如何通過實(shí)驗(yàn)室技術(shù)

鑒定臨床有意義的血型抗體，

確保安全輸血

莫秋紅南寧輸血醫(yī)學(xué)研究所

臨床有意義的抗體臨床有意義的抗體：使紅細(xì)胞壽命縮短，短時(shí)間內(nèi)大量紅細(xì)胞破壞，引起病人發(fā)生不良反應(yīng)，如溶血性輸血反應(yīng)、新生兒溶血病。在37℃中和間接抗球蛋白試驗(yàn)（IAT）中有反應(yīng)。南寧輸血醫(yī)學(xué)研究臨床有意義的抗體自身抗體—溫自身抗體型、冷自身抗體型同種抗體—ABO、Rh等抗體南寧輸血醫(yī)學(xué)研究臨床有意義的血型抗體英國血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)委員會BritishCommitteeforStandardsinHaematology

BCSHSecretary,BritishSocietyforHaematology,Milkins.etal,2012,Guidelinesforpre-transfusioncompatibilityproceduresinbloodtransfusionlaboratories南寧輸血醫(yī)學(xué)研究臨床有意義的血型抗體通常認(rèn)為在25℃以下不反應(yīng)的抗體，是沒有臨床意義的抗體，如抗-P1是常見冷抗體,但也有極少抗-P1在37℃反應(yīng),并引起嚴(yán)重的急性或遲發(fā)性輸血反應(yīng)?？贵w沒有臨床意義是相對的。南寧輸血醫(yī)學(xué)研究易產(chǎn)生同種抗體的病人反復(fù)輸血的病人，如地中海貧血，再生障礙性貧血，陣發(fā)性夜間血紅蛋白尿（PNH）,骨髓增生異常綜合癥（MDS）等。具有妊娠史的病人。南寧輸血醫(yī)學(xué)研究抗體篩查和抗體鑒定目的原理試劑和材料實(shí)驗(yàn)方法結(jié)果的解釋抗原鑒定南寧輸血醫(yī)學(xué)研究抗體篩查和抗體鑒定目的發(fā)現(xiàn)有臨床意義的血型抗體，為患者提供相應(yīng)抗原陰性的血液，減少或避免同種抗體引起的輸血反應(yīng)。南寧輸血醫(yī)學(xué)研究抗體篩查和抗體鑒定原理運(yùn)用已知血型抗原的O型紅細(xì)胞,檢測病人血清中的未知抗體。南寧輸血醫(yī)學(xué)研究試劑和材料

篩選細(xì)胞通常由2或3個(gè)人份O型紅細(xì)胞組成，要求DAT陰性，單人份/瓶，2-5%的紅細(xì)胞懸，配有反應(yīng)格局表。

譜細(xì)胞（Panelredcell)是由不少于8人份O型紅細(xì)胞配套組成的紅細(xì)胞試劑，要求DAT陰性，單人份/瓶，2-5%的紅細(xì)胞懸液,配有反應(yīng)格局表。南寧輸血醫(yī)學(xué)研究試劑和材料篩選細(xì)胞和譜細(xì)胞包含抗原要求：1,8-16種不同常見抗原：D,C,c,E,e,K,k,Fya,Fyb,Jka,Jkb,M,N,S,s,P1,Lea,Leb2,至少含有一個(gè)純合子表達(dá)的抗原：Fya,Fyb,Jka,Jkb,S,s,3,Dia,Dib南寧輸血醫(yī)學(xué)研究試劑和材料鹽水、白蛋白、低離子介質(zhì)（LISS）、酶、聚乙烯乙二醇（PEG）、聚凝胺（Polybrene）、抗球蛋白等試劑和微柱凝膠卡等，可按抗體的血清學(xué)特征和實(shí)驗(yàn)的具體條件選擇。南寧輸血醫(yī)學(xué)研究實(shí)驗(yàn)方法試管技術(shù)（鹽水、白蛋白、Liss、酶、和PEG、抗球蛋白、凝聚胺）微柱凝膠技術(shù)Solid-phasesystems(SP)固相凝集技術(shù)Erythroctye-magnetizedtechnology(EMT)紅細(xì)胞磁化技術(shù)南寧輸血醫(yī)學(xué)研究實(shí)驗(yàn)方法的比較微柱凝膠技術(shù)，靈敏度高，優(yōu)于試管的IAT，不用洗滌細(xì)胞，操作簡單，可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化；但是對于假陽性和非臨床意義的抗體檢測率也高，并且價(jià)格昂貴。試管IAT技術(shù)的特異性最好(Weisbachetal.,2006)，并且價(jià)格便宜；缺點(diǎn)是操作繁瑣，耗時(shí)長。南寧輸血醫(yī)學(xué)研究微柱凝膠技術(shù)南寧輸血醫(yī)學(xué)研究實(shí)驗(yàn)方法的比較58個(gè)AABB免疫血液學(xué)參比實(shí)驗(yàn)室常用的主要的方法中，49個(gè)實(shí)驗(yàn)室用試管法，7個(gè)用凝膠法，2個(gè)用固相法。對于參比實(shí)驗(yàn)室，試管凝集法是檢測臨床有意義的抗體首選的方法。利用多種實(shí)驗(yàn)技術(shù)，相互補(bǔ)充。

（Haywood.etal.2011.Determinationofoptimalmethodforantibodyidentificatoninareferencelaboratory）南寧輸血醫(yī)學(xué)研究結(jié)果的解釋

陰性排除法,通過查看無反應(yīng)的紅細(xì)胞的抗原譜，可排除一些特異性抗體，同時(shí)可以估計(jì)有可能存在的抗體,以防有臨床意義的抗體漏檢，因?yàn)橐粋€(gè)陽性反應(yīng)格局可能是兩種或多種抗體共同存在的格局。南寧輸血醫(yī)學(xué)研究抗原鑒定病人血清中檢測出一種抗體或多種抗體，紅細(xì)胞上應(yīng)該不攜帶相應(yīng)的抗原。如病人血清中含有抗-M，紅細(xì)胞上應(yīng)不帶有M抗原。用血型結(jié)果，可排除一些抗體,并核對抗體鑒定的結(jié)果。南寧輸血醫(yī)學(xué)研究流程抗體篩查抗體篩查抗體鑒定抗原鑒定抗體特異性陽性陰性排除明確臨床意義有相應(yīng)抗原陰性的血液判斷南寧輸血醫(yī)學(xué)研究案例1病人血型：CCDEe獻(xiàn)血者血型ccDEE,或ccDEe南寧輸血醫(yī)學(xué)研究抗體篩查的假陰性假陰性：交叉配血不合或發(fā)生溶血性輸血反應(yīng)，抗體篩查的結(jié)果為陰性。南寧輸血醫(yī)學(xué)研究假陰性原因1，人員操作過程、記錄錯(cuò)誤、標(biāo)本錯(cuò)誤；2，低頻抗原，紅細(xì)胞不含有某些抗原；3，陳舊，抗原性減弱；4，弱抗體，如抗-Jka，(Jka+Jkb-)細(xì)胞w+，(Jka+Jkb+)細(xì)胞，無反應(yīng)；5，補(bǔ)體抗體，需要新鮮的血清；6，實(shí)驗(yàn)方法的靈感度不夠高。南寧輸血醫(yī)學(xué)研究復(fù)雜的反應(yīng)格局（1）1,所有的細(xì)胞都凝集，強(qiáng)弱一致原因:自身免疫性抗體；針對高頻抗原的抗體或抗-HI；實(shí)驗(yàn)方法的特異性低（如）LISS、PEG、酶的非特異性抗體。南寧輸血醫(yī)學(xué)研究解決方法（1）1,所有的細(xì)胞都凝集，強(qiáng)弱一致方法:自身對照；自身和DAT陰性，可能是高頻抗原的抗體，如抗-HI，常見于非O型的病人，排除方法：血漿與病人血型相同的細(xì)胞不反應(yīng)或弱反應(yīng)（A型、B型反定型細(xì)胞）；非LISS、PEG、酶的IAT實(shí)驗(yàn)方法。南寧輸血醫(yī)學(xué)研究復(fù)雜的反應(yīng)格局（2）2,反應(yīng)格局不符合任何一個(gè)單一抗體的格局，凝集強(qiáng)弱不一原因1，2種或以上的混合抗體；2，抗原強(qiáng)弱不一，純合子和雜合子；3，細(xì)胞過于陳舊，抗原減弱；4，實(shí)驗(yàn)方法的靈敏度不高。南寧輸血醫(yī)學(xué)研究解決方法（2）

2,反應(yīng)格局不符合任何一個(gè)單一抗體的格局，強(qiáng)弱不一樣方法1，選擇某一抗體的抗原陰性，其他抗體的抗原陽性的譜細(xì)胞來排除其他抗體；2，多個(gè)血型系統(tǒng)的抗原鑒定,排除一些抗體；3，