實(shí)驗(yàn)三線粒體和液泡系的_第1頁
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實(shí)驗(yàn)三線粒體和液泡系的第一頁,共十五頁,2022年,8月28日二實(shí)驗(yàn)原理活體染色是指對生活有機(jī)體的細(xì)胞或組織能著色但又無毒的一種染色方法?;铙w染色可用來研究生活狀態(tài)下的細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理、病理狀態(tài)。根據(jù)染色劑性質(zhì)和染色方法不同,分為體內(nèi)活染和體外活染。第二頁,共十五頁,2022年,8月28日活體染色之所以能固定、堆積在細(xì)胞內(nèi)某些特殊的部分,主要是染料的“電化學(xué)”特性起重要作用。堿性燃料的膠粒表面帶陽離子,酸性染料的膠粒表面帶有陰離子,而被染的部分本身也是具有陰離子或陽離子,這樣,他們彼此就發(fā)生了吸引作用。但不是任何染料都可以作為活體染色劑之用,應(yīng)選擇那些對細(xì)胞無毒性或毒性極小的染料,而且總要配成稀淡的溶液來使用。一般是以堿性染料最為適用,可能因?yàn)樗哂腥芙庠陬愔|(zhì)的特性,易于被細(xì)胞吸收,JanusgreenB和中性紅兩種堿性染料是活體染色劑中最重要的染料,對于線粒體和液泡系的染色各有專一性。第三頁,共十五頁,2022年,8月28日詹納斯綠B可專一性地對對線粒體進(jìn)行活染,這是由于線粒體內(nèi)的細(xì)胞色素氧化酶系的作用,使染料始終保持氧化狀態(tài)(即有色狀態(tài)),呈藍(lán)綠色。中性紅對液泡系的染色具有專一性,將活細(xì)胞中的液泡系染成紅色。第四頁,共十五頁,2022年,8月28日三實(shí)驗(yàn)用品1.器材:顯微鏡、恒溫水浴鍋、、剪刀、鑷子、解剖刀、載玻片、蓋玻片、吸管、牙簽、吸水紙2.試劑:Ringer液、1/5000詹納斯綠B、1/3000中性紅第五頁,共十五頁,2022年,8月28日3.材料:人口腔上皮細(xì)胞洋蔥鱗莖內(nèi)表皮細(xì)胞小麥或黃豆幼根根尖第六頁,共十五頁,2022年,8月28日四實(shí)驗(yàn)方法一線粒體的超活染色與觀察詹納斯綠B能專一對線粒體進(jìn)行超活染色,呈藍(lán)綠色。第七頁,共十五頁,2022年,8月28日1人口腔粘膜上皮細(xì)胞線粒體的超活染色觀察

載玻片→37℃水浴鍋的金屬板→滴兩滴詹納斯綠B染液牙簽→從口腔粘膜刮取上皮細(xì)胞→放入載玻片染液→染色10-15分鐘→蓋上蓋玻片→觀察低倍鏡→平展的口腔上皮細(xì)胞→高倍鏡→顆?;蚨贪魻罹€粒體第八頁,共十五頁,2022年,8月28日第九頁,共十五頁,2022年,8月28日洋蔥鱗莖表皮細(xì)胞線粒體的

超活染色載玻片→滴一滴詹納斯綠B染液→撕取一小片洋蔥鱗莖內(nèi)表皮→染色10-15分鐘吸去染液→加一滴Ringer液→蓋上蓋玻片→觀察第十頁,共十五頁,2022年,8月28日第十一頁,共十五頁,2022年,8月28日二液泡系的超活染色與觀察中性紅對液泡系的染色具有專一性,將活細(xì)胞中的液泡系染成紅色。第十二頁,共十五頁,2022年,8月28日小麥液泡系的超活染色與觀察小麥根尖細(xì)胞液泡系的中性紅染色觀察雙面刀片→小麥或黃豆幼苗根尖→切一縱切面→中性紅染色5-10分鐘吸去染液→加一滴Ringer液→蓋上蓋玻片→鑷子輕輕下壓蓋玻片→觀察第十三頁,共十五頁,2022年,8月28日第十四頁,共十五頁,2022年,8月28日

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