溫州醫(yī)科大學(xué)孟慶賀第十八章腫瘤的臨床生物化學(xué)第2頁(yè)教學(xué)目標(biāo)與要求

`

掌握腫瘤標(biāo)志物的定義和分類，常見腫瘤標(biāo)志物AFP、CEA、CA125、CA19-9、CA15-3、hCG、PSA、CYFRA21-1等的臨床意義。

`

熟悉常見惡性腫瘤的標(biāo)志物應(yīng)用及聯(lián)合檢測(cè)，基因類腫瘤標(biāo)志物的研究進(jìn)展及其臨床應(yīng)用。

`

了解腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用價(jià)值，腫瘤的發(fā)生及其生化機(jī)制。第3頁(yè)

主要內(nèi)容腫瘤與腫瘤標(biāo)志物的概念常用的腫瘤標(biāo)志物

腫瘤標(biāo)志物的應(yīng)用

腫瘤是威脅人力健康的最主要疾病，全世界每年有820多萬(wàn)人死于癌癥(WHO2012)。預(yù)計(jì)新發(fā)癌癥人數(shù)將由2008年的1270萬(wàn)，躍升到2030年的2000萬(wàn)以上。腫瘤治療的花費(fèi)在各個(gè)國(guó)家和地區(qū)都非常昂貴，降低了癌癥患者得到理想治療的機(jī)會(huì)。《2012中國(guó)腫瘤登記年報(bào)》:全國(guó)每分鐘就有6人被確診為癌癥，每天有8550人成為癌癥患者，每年新增350多萬(wàn)癌癥患者。每分鐘就有5人死于癌癥，每年因

癌癥死亡260萬(wàn)人，占全球死亡人數(shù)1/4。未來(lái)10年，中國(guó)的癌癥發(fā)病率與死亡率仍將繼續(xù)攀升。

癌癥呈現(xiàn)年輕化及發(fā)病率和死亡率走高的趨勢(shì)。預(yù)計(jì)到2020年，中國(guó)每年的癌癥

新發(fā)病例總數(shù)將達(dá)400萬(wàn)左右，患病總數(shù)達(dá)到600萬(wàn)。包括乳腺癌、肺癌、結(jié)腸癌、甲狀腺癌等發(fā)病年齡均低于此前年齡。

自2012年，癌癥已成為中國(guó)人第一大死因。全國(guó)惡性腫瘤發(fā)病第一位的是男性肺癌，女性為乳腺癌。其次為胃癌、結(jié)直腸癌、肝癌和食管癌。惡性腫瘤死亡第一位的仍是肺癌.

胃癌、食道癌等“窮癌”發(fā)病率居高不下，但乳腺癌、肺癌、直腸癌等“富癌”

也在增多。男性前列腺癌、女性甲狀腺癌發(fā)病上升迅速。《2012中國(guó)腫瘤登記年報(bào)》:根據(jù)美國(guó)臨床腫瘤學(xué)會(huì)2014數(shù)據(jù)報(bào)告，在未來(lái)16年，癌癥將會(huì)超過(guò)心血管疾病成為最主要死亡原因，每年癌癥患者將會(huì)以45%遞增，從每年的160萬(wàn)到230萬(wàn)。中國(guó)2013年腫瘤登記年報(bào)中國(guó)2013年腫瘤登記年報(bào)CancerStatistics,2015CACANCERJCLIN2015;65:5-29CancerIncidenceandDeathRatesinUSA(NationalCancerInstitute2015)

IncidenceratesDeathratesMenProstateLung&BronchusLung&BronchusProstateColon&RectumColon&RectumWomen:BreastLung&BronchusLung&BronchusBreastColon&RectumColon&Rectum《中國(guó)2013年腫瘤登記年報(bào)》

發(fā)病率死亡率

男人

肺癌肺癌胃癌,肝癌和食管癌肝癌,胃癌和食管癌

結(jié)直腸癌結(jié)直腸癌女人

乳腺癌肺癌肺癌胃癌和肝癌結(jié)直腸癌結(jié)直腸癌Incidence

andMortalityofCancer第10頁(yè)（一）腫瘤的發(fā)生

腫瘤（Tumor）是機(jī)體在各種致癌因素作用下，某正常組織細(xì)胞在基因水平上失去對(duì)其生長(zhǎng)的正常調(diào)控，發(fā)生異常分化和無(wú)限增殖形成的新生物。

第一節(jié)腫瘤與腫瘤標(biāo)志物的概念一、腫瘤的發(fā)生及其生化機(jī)制各種因素?fù)p害DNA

激活原癌基因滅活抑癌基因改變凋亡調(diào)節(jié)基因和DNA修復(fù)基因靶細(xì)胞轉(zhuǎn)化

克隆性增生

亞克隆（異質(zhì)化）

惡性腫瘤

腫瘤的形成：無(wú)限增殖和異常分化第12頁(yè)（二）腫瘤的發(fā)生的生化機(jī)制腫瘤的發(fā)病是一個(gè)多因素參與，體內(nèi)、外各種因素相互作用的結(jié)果。1、致癌因素

啟動(dòng)促進(jìn)演進(jìn)啟動(dòng)劑直接改變DNA成分或結(jié)構(gòu)啟動(dòng)劑作用后，促進(jìn)劑反復(fù)作用癌基因激活抑癌基因失活最終致癌物與DNA、RNA、蛋白質(zhì)等核基團(tuán)作用基因突變癌變正常細(xì)胞

癌細(xì)胞潛伏性瘤細(xì)胞2、致癌機(jī)制第14頁(yè)（一）腫瘤標(biāo)志物的定義

腫瘤標(biāo)記物（tumormaker，TM）是惡性腫瘤組織自身產(chǎn)生的正常細(xì)胞所沒有或含量很低的物質(zhì)，或機(jī)體自身對(duì)腫瘤反應(yīng)而異常產(chǎn)生或升高的，反映腫瘤存在和生長(zhǎng)的一類物質(zhì)。TM存在于細(xì)胞、組織、血液或體液中，可用生物化學(xué)、免疫學(xué)及分子生物學(xué)等方法進(jìn)行定性或定量測(cè)定。二、腫瘤標(biāo)志物及分類理想的TM特征敏感性高操作可行性腫瘤相關(guān)性特異性高器官特異性可檢測(cè)性理想的TM應(yīng)具備以下特征：第16頁(yè)根據(jù)來(lái)源分類腫瘤組織產(chǎn)生腫瘤與宿主共同作用產(chǎn)生根據(jù)分布分類

位于細(xì)胞膜上或胞內(nèi)的組織腫瘤標(biāo)記物

血漿中的腫瘤標(biāo)記物

根據(jù)生物化學(xué)及免疫學(xué)特性分類

胚胎抗原類、糖類酶類、激素類蛋白類、基因類

（二）腫瘤標(biāo)志物的分類腫瘤標(biāo)志物受體:ER,PR,EGFR乳腺癌，卵巢癌，肺癌第18頁(yè)第二節(jié)常用的腫瘤標(biāo)志物

單鏈糖蛋白:590AA合成部位：主要在胎兒肝細(xì)胞少量在卵黃囊、胃腸道粘膜、腎臟

正常成人肝細(xì)胞幾乎不產(chǎn)生AFP(<5μg/L)。當(dāng)肝細(xì)胞或生殖腺胚胎組織癌變時(shí)可大量產(chǎn)生。一、胚胎性抗原腫瘤標(biāo)志物甲胎蛋白(AFP)第19頁(yè)臨床意義：原發(fā)性肝癌診斷

AFP檢測(cè)對(duì)早期診斷原發(fā)性肝癌有良好價(jià)值，一般認(rèn)為持續(xù)一個(gè)月以上AFP﹥500μg/L，并排除妊娠、生殖腺胚胎瘤、活動(dòng)性肝炎、睪丸癌等。AFP也用于肝癌的治療效果及預(yù)后評(píng)估：

術(shù)后，AFP1周內(nèi)可降至正常，則預(yù)后好；

術(shù)后AFP﹥200μg/L，提示肝癌有殘留或有轉(zhuǎn)移，

若下降后又增高提示復(fù)發(fā)。甲胎蛋白(AFP)第20頁(yè)酸性糖蛋白:641AA

合成：妊娠兩個(gè)月后由胎兒消化道分泌，出生后消失。正常成人血清中CEA含量極低，而癌變細(xì)胞可大量分泌CEA進(jìn)入血液。癌胚抗原(CEA)

第21頁(yè)升高見于(>3μg/L)：①結(jié)直腸癌、胰腺癌、肺癌、胃癌、乳腺癌、轉(zhuǎn)移性肝癌等。②良性腫瘤、炎癥和退行性疾病也有部分升高。③吸煙者中約有30%人CEA大于5μg/L。CEA還反映腫瘤病變程度、預(yù)后判斷、療效監(jiān)測(cè)及復(fù)發(fā)預(yù)測(cè)。術(shù)后6周，CEA水平恢復(fù)正常，否則有殘存腫瘤，CEA含量持續(xù)升高提示預(yù)后不良，若含量降低后又升高提示局部復(fù)發(fā)。臨床意義：非器官特異性腫瘤相關(guān)抗原二、糖類抗原(CarbohydrateAntigen)腫瘤標(biāo)志物大分子糖蛋白存在：胚胎體腔上皮分化而來(lái)的心包膜、腹膜、胸膜等組織，正常成人的輸卵管、子宮內(nèi)膜。高度表達(dá)：漿液性卵巢癌、宮頸內(nèi)膜腺癌、乳腺癌不表達(dá)：粘液性卵巢癌CA125第23頁(yè)臨床意義：0-35U/ml卵巢癌：診斷卵巢癌和檢測(cè)復(fù)發(fā)最敏感的指標(biāo)。手術(shù)和化療有效者CA125水平很快下降。若有復(fù)發(fā)時(shí)，CA125升高可先于臨床癥狀之前。其他非卵巢惡性腫瘤也有一定陽(yáng)性率非惡性腫瘤：子宮內(nèi)膜異位癥，卵巢囊腫，早期妊娠CA125第24頁(yè)形態(tài)上皮糖蛋白抗原決定簇：由糖和多肽兩部分組成表達(dá)：多種腺癌細(xì)胞，如乳腺癌肺腺癌胰腺癌等CA15-3第25頁(yè)臨床意義：0-25U/ml乳腺癌：是乳腺癌患者診斷和監(jiān)測(cè)術(shù)后復(fù)發(fā)、觀察療效的最佳指標(biāo)。大于100U/ml時(shí)，可認(rèn)為有轉(zhuǎn)移性病變。治療后CA15-3水平增高，提示乳腺癌的局部或全身復(fù)發(fā)。其他惡性腫瘤(卵巢癌)、孕婦以及良性乳腺疾病、卵巢疾病等，亦可引起CA15-3不同程度的增高。與CEA聯(lián)合檢測(cè)：可提高乳腺癌早期診斷的敏感性和特異性。與CA125聯(lián)合檢查：用于卵巢癌復(fù)發(fā)的早期診斷。CA15-3第26頁(yè)CA15-3在乳腺癌治療中的動(dòng)態(tài)變化手術(shù)后初始值臨界值123456789101112月1020304050607080化療療效良好復(fù)發(fā)病情緩解第27頁(yè)存在形式：粘蛋白型的糖蛋白分布：正常胎兒胰腺、膽囊、肝、腸正常成人胰腺、膽管上皮表達(dá):正常血清中含量較低，多種消化系統(tǒng)腫瘤細(xì)胞中

表達(dá)。CA19-9

第28頁(yè)臨床意義：0-35U/ml胃腸道腫瘤相關(guān)抗原:以胰腺癌和膽管癌陽(yáng)性率最高，是至今報(bào)道的對(duì)胰腺癌最敏感的標(biāo)志物。病程監(jiān)測(cè)與預(yù)后判斷:術(shù)后2～4周不能降至臨界值(35U/ml)提示手術(shù)失??；CA19-9降低后再升高，提示復(fù)發(fā)。良性疾患:慢性胰腺炎，膽囊炎和肝硬化等出現(xiàn)低濃度增高、一過(guò)性增高。CA19-9

第29頁(yè)

粘液型糖蛋白，唾液酸化糖類抗原表達(dá):多種器官惡性腫瘤臨床意義：胰腺癌和結(jié)、直腸癌：第三代腫瘤標(biāo)志物，胰腺癌的敏感性可達(dá)66%～100%，大腸癌的敏感性達(dá)60%～72%。手術(shù)或放化療前后療效觀察及復(fù)發(fā)預(yù)測(cè)與CEA、CA19-9聯(lián)合：提高腫瘤診斷的敏感性。CA242

第30頁(yè)

CA72-4

高分子糖蛋白類癌胚抗原原名：TAG-72表達(dá)：腺癌臨床意義：是胃腸道腫瘤和卵巢癌的標(biāo)志物對(duì)診斷胃癌的特異性優(yōu)于CA19-9和CEA，它與胃癌分期、病情進(jìn)程、療效監(jiān)測(cè)有關(guān)，特別是對(duì)良性病變鑒別診斷有較高特異性。三、激素腫瘤標(biāo)志物糖蛋白激素分泌：胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞組成：α亞基+β亞基β亞基：特有的，可通過(guò)免疫試驗(yàn)測(cè)定人絨毛膜促性腺激素（hCG）

包括人絨毛膜促性腺激素、降鈣素、生長(zhǎng)激素、胰高血糖素等，其中以絨毛膜促性腺激素、降鈣素最為常用第32頁(yè)臨床意義：hCG：對(duì)早期妊娠診斷，妊娠相關(guān)疾病、滋養(yǎng)層細(xì)胞腫瘤等疾病的診斷、鑒別和病程觀察等有一定價(jià)值。睪丸癌也升高。β-hCG：是公認(rèn)的診斷滋養(yǎng)層細(xì)胞腫瘤最敏感的標(biāo)志物。滋養(yǎng)體瘤和絨毛膜上皮細(xì)胞癌β-hCG可異常升高.乳腺癌、卵巢癌、子宮頸癌、白血病:血尿hCG均可升高。良性疾?。郝殉材夷[、子宮內(nèi)膜異位、肝硬化等可見hCG輕度升高。人絨毛膜促性腺激素（hCG）

32AA單鏈多肽激素合成與分泌：甲狀腺濾泡旁細(xì)胞臨床意義：主要用途：無(wú)癥狀甲狀腺髓樣癌的早期篩選升高：甲狀腺癌、小細(xì)胞肺癌、乳腺癌腎衰竭、妊娠、白血病亦可升高。降鈣素（CT）

四、酶類腫瘤標(biāo)志物酶是較早用于臨床診斷的一類腫瘤標(biāo)志物。當(dāng)人體某部位發(fā)生腫瘤時(shí)，腫瘤細(xì)胞異常代謝，使某些酶或同工酶發(fā)生質(zhì)和量的改變；或腫瘤組織壓迫和浸潤(rùn)致某些酶的排泄受阻，而至腫瘤患者血清中酶活性異常升高。PSA:前列腺上皮細(xì)胞分泌單鏈糖蛋白存在形式：游離型PSA（freeprostatespecificantigen，f-PSA）約占10%-20％；結(jié)合型約占80％，包括與α1-抗糜蛋白酶結(jié)合(PSA-ACT)和與α2-巨球蛋白酶結(jié)合(PSA-α2M)兩型?，F(xiàn)臨床免疫學(xué)檢測(cè)的PSA是針對(duì)f-PSA和PSA-ACT。前列腺特異性抗原（PSA）

臨床意義：主要應(yīng)用：前列腺癌的早期輔助診斷、治療監(jiān)測(cè)及復(fù)發(fā)預(yù)測(cè).

前列腺癌術(shù)后，t-PSA濃度可降至正常，若術(shù)后t-PSA濃度不降或下降后再升高，提示腫瘤轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)。前列腺良性疾病和泌尿生殖系統(tǒng)的疾?。簍-PSA和f-PSA輕度升高.具有器官組織特異性但無(wú)腫瘤特異性。

f-PSA/t-PSA：前列腺良性(>25%)和惡性疾病的鑒別點(diǎn)，比值<15％高度提示前列腺癌變,尤其是在男性PSA水平在4.0to10ng/mL。>25%多預(yù)示良性。

?proPSAandProstateHealthIndex(phi=

([-2]proPSA/fPSA)×sqrt(PSA))具較高特異性.?尿PCA3多升高.

前列腺特異性抗原（PSA）

第37頁(yè)存在：神經(jīng)組織和神經(jīng)內(nèi)分泌組織中臨床意義：小細(xì)胞肺癌：目前公認(rèn)的小細(xì)胞肺癌(SCLC)高特異性和高敏感性的TM。SCLC與NSCLC的鑒別：非小細(xì)胞肺癌NSE無(wú)明顯增高神經(jīng)母細(xì)胞瘤：敏感性可達(dá)90％，對(duì)于早期診斷、療效監(jiān)測(cè)和預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)均有良好價(jià)值。神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞腫瘤：嗜鉻細(xì)胞瘤、胰島細(xì)胞瘤、甲狀腺髓樣癌、黑色素瘤

神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）

五、蛋白類腫瘤標(biāo)志物

細(xì)胞角蛋白（CK:cytokeratin）→細(xì)胞骨架的中間纖維類蛋白質(zhì)，有20個(gè)亞型（CK1-CK20）CK19片段入血→可溶性片段即為Cyfra21-l臨床意義：Cyfra21-1是非小細(xì)胞肺癌(鱗癌)患者最有價(jià)值的腫瘤標(biāo)志物。對(duì)鱗狀細(xì)胞癌的早期診斷、療效判斷及預(yù)后監(jiān)測(cè)有重要意義。對(duì)非小細(xì)胞肺癌特異性達(dá)87%。在宮頸癌、膀胱癌、乳腺癌也有一定的陽(yáng)性率。Cyfra21-l也是一個(gè)較好的膀胱癌輔助診斷標(biāo)志物。細(xì)胞角蛋白19（Cyfra21-l）第39頁(yè)Ferritin合成：肝臟癌細(xì)胞有較強(qiáng)的鐵蛋白合成能力，鐵蛋白可作為一種非器官特異性標(biāo)志物。臨床意義：缺鐵：判斷體內(nèi)是否缺鐵的敏感指標(biāo)。惡性腫瘤：肝癌、白血病、乳腺癌等見增高。各種炎癥感染:肝硬化、肝壞死、急性心肌梗死早期，鐵蛋白含量亦可增加。鐵蛋白（Fer

）

六、基因類腫瘤標(biāo)志物與腫瘤的進(jìn)展、轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)有關(guān)

原癌基因：ras、myc

抑癌基因：p53

基因類TM研究的新熱點(diǎn)：循環(huán)DNA，RNA對(duì)腫瘤的早期診斷、預(yù)后判斷有較好的應(yīng)用前景

癌基因的激活和抑癌基因的變異使正常細(xì)胞惡變，導(dǎo)致腫瘤發(fā)生。因此，癌基因表達(dá)的蛋白可作為腫瘤標(biāo)志物。HER2/neu,EGFR:乳腺癌，卵巢癌，肺癌第三節(jié)腫瘤標(biāo)志物的應(yīng)用一、腫瘤標(biāo)志物的臨床價(jià)值（一）腫瘤標(biāo)志物的敏感性和特異性

敏感性特異性（真陽(yáng)性率）↘

↙（真陰性率）

決定

↓

腫瘤標(biāo)志物的臨床價(jià)值

敏感性越高→越少患者被漏診,但易誤診！特異性越高→就越少人被誤診為腫瘤，但易漏診！第42頁(yè)敏感性與特異性第43頁(yè)敏感性與特異性真陰性率假陽(yáng)性率真陽(yáng)性率腫瘤標(biāo)志物風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估早期診斷預(yù)后評(píng)估療效監(jiān)測(cè)檢測(cè)復(fù)發(fā)第45頁(yè)腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用范圍

（一）腫瘤的篩查:有限（二）腫瘤的診斷:有限（三）腫瘤的預(yù)后判斷:有限（四）腫瘤的療效監(jiān)測(cè):重要

（五）預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)(治愈)：重要第46頁(yè)1.高危人群惡性腫瘤的篩查。有一些腫瘤標(biāo)志物對(duì)于高危人群的普查很有意義，特別是那些有腫瘤家族史、肝硬化、大量吸煙和飲酒等不良生活習(xí)慣者，腫瘤發(fā)生率較高，最好定期進(jìn)行腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)。肝硬化、慢性乙肝/丙肝患者可檢測(cè)甲胎蛋白(AFP)；男性大于50歲的前列腺腺瘤患者可檢測(cè)前列腺特異性抗原(PSA)；胃病患者可篩查胃蛋白酶原(PeP)。2.有助于某些腫瘤的診斷。比如，AFP對(duì)肝癌具有特異性診斷價(jià)值，PSA對(duì)前列腺癌的診斷具有很高的價(jià)值，絨毛膜促性腺激素(HCG)診斷惡性滋養(yǎng)葉腫瘤有決定性意義。腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用(1)第47頁(yè)3.預(yù)測(cè)預(yù)后。以乳腺癌為例，檢測(cè)c-erbB-2、P53、PCNA呈陽(yáng)性，ER、PR呈陰性，則表明存在高風(fēng)險(xiǎn)因素，預(yù)后不良。4.具有預(yù)測(cè)或監(jiān)視腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移的作用。比如，結(jié)、直腸癌術(shù)前高水平血清癌胚抗原(CEA)，術(shù)后會(huì)恢復(fù)正常水平，復(fù)查時(shí)如果發(fā)現(xiàn)血清CEA又升高，盡管無(wú)任何臨床癥狀，仍提示癌癥可能有復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移，其敏感性高于X光片和直腸鏡。5.有助于評(píng)估治療的效果。惡性腫瘤治療后，腫瘤標(biāo)志物濃度的變化一般會(huì)與療效之間有一定的相關(guān)性。腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用(2)第48頁(yè)常見惡性腫瘤多種腫瘤標(biāo)志物的組合二、常見惡性腫瘤的標(biāo)志物應(yīng)用第49頁(yè)

AFPCEAGGTPHC肝癌AFP、AFU、CEA、CA19-9、CA125和鐵蛋白聯(lián)合檢測(cè)，肝癌檢出率可達(dá)95％以上AFP是診斷PHC最主要的標(biāo)志物第50頁(yè)胃癌CEACA19-9Cyfra2l-l

CA72-4

CA242胃癌

CA72-4和CA19-9作為最敏感的胃癌指標(biāo)，意義重大是廣泛用于消化系統(tǒng)腫瘤的診斷、隨訪和療效觀察的腫瘤標(biāo)志物，聯(lián)合檢測(cè)可提高腫瘤診斷敏感性第51頁(yè)結(jié)直腸癌結(jié)直腸癌CEACA19-9CA242CA125目前診斷結(jié)直腸癌最常用的TM為CEA。與CA19-9、CA242、CA125聯(lián)合檢測(cè)，對(duì)結(jié)直腸癌的診斷、隨訪、復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)和轉(zhuǎn)移有一定的價(jià)值。第52頁(yè)NSE+Cyfra21-1+CEA小細(xì)胞肺癌腺癌鱗狀細(xì)胞癌大細(xì)胞癌組織不明確型肺癌

臨床上最常應(yīng)用的肺癌標(biāo)志物組合為CEA+NSE+Cyfra21-1NSE對(duì)小細(xì)胞肺癌最敏感。Cyfra21-1是非小細(xì)胞肺癌的首選腫瘤標(biāo)志物。但特異性差。第53頁(yè)CEACA125

乳腺癌

CA15-3乳腺癌CAl5-3、CAl25及CEA三種指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)，有助于乳腺癌的早期發(fā)現(xiàn)和早期診斷。CAl5-3是目前診斷乳腺癌的特異性指標(biāo)。第54頁(yè)原發(fā)性卵巢癌黏蛋白類卵巢癌CA125

CA72-4

CA125AFP、hCG未成熟的畸胎瘤卵巢癌卵巢癌常用TM有CA125和CA72-4

。CA125是原發(fā)性卵巢癌敏感性最高的指標(biāo)。CA125動(dòng)態(tài)觀察有助于監(jiān)測(cè)療效、預(yù)后判斷與預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)CA72-4對(duì)黏蛋白類卵巢癌敏感。AFP、hCG有助于未成熟的畸胎瘤診斷。第55頁(yè)胰腺癌

CA19-9

CEA

CA242

胰腺癌

CA19-9可評(píng)估預(yù)后和預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)聯(lián)合CEA、CA242檢測(cè)，可提高敏感性近100%CA19-9是至今對(duì)胰腺癌最敏感的標(biāo)志物第56頁(yè)前列腺癌

f-PSA

t-PSA

f-PSA/t-PSA

PSA是目前診斷前列腺癌特異性最高的TMproPSAandPHI睪丸癌

腫瘤標(biāo)記物有重要的診斷和監(jiān)測(cè)價(jià)值。甲胎蛋白(AFP)，人絨毛膜促性腺激素(HCG)，和乳酸脫氫酶（LDH）在睪丸癌診斷,監(jiān)測(cè)療效、預(yù)后判斷與預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)發(fā)揮重要作用牢記…正常參考值范圍內(nèi)的結(jié)果不一定能夠排除惡性腫瘤在不同的方法中獲得的結(jié)果是不能互換的結(jié)果不符合臨床表現(xiàn)的應(yīng)該與實(shí)驗(yàn)室討論理想的腫瘤標(biāo)志物

具有高度敏感性高度特異性器官和組織特異性:可定位濃度應(yīng)該隨腫瘤大小改變濃度應(yīng)反映腫瘤惡性程度，病程進(jìn)展，和臨床分期。判斷臨床預(yù)后及預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)取樣容易，檢測(cè)方法可靠和費(fèi)用合理,高分析靈敏度和特異性.在未來(lái)的腫瘤標(biāo)志物人類基因組計(jì)劃生物信息學(xué)微陣列分析(DNA,proteins,tissues)質(zhì)譜蛋白質(zhì)組學(xué)基因組技術(shù):DNA測(cè)序,PCR,次代基因測(cè)序(NGS)激光捕獲顯微切割(LaserCaptureMicrodisection)單核苷酸多態(tài)性(SNPs)比較基因組雜交循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTC)循環(huán)核酸DNA&RNA小分子RNA,microRNA,小分子肽,微泡,外來(lái)體開發(fā)一組標(biāo)記標(biāo)記物第61頁(yè)小結(jié)腫瘤發(fā)病是一個(gè)多因素參與、多基因改變、多階段發(fā)展的過(guò)程，經(jīng)歷了啟動(dòng)、促進(jìn)、演進(jìn)三個(gè)變化階段。腫瘤標(biāo)志物是惡性腫瘤組織自身產(chǎn)生的正常細(xì)胞所沒有或含量很低的物質(zhì)，或機(jī)體自身對(duì)腫瘤反應(yīng)而異常產(chǎn)生或升高的，反映腫瘤存在和生長(zhǎng)的一類物質(zhì)?？煞譃榕咛タ乖?、糖類、酶類、激素類、蛋白類、基因類及其他標(biāo)志物。

第62頁(yè)小結(jié)腫瘤標(biāo)志物主要用于腫瘤的篩查、預(yù)后判斷及療效監(jiān)測(cè)。敏感性和特異性決定著腫瘤標(biāo)志物的臨床價(jià)值，而單一腫瘤標(biāo)志物診斷腫瘤缺乏足夠的敏感性和特異性，影響其在疾病篩選中的應(yīng)用，因此，應(yīng)作腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢測(cè)，提高惡性腫瘤的陽(yáng)性檢出率。腫瘤標(biāo)志物簡(jiǎn)史1846Bence-Jonesprotein1930hCG1940Acidphosphatase,immunoassays1963Alpha-fetoprotein(AFP)1965Carcinoembryonicantigen(CEA)1970Oncogenes1975Monoclonalantibodies1980CA125,PSA,Carbohydrateantigens1985TumorSuppressorGenes2001Genomicsandproteomics,Microarrays,MassSpectrometry,MolecularDiagnostics,MultiparametricAnalysis1869年，澳大利亞籍醫(yī)生ThomasAshworth首次提出循環(huán)腫瘤細(xì)胞（Circulating

Tumor

Cell，簡(jiǎn)稱CTC）的概念Circulatingtumorcells(CTCs)werefirstdescribedin1869byDrThomasAshworth,anAustralianphysician.Whenobservingunderthemicroscopethebloodofamanwithmetastaticcancer,hediscovered“cellsidenticalwiththoseofthecanceritself”(AshworthTR.AustMedJ1869;14:146-9).LiquidBiopsy:CirculatingTumorCells(CTC）液體活檢-循環(huán)腫瘤細(xì)胞循環(huán)腫瘤細(xì)胞CirculatingTumorCells(CTC)CTC:腫瘤細(xì)胞從原發(fā)腫瘤，脫離基底膜并侵入組織基質(zhì)進(jìn)入血管的腫瘤細(xì)胞。轉(zhuǎn)移癌患者外周血中每毫升可發(fā)現(xiàn)1-10循環(huán)腫瘤細(xì)胞。通常和白細(xì)胞比例為1:100萬(wàn).進(jìn)入血循環(huán)的腫瘤細(xì)胞只有極少部分能存活。24小時(shí)內(nèi),只有少于0.1%CTC存活下來(lái)，只有少于0.01%CTC存活并能形成轉(zhuǎn)移癌。

CTC是轉(zhuǎn)移癌的種子,“播種”、“增殖”、“定植”、形成轉(zhuǎn)移灶。血中查到CTC說(shuō)明病人正在發(fā)生癌轉(zhuǎn)移或已有轉(zhuǎn)移癌。循環(huán)腫瘤細(xì)胞的檢測(cè)

CellSearch系統(tǒng)是目前唯一通過(guò)美國(guó)（FDA）和中國(guó)（SFDA）認(rèn)證的CTCs檢測(cè)技術(shù)。

CellSearch運(yùn)用免疫納米磁顆粒技術(shù)對(duì)腫瘤細(xì)胞細(xì)胞EpCAM(上皮細(xì)胞粘附分子),cytokeratins(角蛋白)進(jìn)行檢測(cè)分析。

該檢測(cè)系統(tǒng)主要包括：CellSave儲(chǔ)存管、CellSearch試劑盒、CellTracks自動(dòng)處理系統(tǒng)、磁槽、CellTracks自動(dòng)分析儀。保存于CellSave儲(chǔ)存管中的血液樣本經(jīng)過(guò)離心后，在CellTracks自動(dòng)處理系統(tǒng)中進(jìn)行系列免疫反應(yīng)，接著在磁槽中進(jìn)行孵化（捕獲的CTC在磁場(chǎng)作用下移動(dòng)至樣本盒的分析表面，形成單細(xì)胞層），最后由CellTracks自動(dòng)分析儀掃描和分析結(jié)果，并由操作人員進(jìn)行最終判讀。7.5mLofbloodisdrawnintoCellsavetubes.Bloodismixedwith6.5mLofbufferandcentrifugedat800gfor10min.Theplasmaisaspiratedandbuffercontainingferrofluid鐵磁流體compoundsthatareboundtoEpCamantibodiesareadded.Magnetsarethenengagedwhichdrawstheferrofluidparticlestothesideofthetube,leavinganyunlabeledcellstobeaspirated.Themagnetsarethenremovedandtargetcellsareresuspendedinbufferandstainedwithfluorescence-conjugatedantibodies.CTC檢測(cè)循環(huán)腫瘤細(xì)胞的甄別InterpretationThecriteriaforanobjecttobedefinedasaCTCincluderoundtoovalmorphology,avisiblenucleus(DAPIpositive),positivestainingforcytokeratin,andnegativestainingforCD45.Resultsofcellenumerationarealwaysexpressedasthenumberofcellsper7.5mLofblood.ReferenceRange:Metastaticbreastcancer:<5CTCs/7.5mLbloodMetastaticcolorectalcancer:<3CTCs/7.5mLbloodMetastaticprostatecancer:<5CTCs/7.5mLbloodA.typicalintactCTCs,B

intactCTCswithclustersoroddshapesC.

CTCfragmentsandapoptoticCTCsnotcountedasCTC.循環(huán)腫瘤細(xì)胞的臨床應(yīng)用CTC與預(yù)后評(píng)估對(duì)轉(zhuǎn)移腫瘤患者進(jìn)行預(yù)后評(píng)估是目前CTC臨床應(yīng)用最廣泛的領(lǐng)域。惡性腫瘤患者治療前后的CTC類型和數(shù)目的變化具有重要的預(yù)后提示價(jià)值。大量實(shí)驗(yàn)證明CTC的出現(xiàn)與晚期癌癥患者的預(yù)后密切相關(guān)。CTC檢測(cè)作為一種簡(jiǎn)單的血液檢測(cè)，可隨時(shí)獲取用于評(píng)估患者的預(yù)后。

CTC與復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估腫瘤的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移與CTC密切相關(guān)，監(jiān)測(cè)CTC可早于常規(guī)影像學(xué)檢查手段預(yù)估腫瘤復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。大量研究已經(jīng)證實(shí)，CTC

檢測(cè)將有助于復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移監(jiān)控、判斷患者預(yù)后、指導(dǎo)術(shù)后輔助治療等。與腫瘤組織樣本相比，血液樣本更易獲取、創(chuàng)傷性小、可反復(fù)采集，是臨床上常規(guī)檢測(cè)較為理想的標(biāo)本來(lái)源，大大提高了這一方法的應(yīng)用價(jià)值。循環(huán)腫瘤細(xì)胞的臨床應(yīng)用CTC與療效監(jiān)測(cè)抗腫瘤治療的療效監(jiān)測(cè)是CTC的另一項(xiàng)重要臨床應(yīng)用領(lǐng)域。CTC檢測(cè)可作為影像學(xué)及臨床評(píng)分體系的補(bǔ)充，對(duì)患者的治療應(yīng)答作出評(píng)價(jià)。比如在藥物治療后

1-2

周，通過(guò)

CTC

的檢測(cè)，臨床醫(yī)師就可以觀察循環(huán)細(xì)胞類型和數(shù)量的改變即可預(yù)測(cè)治療效果，效果不好的患者可及時(shí)調(diào)整治療方案，避免浪費(fèi)寶貴的治療時(shí)間。

循環(huán)腫瘤細(xì)胞的臨床應(yīng)用CTC與個(gè)體化治療CT