實驗高溫對植物細(xì)胞膜的傷害第1頁/共13頁實驗九高溫脅迫對植物

細(xì)胞膜的傷害第2頁/共13頁1.實驗?zāi)康摹鰧W(xué)習(xí)電導(dǎo)儀法測定膜相對透性的方法■理解逆境對植物膜透性的影響

第3頁/共13頁植物細(xì)胞膜起調(diào)節(jié)控制細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)交換的作用，它的選擇透性是其最重要的功能之一。當(dāng)植物受到逆境影響時，如高溫或低溫，干旱、鹽漬、病原菌侵染后，細(xì)胞膜遭到破壞，膜的透性增加，選擇透性喪失，細(xì)胞內(nèi)部分電解質(zhì)外滲，將植物組織浸入去離子水中，水的電導(dǎo)將因電解質(zhì)的外滲而加大，傷害愈重，外滲愈多，電導(dǎo)率愈大。膜結(jié)構(gòu)破壞的程度與逆境的強(qiáng)度、持續(xù)的時間、作物品種的抗性等因素有關(guān)。因此，質(zhì)膜透性的測定?？勺鳛槟婢硞Φ囊粋€生理指標(biāo)，廣泛應(yīng)用在植物抗性生理研究中。本實驗采用電導(dǎo)率法測定電解質(zhì)的相對外滲率，來了解脅迫情況下植物受害的程度。2.實驗原理第4頁/共13頁當(dāng)質(zhì)膜的選擇透性被破壞時細(xì)胞內(nèi)電解質(zhì)外滲，其中包括鹽類、有機(jī)酸等，這些物質(zhì)進(jìn)入環(huán)境介質(zhì)中，如果環(huán)境介質(zhì)是蒸餾水，那么這些物質(zhì)的外滲會使蒸餾水的導(dǎo)電性增加，表現(xiàn)在電導(dǎo)率的增加上。植物受傷害愈嚴(yán)重，外滲的物質(zhì)越多，介質(zhì)導(dǎo)電性也就越強(qiáng)，測得的電導(dǎo)率就越高（不同抗性品種就會顯示出抗性上的差異。）本實驗采用電導(dǎo)率法測定電解質(zhì)的相對外滲率，來了解脅迫情況下植物受害的程度。第5頁/共13頁傷害率本次實驗測定高溫對植物細(xì)胞膜的傷害電導(dǎo)率K=GQQ:電極常數(shù)（電導(dǎo)儀本身決定）G:實測電導(dǎo)值傷害率（％）＝

處理電導(dǎo)率煮沸電導(dǎo)率×100％第6頁/共13頁3材料、儀器設(shè)備及試劑（一）材料：梧桐葉片；（二）儀器設(shè)備：

1.電導(dǎo)儀；2.打孔器；3.真空干燥器；

4.恒溫水浴鍋；第7頁/共13頁4實驗步驟1)打取葉圓片：自選葉片，洗凈吸干，避開葉脈打取30個葉圓片,放入1支試管,再打取30個葉圓片,放入另1支試管,依此類推,每支試管皆放入30個葉圓片；2)試管分別編號為：1A,1B,2A,2B……5A,5B，每管加入15ml純水,抽真空20min；3)水浴處理：5組(1A1B,2A2B……5A5B)分別在60℃水浴0，10，20，30，40min，取出后用自來水冷卻10分鐘；高溫處理時間（min）CK（0）10203040重復(fù)11A2A3A4A5A重復(fù)21B2B3B4B5B第8頁/共13頁4)測量電導(dǎo)率：用電導(dǎo)儀測定浸泡溶液的電導(dǎo)率（分組單獨(dú)領(lǐng)取電導(dǎo)儀，詳細(xì)使用方法分組指導(dǎo)）；5)煮沸電導(dǎo)率：測過電導(dǎo)率的10支試管再放入100℃沸水浴中15min，以殺死植物細(xì)胞，使細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)全部滲漏出來，取出試管后用自來水冷卻10min，測其煮沸電導(dǎo)率。第9頁/共13頁電導(dǎo)儀的使用方法電源開關(guān)“開”，預(yù)熱；打開（測量/校正）撥至“測量”；（補(bǔ)償/一般）撥至“一般”；（×1/×10-2）撥至“×1”；量程范圍選“×103”，使待測值介于0.1～0.999之間。每次往待測液中插入電極時，都要首先用純水沖洗電極，并用吸水紙輕輕拭干。第10頁/共13頁處理電導(dǎo)率CtAB煮沸電導(dǎo)率C100AB傷害率（Ct／C100）×100AB傷害率平均值CK（0）

10min20min30min40min

5數(shù)據(jù)記錄與處理表1高溫對葉片傷害率的影響第11頁/共13頁6實驗結(jié)果及分析計算電導(dǎo)率時，取2支試管的平均值計算傷害