關(guān)于細(xì)胞衰老和死亡第1頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五概述

衰老（aging）和死亡（death）是生命的基本現(xiàn)象。細(xì)胞衰老和死亡是不可避免的，是細(xì)胞生命活動(dòng)的必然規(guī)律。第2頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五第3頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五第一節(jié)細(xì)胞的衰老一、細(xì)胞衰老（Cellularaging）的概念1、定義

是細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的衰變。在正常情況下細(xì)胞隨著年齡的增加，機(jī)能和結(jié)構(gòu)發(fā)生退行性變化，趨向死亡的不可逆的現(xiàn)象。第4頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五第一節(jié)細(xì)胞的衰老一、細(xì)胞衰老（Cellularaging）的概念1、定義2、細(xì)胞的壽限

細(xì)胞來源人胚肺成纖維細(xì)胞中年人成纖維細(xì)胞老年人成纖維細(xì)胞可增殖代數(shù)

40-60

20

2-4體外細(xì)胞可傳代的次數(shù)與細(xì)胞來源個(gè)體的年齡成反比。第5頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五第一節(jié)細(xì)胞的衰老一、細(xì)胞衰老（Cellularaging）的概念1、定義2、細(xì)胞的壽限

4016012080255075100鼠雞人龜壽命的最大限度培養(yǎng)細(xì)胞分裂最高次數(shù)動(dòng)物體細(xì)胞在體外可傳代的次數(shù)與物種的壽命有關(guān)。第6頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五第一節(jié)細(xì)胞的衰老一、細(xì)胞衰老（Cellularaging）的概念1、定義2、細(xì)胞的壽限

Hayflick界限（Hayflicklimitation）：細(xì)胞，至少是培養(yǎng)細(xì)胞，不是不死的，而是有一定的壽命的；它們的增殖能力不是無限的，而是有一定的界限，這就是Hayflick界限。體外培養(yǎng)細(xì)胞所具有增殖分裂的極限。第7頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五第一節(jié)細(xì)胞的衰老二、細(xì)胞衰老（Cellularaging）的表現(xiàn)（一）形態(tài)學(xué)改變

第8頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五體外培養(yǎng)的年輕和衰老的人成纖維細(xì)胞的顯微形態(tài)第9頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五第一節(jié)細(xì)胞的衰老二、細(xì)胞衰老（Cellularaging）的表現(xiàn)（一）形態(tài)學(xué)改變

1、DNA:復(fù)制與轉(zhuǎn)錄受到抑制。2、RNA:mRNA和tRNA含量降低。3、蛋白質(zhì)：含量下降；肽鍵斷裂、交聯(lián)變性。4、酶：活性中心被氧化，酶失活。5、脂類：不飽和脂肪酸被氧化，膜的流動(dòng)性降低。（二）生化改變第10頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五第一節(jié)細(xì)胞的衰老二、細(xì)胞衰老（Cellularaging）的表現(xiàn)（一）形態(tài)學(xué)改變

（二）生化改變（三）細(xì)胞外基質(zhì)改變

大分子交聯(lián)增加。（四）

細(xì)胞內(nèi)水分減少第11頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五

請(qǐng)觀察以上的各圖片,說明了人的一生是怎樣的過程?為什么?第12頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五3.細(xì)胞內(nèi)水分減少，萎縮體積變小、代謝減慢1.細(xì)胞內(nèi)酶活性下降2.細(xì)胞內(nèi)色素沉積出現(xiàn)老年斑？頭發(fā)會(huì)變白？皮膚變干燥，出現(xiàn)皺紋？

第13頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五4.細(xì)胞內(nèi)呼吸速度減慢，核體積增大，染色質(zhì)固縮，染色加深。5.細(xì)胞膜通透性功能改變，物質(zhì)運(yùn)輸功能降低。3.細(xì)胞內(nèi)水分減少，萎縮體積變小、代謝減慢1.細(xì)胞內(nèi)酶活性下降2.細(xì)胞內(nèi)色素沉積出現(xiàn)老年斑？頭發(fā)會(huì)變白？皮膚變干燥，出現(xiàn)皺紋？

第14頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五代謝廢物累積學(xué)說大分子交聯(lián)學(xué)說自由基學(xué)說線粒體DNA突變學(xué)說體細(xì)胞突變與DNA修復(fù)學(xué)說差錯(cuò)災(zāi)難學(xué)說微量元素學(xué)說神經(jīng)內(nèi)分泌學(xué)說程序性衰老學(xué)說重復(fù)基因失活學(xué)說復(fù)制性衰老學(xué)說長壽基因?qū)W說終末分化學(xué)說損傷積累學(xué)派遺傳學(xué)派三、細(xì)胞衰老的機(jī)制第15頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五1.長壽基因?qū)W說衰老是一個(gè)過程，是在一定階段，由一些基因依次觸發(fā)啟動(dòng)所致，是細(xì)胞或機(jī)體本身的固有結(jié)果。（1）促進(jìn)衰老的基因，稱為衰老基因

（2）抑制衰老的基因，稱為抗衰老基因或長壽基因

三、細(xì)胞衰老的機(jī)制第16頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五衰老基因：

細(xì)胞衰老時(shí)，一些衰老相關(guān)基因（SAG）表達(dá)特別活躍，其表達(dá)水平大大高于年輕細(xì)胞，已在人1號(hào)染色體、4號(hào)染色體及X染色體上發(fā)現(xiàn)SAG。

如：載脂蛋白Eε4基因、β淀粉樣蛋白基因、p16、p53、p21、RB基因抗衰老基因：抗氧化酶類基因、延長因子-1a、凋亡抑制基因第17頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五成人早衰癥（Werner‘ssyndrome

）：平均39歲時(shí)出現(xiàn)衰老，47歲左右生命結(jié)束。病因：WRN基因突變Werner'ssyndrome

第18頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五嬰幼兒早衰癥（Hutchinson-Gilfordsyndrome）：1歲時(shí)開始出現(xiàn)明顯的衰老，12～18歲生命結(jié)束。病因：核纖層蛋白A（LMNA）基因突變Hutchinson-Gilfordsyndrome（左邊：9歲；右邊：8歲）第19頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五2.代謝廢物積累學(xué)說三、細(xì)胞衰老的機(jī)制阻礙細(xì)胞的物質(zhì)交換和信號(hào)傳遞細(xì)胞功能下降代謝廢物不能及時(shí)排出胞外或降解與消化越積越多，占據(jù)的空間越來越大影響細(xì)胞代謝廢物的運(yùn)輸引起細(xì)胞衰老細(xì)胞內(nèi)代謝產(chǎn)物的積累至一定量后，會(huì)引起細(xì)胞衰老。例：脂褐素沉積第20頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五3.自由基學(xué)說三、細(xì)胞衰老的機(jī)制

自由基：一類瞬時(shí)形成的含不成對(duì)電子的原子或功能基團(tuán)。包括氧自由基、氫自由基、碳自由基、脂自由基等。

外源性自由基：由環(huán)境中的高溫、輻射、光解、化學(xué)物質(zhì)等引起。內(nèi)源性自由基：由體內(nèi)各種代謝反應(yīng)產(chǎn)生，是人體自由基的主要來源。第21頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五3.自由基學(xué)說三、細(xì)胞衰老的機(jī)制正常細(xì)胞內(nèi)存在清除自由基的防御系統(tǒng)，包括：①酶系統(tǒng)（抗氧化酶）：超氧化物岐化酶（SOD），過氧化氫酶（CAT）等②非酶系統(tǒng)（抗氧化劑）：維生素才C、維生素E、醌類物質(zhì)

當(dāng)自由基產(chǎn)生超過機(jī)體的清除能力，過多的自由基就會(huì)對(duì)許多細(xì)胞組織造成損傷。第22頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五4.復(fù)制性衰老學(xué)說（端粒鐘學(xué)說）端粒端粒：位于染色體末端，由端粒DNA和端粒蛋白構(gòu)成；起穩(wěn)定染色體末端的作用。三、細(xì)胞衰老的機(jī)制第23頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五第24頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五

細(xì)胞增殖次數(shù)與端粒DNA長度有關(guān)。

Harley等1991發(fā)現(xiàn)體細(xì)胞染色體的端粒DNA會(huì)隨細(xì)胞分裂次數(shù)增加而不斷縮短。細(xì)胞DNA每復(fù)制一次端粒就縮短一段，當(dāng)縮短到一定程度至Hayflick點(diǎn)時(shí)，可能會(huì)啟動(dòng)DNA損傷檢測(cè)點(diǎn)，激活p53，導(dǎo)致不可逆地退出細(xì)胞周期，走向衰亡。三、細(xì)胞衰老的機(jī)制4.復(fù)制性衰老學(xué)說（端粒鐘學(xué)說）第25頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五3’5’第26頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五第27頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五

為什么干細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞等可以永生化？

端粒酶（Telomerase）

端粒酶是一種由RNA和蛋白質(zhì)組成的反轉(zhuǎn)錄酶，能以自身的RNA為模板合成端粒DNA，對(duì)于端粒的穩(wěn)定有至關(guān)重要的作用。

端粒-端粒酶：2009年度諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)

三、細(xì)胞衰老的機(jī)制4.復(fù)制性衰老學(xué)說（端粒鐘學(xué)說）第28頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五

細(xì)胞死亡（celldeath）：是細(xì)胞衰老的結(jié)果，是細(xì)胞生命現(xiàn)象不可逆的停止及細(xì)胞生命的結(jié)束。第二節(jié)細(xì)胞死亡

染液活細(xì)胞死細(xì)胞中性紅紅色無色臺(tái)盼藍(lán)無色藍(lán)色活體染色第29頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五兩類：

被動(dòng)死亡——細(xì)胞壞死（cellnecrosis）；

主動(dòng)死亡——程序性細(xì)胞死亡（programmedcelldeath,PCD），或細(xì)胞凋亡（apoptosis）。

第二節(jié)細(xì)胞死亡

第30頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五一、細(xì)胞壞死

細(xì)胞壞死（cellnecrosis）：指細(xì)胞受到化學(xué)因素、物理因素和生物因素等環(huán)境因素的傷害，引起細(xì)胞死亡的病理過程。

細(xì)胞壞死主要由酶性消化和蛋白質(zhì)變性引起。第31頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五

細(xì)胞壞死時(shí)，細(xì)胞膜和細(xì)胞器破裂溶解，細(xì)胞內(nèi)容物釋放引起周圍組織產(chǎn)生的炎癥反應(yīng)對(duì)其他細(xì)胞具有破壞作用，常表現(xiàn)為成群細(xì)胞的丟失或破壞。第32頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五二、細(xì)胞凋亡

細(xì)胞凋亡（apoptosis）：是指體內(nèi)細(xì)胞主動(dòng)發(fā)生的、有基因控制的細(xì)胞自主結(jié)束生命的過程，是細(xì)胞為適應(yīng)生存環(huán)境而主動(dòng)采取的死亡方式。

第33頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五“fortheirdiscoveriesconcerninggeneticregulationoforgandevelopmentandprogrammedcelldeath”1090–131=959(cells)第34頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五王曉東：最年輕美國科學(xué)院院士（41）從事的是細(xì)胞凋亡規(guī)律的研究。2000年，他和助手們進(jìn)行了一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)，研究一種神秘的線粒體蛋白質(zhì)Smac，這種蛋白質(zhì)可以打破腫瘤的“堅(jiān)硬堡壘”，誘使腫瘤細(xì)胞“自殺”，對(duì)研究治療癌癥方法有重要幫助。從1996年他建立起自己的研究室后，他的論文成果在8年間被其他科學(xué)家引用超過了15000次。第35頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五（一）凋亡發(fā)生的形態(tài)變化

1.凋亡的起始：

細(xì)胞膜表面微絨毛和細(xì)胞間連接的減少、消失，但細(xì)胞膜保持完整，未失去通透性；

細(xì)胞質(zhì)濃縮、細(xì)胞器改變（細(xì)胞脫水、細(xì)胞質(zhì)濃縮、細(xì)胞體積縮小、核糖體、線粒體聚集、細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)排列紊亂）；

染色質(zhì)固縮。二、細(xì)胞凋亡

第36頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五

2.凋亡小體的形成：

當(dāng)?shù)蛲黾?xì)胞核染色質(zhì)裂解形成大小不等的碎片后，細(xì)胞膜皺縮，整個(gè)細(xì)胞經(jīng)過類似胞吐的方式，形成一些大、小不等的，由細(xì)胞膜包裹的、表面光滑的球形小體，稱為凋亡小體（apoptosisbody）。

凋亡小體是判斷細(xì)胞凋亡的主要形態(tài)結(jié)構(gòu)之一。（一）凋亡發(fā)生的的形態(tài)變化二、細(xì)胞凋亡

第37頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五第38頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五

3.凋亡小體逐漸被鄰近的細(xì)胞所吞噬并消化

（一）凋亡發(fā)生的的形態(tài)變化二、細(xì)胞凋亡

第39頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五圖：凋亡的形態(tài)變化碎裂第40頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五1、胞漿內(nèi)Ca2+濃度增加；2、細(xì)胞內(nèi)活性氧增加；3、核酸內(nèi)切酶活化、DNA斷裂，電泳后呈梯狀（DNAladder）。（二）凋亡發(fā)生的的生化變化二、細(xì)胞凋亡

第41頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五細(xì)胞凋亡與細(xì)胞壞死的區(qū)別————————————————————————————————————————————————————————————壞死凋亡1.性質(zhì)2.誘導(dǎo)因素強(qiáng)烈刺激，隨機(jī)發(fā)生較弱刺激，非隨機(jī)發(fā)生3.生化特點(diǎn)4.形態(tài)變化6.DNA電泳5.炎癥反應(yīng)7.凋亡小體8.基因調(diào)控被動(dòng)過程，無新蛋白合成，不耗能主動(dòng)過程，有新蛋白合成，耗能細(xì)胞結(jié)構(gòu)全面溶解、破壞、細(xì)胞腫脹胞膜及細(xì)胞器相對(duì)完整細(xì)胞皺縮，核固縮彌散性降解，電泳呈均一DNA片狀DNA片段化（180-200bp），電泳呈“梯”狀條帶溶酶體破裂，局部炎癥反應(yīng)溶酶體相對(duì)完整，局部無炎癥反應(yīng)有病理性，非特異性生理性或病理性，特異性無有無第42頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五第43頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五第44頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五Caspase家族Apoptosisiscarriedoutbyaproteolyticsystem—

caspase

Whycalledcaspase?Activesite:CysteineCleavagesite:Asparaticacid

天冬氨酸特異性的半光氨酸蛋白水解酶CysteineAsparaticacidspecificprotease第45頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五使抑制凋亡因子失活，如CAD/ICAD破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，如Lamina將調(diào)節(jié)區(qū)與催化區(qū)分離，使蛋白失活，如GelsolinCaspase如何殺死細(xì)胞？第46頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五（三）細(xì)胞凋亡與醫(yī)學(xué)的關(guān)系1.凋亡的生理學(xué)意義

①去除不需要的結(jié)構(gòu)（蝌蚪發(fā)育、指端發(fā)育）；②控制細(xì)胞數(shù)目（神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育）；③去除有害細(xì)胞（癌細(xì)胞的清除）；④產(chǎn)生無細(xì)胞器的細(xì)胞（哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞等）；⑤細(xì)胞的自我保護(hù)作用（病毒侵入細(xì)胞啟動(dòng)凋亡）。第47頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五第48頁，共55頁，2023年，2月20日，星期五1、凋亡的生理學(xué)意義2、細(xì)胞凋亡與疾病的關(guān)系（1）細(xì)胞過度凋亡，導(dǎo)致心血管疾??；

（2）細(xì)胞凋亡受阻，導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生；（3）細(xì)胞凋亡過渡或不足導(dǎo)致自身免疫??；（4）神經(jīng)系統(tǒng)的退行性病變。（三）細(xì)胞凋亡與醫(yī)學(xué)的關(guān)系第4