病原性球菌與腸道桿菌一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握葡萄球菌、鏈球菌的形態(tài)特征和染色特性。2.熟悉腸道桿菌培養(yǎng)特征、生化反應(yīng)及動(dòng)力學(xué)等特性。3.了解三種葡萄球菌產(chǎn)生的色素。4.了解甲、乙型溶血型鏈球菌在血瓊脂平板上的菌落特點(diǎn)及溶血性。5.了解大腸埃希菌、痢疾志賀菌、傷寒沙門菌在SS平板上菌落特點(diǎn)。二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1.示教觀察葡萄球菌、鏈球菌的形態(tài)2.觀察腸道桿菌在SS培養(yǎng)基的生長(zhǎng)情況及菌落特征，以及腸道桿菌的雙糖發(fā)酵3.化膿性球菌的鑒定⑴三種葡萄球菌的色素觀察⑵甲、乙型鏈球菌的溶血現(xiàn)象觀察4.甘露醇發(fā)酵實(shí)驗(yàn)5.血漿凝固酶實(shí)驗(yàn)1.葡萄球菌、鏈球菌的培養(yǎng)物示教

普通瓊脂平板血平板

菌落形狀色素溶血性

金葡圓形凸起光滑中等大小金黃色+檸葡同上檸檬色-白葡同上白色-表1葡萄球菌分類按照色素不同金黃色葡萄球菌（金黃色）表皮葡萄球菌（白色）腐生葡萄球菌（檸檬色）三種葡萄球菌的主要性狀性狀金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌菌落色素

金黃色

白色白色或檸檬色血漿凝固酶+--甘露醇+--溶血性

β溶血--SPA+--耐熱核酸酶+--致病性

強(qiáng)

弱

無(wú)

血平板甲型鏈球菌針尖小菌落、草綠色狹窄溶血環(huán)

(α溶血即不完全溶血）乙型鏈球菌針尖小菌落、透明寬大溶血環(huán)（β溶血即完全溶血）

巧克力血平板腦膜炎雙球菌菌落透明似露滴狀表2表3草綠色鏈球菌不溶血鏈球菌溶血性鏈球菌多為條件致病菌致病力強(qiáng)無(wú)致病性α溶血(狹窄草綠色溶血環(huán)

)β溶血（寬大透明溶血環(huán)）乙型溶血性鏈球菌溶血環(huán)大腸桿菌（非致病菌）在SS培養(yǎng)基上可形成相對(duì)較大，不透明，紅色的菌落。傷寒桿菌在SS培養(yǎng)基上形成相對(duì)較小，半透明，無(wú)色或淡黃色的菌落，產(chǎn)生硫化氫的細(xì)菌菌落中心呈黑色。痢疾桿菌在SS培養(yǎng)基上形成的菌落與傷寒桿菌菌落相似。SS平板：為強(qiáng)選擇性培養(yǎng)基，內(nèi)含膽鹽、枸櫞酸鈉和煌綠，可抑制大腸桿菌和非腸道桿菌的生長(zhǎng)；還含有乳糖和中性紅，一般腸道致病菌不分解乳糖，但分解蛋白胨，產(chǎn)生堿性物質(zhì)，故菌落呈淡黃色。大腸桿菌發(fā)酵乳糖，產(chǎn)酸使指示劑變紅，故菌落呈紅色。大腸桿菌痢疾桿菌雙糖鐵培養(yǎng)基含葡萄糖、乳糖、硫酸亞鐵。指示劑為酚紅。葡萄糖與乳糖的比例為1:10。若細(xì)菌分葡萄糖、乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，使斜面與底層均呈黃色，且有氣泡。（大腸桿菌)若細(xì)菌只分解葡萄糖而不分解乳糖,分解葡萄糖后所生成的少量酸可使底層pH降低；而上層少量酸因接觸空氣而氧化，并因細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖利用含氮物質(zhì)生成堿性化合物，呈紅色。（傷寒桿菌、痢疾桿菌）若細(xì)菌產(chǎn)生硫化氫時(shí)與培養(yǎng)基中硫酸亞鐵作用,形成黑色的硫化鐵呈黑色。（傷寒桿菌）配合半固體培養(yǎng)基可觀察腸道桿菌中的細(xì)菌動(dòng)力。

Salmonella-Shigella

Mediun主要成分基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)乳糖指示劑抑制劑分解乳糖不分解乳糖產(chǎn)酸PH指示劑變紅色紅色大菌落大腸桿菌等無(wú)明顯變化無(wú)色半透明小菌落志賀菌等甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)（示教）分別取金葡、白葡菌落接種到甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基中，置37℃培養(yǎng)箱，培養(yǎng)24h。金黃色葡萄球菌應(yīng)能發(fā)酵甘露醇產(chǎn)酸。血漿凝固酶試驗(yàn)--玻片法（操作，1人/組）原理：能產(chǎn)生血漿凝固酶的菌株傾入機(jī)體后使血漿中的纖維蛋白原變成纖維蛋白導(dǎo)致血漿凝固（致病性葡萄球菌產(chǎn)生血漿凝固酶）方法：兔血漿兔血漿

12金葡白葡++凝集顆粒（+）不凝集（-）4、血漿凝固酶試驗(yàn)（試管法）

金葡菌白葡菌

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