本文格式為Word版，下載可任意編輯——沙利度胺對(duì)人外周血單個(gè)核細(xì)胞免疫正調(diào)控作用外周血單個(gè)核細(xì)胞

0.05）。Table1.ProliferationabilityofPBMNCtreatedbydiffe-rentconcentrationsofthalidomide（略）沙利度胺對(duì)淋巴細(xì)胞亞群的影響研究結(jié)果列于表2和圖2、3。由表2及圖2、3可見(jiàn)，與陰性對(duì)照組相比，不同濃度的沙利度胺可刺激CD4+T細(xì)胞的增殖，但經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)無(wú)顯著性差異（P>0.05），隨著沙利度胺濃度的增加，CD8+T細(xì)胞的比例較陰性對(duì)照組有明顯的提高（P0.05）；

隨著沙利度胺濃度的增加，除0.1μg/ml組外，NK細(xì)胞比例漸增高，與陰性對(duì)照組相比，差異有顯著性（P0.05）。

Table3.ConcentrationofcytokinesinculturesupernatantsofPBMNCtreatedbydifferentconcentrationsofthalidomide（略）Table2.LymphocytesubsetsinPBMNCtreatedbydifferentconcentrationsofthalidomide（略）沙利度胺對(duì)PBMNC細(xì)胞因子分泌的影響研究結(jié)果列于表3和圖4。由表3和圖4可見(jiàn)，不同濃度的沙利度胺對(duì)IL-2的分泌無(wú)明顯影響（P>0.05），與陰性對(duì)照組相比，隨著濃度的增加，IFN-γ的分泌漸裁減,除1.25μg/ml組外，各濃度組與陰性對(duì)照組相比，差異有顯著性（P0.05）。

沙利度胺對(duì)PBMNC殺傷活性的影響由表4可見(jiàn)，與陰性對(duì)照組相比，在同一效靶比時(shí)，5μg/ml的沙利度胺可明顯鞏固PBMNC的殺傷活性（P0.05）。Table4.KillingactivityofPBMNCtreatedbythalidomide（略）議論研究說(shuō)明，MM患者骨髓的血管增生與對(duì)沙利度胺治療的回響無(wú)相關(guān)性，治療有效者未見(jiàn)骨髓微血管密度明顯變化［1］，經(jīng)沙利度胺治療后促血管生成因子VEGF、BFGF等的水平無(wú)明顯下降［2,3］，并且體外測(cè)驗(yàn)說(shuō)明，沙利度胺抑制骨髓瘤細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)瘤細(xì)胞的凋亡作用僅在高濃度下才起作用［4］，而這一濃度在患者血漿中難以達(dá)成。沙利度胺僅對(duì)少數(shù)骨髓瘤細(xì)胞系有誘導(dǎo)凋亡作用，對(duì)源于患者的骨髓瘤細(xì)胞無(wú)誘導(dǎo)凋亡作用［5］。這些結(jié)果說(shuō)明，抗血管增生及誘導(dǎo)瘤細(xì)胞凋亡不是沙利度胺發(fā)揮抗骨髓瘤作用的主要機(jī)制。已有研究說(shuō)明，體外沙利度胺可通過(guò)鞏固TCR的作用增加IL-2介導(dǎo)的T細(xì)胞增殖和IFN-γ的產(chǎn)生［6,7］，新的沙利度胺類(lèi)似物被稱(chēng)為免疫回響調(diào)理藥物，其抑制PBMNC產(chǎn)生TNF-α的作用是沙利度胺的5000倍，這些類(lèi)似物是強(qiáng)有力的T細(xì)胞增殖和IL-2、IFN-γ產(chǎn)生誘導(dǎo)劑，并且有抑制IL-1及IL-6分泌的作用［7］。因此大量學(xué)者認(rèn)為，沙利度胺的免疫調(diào)理作用可能是其抗骨髓瘤作用的主要機(jī)制。目前認(rèn)為，沙利度胺的免疫調(diào)理作用主要是抑制TNF-α的生成及調(diào)理細(xì)胞因子的產(chǎn)生。我們對(duì)健康人外周血單個(gè)核細(xì)胞的體外研究說(shuō)明，確定濃度的沙利度胺可明顯鞏固PHA刺激后的PBMNC增殖，CD8+T細(xì)胞及NK細(xì)胞的比例較陰性對(duì)照組明顯提高，經(jīng)沙利度胺刺激后PBMNC的殺傷活性明顯高于對(duì)照組，5μg/ml（效靶比為40∶1）時(shí)殺傷活性最強(qiáng)。這些結(jié)果說(shuō)明，沙利度胺主要鞏固PHA刺激后的PBMNC中CD8+T細(xì)胞及NK細(xì)胞的增殖，通過(guò)鞏固CD8+T細(xì)胞及NK細(xì)胞的殺傷活性來(lái)發(fā)揮抗骨髓瘤作用。

我們的研究結(jié)果說(shuō)明，經(jīng)沙利度胺作用后PBMNC分泌IL-6明顯增加，IL-6的分泌最高為對(duì)照組的7.19倍，同時(shí)IFN-γ的分泌明顯裁減，而IL-2、IL-10的分泌無(wú)明顯變化。這一結(jié)果具有重要的意義。近期的研究表明了傳統(tǒng)T細(xì)胞的激活需要特定的細(xì)胞因子環(huán)境，尤其不成缺少的是DC產(chǎn)生的IL-6,以逃避CD4+CD25+Treg的抑制作用［8,9］。我們的測(cè)驗(yàn)察覺(jué)了PBMNC分泌IL-6明顯增加，同時(shí)PBMNC殺傷活性鞏固，因此認(rèn)為，沙利度胺可能通過(guò)刺激正常人PBMNC分泌IL-6，通過(guò)解除CD4+CD25+Treg的免疫抑制作用活化CTL來(lái)發(fā)揮抗腫瘤作用，同時(shí)IL-6可通過(guò)拮抗骨髓瘤細(xì)胞分泌的TGF-β對(duì)NK細(xì)胞的抑制作用［10］來(lái)鞏固N(yùn)K細(xì)胞的殺傷活性。沙利度胺刺激PBMNC增殖的機(jī)理目前還不是很領(lǐng)會(huì)，有學(xué)者認(rèn)為是由于刺激T細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的IL-2，促進(jìn)PBMNC或T細(xì)胞的增殖［6,11］；

但有些測(cè)驗(yàn)并未查看到IL-2的增加。最近，LeBlance等［12］認(rèn)為，沙利度胺可能是通過(guò)作為一種共刺激因子刺激T細(xì)胞的增殖，其可觸發(fā)T細(xì)胞上CD28的酪氨酸磷酸化，隨之活化CD28信號(hào)通路的NF-κB而發(fā)揮作用。關(guān)于沙利度胺調(diào)理PBMNC細(xì)胞因子分泌的機(jī)理，Rowland等［13］認(rèn)為,可能是通過(guò)調(diào)理mRNA的表達(dá)實(shí)現(xiàn)的。

總之，通過(guò)沙利度胺對(duì)正常人PBMNC作用的體外研究說(shuō)明，沙利度胺可刺激PHA活化后的CD8+T細(xì)胞、NK細(xì)胞的增殖及IL-6的分泌來(lái)鞏固PBMNC殺傷活性。這些結(jié)果說(shuō)明，鞏固細(xì)胞免疫功能可能是沙利度胺治療多發(fā)性骨髓瘤有效的機(jī)制之一。

1SinghalS,MehtaJ,DesikanR,etal.Antitumoractivityofthalidomideinrefractorymultiplemyeloma.NEnglJMed,1999;

341:1565-15712NebenK,MoehlerT,KraemerA,etal.Responsetothalidomideinprogressivemultiplemyelomaisnotmediatedbyinhibitionofangiogeniccytokinesecretion.BrJHaematol,2022;

115:605-6083RosinolL,CibeiraMT,SegarraM,etal.Responsetothalidomideinmultiplemyeloma:impactofangiogenicfactors.Cytokine,2022;

26:145-1484李娟,羅紹凱,洪文德等.體外沙利度胺抑制骨髓瘤細(xì)胞生長(zhǎng)及其機(jī)制的研究.中國(guó)測(cè)驗(yàn)血液學(xué)雜志,2022;10:70-725HideshimaT,ChauhanD,ShimaY,etal.Thalidomideanditsanalogsovercomedrugresistanceofhumanmultiplemyelomacellstoconventionaltherapy.Blood,2000;

96:2943-29506HaslettPA,CorralLG,AlbertM,etal.ThalidomidecostimulatesprimaryhumanTlymphocytes,preferentiallyinducingproliferation,cytokineproduction,andcytotoxicresponsesintheCD8+subset.JExpMed,1998;

187:1885-18927CorralLG,HaslettPA,MullerGW,etal.DifferentialcytokinemodulationandTcellactivationbytwodistinctclassesofthalidomideanaloguesthatarepotentinhibitorsofTNF-alpha.JImmunol,1999;

163:380-3868PasareC,MedzhitovR.Tollpathway-dependentblockadeofCD4+CD25+Tcell-mediatedsuppressionbydendriticcells.Science,2022;

299(5609):1033-10369PowrieF,MaloyKJ.Immunology.Regulatingtheregulators.Science,2022;

299(5609):1030-103110HsiaoYW,LiaoKW,HungSW,etal.Tumor-infiltratinglymphocytesecretionofIL-6antagonizestumor-derivedTGF-beta1andrestoresthelymphokine-activatedkillingactivity.JImmunol,2022;

172:1508-151411PodarK,TaiYT,DaviesFE,etal.Vascularendothelialgrowthfactortriggerssignalingcascadesmediatingmultiplemyelomacellgrowthandmigration.Blood,2022;

98:428-43512LeBlancR,HidesshimaT,CatleyLP,etal.ImmunomodulatorydrugcostimulatesTcellsviatheB7-CD28pathway.Blood,2022;