目錄CONTENTS二多肽鏈合成的起始一氨基酸的活化蛋白質(zhì)生物合成的過程三多肽鏈的延長四多肽鏈合成的終止蛋白質(zhì)生物合成可分為氨基酸的活化、多肽鏈合成的起始、延長和終止，蛋白質(zhì)合成后的加工修飾五個階段。本次課主要介紹前四個階段。一、氨基酸的活化

氨基酸在合成多肽鏈之前，必須先進行活化，然后再與其特異的tRNA結(jié)合，并帶到mRNA相應(yīng)的位置上，這個過程靠氨基酰-tRNA合成酶催化，此酶催化特定的氨基酸與特異的tRNA相結(jié)合，生成各種氨基酰-tRNA。氨基酸+tRNA氨基酰-tRNAATP

AMP＋PPi氨基酰-tRNA合成酶氨基酰-tRNA合成酶對底物氨基酸和tRNA都有高度特異性。氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性。真核生物中的起始氨基酸為甲硫氨酸，而原核生物中起始氨基酸活化，還要甲?；纬杉柞＜琢虬彼醫(yī)RNA。tRNAiMet：起始者tRNAtRNAeMet：肽鏈延長中攜帶Met的tRNAtRNAifMet：起始者tRNA攜帶N-甲酰甲硫氨酸（fMet）真核生物：Met-tRNAiMet原核生物：fMet-tRNAifMet氨基酰-tRNA的合成肽鏈合成起始階段延長階段終止階段二、多肽鏈合成的起始（原核生物）指mRNA和起始氨基酰-tRNA分別與核蛋白體結(jié)合而形成翻譯起始復(fù)合物。有多種蛋白質(zhì)因子參與這一過程，稱為起始因子（IF）。IF-3IF-1（一）核蛋白體大小亞基分離首先起始因子IF-3與核糖體30S小亞基結(jié)合，這種結(jié)合阻止了30S小亞基與50S大亞基的聚合，使核糖體大、小亞基分離。復(fù)合物有助于fMet-tRNAffMet與核糖體小亞基的結(jié)合。30S小亞基上的16SrRNA3’末端序列可與mRNA啟動密碼子上游的一段富含嘌呤的序列通過互補配對結(jié)合。mRNA上的這段特殊序列稱為SD序列。（二）起始因子TF-2和GTP形成復(fù)合物IF-3IF-11、mRNA在小亞基定位結(jié)合AUG5'3'mRNAmRNA與小亞基的結(jié)合依賴于：（1）

SD序列與16SrRNA3’端部分序列的互補（2）rps-1與mRNA上SD序列后的一段序列識別結(jié)合IF-2GTP2、fMet-tRNAifmet

結(jié)合到小亞基IF-3IF-1AUG5'3'結(jié)合于IF-2的GTP水解成GDP和Pi，核糖體大亞基與小亞基重新結(jié)合，IF-1、IF-2和IF-3從核糖體上釋放出來，起始密碼子與fMet-tRNAffMet的反密碼子配對的位置恰好為核糖體上的P位。這樣形成了fMet-tRNAffMet–mRNA-核糖體大小亞基翻譯起始復(fù)合物。（三）形成翻譯起始復(fù)合物核蛋白體大亞基結(jié)合，起始復(fù)合物形成。50SIF-3IF-1AUG5'3'IF-2GTPIF-3IF-1AUG5'3'GDP＋PiIF-2mRNA50SIF-1IF-350S50SAUG5'3'mRNAIF-2GTPIF-3IF-1AUG5'3'GDP＋PiIF-2mRNA50S三、多肽鏈的延長指根據(jù)mRNA密碼序列的指導(dǎo)，依次添加氨基酸從N端向C端延長肽鏈，直到合成終止的過程。肽鏈延長在核蛋白體上連續(xù)性循環(huán)式進行，又稱為核蛋白體循環(huán)，每次循環(huán)增加一個氨基酸，包括以下三步：進位成肽轉(zhuǎn)位需要延長因子（EF）和GTP的參與。延長過程所需蛋白因子稱為延長因子(EF)原核生物：EF-T(EF-Tu、EF-Ts)，EF-G真核生物：EF-1、EF-2（一）進位在延伸因子EF-Tu和EF-Ts協(xié)助下，GTP水解為GDP，下一個能與A位上的密碼子配對的氨基酰-tRNA進入核糖體A位。

延長因子EF-T催化進位（原核生物）

延長因子EF-T催化進位（原核生物）TuTsGTPGDPAUG5'3'TuTsGTP（二）轉(zhuǎn)肽在轉(zhuǎn)肽酶催化作用下，結(jié)合于核糖體P位的fMet-tRNAffMet或已合成的肽酰-tRNA上活化的羧基與相應(yīng)的tRNA解離，解離下的fMet或肽鏈轉(zhuǎn)移到A位新結(jié)合的氨基酰-tRNA的氨基上，形成肽鍵，生成新的肽酰-tRNA。此時P位僅剩下無負載的tRNA。肽鏈合成延長階段的肽鍵形成過程轉(zhuǎn)肽（三）移位在延長因子EF-G作用下，由GTP水解提供能量，核糖體沿mRNA5’-3’方向移動3個核苷酸距離，結(jié)果使新生成的肽酰-tRNA從A位移到P位，A位則與下一個新的密碼子結(jié)合，為下一輪肽鏈延長做好了準(zhǔn)備，原來在P位上結(jié)合的無負荷tRNA與核糖體脫離。移位fMetAUG5'3'fMetTuGTP進位移位轉(zhuǎn)肽核蛋白體循環(huán)從5`AUG開始直至終止密碼子核蛋白體從5`→3`方向閱讀mRNA遺傳密碼肽鏈的合成是從N端到C末端每進行一次核蛋白體循環(huán)，肽鏈延長一個氨基酸四、多肽鏈合成的終