質(zhì)檢查法

3.操作方法（1）點(diǎn)樣、展開：吸取供試液和對照液各10μl，分別點(diǎn)于含有羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠Ｈ薄層板上，放入預(yù)先用苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14:1:1:4）為展開劑飽和過的層析缸中進(jìn)行展開。（2）顯色：待展開至10～15cm，取出薄層板涼干，用對二甲氨基苯甲醛溶液噴霧顯色。

4.結(jié)果判斷供試液如顯雜質(zhì)斑點(diǎn)，與對照液所顯的主斑點(diǎn)比較，不得更深。單元實(shí)訓(xùn)三藥品中特殊雜質(zhì)檢查法

（三）腎上腺素中酮體的檢查

1.實(shí)訓(xùn)用儀器與試藥的準(zhǔn)備儀器：紫外-可見分光光度計(jì)。試藥：鹽酸。

2.實(shí)訓(xùn)用試液的制備（1）鹽酸溶液（9→2000）：取鹽酸9ml鹽酸，加水稀釋至2000ml，搖勻即得。（2）供試液：取本品適量，加鹽酸溶液（9→2000）制成1ml中含2.0mg的溶液，即得。單元實(shí)訓(xùn)三藥品中特殊雜質(zhì)檢查法

3.操作方法（1）檢查儀器是否正常工作，開機(jī)預(yù)熱20分鐘。（2）檢查儀器波長的正確性和1cm石英吸收池的成套性。（3）用１cm石英吸收池，以水作為參比溶液，在310nm的波長處測定供試液的吸光度并記錄。

4.結(jié)果判斷供試液的吸光度小于或等于0.05，則判定檢品中酮體的限量符合規(guī)定，否則為不符合規(guī)定。單元實(shí)訓(xùn)三藥品中特殊雜質(zhì)檢查法

一.實(shí)訓(xùn)目標(biāo)通過本實(shí)訓(xùn)，要求掌握片劑的重量差異、崩解時限檢查的方法及操作技能。二.實(shí)訓(xùn)資料（一）檢驗(yàn)藥品名稱：對乙酰氨基酚片、維生素C片。（二）檢驗(yàn)項(xiàng)目對乙酰氨基酚片的重量差異，維生素C片的崩解時限。單元實(shí)訓(xùn)四重量差異和崩解時限檢查法

（四）檢查方法

1.片劑的重量差異檢查法片劑重量差異的檢查方法：取藥片20片，精密稱定總重量，計(jì)算平均片重，再分別準(zhǔn)確稱定各片的重量，計(jì)算每片片重與平均片重差異的百分率。

2.片劑的崩解時限檢查法崩解時限是指固體制劑在規(guī)定的介質(zhì)中，以規(guī)定的方法進(jìn)行檢查全部崩解溶散或成碎粒并通過篩網(wǎng)所需要時間的限度。檢查片劑的崩解時限。單元實(shí)訓(xùn)四重量差異和崩解時限檢查法

三.實(shí)訓(xùn)方案（一）實(shí)訓(xùn)形式重量差異檢查由每個學(xué)生獨(dú)立完成，崩解時限檢查分小組進(jìn)行，每小組4人。（二）實(shí)訓(xùn)程序

1.儀器準(zhǔn)備與清洗

2.試藥的準(zhǔn)備按要求準(zhǔn)備試藥。也可由學(xué)生隨機(jī)提供相關(guān)藥品作為檢品。單元實(shí)訓(xùn)四重量差異和崩解時限檢查法

確定儀器及規(guī)格洗凈，涼干、備用

3.重量差異的檢查

4.崩解時限的檢查單元實(shí)訓(xùn)四重量差異和崩解時限檢查法

按要求稱量供試品記錄稱量結(jié)果數(shù)據(jù)處理結(jié)果判斷儀器調(diào)試放入供試品，計(jì)時測定數(shù)據(jù)記錄與處理結(jié)果判斷（三）實(shí)訓(xùn)時間具體實(shí)訓(xùn)時間安排可參考表2-4-1。

表2-4-1重量差異和崩解時限檢查的實(shí)訓(xùn)時間安排單元實(shí)訓(xùn)四重量差異和崩解時限檢查法

實(shí)訓(xùn)內(nèi)容實(shí)訓(xùn)時間（分鐘）備注儀器準(zhǔn)備10儀器由實(shí)訓(xùn)教師準(zhǔn)備，學(xué)生應(yīng)在實(shí)訓(xùn)前檢查所需儀器狀態(tài)是否良好。崩解儀由實(shí)訓(xùn)教師提前調(diào)試和預(yù)熱片重差異的檢查15分組進(jìn)行，交換進(jìn)行崩解時限的檢查2045分鐘實(shí)訓(xùn)總時間四.實(shí)訓(xùn)過程（一）重量差異檢查法

1.實(shí)訓(xùn)用儀器與試藥的準(zhǔn)備儀器：分析天平（感量0.1mg）、扁形稱量瓶、鑷子及燒杯（100ml）。

2.檢查方法（1）取出空稱量瓶，精密稱定重量；再取供試品20片，置此稱量瓶中，精密稱定。（2）從已稱定總重量的20片供試品中，依次用鑷子取出1片，分別精密稱定重量，得各片重量。單元實(shí)訓(xùn)四重量差異和崩解時限檢查法

3.記錄與計(jì)算記錄每次稱量數(shù)據(jù)，求出平均片重，保留3位有效數(shù)字。按規(guī)定的重量差異限度，求出允許片重范圍，即：允許片重范圍＝±×重量差異限度。記錄每次稱量數(shù)據(jù)。遇有超出允許片重范圍并處于邊緣者，應(yīng)再與平均片重相比較，計(jì)算出該片的重量差異百分率，再跟據(jù)允許的重量差異百分率進(jìn)行判斷，避免受數(shù)值修約的影響。單元實(shí)訓(xùn)四重量差異和崩解時限檢查法

4.結(jié)果判斷（1）每片重量均未超出允許片重范圍（±×重量差異限度），或每片重量與平均片重相比較，均未超過重量差異限度；或超過重量差異限度的藥片不多于2片，且均未超過限度1倍；均判為符合規(guī)定。（2）每片重量與平均片重相比較，超過重量差異的藥片多于2片；或超過重量差異限度的藥片雖不多于2片，但其中1片超過限度的1倍；均判為不符合規(guī)定。單元實(shí)訓(xùn)四重量差異和崩解時限檢查法

（二）崩解時限檢查法

1.實(shí)訓(xùn)用儀器與試藥的準(zhǔn)備

2.檢查方法（１）取純化水裝入1000ml燒杯內(nèi)，通過水浴加熱，使燒杯內(nèi)的水溫維持在37±1℃。（2）調(diào)節(jié)燒杯內(nèi)液面高度使吊籃上升時篩網(wǎng)在水面下25mm處，支架上下移動的往返速度為每分鐘30～32次。（3）取維生素C片6片，分別置上述吊籃的玻璃管中，每管各加1片，然后將吊籃懸掛于金屬支架上，浸入燒杯中，啟動崩解儀進(jìn)行檢查。單元實(shí)訓(xùn)四重量差異和崩解時限檢查法

3.記錄記錄應(yīng)包括儀器型號、崩解或溶散時間及現(xiàn)象。

4.結(jié)果判斷（1）供試品6片，若每片均能在15分鐘內(nèi)溶散或崩解并通過篩網(wǎng)者，判為符合規(guī)定。（2）初試結(jié)果，不符合規(guī)定，另取6片復(fù)試，各片在15分鐘內(nèi)均能溶散或崩解并通過篩網(wǎng)者，仍判為符合規(guī)定。（3）復(fù)試結(jié)果，如有1片或1片以上不能通過篩網(wǎng)，即判為不符合規(guī)定。單元實(shí)訓(xùn)四重量差異和崩解時限檢查法

一.實(shí)訓(xùn)目標(biāo)通過本實(shí)訓(xùn)，要求掌握溶出度測定的方法及操作技能。二.實(shí)訓(xùn)資料（一）檢驗(yàn)藥品名稱：鹽酸異丙嗪片。（二）檢驗(yàn)項(xiàng)目鹽酸異丙嗪片的溶出度。（三）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

【檢查】溶出度照紫外-可見分光光度法，在249nm的波長處測定吸光度，計(jì)算出每片的溶出量，限度為標(biāo)示量的80％，應(yīng)符合規(guī)定。單元實(shí)訓(xùn)五溶出度測定法（四）檢查方法采用轉(zhuǎn)籃法。轉(zhuǎn)籃置于1000ml溶出杯中，溶出杯盛放溶出介質(zhì)。測定時，取經(jīng)脫氣處理的溶出介質(zhì)900ml，注入溶出杯中，加溫，使溶出介質(zhì)溫度保持在37℃±0.5℃，取供試品６片（粒、袋），分別投入轉(zhuǎn)籃中，將轉(zhuǎn)籃降至溶出杯中，按規(guī)定速度旋轉(zhuǎn)，計(jì)時，除另有規(guī)定外，至45分鐘時，在規(guī)定取樣點(diǎn)取樣，立即經(jīng)不大于0.8μm的微孔濾膜過濾，按各藥品項(xiàng)下的方法測定，計(jì)算每片（粒、袋）的溶出量。單元實(shí)訓(xùn)五溶出度測定法三.實(shí)訓(xùn)方案（一）實(shí)訓(xùn)形式分成4人一組進(jìn)行。（二）實(shí)訓(xùn)程序

1.儀器準(zhǔn)備與清洗單元實(shí)訓(xùn)五溶出度測定法確定儀器及規(guī)格、數(shù)量洗凈，涼干、備用

2.試藥的準(zhǔn)備與試液的制備

3.溶出度的測定單元實(shí)訓(xùn)五溶出度測定法確定試藥及規(guī)格，確定實(shí)驗(yàn)用量按用量制備試液作好試液制備記錄，貼上標(biāo)簽，備用儀器調(diào)試，加入溶出介質(zhì)放入供試品在規(guī)定時間取樣，測定吸光度數(shù)據(jù)記錄與處理結(jié)果判斷（三）實(shí)訓(xùn)時間具體實(shí)訓(xùn)時間安排可參考表2-5-1。

表2-5-1溶出度測定的實(shí)訓(xùn)時間安排單元實(shí)訓(xùn)五溶出度測定法實(shí)訓(xùn)內(nèi)容實(shí)訓(xùn)時間（分鐘）備

注儀器準(zhǔn)備、調(diào)試30

儀器由實(shí)訓(xùn)教師準(zhǔn)備，學(xué)生清洗儀器，備用。溶出度測定儀由實(shí)訓(xùn)教師提前調(diào)試和預(yù)熱

溶出過程60

按要求進(jìn)行吸光度的測定30按要求進(jìn)行120實(shí)訓(xùn)總時間

四.實(shí)訓(xùn)過程（一）實(shí)訓(xùn)用儀器與試藥的準(zhǔn)備儀器：ZRS-8G型智能溶出試驗(yàn)儀、轉(zhuǎn)藍(lán)、溶出杯、752型分光光度計(jì)及超聲波清洗儀等。試藥：鹽酸。（二）實(shí)訓(xùn)用試液的制備鹽酸溶液（9→1000）：取鹽酸9ml，加水稀釋至1000ml，即得。使用前應(yīng)脫氣處理，并預(yù)熱至37℃。單元實(shí)訓(xùn)五溶出度測定法（三）操作方法

1.籃桿與籃網(wǎng)的安裝檢查儀器水平及轉(zhuǎn)動軸的垂直度與偏心度儀器是否處于水平狀態(tài)；轉(zhuǎn)軸的垂直程度應(yīng)與溶出杯中心線相吻合，用直角三角板檢查轉(zhuǎn)動軸與溶出杯平面的垂直度；檢查轉(zhuǎn)籃底部距溶出杯的內(nèi)底部25mm±2mm。

2.溶出儀的調(diào)試將6個操作溶出杯安裝在溶出儀水浴中，在水浴中加水至離上沿約5cm，開啟控溫開關(guān)，調(diào)節(jié)水溫至37±0.5℃。單元實(shí)訓(xùn)五溶出度測定法

3.供試品的溶出將轉(zhuǎn)籃提出溶出杯，拔下轉(zhuǎn)籃，在每個籃內(nèi)各加入1片供試品，重新將轉(zhuǎn)籃裝到轉(zhuǎn)籃蓋上，緩緩放下，使轉(zhuǎn)籃降入操作溶出杯中。注意觀察轉(zhuǎn)籃底部與溶出介質(zhì)接觸時有無氣泡存在。在溶出杯上蓋好有機(jī)玻璃蓋，按下調(diào)速開關(guān)，立即開始計(jì)時。經(jīng)45分鐘時，在轉(zhuǎn)籃上端到溶出介質(zhì)液面中間，離操作溶出杯10cm處的取樣點(diǎn)取樣。用裝有針頭的注射器吸取溶液10ml，拔下針頭，接上裝有濾膜的濾器，使溶液經(jīng)0.8μm濾膜濾過，濾入干燥潔凈的溶出杯中，自取樣至濾過應(yīng)在30秒內(nèi)完成。單元實(shí)訓(xùn)五溶出度測定法

4.溶出量的測定精密量取濾液2.5ml，放入10ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。照紫外-可見分光光度法，在249nm的波長處測定吸光度。計(jì)算出每片的溶出量，限度為標(biāo)示量的80％。記錄應(yīng)包括儀器型號、檢測波長、轉(zhuǎn)速、溫度、每片的溶出量。初試不符合規(guī)定者，應(yīng)記錄不符合規(guī)定的片數(shù)及復(fù)試結(jié)果等。單元實(shí)訓(xùn)五溶出度測定法

6.結(jié)果判斷

6片中每片的溶出量，按標(biāo)示量計(jì)算，均應(yīng)不低于規(guī)定限度；或6片中僅有1～2片低于Q，但不低于Q-10％，且其平均溶出量不低于Q時，仍可判為符合規(guī)定。如6片中有1片低于Q-10％,但不低于Q-20％，且其平均溶出量不低于Q時，應(yīng)另取6片復(fù)試；初復(fù)試的12片(個)中僅有1～3片低于Q，其中僅有１片低于Q-10％,但不低于Q-20％，亦可判為符合規(guī)定。（四）數(shù)據(jù)處理與檢驗(yàn)報(bào)告按規(guī)定要求進(jìn)行數(shù)據(jù)處理并書寫檢驗(yàn)報(bào)告書。單元實(shí)訓(xùn)五溶出度測定法一.實(shí)訓(xùn)目標(biāo)通過本實(shí)訓(xùn)，要求掌握釋放度檢查的方法及操作技能。二.實(shí)訓(xùn)資料（一）檢驗(yàn)藥品名稱：雙氯芬酸鈉腸溶片（二）檢驗(yàn)項(xiàng)目雙氯芬酸鈉腸溶片的釋放度（三）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

【檢查】釋放度取本品，照釋放度測定法、測定。

單元實(shí)訓(xùn)六釋放度測定法

（四）檢查方法采用用于腸溶制劑的方法2進(jìn)行測定，即先以0.1mol/L的鹽酸為釋放介質(zhì)，按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的方法測定每片的“酸中釋放量”，再以磷酸鹽緩沖液（pH6.8）為釋放介質(zhì)，按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的方法測定每片的“緩沖液中釋放量”，最后按藥典附錄規(guī)定按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的方法的方法判斷釋放量是否符合規(guī)定。

單元實(shí)訓(xùn)六釋放度測定法

三.實(shí)訓(xùn)方案（一）實(shí)訓(xùn)形式分成4人一組進(jìn)行。（二）實(shí)訓(xùn)程序

1.儀器準(zhǔn)備與清洗

單元實(shí)訓(xùn)六釋放度測定法

確定儀器及規(guī)格、數(shù)量洗凈，涼干、備用

2.試藥的準(zhǔn)備與試液的制備

3.釋放度的測定單元實(shí)訓(xùn)五溶出度測定法確定試藥及規(guī)格，確定實(shí)驗(yàn)用量按用量制備試液作好試液制備記錄，貼上標(biāo)簽，備用儀器調(diào)試，加入溶出介質(zhì)放入供試品在規(guī)定時間取樣，測定吸光度數(shù)據(jù)記錄與處理結(jié)果判斷（三）實(shí)訓(xùn)時間具體實(shí)訓(xùn)時間安排可參考表2-6-1。

表2-6-1釋放度測定的實(shí)訓(xùn)時間安排

單元實(shí)訓(xùn)六釋放度測定法

實(shí)訓(xùn)內(nèi)容實(shí)訓(xùn)時間（分鐘）備注儀器準(zhǔn)備、調(diào)試、升溫40儀器由實(shí)訓(xùn)教師準(zhǔn)備和檢查。溶出度測定儀由實(shí)訓(xùn)教師調(diào)試和預(yù)熱

酸中釋放與取樣過程130

按要求進(jìn)行緩沖液中釋放與取樣過程50

按要求進(jìn)行吸光度的測定30按要求進(jìn)行250實(shí)訓(xùn)總時間四.實(shí)訓(xùn)過程（一）實(shí)訓(xùn)用儀器與試藥的準(zhǔn)備（二）實(shí)訓(xùn)用液的制備

1.試液的制備鹽酸溶液：取鹽酸9ml鹽酸，加水稀釋至1000ml，搖勻，即得。

2.緩沖液的制備磷酸鹽緩沖液：取0.2mol/L磷酸二氫鉀溶液250ｍl，加0.2mol/L氫氧化鈉溶液118ml，用水稀釋至1000ml，搖勻。

單元實(shí)訓(xùn)六釋放度測定法

（三）操作方法

1.籃桿與籃網(wǎng)的安裝檢查儀器水平及轉(zhuǎn)動軸的垂直度與偏心度儀器是否處于水平狀態(tài)；轉(zhuǎn)軸的垂直程度應(yīng)與容器中心線相吻合，用直角三角板檢查轉(zhuǎn)動軸與溶出杯平面的垂直度；檢查轉(zhuǎn)籃底部距溶出杯的內(nèi)底部25mm±2mm。

2.溶出儀的調(diào)試將6個操作溶出杯安裝在溶出儀水浴中，在水浴中加水至離上沿約5cm，開啟控溫開關(guān)，調(diào)節(jié)水溫至37±0.5℃。

單元實(shí)訓(xùn)六釋放度測定法

3.酸中釋放取6片分別投入轉(zhuǎn)藍(lán)內(nèi)，開始計(jì)時。經(jīng)2小時時，取溶液適量，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液（1）；

4.緩沖液中釋放立即將轉(zhuǎn)籃浸入預(yù)熱至37℃的磷酸鹽緩沖液（pH6.8）1000ml中，轉(zhuǎn)速不變，繼續(xù)依法操作，經(jīng)45分鐘時，取溶液適量，濾過，精密量取續(xù)濾液5ml，置l0ml量瓶中，用磷酸鹽緩沖液（pH6.8）稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液（2）。

單元實(shí)訓(xùn)六釋放度測定法

5.釋放量的測定（1）另取雙氯芬酸鈉對照品20mg，精密稱定，置100ml量瓶中，作為溶液A；精密量取溶液A2ml，加0.1mol／L鹽酸溶液稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。（2）另精密量取溶液A5ml，置100ml量瓶中，加磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液（2）的對照品溶液。（3）取供試品溶液與對照品溶液，照紫外-可見分光光度法，在276nm的波長處測定吸光度，并計(jì)算每片的酸中及緩沖液中釋放量。

單元實(shí)訓(xùn)六釋放度測定法

6.記錄記錄應(yīng)包括特殊測試條件，崩解時間及現(xiàn)象，對照液和供試液的吸光度。初試不符合規(guī)定者，應(yīng)記錄不符合規(guī)定的片數(shù)及現(xiàn)象、復(fù)試結(jié)果等。

7.結(jié)果判斷符合下列條件之一者，可判為符合規(guī)定：酸中釋放量：（1）６片中，每片釋放量均不大于標(biāo)示量的10%；（２）６片中，有1～2片大于10%，但其平均釋放量大于10%。

單元實(shí)訓(xùn)六釋放度測定法

緩沖液中釋放量：（1）6片中，每片釋放量按標(biāo)示量計(jì)算均不低于規(guī)定限度（Ｑ）；除另有規(guī)定外，Ｑ應(yīng)為標(biāo)示量的70%；（3）如6片中有1～２片低于規(guī)定限度（Ｑ），但不低于規(guī)定限度Ｑ-10%，且其平均釋放量不低于Ｑ；（三）數(shù)據(jù)處理與檢驗(yàn)報(bào)告按規(guī)定要求進(jìn)行數(shù)據(jù)處理并書寫檢驗(yàn)報(bào)告書。

單元實(shí)訓(xùn)六釋放度測定法

一.實(shí)訓(xùn)目標(biāo)二.實(shí)訓(xùn)資料（一）檢驗(yàn)藥品名稱：葡萄糖酸鈣口服液。（二）檢驗(yàn)項(xiàng)目檢查葡萄糖酸鈣口服液的微生物限度。（三）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

【檢查】其它應(yīng)符合口服溶液劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定。微生物限度照微生物限度檢查法檢查，應(yīng)符合規(guī)定。單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法（四）檢查方法微生物限度檢查法是檢查非規(guī)定滅菌制劑及其原、輔料受微生物污染程度的方法。三.實(shí)訓(xùn)方案（一）實(shí)訓(xùn)形式兩人一組，兩組合作制備培養(yǎng)基及稀釋液，其余操作各組獨(dú)立完成。（二）實(shí)訓(xùn)程序

1.儀器的準(zhǔn)備及清洗單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法確定儀器的種類、數(shù)量及規(guī)格洗凈、包扎、滅菌，備用

2.試液、稀釋液及培養(yǎng)基的制備

3.微生物限度檢查（1）細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)第一部分計(jì)數(shù)方法驗(yàn)證：可與供試品細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)同時進(jìn)行。單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法確定試藥及規(guī)格，確定實(shí)驗(yàn)用量按用量制備試液、稀釋液和培養(yǎng)基按要求分裝、包扎，貼標(biāo)簽，滅菌，備用培養(yǎng)驗(yàn)證用菌制備菌懸液試驗(yàn)組菌數(shù)菌液組菌數(shù)供試品對照組菌數(shù)釋液對照組菌數(shù)測定供試液的制備計(jì)算回收率驗(yàn)證結(jié)果判斷檢驗(yàn)方法確定

單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法數(shù)據(jù)處理混合平板的制備細(xì)菌、真菌的培養(yǎng)檢查結(jié)果觀察與計(jì)數(shù)與計(jì)數(shù)供試液的制備書寫檢驗(yàn)記錄單第二部分檢查法

（2）大腸埃希菌檢查第一部分方法的驗(yàn)證第二部分檢查法單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法培養(yǎng)驗(yàn)證用菌制備菌懸液試驗(yàn)組菌數(shù)陰性對照組菌數(shù)測定驗(yàn)證結(jié)果判斷檢驗(yàn)方法確定供試液的制備鏡檢及生化試驗(yàn)分離純化最終結(jié)果判斷書寫檢驗(yàn)記錄單增菌培養(yǎng)熒光觀察及靛基質(zhì)試驗(yàn)供試液的制備疑似檢查結(jié)果判斷（三）實(shí)訓(xùn)時間

1.細(xì)菌、真菌總數(shù)檢查具體實(shí)訓(xùn)時間安排可參考表2-7-1。單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法表2-7-1細(xì)菌、真菌總數(shù)檢查實(shí)訓(xùn)時間安排實(shí)訓(xùn)內(nèi)容實(shí)訓(xùn)時間（分鐘）備注計(jì)數(shù)方法驗(yàn)證不計(jì)整個過程時間跨度11天，由實(shí)訓(xùn)教師完成儀器的準(zhǔn)備40實(shí)訓(xùn)第一天完成，亦可提前完成儀器由實(shí)訓(xùn)教師準(zhǔn)備，學(xué)生按單清點(diǎn)，清洗晾干后需滅菌的儀器按要求包扎，貼標(biāo)簽，滅菌培養(yǎng)基及稀釋液的制備100實(shí)訓(xùn)第一天上午完成，可與儀器準(zhǔn)備同時進(jìn)行，中午安排滅菌。配好后按要求分裝，包扎，貼標(biāo)簽，滅菌（安排同上）供試液和混合平板制備100最好在實(shí)訓(xùn)第一天下午完成在無菌室中完成，嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作結(jié)果觀察與計(jì)數(shù)60細(xì)菌在第三天下午計(jì)數(shù)，需30分鐘；真菌在第四天下午計(jì)數(shù)，需30分鐘300實(shí)訓(xùn)總時間

2.大腸埃希菌檢查具體實(shí)訓(xùn)時間安排可參考表2-7-2。單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法表2-7-2大腸埃希菌檢查實(shí)訓(xùn)時間安排實(shí)訓(xùn)內(nèi)容實(shí)訓(xùn)時間（分鐘）備注方法的驗(yàn)證不計(jì)由實(shí)訓(xùn)教師完成儀器的準(zhǔn)備30實(shí)訓(xùn)第一天上午完成儀器由實(shí)訓(xùn)教師準(zhǔn)備，學(xué)生按單清點(diǎn)，清洗晾干后需滅菌的儀器按要求包扎，貼標(biāo)簽，滅菌培養(yǎng)基及稀釋液的制備60實(shí)訓(xùn)第一天上午完成，與儀器準(zhǔn)備同時進(jìn)行，中午安排滅菌。配好后按要求分裝，包扎，貼標(biāo)簽，滅菌陽性、陰性對照用菌液制備不計(jì)由實(shí)訓(xùn)教師完成供試液的制備及增菌培養(yǎng)基接種60可在實(shí)訓(xùn)第一天下午完成，亦可往后安排。在無菌室中完成，嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作MUG培養(yǎng)基接種陰性對照培養(yǎng)物劃線培養(yǎng)60在增菌培養(yǎng)24小時后進(jìn)行結(jié)果觀察及判斷40在MUG培養(yǎng)基培養(yǎng)24小時后進(jìn)行，報(bào)告結(jié)果或進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)，實(shí)訓(xùn)安排可到此結(jié)束250實(shí)訓(xùn)總時間

四.實(shí)訓(xùn)過程（一）細(xì)菌、霉菌及酵母菌檢查

1.實(shí)訓(xùn)用設(shè)備、儀器、試藥與其它物品準(zhǔn)備試藥：牛肉浸出粉、蛋白胨、磷酸氫二鈉、玫瑰紅鈉、瓊脂、蒸餾水、氫氧化鈉、鹽酸。驗(yàn)證用菌：大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌及黑曲霉。供試品：規(guī)格10％葡萄糖酸鈣口服液。單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法

2.實(shí)訓(xùn)用液、培養(yǎng)基的制備及儀器的包扎（1）試液的制備①氫氧化鈉溶液：取氫氧化鈉40g，加蒸餾水1000ml。②鹽酸：取密度為1.19g/cm3的濃鹽酸84ml，加蒸餾水至1000ml。（2）稀釋液及培養(yǎng)基的制備①pH7.0氯化鈉－蛋白胨緩沖液（稀釋液）：②營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基③玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基（3）其它物品包扎與準(zhǔn)備單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法

3.細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)檢查過程第一部分計(jì)數(shù)方法的驗(yàn)證（1）菌液制備：接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，置30～35℃培養(yǎng)18～24小時；接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁培養(yǎng)基，置23～28℃培養(yǎng)24～48小時。（2）供試液的制備：用10ml吸量管吸取供試品10ml，加至含無菌pH7.0氯化鈉－蛋白胨緩沖液90ml的錐形瓶中，搖勻,即為1:10供試液。單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法（3）驗(yàn)證試驗(yàn)：至少應(yīng)進(jìn)行3次獨(dú)立的平行試驗(yàn)，并分別計(jì)算各試驗(yàn)菌每次試驗(yàn)的回收率。（4）結(jié)果判定：在3次獨(dú)立的平行試驗(yàn)中，稀釋劑對照組的菌回收率均應(yīng)不低于70％。單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法第二部分檢查法常規(guī)平板法（1）供試液的制備（2）供試液的稀釋：取1:10供試液1ml，加入裝有9mlpH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液的試管中，混勻，即為1:100供試液，以次類推可制得1:1000供試液。（3）混合平板的制備：分別取以上兩個稀釋級供試液1ml，置無菌平皿中，分別注入15～20ml溫度不超過45℃的溶化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，凝固后分別置30～35℃及23～28℃恒溫培養(yǎng)箱倒置培養(yǎng)。單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法（4）陰性對照試驗(yàn)：取試驗(yàn)用的稀釋液1ml，置無菌平皿中，注入培養(yǎng)基，凝固，倒置培養(yǎng)。每種計(jì)數(shù)用的培養(yǎng)基各制備2個平板，均不得有菌生長。常規(guī)平板法操作，基本過程如圖2-7-1所示。（5）結(jié)果計(jì)數(shù)：細(xì)菌培養(yǎng)48小時，分別在24及48小時點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)，一般以48小時的菌落數(shù)報(bào)告；霉菌、酵母菌培養(yǎng)72小時，分別在48及72小時點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)，一般以72小時的菌落數(shù)報(bào)告。單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法圖2-7-1細(xì)菌、霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)的操作過程單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法各1ml9.0ml10-210-310-310-210-210-310-3

10-2對照對照對照對照倒置培養(yǎng)48h30～35℃營養(yǎng)瓊脂23～28℃玫瑰紅鈉瓊脂倒置培養(yǎng)72h1ml1ml90ml10ml供試品

10-2

9.0ml

9.0ml10-3

液稀釋10-1（6）菌落報(bào)告規(guī)則：宜選取細(xì)菌平均菌落在30～300之間，作為菌數(shù)報(bào)告的依據(jù)。①當(dāng)僅有1個稀釋級的菌落數(shù)符合上述規(guī)定，以該稀釋級的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)的值報(bào)告菌數(shù)。②當(dāng)同時有2個稀釋級的菌落數(shù)符合上述規(guī)定，視兩者比值而定：③若各稀釋級平均菌落數(shù)均小于30個，以最低稀釋級的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)的值報(bào)告菌數(shù)。單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法（二）大腸埃希菌檢查

1.實(shí)訓(xùn)用設(shè)備、儀器與試藥的準(zhǔn)備

2.實(shí)訓(xùn)用液、培養(yǎng)基的制備及儀器的包扎（1）試液的制備①靛基質(zhì)試液：取對二甲氨基苯甲醛5.0g，加入戊醇75ml，充分振搖，使完全溶解后，再取濃鹽酸25ml徐徐滴入，置冰箱保存，備用。

②曙紅鈉指示液：取曙紅鈉2.0g，加水使溶解成100ml。滅菌，備用。

③亞甲藍(lán)指示液：取亞甲藍(lán)0.5g，加水使溶解成100ml。滅菌，備用。單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法（2）稀釋液、培養(yǎng)基的制備：兩組合作，分工制備，分裝好后，平均分配，相互交換。①pH7.0氯化鈉－蛋白胨緩沖液（稀釋液）：按本實(shí)訓(xùn)“四.（一）、2.（2）①”方法制備300ml。②膽鹽乳糖培養(yǎng)基（BL增菌培養(yǎng)基）③4－甲基傘形酮葡糖苷酸（MUG）培養(yǎng)基④曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基（EMB）（3）其它物品包扎與準(zhǔn)備單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法

3.大腸埃希菌檢查過程第一部分方法的驗(yàn)證（1）菌液制備（2）供試液的制備（3）驗(yàn)證方法①陽性對照組②陰性菌對照組（4）結(jié)果判定：陰性菌對照組不得檢出陰性對照菌。若試驗(yàn)組檢出試驗(yàn)菌，按此供試液制備法和大腸埃希菌檢查法作該供試品的大腸埃希菌檢查。單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法第二部分檢查法常規(guī)法（1）供試液的制備（2）陰性對照試驗(yàn)：取稀釋液10ml加入BL增菌培養(yǎng)基，培養(yǎng)18～24小時，取出，用接種環(huán)取陰性對照培養(yǎng)物在EMB平板中劃線培養(yǎng)24小時，應(yīng)無菌生長。（3）陽性對照試驗(yàn)：取1:10供試液10ml和1ml含菌量10～100cfu的大腸埃希菌菌懸液加入增菌培養(yǎng)基，按以下大腸埃希菌檢查法檢查，作為陽性對照，應(yīng)為MUG陽性、靛基質(zhì)陽性，檢出大腸埃希菌。單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法（4）大腸埃希菌檢查①供試品增菌培養(yǎng)：取1:10供試液10ml接種于加入BL增菌培養(yǎng)基，培養(yǎng)18～24小時。②MUG培養(yǎng)：培養(yǎng)后沿管壁加靛基質(zhì)試液數(shù)滴，液面呈玫瑰紅色，為靛基質(zhì)陽性；呈試液本色，為靛基質(zhì)陰性。結(jié)果判斷：MUG陽性、靛基質(zhì)陰性或MUG陰性、靛基質(zhì)陽性，需進(jìn)一步做以下檢查。③分離培養(yǎng)：檢查有無疑似大腸埃希菌菌落（大腸埃希菌落形態(tài)特征見表2-7-3），若有，進(jìn)一步做以下試驗(yàn)。單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法表2-7-3大腸埃希菌菌落形態(tài)特征單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法培養(yǎng)基菌落形態(tài)曙紅亞甲基藍(lán)瓊脂（EMB）呈紫黑色、淺紫色、藍(lán)紫色或粉紅色，菌落中心呈深紫色或無明顯暗色中心，圓形，微突起，邊緣整齊，表面光滑，濕潤，常有金屬光澤麥康凱瓊脂（MacC）鮮桃紅色或微紅色，菌落中心呈深桃紅色，圓形，扁平，表面光滑，濕潤④純培養(yǎng)：用接種環(huán)挑取2～3個疑似大腸埃希菌菌落，分別接種于營養(yǎng)瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)18～24小時。⑤革蘭染色、鏡檢：將斜面培養(yǎng)物涂片，革蘭染色、鏡檢，若證明為革蘭氏陰性短桿菌者，繼續(xù)做生化反應(yīng)試驗(yàn)。供試品大腸埃希菌檢驗(yàn)程序如圖2-7-2所示。單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法圖2-7-2大腸埃希菌的檢驗(yàn)程序單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法供試液BL增菌培養(yǎng)液供試品報(bào)告疑似，進(jìn)一步試驗(yàn)10mlMUG培養(yǎng)基MUG陽性、靛基質(zhì)陰性MUG陽性、靛基質(zhì)陽性MUG陰性、靛基質(zhì)陰性MUG陰性、靛基質(zhì)陽性35～37℃5.24h0.2ml報(bào)告疑似菌落純培養(yǎng)MacC或EMB瓊脂平板革蘭染色、鏡檢乳糖發(fā)酵、IMViC試驗(yàn)35～37℃24～48h35～37℃18～24h35～37℃18～24h⑦結(jié)果判定：陰性對照試驗(yàn)呈陰性，陽性對照試驗(yàn)MUG陽性、靛基質(zhì)陽性，供試品MUG陽性、靛基質(zhì)陽性，報(bào)告1g或1ml供試品中檢出大腸埃希菌；供試品MUG陰性、靛基質(zhì)陰性，報(bào)告1g或1ml供試品中檢未出大腸埃希菌。供試品培養(yǎng)物檢查不符合以上結(jié)果判定中的任一項(xiàng)，報(bào)告1g或1ml供試品中未檢出大腸埃希菌。單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法（三）微生物限度檢查結(jié)果判斷

供試品檢出控制菌或其它致病菌時，按一次檢出結(jié)果為準(zhǔn)，不再復(fù)試。供試品的細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母菌數(shù)其中任何一項(xiàng)不符合該品種項(xiàng)下的規(guī)定，應(yīng)從同一批樣品中隨機(jī)抽樣，獨(dú)立復(fù)試兩次，以3次結(jié)果的平均值報(bào)告菌數(shù)。單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法若供試品的細(xì)菌數(shù)、霉菌和酵母數(shù)及控制菌三項(xiàng)檢驗(yàn)結(jié)果均符合該品種項(xiàng)下的規(guī)定，判供試品符合規(guī)定；若其中任何一項(xiàng)不符合該品種項(xiàng)下的規(guī)定，判供試品不符合規(guī)定。（四）微生物限度檢查記錄及報(bào)告按規(guī)定報(bào)告細(xì)菌、真菌總數(shù)及大腸埃希菌檢查結(jié)果，填寫微生物限度檢查記錄及檢驗(yàn)報(bào)告書。單元實(shí)訓(xùn)七微生物限度檢查法

一.實(shí)訓(xùn)目標(biāo)通過本實(shí)訓(xùn)，要求掌握無菌操作技術(shù)，掌握直接接種法進(jìn)行注射液的無菌檢查的方法及操作技能。二.實(shí)訓(xùn)資料（一）檢驗(yàn)藥品名稱：葡萄糖酸鈣注射液。（二）檢驗(yàn)項(xiàng)目葡萄糖酸鈣注射液的無菌檢查。（三）質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖酸鈣注射液

【檢查】其它應(yīng)符合注射劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定。（四）檢查方法采用直接接種法。

單元實(shí)訓(xùn)八無菌檢查法

三.實(shí)訓(xùn)方案（一）實(shí)訓(xùn)形式兩人一組，培養(yǎng)基制備兩組合作，其余操作各組獨(dú)立完成。（二）實(shí)訓(xùn)程序

1.儀器的準(zhǔn)備及清洗

2.稀釋液和培養(yǎng)基的制備

單元實(shí)訓(xùn)八無菌檢查法

確定儀器的種類、數(shù)量及規(guī)格洗凈、包扎、滅菌，備用確定試藥及規(guī)格，確定實(shí)驗(yàn)用量按用量制備實(shí)驗(yàn)用液、稀釋液及培養(yǎng)基按要求分裝、包扎，做記號，滅菌，備用

3.方法驗(yàn)證方法驗(yàn)證可與供試品的無菌檢查同時進(jìn)行。

4.供試品的無菌檢查

單元實(shí)訓(xùn)八無菌檢查法

陽性對照菌液的制備培養(yǎng)基接種書寫檢驗(yàn)記錄細(xì)菌、真菌的培養(yǎng)檢查結(jié)果觀察及判斷培養(yǎng)驗(yàn)證用菌制備菌懸液驗(yàn)證結(jié)果判斷檢驗(yàn)方法確定直接接種法驗(yàn)證試驗(yàn)操作（三）實(shí)訓(xùn)時間具體實(shí)訓(xùn)時間安排可參考表2-8-1。

表2-8-1無菌檢查實(shí)訓(xùn)時間安排

單元實(shí)訓(xùn)八無菌檢查法

實(shí)訓(xùn)內(nèi)容實(shí)訓(xùn)時間（分鐘）備注方法的驗(yàn)證不計(jì)整個過程時間跨度6天，由實(shí)訓(xùn)教師完成陽性對照菌液制備不計(jì)由實(shí)訓(xùn)教師完成儀器的準(zhǔn)備15實(shí)訓(xùn)第一天完成儀器由實(shí)訓(xùn)教師準(zhǔn)備，培養(yǎng)基的制備30實(shí)訓(xùn)第一天上午完成，與儀器準(zhǔn)備同時進(jìn)行，中午安排滅菌配好后按要求分裝，包扎，做記號，滅菌無菌檢查操作45可在實(shí)訓(xùn)第一天下午完成，亦可往后安排。在無菌室中完成，嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作結(jié)果觀察及判斷45每天記錄生長情況，以培養(yǎng)第14天生長情況報(bào)告135實(shí)訓(xùn)總時間四.實(shí)訓(xùn)過程（一）設(shè)備、儀器、試藥與其它物品的準(zhǔn)備（二）實(shí)訓(xùn)用液、培養(yǎng)基的制備及儀器包扎

1.試液的制備（1）碘酒溶液：取碘片20g、碘化鉀8g、乙醇500ml，加蒸餾水至1000ml，溶解即得。（2）75％乙醇溶液：取95％乙醇78ml，加水稀釋至100ml。（3）1.0mol/L氫氧化鈉溶液：取氫氧化鈉40g，加蒸餾水1000ml溶解即得。（4）1.0mol/L鹽酸：取密度為1.19g/cm3的濃鹽酸84ml，加蒸餾水至1000ml，混勻即得。

單元實(shí)訓(xùn)八無菌檢查法

2.培養(yǎng)基的制備（1）硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基（2）改良馬丁培養(yǎng)基

3.儀器包扎（三）方法驗(yàn)證

1.菌液制備按銅綠假單胞菌菌液制備同金黃色葡萄球菌，生孢梭菌接種于硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基，分別制備金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌、白色念珠菌，每毫升含菌（孢子）數(shù)小于100cfu。

單元實(shí)訓(xùn)八無菌檢查法

2.驗(yàn)證試驗(yàn)取適宜裝量的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基8管分別加入上述金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、生孢梭菌菌液1ml各兩管；取適宜裝量的改良馬丁培養(yǎng)基4管，分別加入白色念珠菌、黑曲霉菌液1ml各兩管。

3.結(jié)果判定與陽性對照比較，如含供試品各容器中的試驗(yàn)菌均生長良好，可按此檢查法和檢查條件進(jìn)行供試品的無菌檢查。如含供試品的任一容器中微生物生長微弱、緩慢或不生長，則供試品的該檢驗(yàn)量在該檢驗(yàn)條件下有抑菌作用，可采用增加培養(yǎng)基的用量。

單元實(shí)訓(xùn)八無菌檢查法

（四）供試品的檢查過程

1.菌液制備制備每毫升含菌數(shù)小于100cfu的金黃色葡萄球菌菌懸液，用作陽性對照。

2.供試品加入和培養(yǎng)取供試品11支，用砂輪在安瓿頸部劃一環(huán)行線，再用75％酒精棉球?qū)⒌饩撇羶?，按?-8-2中接種的要求分別接種不同