將人自體、同種異體或異種（非人體）的體細(xì)胞或干細(xì)胞，經(jīng)體外操作后回輸（或植入）人體的治療方法。近些年細(xì)胞治療遺傳病、癌癥、組織損傷、糖尿病等疾病的治療上顯示出越來(lái)越高的應(yīng)用價(jià)值。二十世紀(jì)是藥物治療的時(shí)代，二十一世紀(jì)是細(xì)胞治療的時(shí)代——美國(guó)生物學(xué)家喬治·戴利什么是細(xì)胞治療？第一頁(yè)，共57頁(yè)。2014年底，CAR-T免疫細(xì)胞療法在美國(guó)二期臨床試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)驚人成效，復(fù)發(fā)性急淋巴血癌(RelapsedALL)經(jīng)過(guò)CAR-T治療過(guò)后，30人當(dāng)中有27人癌細(xì)胞完全消失，由原先的低于25%的完全治愈率，經(jīng)CAR-T治療后，治愈率一舉拉升到大于90%。這27人之中的20人經(jīng)過(guò)6個(gè)月后復(fù)診，沒有檢查到癌細(xì)胞，震驚全球。2015年，《新英格蘭醫(yī)學(xué)雜志》（NEJM）旗下的JournalWatch評(píng)出了由編輯精心挑選的2014年度腫瘤學(xué)和血液學(xué)10大研究進(jìn)展。其中《CAR-T-Cell療法用于治療復(fù)發(fā)性急性淋巴細(xì)胞白血病》位列第一。細(xì)胞治療有多熱門？第二頁(yè)，共57頁(yè)。國(guó)外的細(xì)胞治療產(chǎn)業(yè)2014年6月20日，輝瑞宣布將向法國(guó)生物技術(shù)公司Cellectis購(gòu)買CART技術(shù)，同時(shí)輝瑞還將為Cellectis的新項(xiàng)目支付大額研發(fā)費(fèi)用，如果最終完成目標(biāo)，輝瑞將向Cellectis支付29億美元；而全球第三大醫(yī)藥公司諾華制藥也正與賓夕法尼亞大學(xué)合作，在高達(dá)99億美元的研發(fā)預(yù)算中將CART細(xì)胞療法列為重點(diǎn)研發(fā)對(duì)象；在今年美國(guó)舉辦的兩個(gè)高級(jí)別腫瘤領(lǐng)域會(huì)議，包括４月的AACR（美國(guó)腫瘤研究年會(huì)）和6月的ASCO（臨床腫瘤年會(huì)）上，幾乎所有報(bào)告數(shù)據(jù)都在圍繞腫瘤免疫細(xì)胞治療展開討論。第三頁(yè)，共57頁(yè)。國(guó)內(nèi)的細(xì)胞治療產(chǎn)業(yè)僅干細(xì)胞一項(xiàng)，細(xì)胞治療產(chǎn)業(yè)預(yù)期未來(lái)全球市場(chǎng)可以達(dá)到4000億美金；免疫細(xì)胞治療市場(chǎng)預(yù)期將會(huì)更高！第四頁(yè)，共57頁(yè)。細(xì)胞治療產(chǎn)業(yè)的機(jī)遇提供給我們巨大的機(jī)遇！面世的產(chǎn)品并不多；大多數(shù)還停留在科研和臨床試用階段；未來(lái)巨大的市場(chǎng)第五頁(yè)，共57頁(yè)。細(xì)胞治療能干什么？最常規(guī)也是最核心的——治療腫瘤；自身免疫及免疫缺陷疾病等治療；各種組織器官損傷、退行治療；康復(fù)治療第六頁(yè)，共57頁(yè)。細(xì)胞治療的種類？免疫細(xì)胞治療：免疫細(xì)胞群的回輸或移植；干細(xì)胞治療：骨髓干細(xì)胞、造血干細(xì)胞或骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；腫瘤細(xì)胞/顆?？乖鲃?dòng)免疫治療：體內(nèi)接種體外處理過(guò)的腫瘤細(xì)胞（瘤苗）第七頁(yè)，共57頁(yè)。什么是免疫細(xì)胞治療？免疫細(xì)胞治療是采集人體自身免疫細(xì)胞，經(jīng)過(guò)體外培養(yǎng)，使其數(shù)量成千倍增多，靶向性殺傷功能增強(qiáng)，然后再回輸?shù)饺梭w來(lái)殺滅血液及組織中的病原體、癌細(xì)胞、突變的細(xì)胞，打破免疫耐受，激活和增強(qiáng)機(jī)體的免疫能力，兼顧治療和保健的雙重功效。是目前細(xì)胞治療體系中應(yīng)用最廣、潛力最大的治療方案之一。第八頁(yè)，共57頁(yè)。免疫細(xì)胞有哪些？CIK細(xì)胞（自體細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞）TIL細(xì)胞（自體腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞）DC-CIK細(xì)胞（自體樹突狀細(xì)胞刺激的CIK細(xì)胞）CTL細(xì)胞（細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞）γδT細(xì)胞（自體伽馬德爾塔T細(xì)胞）NK細(xì)胞（自然殺傷細(xì)胞）CAR-T細(xì)胞（嵌合抗原受體T細(xì)胞）基本上來(lái)自于天然免疫細(xì)胞或人工改造后的免疫細(xì)胞第九頁(yè)，共57頁(yè)。樹突狀細(xì)胞（DC）分類㈠按來(lái)源髓樣DC

淋巴樣DC第十頁(yè)，共57頁(yè)。第十一頁(yè)，共57頁(yè)。分布細(xì)胞名稱表面標(biāo)志功能淋巴組織

IDCMHC-Ⅱ/Ⅰ(高)提呈Ag給T細(xì)胞

FDC

FcR+CR+不表達(dá)MHC-Ⅱ捕捉Ag給B細(xì)胞非淋巴組織

LCPRR+FcR+CR+攝取、處理Ag

間質(zhì)性DCMHC-Ⅰ/Ⅱ(低/無(wú)）體液隱蔽細(xì)胞血液DC㈡按組織分布和分化程度分類第十二頁(yè)，共57頁(yè)。2、功能㈡免疫調(diào)節(jié)：IL-1：活化T/NK/MφIL-2,12：促Th0轉(zhuǎn)化為Th1IL-4,5：促Th0轉(zhuǎn)化為Th2IFN-α：抗病毒，MHC表達(dá)IL-10/TGF-β：負(fù)調(diào)節(jié)㈢誘導(dǎo)中樞和外周免疫耐受㈠提呈抗原，激活初始T細(xì)胞，啟動(dòng)適應(yīng)性IR第十三頁(yè)，共57頁(yè)。電鏡下DC的吞噬作用第十四頁(yè)，共57頁(yè)。自然殺傷細(xì)胞（NK）：第三群淋巴細(xì)胞主要分布：外周血和脾臟表面標(biāo)志：

TCR-mIg-CD56+（NK1.1)CD16+(FcγRⅢ)

功能：

非特異性殺傷病毒感染細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)第十五頁(yè)，共57頁(yè)。NK殺傷特點(diǎn)

無(wú)需抗原預(yù)先致敏

無(wú)MHC限制性無(wú)抗原特異性第十六頁(yè)，共57頁(yè)。1.穿孔素/顆粒酶途徑穿孔素→靶細(xì)胞溶解顆粒酶→靶細(xì)胞凋亡（一）NK細(xì)胞殺傷機(jī)制(類似CTL）第十七頁(yè)，共57頁(yè)。NK釋放穿孔素和顆粒酶誘導(dǎo)靶細(xì)胞壞死/凋亡NKNKNK第十八頁(yè)，共57頁(yè)。NK-FasL+靶細(xì)胞-Fas→激活caspase→靶細(xì)胞凋亡2.Fas-FasL途徑:3.TNF-α/TNFR-I途徑

靶細(xì)胞凋亡第十九頁(yè)，共57頁(yè)。Fas-FasL相互作用誘導(dǎo)靶細(xì)胞凋亡活化NK表達(dá)FasL誘導(dǎo)靶細(xì)胞凋亡NK第二十頁(yè)，共57頁(yè)。第二十一頁(yè)，共57頁(yè)。第二十二頁(yè)，共57頁(yè)。1.識(shí)別HLA-Ⅰ的NK細(xì)胞受體KIR：KIR2DL/KIR3DLKLR：CD94/NKG2A活化性受體（親和力較弱）KIR：KIR2DS/KIR3DS(二)NK細(xì)胞活性的調(diào)節(jié)KLR：CD94/NKG2C抑制性受體（親和力較強(qiáng)）自身細(xì)胞表達(dá)HLA-1，與兩類受體都可結(jié)合，但抑制性受體占主導(dǎo)自身細(xì)胞被病毒感染或惡變后HLA-1表達(dá)降低或缺失，抑制性受體失去功能，故活化性受體占主導(dǎo)第二十三頁(yè)，共57頁(yè)。KIR2DLITIMKIR2DSDAP12ITAMDAP12KIR抑制性受體KIR3DLKIR3DSKIR活化性受體第二十四頁(yè)，共57頁(yè)。DAP-12CD94NKG2ACD94NKG2CITIMKLR抑制性受體ITAMKLR活化性受體第二十五頁(yè)，共57頁(yè)。非HLAⅠ：僅存在于某些腫瘤細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞表面，而不表達(dá)于正常組織細(xì)胞表面（1）NKG2D：DAP-10NKG2DITAM2.識(shí)別非HLAⅠ活化受體第二十六頁(yè)，共57頁(yè)。NKp46ζ-ζζ-ζDAP12NKp30NKp44ITAM（2）自然細(xì)胞毒性受體（NCR）：ITAMITAM第二十七頁(yè)，共57頁(yè)。

殺傷細(xì)胞活化受體

KIR2DS/KIR3DS

CD94/NKG2CNKG2DNCR識(shí)別HLA-Ⅰ識(shí)別非正常細(xì)胞非HLA-Ⅰ殺傷細(xì)胞抑制受體

KIR2DL/KIR3DLCD94/NKG2A識(shí)別HLA-Ⅰ第二十八頁(yè)，共57頁(yè)。V感染細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞非HLA-Ⅰ分子NCRNKG2DNK細(xì)胞NK細(xì)胞活化HLAⅠ↓自身組織細(xì)胞HLA-Ⅰ分子抑制受體NK細(xì)胞NK細(xì)胞失活HLAⅠ正?；颉{(diào)節(jié)性受體對(duì)NK細(xì)胞殺傷效應(yīng)的調(diào)節(jié):活化受體（僅有活化受體）（主導(dǎo)）為何正常情況下NK不殺傷自身細(xì)胞而殺傷腫瘤/病毒感染細(xì)胞？第二十九頁(yè)，共57頁(yè)。第三十頁(yè)，共57頁(yè)。NKT細(xì)胞（一）概念：能表達(dá)NK1.1分子(CD56）和αβTCR-CD3的T細(xì)胞（三）特點(diǎn)：

1.大多CD4-CD8-2.表達(dá)低密度的αβTCR3.TCR缺乏多樣性，識(shí)別CD1提呈的脂類，不受MHC限制（二）分布：骨髓、胸腺、肝臟第三十一頁(yè)，共57頁(yè)。（四）功能：

1.細(xì)胞毒作用（類似NK），早期抗感染

2.免疫調(diào)節(jié):IL-4：促Th0→Th2→HIR

IL-12/IFN-γ:促Th0→Th1

→CIR;

活化Mφ與NKMCP-1,MIP-1:趨化第三十二頁(yè)，共57頁(yè)。γδT細(xì)胞㈠分布：皮膚和黏膜組織㈡表面標(biāo)志：TCRγδ，多CD4-CD8-㈢特征：多為CD4－CD8－TCR缺乏多樣性，抗原識(shí)別譜窄:HSP/CD1-脂類/某些病毒蛋白/磷酸化Ag第三十三頁(yè)，共57頁(yè)。㈣生物學(xué)功能①皮膚黏膜早期抗感染主要效應(yīng)細(xì)胞②分泌IL-2,4,5,6,10,IFN-γ等參與免疫調(diào)節(jié)和介導(dǎo)炎癥反應(yīng)第三十四頁(yè)，共57頁(yè)。我國(guó)腫瘤的現(xiàn)狀第三十五頁(yè)，共57頁(yè)?，F(xiàn)有治療技術(shù)的乏力第三十六頁(yè)，共57頁(yè)。腫瘤的免疫治療時(shí)代權(quán)威醫(yī)學(xué)雜志紛紛刊文，高度評(píng)價(jià)免疫細(xì)胞治療技術(shù)的前景腫瘤的免疫治療時(shí)代已經(jīng)來(lái)臨癌癥免疫療法是2013年最值得關(guān)注的六大科學(xué)領(lǐng)域之一細(xì)胞治療技術(shù)正走進(jìn)腫瘤免疫治療的前沿第三十七頁(yè)，共57頁(yè)。免疫細(xì)胞治療的原理腫瘤免疫理論的提出

腫瘤免疫的概念起源于上世紀(jì)初。1909年Ehrlich首先提出，免疫系統(tǒng)不僅負(fù)責(zé)防御微生物侵犯，而且能從機(jī)體內(nèi)清除改變了的宿主成分。并提出了細(xì)胞免疫直接對(duì)抗腫瘤的概念，此后人們認(rèn)識(shí)到癌細(xì)胞是改變了的宿主成分。免疫監(jiān)視學(xué)說(shuō)的提出免疫系統(tǒng)具有一個(gè)十分完備的監(jiān)視功能，能準(zhǔn)確地分辨“自己”和“非己”的成分；它不僅能清除外界侵入的各種微生物，排斥同種異體移植物，而且還能消滅機(jī)體內(nèi)突變的細(xì)胞，防止腫瘤的生長(zhǎng)，保護(hù)機(jī)體的健康。每當(dāng)免疫監(jiān)視功能由于這種或那種原因被消弱時(shí)，便為腫瘤的發(fā)生提供了有利條件；如果機(jī)體不具備免疫監(jiān)視功能，人類的腫瘤發(fā)病率會(huì)大大的提高。第三十八頁(yè)，共57頁(yè)?！澳[瘤免疫編輯”(TumorImmunoediting）

Elimination:免疫消除Equilibrium:免疫平衡Escape:免疫逃逸發(fā)病時(shí)健康時(shí)免疫平衡理論免疫細(xì)胞治療根本上是幫助腫瘤患者失去平衡的免疫系統(tǒng)恢復(fù)生機(jī)！第三十九頁(yè)，共57頁(yè)。可以調(diào)節(jié)和增強(qiáng)全身免疫機(jī)能；可有效的殺傷殘余的腫瘤細(xì)胞，防止腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移；緩解晚期患者的臨床癥狀，延長(zhǎng)生存期，創(chuàng)造更多的治療機(jī)會(huì)，甚至實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期帶瘤生存；減輕放、化療的毒副反應(yīng)，提高患者生存質(zhì)量；它特異性極強(qiáng)、無(wú)免疫排斥反應(yīng)，相對(duì)于其他手術(shù)及放化療模式副作用小。免疫細(xì)胞治療的優(yōu)勢(shì)如何避免外來(lái)的免疫細(xì)胞自身誘導(dǎo)免疫反應(yīng)？第四十頁(yè)，共57頁(yè)。自體免疫細(xì)胞治療從自體外周血中分離的單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)過(guò)體外激活和擴(kuò)增后輸入患者體內(nèi)，直接殺傷腫瘤細(xì)胞或病毒感染細(xì)胞，或調(diào)節(jié)和增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能。納入國(guó)家衛(wèi)生部醫(yī)政處第三類技術(shù)準(zhǔn)入制管理，已制定相應(yīng)的自體免疫細(xì)胞（T細(xì)胞、NK細(xì)胞）治療技術(shù)管理規(guī)范。第四十一頁(yè)，共57頁(yè)。自體免疫細(xì)胞治療的一般流程療效觀察單個(gè)核細(xì)胞采集細(xì)胞分離、擴(kuò)增細(xì)胞鑒定及無(wú)菌檢測(cè)細(xì)胞回輸?shù)谒氖?yè)，共57頁(yè)。常見自體免疫細(xì)胞治療DC-CIKCAR-TTreg免疫細(xì)胞治療種類較多，這里以幾種前沿治療手段加以介紹。第四十三頁(yè)，共57頁(yè)。DC-CIK通過(guò)負(fù)載腫瘤抗原的DC與CIK的有機(jī)結(jié)合（即DC-CIK細(xì)胞）能產(chǎn)生特異性和非特異性的雙重抗腫瘤效應(yīng)，二者具有一定的互補(bǔ)作用。DC-CIK細(xì)胞不僅能激發(fā)、增強(qiáng)腫瘤患者特異性抗腫瘤免疫應(yīng)答，有效清除體內(nèi)殘留病灶，且在患者體內(nèi)誘發(fā)免疫記憶，從而獲得長(zhǎng)期的抗瘤效應(yīng)。DC-CIK自體細(xì)胞免疫治療可以有效殺滅術(shù)后的殘留腫瘤細(xì)胞，防治復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移，減輕放化療的毒副作用，減輕患者痛苦，提高患者自身免疫機(jī)制和生活質(zhì)量，延長(zhǎng)患者生命。第四十四頁(yè)，共57頁(yè)。CAR-T2011年8月10日，美國(guó)《生物轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)》和《新英格蘭醫(yī)學(xué)期刊》權(quán)威雜志報(bào)道，賓夕法尼亞大學(xué)基因治療專家卡爾·朱恩利用患者改造后的自身T細(xì)胞治愈了兩位晚期慢性淋巴細(xì)胞白血病（血癌）患者，開創(chuàng)了腫瘤生物治療的新紀(jì)元。第四十五頁(yè)，共57頁(yè)。CAR-T原理嵌合抗原受體(CAR)是CAR-T的核心部件，使得經(jīng)過(guò)CAR改造的T細(xì)胞相較于天然T細(xì)胞表面受體TCR能夠識(shí)別更廣泛的目標(biāo)。CAR的基礎(chǔ)設(shè)計(jì)中包括一個(gè)腫瘤相關(guān)抗原（tumor-associatedantigen，TAA）結(jié)合區(qū)，一個(gè)胞外鉸鏈區(qū)，一個(gè)跨膜區(qū)和一個(gè)胞內(nèi)信號(hào)區(qū)。目標(biāo)抗原的選擇是關(guān)鍵的決定因素。第四十六頁(yè)，共57頁(yè)。第二、三代CAR-T第四十七頁(yè)，共57頁(yè)。CAR-T的制備第四十八頁(yè)，共57頁(yè)。CAR-T比對(duì)CIK、NK都是屬于非靶向特異的，是一個(gè)比較普遍性的一個(gè)免疫治療方案。DC疫苗也是屬于一種針對(duì)某些抗原刺激反映，特異性也沒有CAR-T高，CAR-T相比于其它細(xì)胞治療手段更直接，更有效，是一個(gè)人工改造過(guò)的最強(qiáng)“殺手”。第四十九頁(yè)，共57頁(yè)。CAR-T的應(yīng)用至2014年，ClinicalTrials已經(jīng)注冊(cè)的CAR-T項(xiàng)目達(dá)61項(xiàng)，其中中國(guó)有13項(xiàng)。第五十頁(yè)，共57頁(yè)。治療更精準(zhǔn)。由于CAR-T細(xì)胞是應(yīng)用基因修飾病人自體的T細(xì)胞，利用抗原抗體結(jié)合的機(jī)制，能克服腫瘤細(xì)胞通過(guò)下調(diào)MHC分子表達(dá)以及降低抗原遞呈等免疫逃逸，讓腫瘤細(xì)胞無(wú)所逃遁；多靶向更精準(zhǔn)。CAR既可以利用腫瘤蛋白質(zhì)抗原，又可利用糖脂類非蛋白質(zhì)抗原，擴(kuò)大了腫瘤抗原靶點(diǎn)范圍，CAR-T細(xì)胞作用過(guò)程不受MHC的限制；殺瘤范圍更廣。鑒于很多腫瘤細(xì)胞表達(dá)相同的腫瘤抗原，針對(duì)某一種腫瘤抗原的CAR基因構(gòu)建一旦完成，便可以被廣泛利用；殺瘤效果更持久。新一代CAR結(jié)構(gòu)中加入了促進(jìn)T細(xì)胞增殖與活化的基因序列，能保證T細(xì)胞進(jìn)入體內(nèi)后還可以增殖，CAR-T細(xì)胞具有免疫記憶功能，可以長(zhǎng)期在體內(nèi)存活。CAR-T的優(yōu)勢(shì)第五十一頁(yè)，共57頁(yè)。Treg

調(diào)節(jié)T細(xì)胞(Treg)是近10年來(lái)才發(fā)現(xiàn)在維持免疫穩(wěn)定狀態(tài)和防止自身免疫性疾病的發(fā)生上極為重要的一種因素。使用Treg療法代替雖然是未來(lái)治療自身免疫性疾病的必然趨勢(shì)，但這群細(xì)胞在炎癥狀態(tài)下很不穩(wěn)定，可轉(zhuǎn)化成為其他病理性T細(xì)胞從而喪失治療效果，并且可能會(huì)產(chǎn)生致病效果，這就嚴(yán)重地限制了它們的臨床應(yīng)用。