一、目的建立培養(yǎng)基模擬灌裝驗證的管理規(guī)程，確保培養(yǎng)基模擬灌裝驗證符合生產(chǎn)工藝及GMP要求。二、適用范圍適用于制劑車間生產(chǎn)的產(chǎn)品需要培養(yǎng)基模擬灌裝驗證的整個工藝過程，包括從部件、材料的滅菌準備，一直到完成灌裝和容器密封的整個過程。三、責任者制劑車間、生產(chǎn)部、公用事業(yè)部、質(zhì)量控制部、物流部、質(zhì)量保證部及驗證部遵照執(zhí)行。四、縮寫與定義.最差條件(worstcase)在SOP范圍內(nèi)(或超出)，由工藝參數(shù)的上、下限和相關因素組成的一個或一系列條件。與理想條件相比時，最差條件使產(chǎn)品或者生產(chǎn)工藝失敗的幾率為最大，這樣的條件不一定導致產(chǎn)品或生產(chǎn)工藝的失敗。.干預(Intervention)操作人員在無菌操作區(qū)域內(nèi)的操作活動。.正常干預(InherentInterventions)在無菌工藝灌裝過程中發(fā)生的正常的在計劃中的活動(例如，設備安裝、裝量調(diào)節(jié)、膠塞的再補給、灌裝容器的再補給、環(huán)境監(jiān)測、取樣等等)。.糾正干預(CorrectiveInterventions)在無菌工藝灌裝過程中的糾正或調(diào)整的活動，其不屬于計劃性。(例如，灌裝容器的破損、倒瓶、掉塞、更換灌裝針、灌裝設備維修)五、健康、安全和環(huán)境無六、程序驗證小組職責：驗證部負責編制培養(yǎng)基模擬灌裝驗證管理規(guī)程。協(xié)助起草并審核培養(yǎng)基模擬灌裝驗證方案及培養(yǎng)基模擬灌裝驗證報告。驗證工作的組織與協(xié)調(diào)，參與并監(jiān)督培養(yǎng)基模擬灌裝驗證的實施，模擬灌裝樣品的接收、培養(yǎng)及結果觀察。對驗證過程中偏差、變更處理過程追蹤。質(zhì)量保證部審核培養(yǎng)基模擬灌裝驗證方案及培養(yǎng)基模擬灌裝驗證報告。驗證工作的組織與協(xié)調(diào)，參與并監(jiān)督培養(yǎng)基模擬灌裝驗證的實施，負責驗證過程中取樣。負責培養(yǎng)基模擬灌裝驗證環(huán)境監(jiān)控，參與模擬灌裝樣品的接收、培養(yǎng)及結果觀察。參與驗證過程中偏差、變更處理。生產(chǎn)部及制劑車間負責起草培養(yǎng)基模擬灌裝驗證方案及報告。負責方案實施前的培訓、驗證的實施。負責驗證過程的偏差、變更的處理。負責培養(yǎng)基模擬灌裝驗證的進度，組織與協(xié)調(diào)驗證實施。質(zhì)量控制部審核培養(yǎng)基模擬灌裝驗證方案及報告。負責培養(yǎng)基模擬灌裝驗證過程中所需物料及樣品檢驗，出具檢驗結果及報告。負責培養(yǎng)基模擬灌裝驗證樣品的接收、培養(yǎng)及結果觀察。公用事業(yè)部審核培養(yǎng)基模擬灌裝驗證方案及培養(yǎng)基模擬灌裝驗證報告。確保培養(yǎng)基模擬灌裝驗證所需的公用設施、設備等正常運行。物流部負責提供培養(yǎng)基模擬灌裝驗證中所需的合格物料。生產(chǎn)管理負責人：審核批準培養(yǎng)基模擬灌裝驗證方案及報告。質(zhì)量管理負責人：審核批準培養(yǎng)基模擬灌裝驗證方案及報告。培養(yǎng)基模擬灌裝驗證原則根據(jù)風險評估的原則和結果，確定每次培養(yǎng)基模擬灌裝驗證的具體方案，風險評估考慮的因素包括：近兩年內(nèi)筆式水針車間培養(yǎng)基模擬灌裝的實施情況、實施結果以及偏差情況。近兩年內(nèi)筆式水針車間空調(diào)凈化系統(tǒng)、關鍵生產(chǎn)設備的確認及使用情況。前次培養(yǎng)基模擬灌裝驗證后生產(chǎn)工藝（包括批量）變更以及人員變更情況，關鍵生產(chǎn)設備維修保養(yǎng)情況等。前次培養(yǎng)基模擬灌裝驗證后日常生產(chǎn)過程中對無菌結果存在潛在影響的關鍵操作的變化。前次培養(yǎng)基模擬驗證后日常生產(chǎn)過程中最差條件的變化，詳細參見5.2.2培養(yǎng)基灌裝驗證最差條件。培養(yǎng)基模擬灌裝驗證條件的選擇培養(yǎng)基的確定根據(jù)產(chǎn)品的劑型、培養(yǎng)基的選擇性、澄清度、濃度和滅菌的適用性選擇培養(yǎng)基。根據(jù)PDATR22Revised2011技術報告以及從2013年歷次的培養(yǎng)基模擬灌裝驗證，選用胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基（TSB）,其每批培養(yǎng)基適用性都符合藥典要求，并且其屬于廣譜培養(yǎng)基，其選擇性良好，能有效促進細菌和真菌的生長，同時有較好的澄清度，較小的粘度，適用于除菌過濾，滿足工藝現(xiàn)有的生產(chǎn)工藝。因此，在培養(yǎng)基模擬灌裝驗證時選擇的培養(yǎng)基確定為胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基（TSB）。培養(yǎng)基模擬灌裝批號確定批號由MF+8位數(shù)字組成：MFXXXXXXXX,批號的前4位數(shù)表示培養(yǎng)基生產(chǎn)的年份，此后的2位表示生產(chǎn)的月份，最后2位表示年流水號。例如:2014年04月生產(chǎn)第2批培養(yǎng)基，則批號為MF20140402。培養(yǎng)基模擬灌裝批量的確定培養(yǎng)基模擬灌裝批量應當足以保證評價的有效性。灌裝的數(shù)量基于具體工藝的污染風險，并應足以模擬正常生產(chǎn)那些有代表性的操作。一般培養(yǎng)基模擬灌裝批量不少于實際生產(chǎn)線批量。具體見下表：生產(chǎn)規(guī)模日常生產(chǎn)批量（支）培養(yǎng)基模擬灌裝批量（支）小規(guī)模<5000不少于日常生產(chǎn)批量中等規(guī)模5000?100005000?10000大規(guī)模>10000>10000容器、密封結構、灌裝體積及灌裝速度的確定在日常生產(chǎn)中該灌裝生產(chǎn)線使用灌裝容器為：筆式注射器用中性硼硅玻璃套筒（規(guī)格：3ml）、筆式注射器用溴化丁基橡膠活塞（規(guī)格：3ml）、筆式注射器用鋁蓋（規(guī)格：3ml），故在培養(yǎng)基模擬灌裝驗證中使用以上容器進行驗證。根據(jù)風險評估原則：在培養(yǎng)基模擬灌裝驗證時，灌裝線速度應設置在灌裝速度范圍的低端，增加灌裝時間，增大受污染的幾率。但由于本公司是用3ml筆式注射器用中性硼硅玻璃套筒作為灌裝容器，較快的灌裝速度會增加更多的干預，因此培養(yǎng)基灌裝驗證時模擬較慢的灌裝速度和較快的灌裝速度。培養(yǎng)基模擬灌裝驗證的一般流程培養(yǎng)基模擬灌裝驗證與實際灌裝工藝一致。培養(yǎng)基模擬灌裝驗證要求及內(nèi)容驗證實施前確認人員資格確認確認所有參加驗證生產(chǎn)人員（含設備維修人員、QA、QC人員）均接受驗證方案培訓。確認所有進入灌裝區(qū)的人員經(jīng)過GMP、無菌操作培訓、潔凈室行為規(guī)范、微生物基礎知識的培訓并考核合格。確認所有進入灌裝區(qū)的人員（包括QA、設備維修人員）已接受無菌更衣程序的培訓，并經(jīng)更衣確認合格。確認參與驗證的生產(chǎn)人員、設備維修人員、QC、QA均接受崗位操作培訓，并持證上崗。培養(yǎng)基結果觀察人員已接受培養(yǎng)基污染識別的培訓。參加培養(yǎng)基模擬灌裝的操作人員（包括QA、設備維修人員）在培養(yǎng)基模擬灌裝驗證實施中需進行特定的操作，具體操作包括過濾、灌裝系統(tǒng)的安裝、清潔消毒、操作、內(nèi)包材供給和產(chǎn)品處理、轉(zhuǎn)移、取樣、環(huán)境監(jiān)控的一些正常干預和破瓶、裂瓶處理、設備維修、手工剔除倒破/瓶干預、手工排除卡塞、振蕩鍋卡塞、下蓋軌道堵塞、膠管破裂更換灌裝針等糾正干預。參加完一次成功的培養(yǎng)基模擬灌裝驗證人員才可以進行日常產(chǎn)品的灌裝。5.1.2驗證前先決條件文件確認與培養(yǎng)基模擬驗證相關的SOP已建立并定期審核，確保為最新版本，并且相關人員經(jīng)過培訓培養(yǎng)基模擬驗證方案及批記錄已批準生效，并且相關人員經(jīng)過培訓公用系統(tǒng)確認注射用水系統(tǒng)經(jīng)過確認并在有效期內(nèi)筆式水針車間空調(diào)系統(tǒng)經(jīng)過確認并在有效期內(nèi)在線粒子監(jiān)控系統(tǒng)經(jīng)過確認并在有效期內(nèi)設備確認關鍵生產(chǎn)設備（洗瓶機、隧道烘箱、灌裝封口機、稱量罩、層流車、脈動蒸汽滅菌柜、干熱滅菌柜）等經(jīng)過確認并在有效期內(nèi)工藝確認各種滅（除）菌工藝已經(jīng)過確認人員更衣效果經(jīng)過確認并在有效期內(nèi)培養(yǎng)基靈敏度檢查胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基靈敏度檢查符合要求5.2驗證最差條件原則：培養(yǎng)基模擬灌裝驗證應當盡可能模擬常規(guī)的無菌生產(chǎn)工藝，包括所有對無菌結果有影響的關鍵操作，以及生產(chǎn)中盡可能出現(xiàn)的各種干預和最差條件。最差條件不意味著創(chuàng)造出超出允許操作條件或可能導致系統(tǒng)失效的情況。在設計培養(yǎng)基模擬灌裝驗證的方案時，必須考慮以下項目（包括但不限于）的最差條件：灌裝間人員房間/設備再清潔或滅菌后的最長保存期限最大容器的最小灌裝速度（最長開放時間）最小容器的最高灌裝速度（較難控制）灌裝持續(xù)時間各種類型的干預次數(shù)及頻率等每次培養(yǎng)基模擬灌裝驗證的具體方案可以根據(jù)風險評估的原則并結合人員、設備的運行情況對各種干預和最差條件進行調(diào)整，不僅限于5.2.2。5.3培養(yǎng)基模擬灌裝過程具體操作要求胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基（3%溶液）的配制按照胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基使用說明書進行配制，并采用與筆式水針車間（貝那魯肽注射液）實際生產(chǎn)時所用的生產(chǎn)設備，以及日常生產(chǎn)的所有無菌工序，如取樣、無菌連接、除菌過濾等。任何保存時間，包括配液和除菌過濾時間以及過濾后存放時間。培養(yǎng)基模擬灌裝操作培養(yǎng)基模擬灌裝操作過程應被監(jiān)督和用錄像來記錄，確保灌裝線上的所有活動都被模擬，確認已進行了適當?shù)恼８深A與糾正性干預，同時也為后續(xù)出現(xiàn)陽性結果調(diào)差提供依據(jù)。在每半年的培養(yǎng)基灌裝前應對上一階段的生產(chǎn)狀況進行總結和趨勢分析，綜合考慮有代表性的活動及干預，將其列入方案中。正常干預正常干預是在無菌工藝灌裝過程中發(fā)生的正常的計劃內(nèi)的行為，（例如，設備安裝、裝量調(diào)節(jié)、膠塞的再補給、灌裝容器的再補給、環(huán)境監(jiān)測、取樣等等）。正常干預不是灌裝線發(fā)生事情時進行的整改措施，是整個工藝中計劃并要記錄的。正常干預需在培養(yǎng)基模擬灌裝驗證方案中按照規(guī)定的頻次或灌裝時間點進行模擬。糾正干預在無菌工藝灌裝過程中的糾正或調(diào)整的活動，其不屬于計劃性。（例如，灌裝容器的破損、倒瓶、掉塞、更換灌裝針、灌裝設備維修），但這些行為有時候會發(fā)生在工藝過程中的，因此其活動應該能證明是可接受的無菌技術和無菌控制。培養(yǎng)基模擬灌裝驗證方案設計時應該體現(xiàn)最差原則，即糾正干預模擬的次數(shù)不得少于實際生產(chǎn)可能發(fā)生的最多次數(shù)，此外還需對為何要進行這些糾正干預給予合理解釋，這些糾正干預是計劃之外的，均要清楚的識別并被記錄。在日常灌裝過程中發(fā)生新的糾正干預（未在培養(yǎng)基模擬灌裝驗證中模擬的干預），必需進行評估。干預是否可接受，可根據(jù)之前是否模擬過相似的干預，并且是否采用了適當?shù)臒o菌技術，這種干預的評估可通過風險評估來支持。干預相關容器的處理整個培養(yǎng)基灌裝過程中需要嚴格控制丟棄任何已經(jīng)灌裝的培養(yǎng)基，避免將一些潛在污染的可能性也同時丟棄了。任何丟棄都要有充分的理由，并做好相應的記錄和解釋。確定因操作不當或儲存不當而導致培養(yǎng)基密封性缺陷的，且有明確的書面規(guī)程可以進行剔除報廢的產(chǎn)品才可以丟棄。通常所有密閉性完整的容器都應被進行培養(yǎng)并檢查。例如，在灌裝過程中正常產(chǎn)品的灌裝量控制精度需要很高，但培養(yǎng)基灌裝時，只要符合最低灌裝量，而不應該丟棄。但如果是膠塞上位不正確的培養(yǎng)基，由于密閉系統(tǒng)不完整，必須丟棄。同時，培養(yǎng)基灌裝中剔除的產(chǎn)品或者區(qū)域不得比實際生產(chǎn)中清除的多。生產(chǎn)線上保留的產(chǎn)品必須進行培養(yǎng)，已證明控制有效和隔離適當。在干預發(fā)生前生產(chǎn)的產(chǎn)品，除非不包括在生產(chǎn)中，否則必須進行培養(yǎng)。灌裝的持續(xù)時間培養(yǎng)基模擬灌裝的持續(xù)時間應充分包括任何可能包括在實際灌裝過程中的正常干預與糾正干預。其灌裝持續(xù)時間能足以發(fā)現(xiàn)這些干預所能造成的潛在微生物影響，在設計方案時其灌裝的持續(xù)時間要比日常灌裝時間長。環(huán)境監(jiān)控培養(yǎng)基模擬灌裝驗證的環(huán)境監(jiān)控按照“潔凈區(qū)環(huán)境監(jiān)控管理規(guī)程”進行取樣監(jiān)測。任何不滿足日常監(jiān)測限度的標準的偏差應按照日常環(huán)境監(jiān)測調(diào)查程序進行調(diào)差并采取行動，環(huán)境監(jiān)測的異常不一定會導致最終培養(yǎng)基模擬灌裝驗證的失敗。培養(yǎng)前容器檢查灌裝后的培養(yǎng)基模擬灌裝驗證樣品需逐瓶進行容器密封性檢查，凡瓶體破損、軋蓋不嚴、橡膠活塞破損等需剔除不作培養(yǎng)，并做好記錄。培養(yǎng)條件與溫度培養(yǎng)之前，灌裝好的培養(yǎng)基模擬灌裝樣品需進行編號并倒置培養(yǎng)，先在20?25℃（設定23℃）培養(yǎng)7天，后在30?35℃（設定33℃）培養(yǎng)7天。培養(yǎng)期間，可不定期對灌裝的培養(yǎng)基進行目檢（微生物污染情況），但在培養(yǎng)后的第7天，第14天必須分別進行一次全面檢查。在培養(yǎng)過程中，任何發(fā)現(xiàn)損壞的樣品也應列入培養(yǎng)基灌裝的批記錄數(shù)據(jù)中。如果要將這類已培養(yǎng)的樣品從最后的結果判定計算中剔除，則必需充分說明理由，并在培養(yǎng)基灌裝報告中對偏差做出解釋。假如難以判斷微生物污染是由損壞引起還是本身就存在，則應進行偏差調(diào)查以確定原因。培養(yǎng)基靈敏度檢查培養(yǎng)基模擬灌裝驗證所用的胰蛋白胨大豆肉湯培養(yǎng)基，在使用前和14天培養(yǎng)結束后，需對培養(yǎng)基進行靈敏度檢查，推薦測試包含環(huán)境菌或其它不同測試的陽性菌?？山邮軜藴逝囵B(yǎng)基模擬灌裝結果的目標是零污染，應當遵循以下要求：灌裝數(shù)量＜5000瓶時，不得有檢出污染品。若有1瓶污染，必須進行徹底調(diào)查，調(diào)查后重新驗證（連續(xù)3批）。灌裝數(shù)量5000至10000瓶時，若有1瓶污染，需調(diào)查，并視調(diào)查結果決定是否需要重新進行1批培養(yǎng)基模擬灌裝，若有2瓶污染，必須進行徹底調(diào)查，調(diào)查后重新進行驗證（連續(xù)3批）灌裝數(shù)量＞10000瓶時，若有1瓶污染，需徹底調(diào)查，若有2瓶污染，必須進行徹底調(diào)查，調(diào)查后重新進行驗證（連續(xù)3批）。驗證過程的偏差當驗證過程中某一部分無法實施或?qū)嶋H情況無法達到可接受標準時，按照“驗證偏差管理規(guī)程”進行偏差調(diào)查，并確定該偏差是由什么引起的，之后再確定相應的解決措施。培養(yǎng)基模擬灌裝偏差調(diào)查的一般方法調(diào)查的范圍應包括：生產(chǎn)環(huán)境微生物監(jiān)測數(shù)據(jù)；生產(chǎn)環(huán)境懸浮粒子監(jiān)測數(shù)據(jù)；人員污染的監(jiān)測數(shù)據(jù)；HEPA過濾器的完整性檢測、粒子、風速等；操作間的空氣流向、壓差；.操作人員的操作方法、培訓情況；模擬灌裝試驗過程中的干預因素分析；無菌室生產(chǎn)工具及其他用品的儲存狀況；鑒別污染微生物的種、屬，以尋找污染源的線索；無菌室的清潔、清潔規(guī)程的培訓及執(zhí)行情況；無菌生產(chǎn)用設備的控制系統(tǒng)和監(jiān)測系統(tǒng)的校正；生產(chǎn)前、生產(chǎn)后過濾器的完整性檢測結果；驗證過程中內(nèi)包材抽檢結果；相關產(chǎn)品、相關生產(chǎn)過程存在的問題等。原因調(diào)查結束后，應根據(jù)調(diào)查所確定的或可能發(fā)生的原因制定糾正或改進方案并予以實施。當改進方案實施之后應重復模擬灌裝試驗。持續(xù)的工藝評估在初始驗證時，至少要連續(xù)成功地灌裝3個批次。初次驗證后，為了評估無菌工藝的受控情況，每條生產(chǎn)線的培養(yǎng)基灌裝每半年應進行一次，每次至少一批。當產(chǎn)品或生產(chǎn)線發(fā)生變更時，均應按照書面的變更控制系統(tǒng)規(guī)定的流程進行全面評估，一般以下情況變更后應當通過培養(yǎng)基灌裝驗證對整個工藝過程的無菌保證能力變化進行評估。設備改裝（相同部件的更換不構成改裝）設備或廠房的改變潛在影響了無菌環(huán)境的空氣質(zhì)量或