ICS65.020.30B44中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T14926.64—2001實！驗動物猴痘病毒檢測方法Laboratoryanimal--MethodforexaminationofSimianPoxvirus（SPv)2001-08-29發(fā)布2002-05-01實施中華民共和發(fā)布國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局

GB/T14926.64-2001前本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了猴痘病毒的檢測方法。藤痘病毒屬人獸共思病原.猶猴是猴痘病毒的自然宿主，猴痘病毒是普通級猴和SPF猴的必檢項日·因此增加該病毒的檢測方法本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國科學(xué)技術(shù)部提出并歸口本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：中國實驗動物學(xué)會。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：田克恭。

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)金實物GB/T14926.64-2001猴痘病毒檢測方法Laboratoryanimal-MethodforexaminationofSimianPoxvirus（SPV）本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了猴痘病毒(SPV)的檢測方法、試劑等本標(biāo)準(zhǔn)適用于猴SPV的檢測2引用標(biāo)準(zhǔn)下列標(biāo)準(zhǔn)所包含的條文·通過在本標(biāo)準(zhǔn)中引用而構(gòu)成為本標(biāo)準(zhǔn)的條文。本標(biāo)準(zhǔn)出版時，所示版本均為有效。所有標(biāo)準(zhǔn)都會被修訂，使用本標(biāo)準(zhǔn)的各方應(yīng)探討使用下列標(biāo)準(zhǔn)最新版本的可能性。GB/T14926.50—2001實驗動物酶聯(lián)免疫吸附試驗GB/T14926.51-2001實驗動物免疫酶試驗3原理痘苗病毒與SPV有密切的抗原關(guān)系。根據(jù)免疫學(xué)原理,采用痘苗病毒抗原檢測猴血清中SPV抗體主要試劑和器材4.1試劑4.1.1ELISA抗原4.1.1.1特異性抗原：在生物安全柜內(nèi),用痘苗病毒感染BHK21細(xì)胞,接種2～3d后，當(dāng)病變達(dá)十+～十十十時收獲。凍融三次或超聲波處理后，低速離心去除細(xì)胞碎片，上清液再經(jīng)超速離心濃縮后制成EIISA抗原4.1.1.2正?？乖築HK21細(xì)胞凍融破碎后.經(jīng)低速離心去除細(xì)胞碎片而獲得的上清液。4.1.2抗原片痘苗病毒接種BHK21細(xì)胞，接種后1～2d.病變達(dá)十十時,在生物安全柜內(nèi)，用胰酶消化分散,PBS洗滌，涂片，室溫干燥的同時,在紫外線下20cm處照射30min,冷丙酮固定10min,－20℃保存。4.1.3陽性血清痘苗病毒抗原免疫的猴血清、4.1.4陰性血清無SPV、痘苗病毒感染的猴血清。4.